抗鉛真菌的篩選、鑒定及其對(duì)Pb2+的吸附特性

趙琪琪，李海紅*，安鳳秋,2

(1.西安工程大學(xué)環(huán)境與化學(xué)工程學(xué)院，陜西 西安 710048； 2.西北農(nóng)林科技大學(xué)資源環(huán)境學(xué)院，陜西 楊凌 712100)

【研究意義】重金屬因不能被生物降解，可在土壤中積累，并且通過(guò)食物鏈可對(duì)人體造成危害，因此重金屬污染已經(jīng)引起廣大學(xué)者的廣泛關(guān)注。Pb廣泛應(yīng)用于金屬冶煉、建筑行業(yè)及蓄電池、印刷業(yè)、染料、油漆等工業(yè)[1-2]，大量廢水廢氣排入土壤中，使土壤受Pb污染面積越來(lái)越大。因此，Pb污染土壤的修復(fù)顯得尤為重要。目前，對(duì)重金屬污染土壤的傳統(tǒng)修復(fù)技術(shù)有物理化學(xué)處理等技術(shù)，但缺點(diǎn)是能耗高、投資大、操作較困難、同時(shí)易產(chǎn)生二次污染[3-4]?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】近年來(lái)，迅速興起的生物修復(fù)技術(shù)，主要是利用微生物的生化反應(yīng)來(lái)穩(wěn)定或清除環(huán)境中的有害物質(zhì)，這些能夠吸附土壤中Pb2+的微生物多為真菌和細(xì)菌，如真菌秀珍菇(Pleurotuspulmonarius)[5]、短小芽孢桿菌(Bacilluspumilus)[6]、曲霉(Aspergilus)、青霉(Penicillium)[7]、鐮刀菌屬(Fusarium)[8]、芽孢桿菌(Bacillus)[9]、Rhizopusarrhizus[10]、Enterobactersp.JI[11]、Norcardiaamarae[12]、Phanerochaetechrysosporium[13]Cochlioboluslunatus[14]等，但這些微生物對(duì)Pb2+的耐受能力均不太高，大部分小于400 mg·L-1，對(duì)于重金屬Pb污染比較嚴(yán)重的環(huán)境進(jìn)行生物修復(fù)，上述這些菌株就存在明顯不足，因此篩選馴化出能夠在較高濃度Pb污染環(huán)境中存活的菌株，對(duì)治理Pb污染的環(huán)境進(jìn)行生物修復(fù)尤為重要?！颈狙芯康那腥朦c(diǎn)】本實(shí)驗(yàn)從重金屬污染的土樣中篩選馴化出一株耐Pb菌株，對(duì)其進(jìn)行了Pb2+去除和吸附特性研究?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】以期為鉛污染土壤的微生物修復(fù)提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 土樣來(lái)源 土壤樣品采集于陜西省楊凌區(qū)西北農(nóng)林科技大學(xué)國(guó)家黃土肥力與肥料效益監(jiān)測(cè)基地。0～20 cm的地表土，采樣法采用“之”字型，設(shè)置5個(gè)點(diǎn)，將5個(gè)點(diǎn)采取的土樣混合為1分樣品，然后從中稱取200 g裝入已經(jīng)滅菌的自封袋中，將自封袋放置在冰盒中快速運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，用研缽研碎，100目篩過(guò)樣，放置在4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.2 試劑 Pb(NO3)2:配制成Pb2+濃度為0.5 mg·L-1的貯備液。

1.1.3 培養(yǎng)基 PDA培養(yǎng)基(%)：去皮馬鈴薯20，葡萄糖1.5，蛋白胨0.3，KH2PO40.3，MgSO40.2，瓊脂 2，pH 7.0。

1.2 菌株的篩選和馴化

取10 g土樣溶于100 mL無(wú)菌水中，25 ℃、160 r/min振蕩培養(yǎng)12 h，靜置20 min，將1 mL上清液梯度稀釋至10-3、10-4、10-5，然后用注射器取1 mL培養(yǎng)液轉(zhuǎn)接到含Pb2+濃度為200、300、400和500 mg·L-1的Pb2+培養(yǎng)基平板上，每個(gè)樣設(shè)置3個(gè)重復(fù)，28 ℃培養(yǎng)72 h，然后觀察菌株的生長(zhǎng)情況。根據(jù)菌落的形態(tài)不同，用平板劃線法挑取單菌落進(jìn)行分離純化培養(yǎng)，反復(fù)多次進(jìn)行分離純化培養(yǎng)，劃線直到獲得純菌株[15]。對(duì)于初篩得到的菌株，通過(guò)增加Pb2+濃度梯度，進(jìn)行復(fù)篩培養(yǎng)，選取耐鉛活性較強(qiáng)的菌株，進(jìn)行馴化傳代培養(yǎng)。

