肺炎支原體肺炎患兒血清SAA、CRP和PCT水平的變化及意義

陳 玲

（江蘇省淮安市婦幼保健院，江蘇淮安 223002）

肺炎支原體肺炎（mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP）是兒童高發(fā)呼吸系統(tǒng)疾病，在各個年齡段兒童均有分布，全年可發(fā)，發(fā)病率以冬春季節(jié)較高，平時可見散發(fā)病例，該病發(fā)病率為10%～20%，可呈廣泛爆發(fā)性流行，流行持續(xù)時間較短[1]。肺炎支原體(mycoplasma pneumoniae,MP)以呼吸道飛沫傳播為主，潛伏期2 ～3 周。近年來我國多個省市發(fā)病率有所升高，尤其是1 ～3 歲患兒發(fā)病率較以往有升高趨勢，需高度警惕[2]。目前診斷方法較多，近年來研究較多的血清指標(biāo)包括C 反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）、降鈣素原（procalcitonin，PCT）和淀粉樣蛋白A（serum amyloid A, SAA）。其中SAA 是較新穎的炎癥反應(yīng)指標(biāo)，較PCT、CRP 更為靈敏，目前已知SAA 可預(yù)測房顫、冠心病、心力衰竭等心血管疾病的發(fā)生風(fēng)險和預(yù)后[3]。目前在MPP 方面報道較少。本研究分析以上三項血清指標(biāo)在MPP 患兒中的表達(dá)情況和意義，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017 年5 月至2020 年7 月江蘇省淮安市婦幼保健院收治的155 例MMP 患兒為研究對象。按病情分為輕癥組（急性期、恢復(fù)期）和重癥組（急性期、恢復(fù)期），同期取50 例健康兒童為對照組。輕癥判斷：持續(xù)劇烈咳嗽，臨床癥狀輕，X 線表現(xiàn)重；白細(xì)胞計數(shù)稍高或正常，血沉多增快；經(jīng)頭孢抗菌藥、青霉素治療無效；MP 特異性IgM 陽性，或單次測得MP抗體滴度＞1∶160。重癥判斷：脫水或拒食，一般情況差；呼吸增快，年長兒呼吸頻率（RR）＞50 次/min，嬰兒＞70 次/min；意識障礙；鼻翼煽動、呻吟、發(fā)紺或三凹征；胸腔積液或存在肺外并發(fā)癥；多個肺葉受累或至少2/3的肺受損；脈搏血氧飽和度不超過92%。急性期：咳嗽、發(fā)熱明顯，肺部體征明顯。恢復(fù)期：持續(xù)3 d 體溫正常，咳嗽基本消失，心率、呼吸頻率、精神狀態(tài)正常。

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合第8 版《諸福棠實用兒科學(xué)》[4]關(guān)于MPP 診斷標(biāo)準(zhǔn)；符合上述輕癥、重癥,急性期、恢復(fù)期的診斷；年齡1 ～12 歲；家屬簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：先天或繼發(fā)免疫抑制、免疫缺陷；糖尿??；肥胖；心血管疾?。荒I??；惡性腫瘤；臨床資料缺失。

輕癥組100 例，男46 例，女54 例；年齡5 ～8 歲，平均年齡（6.65±1.12）歲。重癥組55 例，男23 例，女32 例；年齡5 ～8 歲，平均年齡（6.71±1.05）歲。對照組50 例，男21 例，女29 例；年齡5 ～8 歲，平均年齡（6.49±1.13）歲。三組上述資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究獲得江蘇省淮安市婦幼保健院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法

