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    慢性乙肝患者血漿同型半胱氨酸測(cè)定及其與肝纖維化程度的相關(guān)性研究*

    2020-04-20 07:50:20廣東醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院佛山市順德區(qū)龍江醫(yī)院廣東佛山528300
    罕少疾病雜志 2020年1期
    關(guān)鍵詞:乙肝患者肝細(xì)胞纖維化

    廣東醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院(佛山市順德區(qū)龍江醫(yī)院) (廣東 佛山 528300)

    侯有磯 陸中奎 鄧勇瑩

    慢性乙肝是臨床感染科較為常見的一類傳染性疾病,可通過血液、母嬰垂直傳播及性接觸等方式進(jìn)行傳染,患者普遍出現(xiàn)肝細(xì)胞炎癥損傷及纖維化等情況,臨床表現(xiàn)為乏力、惡心、畏食等癥狀,嚴(yán)重影響其生活質(zhì)量[1]。研究表明,慢性乙肝患者體內(nèi)血漿同型半胱氨酸(Hcy)水平較正常值顯著升高,其水平與肝功能障礙有著密切聯(lián)系,而肝纖維化指標(biāo)均可反映患者肝細(xì)胞受損程度,若可通過評(píng)估以上生化指標(biāo)進(jìn)而判斷患者肝纖維化程度,則可避免穿刺活檢對(duì)患者機(jī)體的創(chuàng)傷[2]。近年來,有關(guān)血漿Hcy水平在心腦血管疾病中的臨床意義得到廣泛研究[3],但有關(guān)慢性乙肝患者該指標(biāo)的意義研究報(bào)道鮮少。本研究旨在探究慢性乙肝患者血漿同型半胱氨酸(Hcy)測(cè)定及其與肝纖維化程度的相關(guān)性,取得一定成果,現(xiàn)報(bào)道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    1.1.1 研究對(duì)象:隨機(jī)選取2017年1月~2019年1月于我院接受治療的60例慢性乙肝患者為觀察組,符合《慢性乙型肝炎特殊患者抗病毒治療專家共識(shí)》[4]中慢性乙肝診斷標(biāo)準(zhǔn):血清乙肝表面抗原(HBsAg)陽性時(shí)間>6個(gè)月,且乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)呈現(xiàn)陰性,乙肝病毒脫氧核糖核酸(HBV DNA)>1×105,丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)水平為正常值的2-10倍,納入標(biāo)準(zhǔn):①經(jīng)病理學(xué)穿刺活檢或?qū)嶒?yàn)室檢查確診并分期者;②自愿簽署知情同意書者;③臨床各項(xiàng)檢查資料完整者。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并心、腦等器官病變者;②近3個(gè)月內(nèi)曾服用影響Hcy水平的藥物者;③意識(shí)及溝通障礙者。隨機(jī)選取同期接受體檢的自愿者30例為健康對(duì)照組,本研究已獲得醫(yī)院倫理會(huì)員會(huì)批準(zhǔn)。觀察組男36例,女24例,年齡35-66歲,平均年齡(47.52±2.17)歲,病程4-15年,平均病程(9.41±2.72)年;健康對(duì)照組男19例,女11例,年齡34-65歲,平均年齡(48.21±3.14)歲。兩組對(duì)象性別、年齡比較差異不顯著(P均>0.05),具有可比性。

    1.2 方法

    1.2.1 肝纖維化分級(jí)方法:通過DU8-M6全數(shù)字彩色多普勒超聲診斷儀(徐州市瑞華電子科技發(fā)展有限公司)進(jìn)行肝臟定位掃描,使用16G巴德活組織檢查針進(jìn)行穿刺活檢,獲得肝細(xì)胞1.0cm-1.5cm長的組織,使用10%的甲醛溶液進(jìn)行固定,隨后石蠟包埋切片,常規(guī)HE染色及網(wǎng)織纖維染色,由兩位臨床醫(yī)師進(jìn)行閱片判斷,參考《病毒性肝炎防治方案》[5]中的有關(guān)標(biāo)準(zhǔn),并通過Metavir評(píng)分系統(tǒng)將其分為無纖維化組(S0期)、輕纖維化組(S1-S2期)、中度纖維化組(S3期)及重度纖維化組(S4期)。

