病毒性腦炎患兒血清P-selectin、NSE、sVCAM-1水平的表達(dá)及臨床意義

張偉東，王幸麗，楊紅，張義堂

（南陽市中心醫(yī)院 PICU，河南 南陽 473000）

病毒性腦炎（Viral encephalitis，VE）為臨床常見神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病，好發(fā)于小兒，臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、頭痛、嘔吐及腦膜刺激征等，癥狀缺乏特異性，易出現(xiàn)漏診、誤診情況，延誤臨床治療時機(jī)[1,2]。故探尋一種VE早期篩查及病情評定的有效方法對指導(dǎo)臨床實施及時治療、改善患兒預(yù)后尤為重要。近年來，有研究指出，神經(jīng)系統(tǒng)與免疫系統(tǒng)共同組成了一個復(fù)雜細(xì)胞網(wǎng)絡(luò),且兩者之間有雙向調(diào)控作用[3]。 而 P-選擇素（P-selectin）、可溶性血管細(xì)胞黏附分子-1（sVCAM-1）在誘導(dǎo)炎癥過程中具有重要作用，可影響神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病病情轉(zhuǎn)歸。神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）為神經(jīng)細(xì)胞損傷靈敏標(biāo)志物,其表達(dá)與腦損傷程度有著密切關(guān)系[4]。本研究選取76例VE患兒及42例健康體檢兒童，分組探究VE患兒血清P-selectin、NSE、sVCAM-1水平的表達(dá)及臨床意義，報告如下。

1 資料及方法

1.1 一般資料 選取2015年9月-2018年6月我院76例VE患兒為試驗組，另同期選取42例健康體檢兒童為對照組。試驗組男45例，女31例；年齡 3～12 歲，平均（6.31±1.50）歲；體質(zhì)量 12～49 kg，平均（22.75±6.93）kg；病情程度：重癥 33 例，輕癥43例。對照組男25例，女17例；年齡3～11歲，平均（6.19±1.63）歲；體質(zhì)量 12～48 kg，平均（22.47±7.14）kg。兩組一般資料（性別、體重、年齡等）均衡可比（P＞0.05），本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，符合《世界醫(yī)學(xué)會赫爾辛基宣言》有關(guān)要求。

1.2 選例標(biāo)準(zhǔn) ⑴納入標(biāo)準(zhǔn)：試驗組符合《兒科學(xué)》[5]中VE相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)腦脊液及影像學(xué)檢查證實：對照組均為健康體檢兒童，無感染性疾病；兩組患兒家屬知曉本研究，簽訂知情同意書；⑵排除標(biāo)準(zhǔn)：合并血液系統(tǒng)疾病、精神系統(tǒng)疾病、腦外傷、先天性腦病兒童；肝腎心等臟器功能存在明顯異常兒童；或合并免疫缺陷性疾病兒童。

1.3 方法 ⑴檢測方法：在入院后次日清晨空腹抽取受檢兒童3 ml靜脈血樣,采用離心機(jī)離心處理15 min 左右（轉(zhuǎn)速：3000 r/min）,取上清液,-80℃環(huán)境中儲存待檢;以雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法測定血清 P-selectin、NSE、sVCAM-1水平，檢測試劑盒購于杭州聯(lián)科生物技術(shù)股份公司,有關(guān)操作嚴(yán)格按試劑盒說明書施行。⑵治療方法：給予試驗組患兒常規(guī)治療，如：抗感染、鎮(zhèn)靜、退熱、抗病毒、止癇、脫水降顱壓、糾正水電解質(zhì)紊亂、營養(yǎng)腦神經(jīng)等，持續(xù)治療3周。在治療1周、3周后以同樣檢測方法測定患兒血清P-selectin、NSE、sVCAM-1水平。

1.4 觀察指標(biāo) ⑴試驗組與對照組血清P-selectin、NSE、sVCAM-1水平；⑵試驗組不同病情程度（重癥、輕癥）患兒血清 P-selectin、NSE、sVCAM-1水平；⑶試驗組治療前、治療1周、3周后血清P-selectin、NSE、sVCAM-1 水平；⑷血清 P-selectin、N SE、sVCAM-1水平與VE患兒病情程度的關(guān)聯(lián)性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析 研究數(shù)據(jù)納入至SPSS 23.0施行處理，計量資料(x±s)表示，t檢驗，多組間比較行單因素方差分析，多重比較行LSD-t檢驗，計數(shù)資料n（%）表示，χ2檢驗，相關(guān)性分析行 Spearman 相關(guān)分析，檢驗標(biāo)準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 試驗組與對照組血清 P-selectin、NSE、sVCAM-1水平對比 試驗組血清P-selectin、NSE、sV CAM-1水平高于對照組（P＜0.05）。 見表 1。

表1 試驗組與對照組血清P-selectin、NSE、sVCAM-1 水平對比(x±s，ng/ml)

2.2 試驗組不同病情程度患兒血清P-selectin、NSE、sVCAM-1水平對比 試驗組病情程度為重癥患兒血清 P-selectin、NSE、sVCAM-1水平高于輕癥患兒（P＜0.05）。 見表 2。

表2 試驗組不同病情程度患兒血清P-selectin、NSE、sVCAM-1 水平對比(x±s，ng/ml)

2.3 試驗組治療前、治療1周、3周后血清P-selectin、NSE、sVCAM-1水平對比 試驗組治療 1周、3 周后血清 P-selectin、NSE、sVCAM-1 水平較治療前降低,且治療3周后上述血清指標(biāo)低于治療1 周后（P＜0.05）。 見表 3。

表3 試驗組治療前、治療1周、3周后血清P-selectin、NSE、sVCAM-1 水平對比(x±s，ng/ml，n=76)

