EDTA依賴性假性血小板減少1例

徐亞林 張亞麗 張夢(mèng)晗 馬夢(mèng)蘭 王輝

血小板（platelet，PLT）在體內(nèi)的主要作用是參與止血與血栓形成，具有非常重要的生理功能［1］。血小板減少為臨床常見癥狀，表現(xiàn)為由于各種原因?qū)е碌难“逵?jì)數(shù)結(jié)果低于參考值下限。當(dāng)血小板減少時(shí)患者可出現(xiàn)一系列癥狀，如皮膚淤血、鼻出血、牙齦出血、口腔黏膜出血，還可出現(xiàn)月經(jīng)量多、血尿等，嚴(yán)重者可出現(xiàn)內(nèi)臟出血、腦出血甚至危及生命。造成血小板減少的原因很多，如血液稀釋、血小板生成障礙、血小板破壞或消耗過多、血小板分布異常、血小板滯留增多等［2-3］。當(dāng)身體患有嚴(yán)重疾病（如免疫性疾病、肝病、惡性腫瘤等）時(shí)，常伴有假性血小板減少，某些抗菌藥物也可導(dǎo)致血小板減少［4］。另外血液檢測(cè)中的實(shí)驗(yàn)室因素也可引起血小板檢測(cè)值減少［5］，本文就實(shí)驗(yàn)室因素造成的假性血小板減少1例分析原因，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 病例介紹

患者男性，72歲，因“胸痛、胸前區(qū)不適”于2019年12月16日17：10至本院急診科就診，檢查血常規(guī)，PLT為134×109/L，當(dāng)晚患者因持續(xù)不適收入本院心血管內(nèi)科，重新采樣進(jìn)行血常規(guī)、血生化等檢查，顯示PLT達(dá)到危急值，為26×109/L（本院危急值標(biāo)準(zhǔn)為PLT＜30×109/L），短時(shí)間內(nèi)2次血常規(guī)檢查結(jié)果出現(xiàn)較大偏差，筆者在進(jìn)行臨床溝通的同時(shí)，為查找原因，排除干擾，對(duì)患者血液樣本進(jìn)行一系列處理。

2 血小板檢測(cè)

2.1 儀器與試劑 Beckman Coulter DXH800全自動(dòng)血液分析儀及原裝配套試劑（失效日期為2020年5月6日），生產(chǎn)備案證號(hào)（蘇蘇食藥監(jiān)械生產(chǎn)備20151012號(hào)）。乙二胺四乙酸二鉀（ethylenediamine tetra-acetic acid-K2，EDTA-K2）抗凝管，生產(chǎn)日期為2019年3月3日，失效日期為2021年3月2日，生產(chǎn)許可證號(hào)（贛食藥監(jiān)械生產(chǎn)許20140016號(hào)），由江西格蘭斯醫(yī)療器械有限公司提供。全血質(zhì)控品批號(hào)為BC1907BN，失效日期為2019年9月10日。

2.2 儀器質(zhì)量控制（質(zhì)控）及檢測(cè) 檢查儀器每日質(zhì)控情況，同時(shí)重新對(duì)患者EDTA抗凝血樣本進(jìn)行隨機(jī)上機(jī)檢測(cè)，顯示質(zhì)控結(jié)果穩(wěn)定在控。采集患者靜脈血2 mL置于EDTA-K2抗凝管，顛倒8次混勻后上機(jī)檢測(cè)。

2.3 血涂片觀察 參照血細(xì)胞分析顯微鏡復(fù)檢規(guī)則［2］，對(duì)EDTA抗凝管內(nèi)樣品行血涂片瑞氏染色顯微鏡油鏡下復(fù)檢，可見血小板聚集成團(tuán)。見圖1。

圖1 1例假性血小板減少患者血涂片（瑞氏染色 10×100倍放大）

2.4 血小板計(jì)數(shù) 行顯微鏡下血小板人工計(jì)數(shù)［2］，本例結(jié)果為120×109/L。

2.5 不同抗凝管復(fù)測(cè) 于患者入院第2天（2019年12月17日）上午同時(shí)使用肝素抗凝管和EDTA-K2抗凝管重新對(duì)該患者進(jìn)行平行采樣，采樣后5 min內(nèi)進(jìn)行第1次檢測(cè)，分時(shí)段上機(jī)分析，記錄結(jié)果。使用肝素抗凝管的PLT檢測(cè)結(jié)果均在正常值參考范圍內(nèi)。見表1。將EDTA-K2抗凝管置于水浴箱，溫度設(shè)定為37 ℃，30 min后上機(jī)分析，PLT結(jié)果為23×109/L，血小板減少現(xiàn)象未見恢復(fù)，可以排除該患者系自身冷凝集原因引起的血小板減少。