1.3 菌株的鑒定

1.3.1 菌株的形態(tài)特征觀察 對(duì)篩選出的真菌菌株進(jìn)行菌落表面、邊緣、顏色及其形態(tài)特征等方面的觀察[15]。

1.3.2 菌株的分子生物鑒定 采用酶法提取菌株的DNA，依據(jù)真菌ITS rRNA基因中最保守的序列設(shè)計(jì)并合成引物ITS1(TCCGTAGGTGAACCTGCGG)/ITS4(TCCTCCGCTTATTGATATGC)，通過(guò)PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。PCR運(yùn)行程序?yàn)椋涸?4 ℃預(yù)變性5 min后，同等溫度下變性45 s，然后在58 ℃條件下退火45 s，72 ℃延伸1 min 30 s，31個(gè)循環(huán)；在4 ℃條件下冷藏保存[16]。在北京六合華大基因科技有限公司進(jìn)行ITS rRNA測(cè)序，將所得序列與NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中已有的序列進(jìn)行BLAST分析，分析該菌株的同源性，通過(guò)MEGA 6.0 軟件生成系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)[16-18]。

1.4 菌株的生長(zhǎng)特性研究

對(duì)篩選出的真菌菌株用滅菌的打孔器取直徑為1.2 cm的菌餅，接種在PDA固體培養(yǎng)基上，25 ℃下恒溫培養(yǎng)7 d，設(shè)置3個(gè)重復(fù)，采用十字交叉法測(cè)量不同培養(yǎng)時(shí)間下菌落的直徑，并計(jì)算平均生長(zhǎng)速率[19-20]。

平均生長(zhǎng)速率V(cm·d-1)=(φ菌落直徑平均值-φ菌餅直徑)/培養(yǎng)時(shí)間(t)以pH值、培養(yǎng)溫度及培養(yǎng)時(shí)間作為影響該菌株生長(zhǎng)的主要因素，分別將pH值設(shè)置為6、7、8、9；溫度設(shè)置為20、25、30和35 ℃；培養(yǎng)時(shí)間設(shè)置為1、2、3、4、5、6和7 d，設(shè)計(jì)單因素試驗(yàn)確立待測(cè)菌株的最優(yōu)培養(yǎng)條件，研究該菌株的生長(zhǎng)特性。

1.5 菌株的最大抗性水平研究

菌株所能耐受的最大Pb2+濃度即為該菌株的最大抗性水平(MRL)，為了確定待測(cè)菌株對(duì)重金屬Pb2+的最大抗性水平(MRL)，將該菌株劃線接種于含不同濃度Pb2+(1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000)mg·L-1的固體PDA培養(yǎng)基上，25 ℃下培養(yǎng)4 d，觀察其生長(zhǎng)情況。每個(gè)處理設(shè)3個(gè)平行，將菌株接種在不含Pb2+的培養(yǎng)基作為空白對(duì)照。

1.6 菌株對(duì)Pb2+的去除吸附效果

1.6.1 菌株在不同Pb2+濃度下的生長(zhǎng)曲線 對(duì)于不同生長(zhǎng)時(shí)間菌體的干質(zhì)量，可采用搖瓶培養(yǎng)測(cè)定的方法來(lái)繪制其生長(zhǎng)曲線[17]。配制 Pb2+濃度分別為(0、1000、1500、2000、2500、3000)mg·L-1的PDA液體培養(yǎng)基，向每個(gè)搖瓶加入1 mL菌株種子液，每個(gè)濃度梯度設(shè)置3個(gè)重復(fù)，在25 ℃、160 r·min-1下恒溫振蕩培養(yǎng)4 d。每8 h取1次樣，用離心法測(cè)定其細(xì)胞干重，即先稱量離心管的重量，然后在離心管中放入待測(cè)培養(yǎng)液，8000 r·min-1下離心5 min，80 ℃真空干燥后稱菌體干重[18]。