清晨抽取空腹靜脈血2 ～4 mL，室溫存放2 h，離心后取血清。CRP 使用酶聯(lián)免疫分析檢測：加樣：向樣品反應(yīng)孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔加待測樣品、標(biāo)準(zhǔn)品，振蕩搖勻之后溫育；洗滌：每孔重復(fù)洗滌4 次，分別加抗IgG 抗體、鏈霉親和素-HRP，再次溫育、洗滌；顯色：每孔先后加顯色劑A、B，振蕩搖勻；終止：每孔加終止液。根據(jù)顯色結(jié)果完成CRP值測定和計算，CRP ＞10 mg/L 為陽性。SAA 檢測用酶聯(lián)免疫吸附試驗：準(zhǔn)備實驗物品，按說明書加樣、檢測液A，37 ℃孕育1 h；洗版、加檢測液B，37 ℃孕育30 min；反復(fù)洗滌5 次，加TMB 底物，37 ℃孕育15 min，按說明書加終止液，讀結(jié)果；SAA ＞10.0 mg/L 為陽性。PCT 用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測：按說明向各孔加檢測液A 并溫育，各孔洗滌之后反復(fù)洗板3 次，按說明向各孔加檢測液B 后溫育，反復(fù)洗板5 次，按說明向各孔加底物溶液，顯色，向各孔加終止溶液，讀取結(jié)果，PCT ＞0.05 ng/mL 為陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 18.0 統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，符合正態(tài)分布計量資料以（±s）表示，行t檢驗；計數(shù)資料用[例（%）]檢表示，行χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組血清SAA、CRP、PCT 水平對比

無論在輕癥組還是重癥組中，急性期SAA、CRP、PCT水平均高于恢復(fù)期；重癥組急性期、恢復(fù)期SAA、CRP、PCT水平分別高于輕癥組急性期、恢復(fù)期對應(yīng)指標(biāo)；輕癥組恢復(fù)期SAA、CRP、PCT 高于對照組對應(yīng)指標(biāo);以上差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 三組血清SAA、CRP、PCT 水平對比（±s）

表1 三組血清SAA、CRP、PCT 水平對比（±s）

注：t1、P1 為a 與b 比較；t2、P2 為c 與d 比較；t3、P3 為a 與c 比較；t4、P4 為b 與d 比較；t5、P5 為b 與e 比較。

組別 n SAA（mg/L） CRP（mg/L） PCT（ng/mL）輕癥組（n=100） 急性期a 42 94.89±13.32 27.12±5.43 0.09±0.02恢復(fù)期b 58 10.98±2.18 11.43±2.54 0.06±0.01重癥組（n=55） 急性期c 33 249.54±39.41 54.65±14.32 5.13±1.03恢復(fù)期d 22 23.54±4.76 15.50±2.54 1.40±0.12對照組（n=50） e 50 5.32±1.02 5.16±1.02 0.03±0.01 t1、P1 47.199、0.000 19.307、0.000 9.860、0.000 t2、P2 26.686、0.000 12.653、0.000 16.858、0.000 t3、P3 23.797、0.000 11.471、0.000 31.763、0.000 t4、P4 16.212、0.000 6.399、0.000 85.150、0.000 t5、P5 16.831、0.000 16.347、0.000 5.182、0.000

2.2 輕癥與重癥MPP 患兒血清SAA、CRP、PCT 峰值和異常持續(xù)時間對比

與輕癥組比較，重癥組SAA、CRP、PCT 峰值較輕癥組更高，異常時間較輕癥組更長，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

2.3 三項指標(biāo)診斷重癥MPP 效能分析

設(shè)檢驗變量為入院血清SAA、CRP、PCT，效應(yīng)變量為重癥MPP 組。經(jīng)ROC曲線獲得三項診斷重癥MPP 效能，見表3。

3 討論

MP 體積在病毒和細(xì)菌之間，是可在無細(xì)胞培養(yǎng)基上獨(dú)立存活的最小病原微生物，可引起兒童肺炎、支氣管炎、咽炎等呼吸道疾病以及氣道高反應(yīng)性疾病和大量肺外表現(xiàn)。目前診斷方法較多，實驗室常用核酸擴(kuò)增檢查，MP 感染早期檢出率高，但對技術(shù)要求也高，且容易被MP 感染后攜帶狀態(tài)影響，MP 感染后1 個月，DNA 檢出率高達(dá)50%，MP-DNA 持續(xù)攜帶7 周左右，個別可達(dá)到7 個月，臨床使用限制高。目前主要依靠MP 血清抗體進(jìn)行MP 感染臨床診斷，其中MP-IgM 是MP 感染后首先出現(xiàn)的抗體，但在感染后7 d 方能檢測，因為兒童免疫不完善，產(chǎn)生抗體能力低，可能出現(xiàn)低滴度抗體和假陰性，早期診斷還需結(jié)合其他敏感指標(biāo)[5]。