    1.2.2 指標(biāo)檢測(cè)方法:行常規(guī)靜脈采血5mL置于抗凝管,以3000r/min離心血樣10min,及時(shí)提取血漿,采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血漿Hcy水平;采用放射免疫法測(cè)定透明質(zhì)酸(HA)、層粘連蛋白(LN)、Ⅲ型前膠原(PCⅢ)、Ⅳ型膠原(Ⅳ-C)水平。

    1.3 觀察指標(biāo) 比較觀察組、健康對(duì)照組及觀察組不同肝纖維化程度受試者血漿Hcy及肝纖維化指標(biāo)[HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C]水平差異;經(jīng)Spearman等級(jí)相關(guān)分析慢性乙肝患者肝纖維化程度與血漿Hcy水平、肝纖維化指標(biāo)(HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C)的相關(guān)性。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù),計(jì)量資料用(±s)表示,多組間采用單因素方差分析,統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義的結(jié)果進(jìn)一步采用SNK-q檢驗(yàn);相關(guān)性采用spearman分析法,以P<0.05時(shí)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié) 果

    2.1 觀察組患者肝纖維化程度分級(jí)情況 應(yīng)用分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)將觀察組患者根據(jù)肝纖維化程度分為無纖維化組(n=12)、輕纖維化組(n=22)、中度纖維化組(n=18)及重度纖維化組(n=8)。

    表1 兩組血漿Hcy、血清肝纖維化指標(biāo)水平比較(±s)

    表1 兩組血漿Hcy、血清肝纖維化指標(biāo)水平比較(±s)

    組別 血漿Hcy(μmol/L) HA(ng/mL) LN(ng/mL) PCⅢ(ng/mL) Ⅳ-C(ng/mL)觀察組(n=60) 20.04±3.26 345.26±41.52 215.34±42.31 175.21±41.06 249.15±53.64健康對(duì)照組(n=30) 9.58±2.59 65.23±16.34 110.26±19.24 96.35±21.04 61.04±18.36 t值 15.310 35.510 12.924 9.872 18.625 P值 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

    表2 觀察組不同肝纖維化程度患者血漿Hcy、血清肝纖維化指標(biāo)水平比較(±s)

    表2 觀察組不同肝纖維化程度患者血漿Hcy、血清肝纖維化指標(biāo)水平比較(±s)

    注:與無纖維化組比較,a P<0.05;與輕度纖維化組比較,b P<0.05,與中度纖維化組比較,c P<0.05

    組別 n 血漿Hcy(μmol/L) HA(ng/mL) LN(ng/mL) PCⅢ(ng/mL) Ⅳ-C(ng/mL)無纖維化組 12 12.14±2.06 256.38±26.34 152.34±26.31 121.36±32.49 176.39±46.25輕度纖維化組 22 15.26±3.01 a 305.24±36.59 186.34±31.06 a a 150.26±35.29 ab 221.02±43.01 ab中度纖維化組 18 21.04±3.42 ab 342.15±40.16 ab 210.04±40.16 ab 186.24±42.16 ab 260.14±48.51 ab重度纖維化組 8 24.01±2.19 abc 384.16±53.29 245.26±53.28abc 220.15±53.68abc abc 306.24±52.23abc F值 40.553 21.266 11.860 12.721 14.982 P值 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001

    2.2 觀察組及健康對(duì)照組血漿Hcy、血清肝纖維

    化指標(biāo)水平比較 觀察組患者血漿Hcy、HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平均明顯高于健康對(duì)照組(P<0.05),見表1。

    2.3 觀察組不同肝纖維化程度患者血漿Hcy、血

    清肝纖維化指標(biāo)水平比較 經(jīng)檢測(cè),觀察組不同肝纖維化程度患者血漿Hcy、HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表2。