表1 不同時(shí)間段使用EDTA-K2和肝素抗凝管的血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果比較

3 討論

血小板計(jì)數(shù)是檢驗(yàn)科日常工作中最常規(guī)的檢驗(yàn)項(xiàng)目之一，由于血小板具有聚集性和黏附性，這種聚集現(xiàn)象在采血后5 min就已經(jīng)開始，時(shí)間越長(zhǎng)，聚集越嚴(yán)重，儀器測(cè)得的血小板數(shù)值越低［6］。本例即是由于該患者在急診科就診時(shí)，患者血常規(guī)樣本為即時(shí)檢測(cè)，血小板聚集現(xiàn)象不明顯，檢驗(yàn)結(jié)果亦降低不明顯，收入院后，由于臨床護(hù)理人員標(biāo)本采集送檢時(shí)間的影響，標(biāo)本送檢及時(shí)性無法保證，導(dǎo)致血小板嚴(yán)重聚集，使得計(jì)數(shù)結(jié)果降低非常明顯，因此該患者短時(shí)間內(nèi)前后2次血小板計(jì)數(shù)結(jié)果出現(xiàn)較大偏差。

目前檢驗(yàn)技術(shù)飛速發(fā)展，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)設(shè)備給檢驗(yàn)工作帶來極大快捷便利的同時(shí)，也會(huì)伴隨著一些新問題的產(chǎn)生，比如，我們?cè)谂R床工作中經(jīng)常會(huì)碰到并無出血征象，而實(shí)驗(yàn)室結(jié)果顯示血小板減少，甚至嚴(yán)重低于正常參考值的情況，給患者造成較重的心理負(fù)擔(dān)，甚至產(chǎn)生一些不必要的醫(yī)療行為，而這種血小板減少通過實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)發(fā)現(xiàn)其中一部分患者為非疾病原因?qū)е碌难“寮傩詼p少。

EDTA-K2是一種常用的血液抗凝劑，于1993年由國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（International Council for Standardization in Haematology，ICSH）建議用于血液分析中，但某些情況下EDTA-K2會(huì)引起血小板聚集，使得血小板計(jì)數(shù)假性減少，在臨床上診斷為EDTA依賴性假性血小板減少癥（EDTA dependent pseudothrombocytopenia，EDTA-PTCP）。EDTA-PTCP發(fā)病率較低，約為0.1%，臨床表現(xiàn)為重型假性血小板減少癥，無出血現(xiàn)象。此種假性血小板減少無任何病理生理意義，無需治療［7］。本例患者即為經(jīng)過一系列實(shí)驗(yàn)確認(rèn)其血小板減少為EDTA-K2抗凝引起的假性血小板減少，即EDTA-PTCP。EDTA誘導(dǎo)血小板活化，改變了血小板膜表面某種隱匿性抗原的表位構(gòu)象，與血漿中的自身抗體相結(jié)合而發(fā)生凝集，其抗體產(chǎn)生的病理機(jī)制尚不清楚［8］。雖然對(duì)于確診的EDTA-PTCP無需進(jìn)行醫(yī)療干預(yù)，但是一旦誤診難免會(huì)加重患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和心理負(fù)擔(dān)，因此檢驗(yàn)科醫(yī)生在日常工作中要保持高度責(zé)任心，嚴(yán)格遵守各類操作規(guī)程，熟悉儀器、試劑、方法學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)程序文件，嚴(yán)格室內(nèi)質(zhì)控工作。

檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展日新月異，從細(xì)胞水平到分子水平，再從蛋白質(zhì)水平到基因水平，各種新的檢測(cè)方法層出不窮，這在給醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作帶來便利的同時(shí)，也對(duì)檢驗(yàn)工作者提出了更高的要求，在熟悉本專業(yè)基礎(chǔ)理論的同時(shí)，要不斷更新自己的專業(yè)思維，強(qiáng)化與臨床的溝通，參與臨床信息的共享，開拓自己的專業(yè)視野，用科學(xué)的作風(fēng)、專業(yè)的思維、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度面對(duì)每一份標(biāo)本，給出每一份標(biāo)本最具可信度的報(bào)告。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突