1.6.2 菌株對(duì)Pb2+的去除研究 配制含Pb2+濃度為(1000、2000、3000)mg·L-1的液體培養(yǎng)基，然后在100 mL培養(yǎng)基中接種1 mL的菌株種子液，以不加菌的鉛溶液作為對(duì)照，160 r·min-1，25 ℃下恒溫振蕩培養(yǎng)4 d。8000 r/min離心5 min除去菌體，取上清液，加入硝酸加熱消解、稀釋，使用NexION350電感耦合等離子體質(zhì)譜儀測(cè)定溶液中Pb2+濃度[20]。每個(gè)樣品設(shè)置3個(gè)重復(fù)。Pb2+去除率(P)按照公式(1)進(jìn)行計(jì)算[18-20]。

圖1 菌株P(guān)bW的菌落及菌絲形態(tài)特征

P= (C1-C0)/C1×100 %

(1)

式中，C1——原培養(yǎng)液中Pb2+濃度(mg·L-1)，C0——菌體生長(zhǎng)后培養(yǎng)液中Pb2+濃度(mg·L-1)。

1.6.3 菌株對(duì)Pb2+的吸附 取滅菌消毒的離心管1支，移取20 mL新鮮菌體種子液于其中，在8000 r·min-1離心條件下離心5 min，棄上清液，用去離子水沖洗菌體3次，并收集菌體，用濾紙將水蘸干，然后將菌體分別加入到含Pb2+濃度為(1000、2000、3000)mg·L-1的溶液中，用玻璃珠充分將加入的菌體打散使之與溶液混勻，置于恒溫振蕩器上25 ℃以160 r·min-1的轉(zhuǎn)速震蕩24 h，后過(guò)濾，取上清液加入硝酸消解，稀釋后用NexION350電感耦合等離子體質(zhì)譜儀測(cè)定溶液中Pb2+濃度。將實(shí)驗(yàn)所用濾紙標(biāo)號(hào)，烘干，稱重，然后過(guò)濾出菌絲體，將帶有菌絲體的濾紙放入80 ℃的烘箱里，烘干至恒重后取出，放在分析天平上稱量重量，減去濾紙重量，即可算出菌體干重[19]。本試驗(yàn)吸附率和吸附量分別按公式(2)和(3)進(jìn)行計(jì)算[18-20]。

Q= (C-Ct)/C×100 %

(2)

q= (C-Ct)×V/m

(3)

M:Marker DL2000 plus 從下至上依次為：5000、3000、2000、1000、750、500、250、100 bp

式中，Q——吸附率，C——吸附前溶液中Pb2+濃度(mg·L-1)，Ct——吸附t時(shí)刻后溶液中Pb2+濃度(mg·L-1)，q——吸附量(mg·g-1)，V——反應(yīng)液體積(L)，m——反應(yīng)液中菌體烘干后的質(zhì)量(g)。

2 結(jié)果與分析

2.1 菌株的基本形態(tài)特征

如圖1-a所示，菌落呈圓餅狀生長(zhǎng)，菌落直徑8～9 cm，菌落稍隆起，蔓延生長(zhǎng)，質(zhì)地絨狀兼絮狀，菌絲體灰白色，表面無(wú)滲出液，無(wú)可溶性色素，反面接近灰黑色。如圖1-b所示，光學(xué)顯微鏡下顯示菌株?duì)I養(yǎng)菌絲壁突起分生孢子結(jié)構(gòu)大量產(chǎn)生，分生孢子近于灰色，顯示其分生孢子梗發(fā)生于基質(zhì)，孢梗莖(165.4～258.3) μm×(2.7～5.0) μm，梨形單輪生，分生孢子通常呈現(xiàn)橢圓形，(2.2～2.9) μm×(1.9～2.8) μm，少量的橢球形或近扁球形，分生孢子鏈較緊密。

2.2 菌株的分子生物學(xué)鑒定

經(jīng)過(guò)PCR擴(kuò)增，PbW菌株的ITS rRNA基因長(zhǎng)度約為960 bp，PCR擴(kuò)增產(chǎn)物如圖2所示。本實(shí)驗(yàn)菌株(PbW)的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)如圖3所示：對(duì)ITS rRNA所測(cè)序列與NCBI的序列進(jìn)行BLAST比對(duì)及構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)，菌株P(guān)bW與莖點(diǎn)霉屬(Phoma)具有較高的相似性，其中菌株P(guān)bW與Phomasp.(KU293587.1)的相似性為99 %，且在進(jìn)化上的距離相對(duì)較近，處于同一分支。結(jié)合菌株形態(tài)特征確定菌株P(guān)bW為莖點(diǎn)霉屬。