2.4 血清P-selectin、NSE、sVCAM-1水平與VE患兒病情程度的關(guān)聯(lián)性分析 經(jīng)相關(guān)性分析顯示，血清P-selectin、NSE、sVCAM-1水平與VE患兒病情程度呈顯著正相關(guān)（P均＜0.05）。見表4。

表4 血清P-selectin、NSE、sVCAM-1水平與VE患兒病情程度的關(guān)聯(lián)性分析（n=76）

3 討論

VE多因柯薩奇病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒及單純皰疹病毒感染造成，病毒可通過血液循環(huán)、神經(jīng)網(wǎng)等途徑侵入中樞神經(jīng)系統(tǒng),造成神經(jīng)細(xì)胞脫髓鞘改變及血管損害，進(jìn)而導(dǎo)致腦供血不足，引起腦組織缺血缺氧性損傷。相關(guān)研究報道,于血管炎發(fā)生、發(fā)展過程中,白細(xì)胞激活、黏附分子改變、內(nèi)皮細(xì)胞損傷、血管壁破壞為其重要生理病理環(huán)節(jié)[6]。內(nèi)皮細(xì)胞表面黏附分子、激活白細(xì)胞在炎癥反應(yīng)、腫瘤、血栓等病理過程中具有重要作用[7]。而炎癥反應(yīng)為VE腦損傷發(fā)生、發(fā)展過程中的重要作用機(jī)制,且其中腦神經(jīng)細(xì)胞損傷與黏附損傷之間密切相關(guān)。

在炎癥反應(yīng)初期，P-selectin可參與機(jī)體血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附，引起微血管病變、組織損傷等一系列病理損害；且可參與腦缺血早期損傷病理過程，抑制P-selectin表達(dá),起到保護(hù)腦神經(jīng)元的作用。此外，有研究指出，同時進(jìn)行血小板體積及P-selectin含量觀察，能為重癥VE患兒是否存在血液高凝狀態(tài)提供依據(jù)[8]。P-selectin水平提高可說明血小板已活化，血液處在高凝狀態(tài)，致使局部血流減慢，易生成微血栓。本研究顯示,試驗組血清P-selectin水平高于對照組,病情程度為重癥患兒血清P-selectin水平高于輕癥患兒，且治療1周、3周后血清P-selectin、NSE、sVCAM-1 水平低于治療前,治療 3周后低于治療1周后（P＜0.05）。表明VE患兒血清P-selectin水平呈高表達(dá),且其表達(dá)與患兒病程進(jìn)展、病情程度等有著密切關(guān)系。

正常生理狀態(tài)下，sVCAM-1主要于內(nèi)皮細(xì)胞中呈低水平表達(dá)，而當(dāng)產(chǎn)生炎癥反應(yīng)時，腫瘤壞死因子-α等炎癥細(xì)胞因子可誘導(dǎo)sVCAM-1于血管內(nèi)皮異常表達(dá)，而高水平sVCAM-1可激活多種白細(xì)胞并最終和內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生黏附,促使其朝炎癥區(qū)域不斷浸潤及移行,且上述炎癥細(xì)胞激活后可釋放大量氧自由基，加劇內(nèi)皮損傷，同時，sVCAM-1還可促進(jìn)多種炎癥細(xì)胞因子分泌,加劇病變部位炎癥反應(yīng)[9]。此外，近年來有研究指出，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染發(fā)生、進(jìn)展過程中，體內(nèi)sVCAM-1可參與腦組織損傷、血腦屏障破壞、炎癥反應(yīng)等一系列病理過程[10]。本研究顯示，試驗組血清sVCAM-1水平高于對照組，病情程度為重癥患兒血清sVCAM-1水平高于輕癥患兒,且治療1周、3周后血清sVCAM-1水平低于治療前,治療3周后低于治療1周后（P＜0.05）。表明VE患兒血清sVCAM-1水平呈高表達(dá)，且其表達(dá)與患兒病程進(jìn)展、病情程度等密切相關(guān)。

此外，NSE主要分布在神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞、腦神經(jīng)細(xì)胞胞漿中，可參與糖酵解，促進(jìn)磷酸烯醇化丙酮酸形成，發(fā)揮調(diào)節(jié)細(xì)胞中糖代謝作用。在正常生理狀態(tài)下，NSE于血清中的表達(dá)極低，而在產(chǎn)生腦損傷時，腦神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生崩解破壞，導(dǎo)致血腦屏障通透性提升，NSE可大量侵入至血液循環(huán)中[11]。有研究指出，VE血清NSE水平顯著高于非中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病患兒,且其表達(dá)水平與患兒病情程度有著密切關(guān)系[12]。本研究結(jié)果中，試驗組血清NSE水平高于對照組,病情程度為重癥患兒血清NSE水平高于輕癥患兒,且治療1周、3周后血清NSE水平低于治療前,治療3周后低于治療1周后(P＜0.05)。表明VE患兒血清NSE水平呈高表達(dá),且其表達(dá)水平與患兒病程進(jìn)展、病情程度等有著密切關(guān)系。本研究經(jīng)相關(guān)性分析顯示，血清P-selectin、NSE、sVCAM-1水平與VE患兒病情程度呈顯著正相關(guān)(P＜0.05)。亦提示血清 P-selectin、NSE、sVCAM-1 水平和VE患兒病情程度密切相關(guān)。

綜上，VE 患兒血清 P-selectin、NSE、sVCAM-1水平呈現(xiàn)高表達(dá),且三者表達(dá)水平與患兒病程進(jìn)展、病情程度等密切相關(guān)，可將其作為VE病情評估的有效指標(biāo)。