平板傾注法與3M紙片法對(duì)水質(zhì)檢驗(yàn)的結(jié)果分析

沈燕 張繼燕

【摘 ?要】目的：探討平板傾注法與3M紙片法對(duì)水質(zhì)檢驗(yàn)的結(jié)果。方法：樣品取自轄區(qū)市政的末梢水100份，自備井水20份，二次加壓120份，首先制備混合試劑菌液，之后分別用平板傾注法與3M紙片法對(duì)水質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)比平板傾注法與3M紙片法的檢測(cè)結(jié)果及兩種方法在末梢水、二次加壓水及自備井水中的菌落數(shù)對(duì)比結(jié)果。結(jié)果：兩種檢測(cè)方法的檢測(cè)結(jié)果對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05。兩種方法在末梢水、二次加壓水及自備井水中的菌落數(shù)對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05。結(jié)論：3M紙片法也可用于水質(zhì)檢驗(yàn)，其檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、便捷、快速，具有實(shí)用價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】平板傾注法;3M紙片法;水質(zhì)檢驗(yàn);菌落數(shù)

【中圖分類(lèi)號(hào)】R15??????【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A??????【文章編號(hào)】1672-3783（2020）03-0070-01

生活飲用水菌落總數(shù)是指水體在營(yíng)養(yǎng)瓊脂上的有氧條件下，在37°C下對(duì)水體進(jìn)行培養(yǎng)，48h后可得到水體中所含有的菌落總數(shù)，其可對(duì)水體污染的嚴(yán)重程度進(jìn)行評(píng)價(jià)，以往國(guó)際上多采用平板傾注法進(jìn)行監(jiān)測(cè)，但其存在配置營(yíng)養(yǎng)基、操作復(fù)雜及消毒清洗工作量大、細(xì)菌容易出現(xiàn)假陰性結(jié)果等缺點(diǎn)，使得其不利于衛(wèi)生監(jiān)督工作的開(kāi)展^[1]，因此尋找一種更為靈敏、準(zhǔn)確的水質(zhì)檢測(cè)方法非常重要。3M紙片法是一種新型的檢測(cè)方法，其由美國(guó)3M公司研制，可將細(xì)菌生長(zhǎng)中所需的營(yíng)養(yǎng)成分在紙上進(jìn)行固定，使用較為方便，且會(huì)在營(yíng)養(yǎng)成分中加入著色劑，將菌落染成紅色，便于判別，較為實(shí)用^[2]。本文分析了平板傾注法與3M紙片法對(duì)水質(zhì)檢驗(yàn)的結(jié)果，以為水質(zhì)檢驗(yàn)選擇合適的方法。

1 材料與方法

1.1材料

菌株為大腸桿菌，3M紙片為3M公司生產(chǎn)，一次性無(wú)菌培養(yǎng)皿購(gòu)自青島金典生化器材有限公司，營(yíng)養(yǎng)瓊脂購(gòu)自青島高科園博生物有限公司。樣品取自轄區(qū)市政的末梢水100份，自備井水20份，二次加壓120份。

1.2檢測(cè)方法

首先制備混合試劑菌液，首先將大腸桿菌半固體保存菌苔接種在5ml葡萄營(yíng)養(yǎng)肉湯或營(yíng)養(yǎng)肉湯中，在37°C下培養(yǎng)18～24h，之后取1ml培養(yǎng)液，將其置于無(wú)菌試管中，并在微型的振蕩器中進(jìn)行振蕩，時(shí)長(zhǎng)為1～3min，之后進(jìn)行充分混勻，再將菌液濃度調(diào)整為3×10⁵cfu/ml，再用倍比稀釋法將其稀釋至5～10cfu/ml，之后在平皿及3M紙片中進(jìn)行接種，并繼續(xù)培養(yǎng)24h，培養(yǎng)溫度為36±1°C。其中3M紙片法為用無(wú)菌操作法吸取充分混勻后的液體1ml于紙片中央，再將上層膜直接落下，落下時(shí)需避免氣泡，之后將壓板凹面向下，將其置于上層膜中央，再輕按下，從而可使樣液覆蓋在圓形的培養(yǎng)基上，再將壓板靜置，時(shí)間超過(guò)1min，之后置入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，48h后對(duì)結(jié)果進(jìn)行觀察;平皿計(jì)數(shù)法，采用無(wú)菌操作法取充分混勻后的液體1ml，將其注入至無(wú)菌平皿中，之后傾注已融化且冷卻溫度為45°的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基15ml，使其水樣進(jìn)行充分混勻，另一個(gè)平皿中僅加入同樣體積的營(yíng)養(yǎng)瓊脂，將其作為空白對(duì)照，兩組均進(jìn)行培養(yǎng)，48h后對(duì)結(jié)果進(jìn)行觀察。