圖3 菌株P(guān)bW的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)

結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(n±s)表示

2.3 菌株的生長(zhǎng)特性研究

2.3.1 溫度對(duì)耐鉛菌株生長(zhǎng)的影響 如圖4所示：菌株P(guān)bW在不同溫度下呈曲線生長(zhǎng)。在20～25 ℃范圍內(nèi)，生長(zhǎng)速率隨溫度的升高而增大，25 ℃時(shí)菌株P(guān)bW生長(zhǎng)速率達(dá)到最大值；在25～35 ℃范圍內(nèi)，菌株生長(zhǎng)速率隨溫度升高而減弱，30 ℃以上菌株生長(zhǎng)極其緩慢，35 ℃時(shí)菌株生長(zhǎng)速率為0。因此菌株P(guān)bW的最適溫度為25 ℃。

2.3.2 時(shí)間對(duì)耐鉛菌株生長(zhǎng)的影響 從圖4可以看出，菌株P(guān)bW在不同時(shí)間下的生長(zhǎng)狀況為：0～1 d菌株基本上沒(méi)有生長(zhǎng)，處于停滯期；1～2 d，菌株加速生長(zhǎng)，處于加速期；2～4 d，菌株生長(zhǎng)速率增至最大，菌株呈幾何級(jí)數(shù)增加，處于對(duì)數(shù)期；4～5 d，菌株生長(zhǎng)速率稍有減弱，但菌株生物量仍處于上升狀態(tài)，處于減速期；5～6 d，菌株生長(zhǎng)速率減緩，基本上處于靜止期，靜止期新生的菌株數(shù)和死亡的菌株數(shù)相當(dāng)，菌株總數(shù)達(dá)到最大值；6～7 d，菌株生長(zhǎng)顯著降低，死亡率增加，此時(shí)菌株群體進(jìn)入衰亡期。因此菌株P(guān)bW的最適培養(yǎng)時(shí)間為4～5 d。

結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(n±s)表示

2.3.3 pH對(duì)耐鉛菌株生長(zhǎng)的影響 PDA在強(qiáng)酸(≤5)強(qiáng)堿(≥10)條件下不能凝固，故培養(yǎng)基的pH值設(shè)定范圍在6～9。如圖5所示：菌株P(guān)bW在不同pH的影響下呈曲線式生長(zhǎng)，可以看出菌株在pH=7時(shí)生長(zhǎng)速率最大，pH=6時(shí)生長(zhǎng)速率較大，pH=8和pH=9時(shí)生長(zhǎng)速率降低，因此菌株P(guān)bW的最適生長(zhǎng)pH為7。

A: CK; B: 1000 mg·L-1; C: 1500 mg·L-1; D: 2000 mg·L-1; E: 2500 mg·L-1; F: 3000 mg·L-1 ; G: 3500 mg·L-1; H: 4000 mg·L-1; I: 4500 mg·L-1;J: 5000 mg·L-1; K: 5500 mg·L-1; L: 6000 mg·L-1

2.4 菌株的最大抗性水平研究

通過(guò)最大抗性水平(MRL)檢測(cè)，菌株P(guān)bW耐Pb2+能力可達(dá)到6000 mg·L-1，由圖6可知，當(dāng)固體培養(yǎng)基中Pb2+的含量為0時(shí)，菌株生長(zhǎng)速度最快。隨著Pb2+濃度的增加，菌株生長(zhǎng)逐漸受到抑制，菌株生長(zhǎng)減慢，其菌體量變少，這可能與重金屬鉛對(duì)微生物的毒害作用有關(guān)。Pb2+在1000～2000 mg·L-1，菌株正常生長(zhǎng)，形態(tài)基本沒(méi)有發(fā)生變化，呈暗灰色，且與不添加重金屬Pb2+的對(duì)照形態(tài)及菌株生物量相似。說(shuō)明菌株在Pb2+為1000～2000 mg·L-1范圍內(nèi)，生長(zhǎng)基本上不受Pb2+的影響；Pb2+在2500～4000 mg·L-1，菌株生物量減少，菌絲周圍開(kāi)始泛白；Pb2+在4500～6000 mg·L-1，菌株生物量急劇減少，并隨著Pb2+濃度的升高，菌絲顏色逐漸變淺，漸漸從灰色變?yōu)榘咨?。?dāng)Pb2+濃度達(dá)到6000 mg·L-1時(shí)，菌株由之前的暗灰色變成了白色，菌株生物量極少，基本不再生長(zhǎng)，耐Pb2+能力達(dá)到極限。表明分離的菌株P(guān)bW具有較強(qiáng)的耐受鉛能力。