本研究中血清SAA 診斷重癥MPP 靈敏度、特異度為92.18%、82.43%，提示血清SAA 能幫助MPP 診斷和病情評估。血清SAA 濃度與炎性細(xì)胞因子腫瘤壞死因子（TNF-α）、白介素-6 （IL-6）等密切相關(guān)。MP 侵入呼吸道，依靠終端復(fù)合細(xì)胞器黏附在上皮細(xì)胞，可調(diào)節(jié)支氣管上皮細(xì)胞中轉(zhuǎn)化生長因子β1 表達(dá)以及細(xì)小支氣管中趨化因子的表達(dá)，刺激炎性因子產(chǎn)生；MP 對肺泡巨噬細(xì)胞分泌TNF-α、白介素-18 （IL-18）等炎性因子有促進(jìn)作用；MP 脂蛋白通過Toll 樣受體激活核因子（NF-kβ），產(chǎn)生炎性細(xì)胞因子和趨化因子[6]。已經(jīng)有許多研究指出血清TNF-α、IL-6 等炎性指標(biāo)在MPP 急性期顯著升高，與病情呈正相關(guān)[7]。而TNF-α、IL-6 等炎性因子能刺激肝臟合成并分泌SAA，因此血清SAA 水平與MPP 嚴(yán)重程度有關(guān)，本研究中重癥SAA 較輕癥高，急性期較恢復(fù)期高（P＜0.05）。CRP 在健康人體血清中水平極低，感染后持續(xù)升高，峰值和異常時間與病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)。目前已有不少研究指出MPP 病情越重血清CRP 越高，異常時間也越長，急性期CRP 高于恢復(fù)期[8]。本研究與上述研究報道相符。CRP 在急性期和重癥患者中的更高，考慮是因為急性期和重癥患者炎癥損傷更重，釋放更多炎癥因子；本研究中CRP 診斷重癥MPP 靈敏度、特異度分別為68.54%、65.72%。PCT 是目前臨床診斷細(xì)菌感染性病變的重要標(biāo)志，感染后，血清PCT 升高。既往研究證實MP 具有革蘭氏陰性菌內(nèi)毒素以及脂多糖誘導(dǎo)血清PCT 升高作用；IL-2、TNF-α 等炎性細(xì)胞因子能促進(jìn)PCTmRNA 表達(dá)，而IL-2、TNF-α 炎性細(xì)胞因子又與MPP 病情相關(guān)，病情跟蹤的MPP 患兒血清PCT 較輕癥更高，急性期較恢復(fù)期更高[8]。本研究中血清PCT 診斷重癥MPP 靈敏度、特異度分別為91.03%、91.87%。最后本研究分析三項指標(biāo)峰值情況，發(fā)現(xiàn)與輕度組比較，重癥組SAA、CRP、PCT 峰值較輕癥組更高，異常時間較輕癥組更長，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，三項血清指標(biāo)在重癥MPP 診斷中具有較高靈敏度和特異度，利于MPP 病情評估，值得應(yīng)用。

表2 輕癥與重癥MPP 患兒血清SAA、CRP、PCT 峰值和異常持續(xù)時間對比（±s）

表2 輕癥與重癥MPP 患兒血清SAA、CRP、PCT 峰值和異常持續(xù)時間對比（±s）

組別 n SAA CRP PCT峰值（mg/L） 異常時間（d） 峰值（mg/L） 異常時間（d） 峰值（ng/mL） 異常時間（d）輕癥組 100 146.43±21.19 7.04±0.54 33.98±9.32 8.23±1.43 0.66±0.25 6.09±1.11重癥組 55 365.54±51.21 16.54±2.87 76.12±27.39 18.23±3.19 9.94±1.98 15.32±2.18 t 37.458 32.163 14.011 26.870 46.322 34.952 P 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

表3 三項血清指標(biāo)診斷重癥MPP 效能