1.3觀察指標(biāo)

（1）對(duì)比平板傾注法與3M紙片法的檢測(cè)結(jié)果;（2）對(duì)比兩種方法在末梢水、二次加壓水及自備井水中的菌落數(shù)對(duì)比結(jié)果。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS23.0軟件，計(jì)數(shù)資料（n/%）行卡方檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2?結(jié)果

2.1對(duì)比平板傾注法與3M紙片法的檢測(cè)結(jié)果

兩種檢測(cè)方法的檢測(cè)結(jié)果對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05，見(jiàn)表1。

2.2對(duì)比兩種方法在末梢水、二次加壓水及自備井水中的菌落數(shù)對(duì)比結(jié)果

兩種方法在末梢水、二次加壓水及自備井水中的菌落數(shù)對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05，見(jiàn)表2。

3?討論

菌落總體數(shù)量是對(duì)水質(zhì)是否有污染及人體飲用后是否會(huì)對(duì)生命健康造成危害的一種衛(wèi)生評(píng)價(jià)指標(biāo)，是生活用水的標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)項(xiàng)目之一。近年來(lái)，平板傾注法較為規(guī)范、正確，但檢測(cè)中檢測(cè)人員工作量較大，且操作及要求較為繁瑣，使得衛(wèi)生監(jiān)督工作往往不能按照標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行。3M紙片法可用于水質(zhì)檢驗(yàn)，但其操作簡(jiǎn)便，可節(jié)省檢驗(yàn)前期復(fù)雜準(zhǔn)備工作，可提高檢驗(yàn)檢驗(yàn)人員的工作效率^[3]。

本文結(jié)果表明，兩種檢測(cè)方法的檢測(cè)結(jié)果對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，兩種方法在末梢水、二次加壓水及自備井水中的菌落數(shù)對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明兩種方法的檢測(cè)結(jié)果一致，但與平板傾注法相比，3M紙片法具有應(yīng)用方便、迅速的優(yōu)點(diǎn)，平板傾注法接種水樣后需將營(yíng)養(yǎng)瓊脂傾倒進(jìn)去，同時(shí)需對(duì)冷凝溫度進(jìn)行控制，使得其操作不夠簡(jiǎn)便，而3M紙片法則已將培養(yǎng)基在紙片上進(jìn)行固定，只需要水樣、壓片操作，可節(jié)省配制培養(yǎng)基、滅菌等操作，通常其只需要1min即刻完成，因此其尤其適用于各種應(yīng)急檢測(cè)。其次其便于結(jié)果統(tǒng)計(jì)，因?yàn)樗|(zhì)中的菌落在3M紙片上會(huì)呈現(xiàn)出紅色小點(diǎn)狀斑，其可與水中的各種雜志及不溶解顆粒進(jìn)行區(qū)別，從而便于分辨、鑒別，而平板傾注法的菌落顏色與營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基顏色接近，導(dǎo)致其辨識(shí)度不高，不利于觀察、計(jì)數(shù);再次，其可減少被污染的可能性，因平板傾注法在檢測(cè)時(shí)隨著熔融次數(shù)的增多，其營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中的性能、成分會(huì)逐漸衰退，且該過(guò)程中容易出現(xiàn)污染，而3M紙片法檢測(cè)時(shí)，其在冷藏良好情況下有效期可達(dá)3年，檢測(cè)時(shí)間短，可大大降低污染率^[4]。

綜上所述，3M紙片法也可用于水質(zhì)檢驗(yàn)，其檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確，操作方法快捷、方便、簡(jiǎn)單，可在任何環(huán)境下進(jìn)行，適宜的水質(zhì)檢驗(yàn)工作中進(jìn)行推廣。

參考文獻(xiàn)

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