2.5 菌株對(duì)Pb2+去除吸附效果研究

2.5.1 菌株在不同Pb2+濃度下的生長(zhǎng)曲線 由圖7可知，培養(yǎng)基中Pb2+的濃度為零時(shí)，菌體生長(zhǎng)最好。當(dāng)逐漸增大培養(yǎng)基中Pb2+質(zhì)量濃度時(shí)，菌株的生長(zhǎng)能力減弱，細(xì)胞干重也在不斷減少，在培養(yǎng)液中的Pb2+濃度在1000～1500 mg·L-1時(shí)，細(xì)胞干重有所減少，說(shuō)明低濃度的Pb2+對(duì)菌體生長(zhǎng)有一定的抑制作用。當(dāng)培養(yǎng)液中的Pb2+濃度大于2000 mg·L-1時(shí)，菌株生長(zhǎng)較緩慢，細(xì)胞干重顯著減少。但在一定的Pb2+濃度范圍內(nèi)，該菌株依然能生長(zhǎng)，表明該菌株具有一定的耐鉛能力。

2.5.2 菌株對(duì)Pb2+的去除 如圖8所示：當(dāng)Pb2+濃度為1000 mg·L-1時(shí)，去除率為95.67 %；Pb2+濃度為1000～2000 mg·L-1時(shí)，菌株對(duì)Pb2+均有較好的去除效果。當(dāng)Pb2+濃度達(dá)為2000 mg·L-1時(shí)，去除率最大，達(dá)到98.42 %，隨著Pb2+濃度的升高，菌株對(duì)Pb2+的去除率呈下降趨勢(shì)，但仍高達(dá)90 %。當(dāng)Pb2+濃度為3000 mg·L-1時(shí)，去除率有所下降，這可能與菌株吸附到達(dá)飽和有關(guān)。

結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(n±s)表示

2.5.3 菌株對(duì)Pb2+的吸附 如表1所示：菌株對(duì)鉛有吸附作用，且吸附平衡較快。在Pb2+濃度為1000 mg·L-1時(shí)，其吸附率為51.65 %；Pb2+濃度為1000～2000 mg·L-1時(shí)，吸附率隨著Pb2+濃度增大而升高；當(dāng)Pb2+濃度為2000 mg·L-1時(shí)，吸附率為56.28 %，吸附率達(dá)到最大；當(dāng)Pb2+濃度大于2000 mg·L-1時(shí)，吸附率隨著Pb2+濃度增大而降低，當(dāng)Pb2+濃度為3000 mg·L-1時(shí)，吸附率為33.39 %。隨著Pb2+濃度升高，菌株對(duì)Pb2+的吸附率下降，但吸附率依然大于30 %。這一結(jié)果與Norcardia amarae對(duì)Pb2+的吸附特性相似[12]。

2.5.4 菌株對(duì)Pb2+去除率與吸附率的比較 如圖9所示，菌株對(duì)Pb2+的吸附率與去除率不同，其中去除率明顯高于吸附率。這與鐮刀菌屬[17]類似，但沒(méi)有鐮刀菌屬對(duì)Pb2+吸附率(92.6 %)與去除率(99.8 %)的差別大，推測(cè)可能與菌種不同有關(guān)。菌株對(duì)Pb2+的去除率與吸附率存在不同，可能是因?yàn)榫陮?duì)Pb2+的去除是菌株吸附作用和轉(zhuǎn)化作用所致[18]。