    2.4 相關(guān)性分析 經(jīng)Spearman等級(jí)相關(guān)分析,慢性乙肝患者血漿Hcy水平及HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平與肝纖維化程度具有正相關(guān)性(P<0.05),見表3。

    表3 慢性乙肝患者肝纖維化程度與血漿Hcy、血清肝纖維化指標(biāo)水平的相關(guān)性分析

    3 討 論

    現(xiàn)階段主要采用病理學(xué)穿刺活檢的方式進(jìn)行肝纖維化程度判斷,但考慮到該項(xiàng)技術(shù)是一項(xiàng)有創(chuàng)檢查,不易被患者接受,因此,利用生化指標(biāo)進(jìn)行評(píng)估成為現(xiàn)臨床研究熱點(diǎn)[6]。

    動(dòng)物學(xué)研究表明,血漿Hcy的代謝與肝臟密不可分,且該指標(biāo)水平顯著上升同樣會(huì)促進(jìn)超氧化合物含量的增加,導(dǎo)致酶基因突變等,加重肝臟細(xì)胞損 傷[7]。本研究結(jié)果顯示,慢性乙肝患者體內(nèi)血漿Hcy水平確顯著高于健康對(duì)照組,與以往報(bào)道結(jié)果一 致[8],且隨著肝纖維化程度的加重,其血漿Hcy水平明顯升高。分析原因,可能是因?yàn)檠獫{Hcy是一類含硫氨基酸,不屬于組成人體蛋白質(zhì)的20中氨基酸,人體內(nèi)無法直接合成,是蛋氨酸或半胱氨酸代謝過程中的產(chǎn)物之一,主要通過葉酸循環(huán)途徑,在蛋氨酸合成酶的催化下,由甲基四氫葉酸及維生素B12作為輔助因子的條件下生成,或通過β2胱硫醚合成酶催化,在肝臟內(nèi)代謝產(chǎn)生,又或者將甜菜堿作用甲基供體,在轉(zhuǎn)移酶的作用下轉(zhuǎn)化為蛋氨酸,且轉(zhuǎn)化過程僅限于肝細(xì)胞內(nèi),其含量受肝細(xì)胞損傷影響[9]。

    結(jié)果顯示隨著肝纖維化程度的加重,其HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平同樣顯著上升,分析原因,可能是因?yàn)檎I砬闆r下,肝臟中細(xì)胞外基質(zhì)主要位于肝包膜、肝臟細(xì)胞表面等部位,其主要成分包括HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C等,總量屬于平衡狀態(tài),而一旦肝臟細(xì)胞收到損害時(shí),內(nèi)皮細(xì)胞及星狀細(xì)胞被激活,在細(xì)胞因子的作用下分泌膠原纖維,自身轉(zhuǎn)化為成纖維細(xì)胞,且伴隨著基質(zhì)合成沉積,進(jìn)而導(dǎo)致肝纖維化,若不及時(shí)治療,則隨著病情的惡化,即可發(fā)展為肝硬化[10]。且慢性乙肝患者血漿Hcy水平與HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平具有顯著正相關(guān)性,均隨著肝纖維化程度的加重而升高,提示,慢性乙肝患者病情由輕度到重度發(fā)展,其肝損害程度越發(fā)加重,導(dǎo)致蛋氨酸代謝改變,肝細(xì)胞外基質(zhì)合成降解失衡,引起血漿Hcy水平與肝纖維化指標(biāo)變化,但有關(guān)兩者相互作用機(jī)制,臨床尚未給出明確解釋。

    綜上所述,慢性乙肝患者體內(nèi)血漿Hcy水平明顯高于健康對(duì)照組,且隨著肝纖維化程度的加重,其血漿Hcy水平與肝纖維化指標(biāo)均顯著上升,呈現(xiàn)顯著正相關(guān),聯(lián)合檢查可反映慢性乙肝患者肝細(xì)胞受損程度。

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