3 討論與結(jié)論

研究表明，菌株P(guān)bW經(jīng)鑒定為莖點(diǎn)霉屬(Phomasp.)。它們對(duì)鉛的耐受質(zhì)量濃度分別高達(dá)6000 mg·L-1。PbW最適pH值為7，最適溫度為25 ℃，最佳培養(yǎng)時(shí)間為4～5 d；試驗(yàn)研究結(jié)果表明，PbW在pH值為6～9基本都能生長(zhǎng)，當(dāng)pH>7時(shí)，隨著pH值的升高，生長(zhǎng)速率減弱。pH對(duì)微生物的生命活動(dòng)有很大的影響。pH會(huì)影響細(xì)胞質(zhì)膜對(duì)離子和養(yǎng)料的吸收、影響酶的活性、改變環(huán)境中養(yǎng)料的可給性或有害物質(zhì)的毒性。因此，深入探究獲得其生長(zhǎng)適宜的pH 值對(duì)微生物創(chuàng)造一個(gè)良好的生長(zhǎng)環(huán)境至關(guān)重要，也對(duì)真菌在實(shí)際治理重金屬污染方面起著重要作用[17-21]。PbW在20～30 ℃，由于溫度適宜，菌株生長(zhǎng)情況基本上無(wú)差別。當(dāng)溫度高于35 ℃時(shí)，菌株P(guān)bW的生長(zhǎng)速率為零，表明高溫會(huì)影響菌株P(guān)bW的生長(zhǎng)。研究發(fā)現(xiàn)微生物的生長(zhǎng)與溫度密切相關(guān)，超過(guò)微生物生長(zhǎng)的最高溫度可引起微生物細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固，使酶變性失活，代謝停滯死亡。當(dāng)環(huán)境溫度低于微生物生長(zhǎng)的下限時(shí)，可造成微生物細(xì)胞內(nèi)的酶的活性降低，新陳代謝活動(dòng)緩慢，呈休眠狀態(tài)。因此，在適宜的溫度，它下們能夠正常生長(zhǎng)，在適應(yīng)的溫度界限以外，過(guò)高或過(guò)低的溫度會(huì)抑制微生物的生長(zhǎng)，嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致它們死亡[17-21]。

圖8 菌株對(duì)Pb2+的去除效果研究

表1 菌株對(duì)Pb2+的吸附效果研究

圖9 菌株P(guān)bW對(duì)Pb2+去除率與吸附率的比較

在初始Pb2+濃度為1000～3000 mg·L-1時(shí)，采用菌株P(guān)bW的活體細(xì)胞對(duì)Pb2+進(jìn)行去除實(shí)驗(yàn)，同時(shí)采用菌株P(guān)bW的離心生物質(zhì)對(duì)Pb2+進(jìn)行吸附實(shí)驗(yàn)[18]，在鉛質(zhì)量濃度一定時(shí)，隨著生長(zhǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，菌株P(guān)bW對(duì)鉛的去除率及吸附率表現(xiàn)出先增大后減小的趨勢(shì)，這與其他學(xué)者的研究[22-24]一致。在鉛質(zhì)量濃度為2000 mg·L-1時(shí)，菌株對(duì)鉛的去除率及吸附率達(dá)到最大，分別為56.28 %和98.42 %。結(jié)果表明，菌株P(guān)bW對(duì)Pb2+的去除率高于吸附率，說(shuō)明菌體對(duì)Pb2+的去除不僅與菌體的細(xì)胞壁和各個(gè)官能團(tuán)有關(guān)，可能也與菌株P(guān)bW自身的一些代謝產(chǎn)物有關(guān)[18]，真菌的代謝作用能產(chǎn)生多種低分子量的有機(jī)物來(lái)絡(luò)合、吸附Pb2+，從而達(dá)到去除、回收Pb2+的目的[18]。

菌株P(guān)bW對(duì)Pb2+的最大飽和吸附量達(dá)到了61.87 mg·L-1，這明顯高于文獻(xiàn)[18]所報(bào)道的青霉菌最大鉛吸附量(59.88 mg·L-1)。菌株P(guān)bW對(duì)Pb2+具有高效的吸附力這一特性，在重金屬鉛污染研究方面具有潛在的實(shí)用性。但土壤是一個(gè)非常復(fù)雜的環(huán)境體系，一般而言，會(huì)存在多種重金屬污染，所以利用單一的真菌或微生物來(lái)修復(fù)土壤重金屬的效率較低，因此，研發(fā)高效的、耐重金屬離子濃度高的微生物菌劑來(lái)聯(lián)合降解土壤重金屬以及深入解析重金屬污染土壤修復(fù)的作用機(jī)制，還有待今后進(jìn)一步的試驗(yàn)和研究。