胃癌組織中程序性死亡受體-1和程序性死亡-配體1表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后的相關(guān)性

林華隆 虞希祥

(1.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第三人民醫(yī)院腫瘤內(nèi)科 瑞安 325200；2.溫州醫(yī)科大學(xué)溫州市第三臨床學(xué)院介入血管外科 溫州 325000 )

胃癌為臨床中常見(jiàn)消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一，隨著飲食和生活習(xí)慣改變、人口老齡化，發(fā)病率成顯著升高趨勢(shì)。胃癌發(fā)生機(jī)制較復(fù)雜，其中基因變異、免疫功能逃逸為重要發(fā)生機(jī)制，臨床中通過(guò)分析免疫因子在胃癌組織中表達(dá)情況，對(duì)判定胃癌疾病嚴(yán)重程度、預(yù)后有重要價(jià)值[1]。PD-1在惡性腫瘤免疫逃逸中發(fā)生有重要參與作用，PD-1是T細(xì)胞介導(dǎo)免疫反應(yīng)中的重要抑制性免疫檢查點(diǎn),腫瘤細(xì)胞通過(guò)表達(dá)PD-L1,與腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞的PD-1結(jié)合,誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞的凋亡,從而抵抗淋巴細(xì)胞的殺傷作用,最終造成腫瘤發(fā)生免疫逃逸。為探究PD-1和PD-L1與胃癌患者病理特征和預(yù)后相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2016年2月～2018年2月我院診治實(shí)施手術(shù)治療胃癌患者103例臨床資料行回顧性分析。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)患者均行手術(shù)治療，術(shù)后取胃癌組織、胃癌旁組織行病理檢查；(2)患者臨床資料均收集完成；(3)患者預(yù)后均得到隨訪。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)精神疾病、認(rèn)知功能障礙患者；(2)合并其他系統(tǒng)惡性腫瘤患者，如肺癌、腸癌；(3)合并免疫功能障礙、血液系統(tǒng)疾病、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病患者；(4)臨床資料收集不完整患者。其中男58例，女45例；年齡45～79歲，平均(61.2±6.5)歲。

1.2 方法

所有患者均實(shí)施胃癌根治術(shù)，術(shù)中取癌病灶組織和癌旁組織行病理檢查，由病理科醫(yī)師對(duì)組織切片，脫臘、水處理，用過(guò)氧化氫對(duì)標(biāo)本進(jìn)行孵育10min，用PBS緩沖液對(duì)標(biāo)本沖洗3次，將標(biāo)本放入檸檬酸鹽緩沖溶液，采用微波加熱20min，后放置自然冷卻，再次用PBS緩沖液對(duì)標(biāo)本沖洗3次。在標(biāo)本上滴加1:200濃度鼠抗人PD-1多克隆抗體和1∶200濃度兔抗人PD-L1多克隆抗體，在4℃恒溫環(huán)境中進(jìn)行孵育，用PBS緩沖液對(duì)標(biāo)本進(jìn)行沖洗，在標(biāo)本上滴加PV-6000二抗50ul，在外溫室中孵育20min，用PBS緩沖液對(duì)標(biāo)本進(jìn)行沖洗3次，在標(biāo)本上滴加DAB顯示試劑，控制顯示時(shí)間為4min，室溫、避光條件下，由醫(yī)師在顯微鏡下觀察標(biāo)本顯示情況，觀察完成后用蒸餾水沖洗，用蘇木精染色1min，水沖洗、返藍(lán)，用酒精對(duì)標(biāo)本進(jìn)行脫水，在中性樹(shù)膠封片鏡下進(jìn)行觀察。如細(xì)胞漿或細(xì)胞膜中存在棕褐色或黃色顆粒物質(zhì)為PD-1和PD-L1表達(dá)陽(yáng)性[2]。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)比較癌組織和癌旁組織中PD-1、PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率；(2)對(duì)患者進(jìn)行1～3年隨訪，比較死亡和存活患者癌組織中PD-1、PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率；(3)比較不同病理分期中PD-1、PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率差異。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

此次研究獲得數(shù)據(jù)用SPSS24.0統(tǒng)計(jì)軟件包(由美國(guó)SPSS公司提供)分析；PD-1、PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率用χ2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 胃癌組織和胃癌旁組織PD-1、PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率

癌組織PD-1和PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率顯著高于癌旁組織[40.78% vs.0.00%，63.11% vs.0.97%，P<0.05]，見(jiàn)表1。

表1 胃癌組織和胃癌旁組織PD-1、PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率[n(%)]

組別nPD-1PD-L1癌組織10342(40.78)65(63.11)癌旁組織1030(0.00)1(0.97)χ2值-52.756191.3177P值-0.00000.0000

2.2 死亡和存活患者癌組織中PD-1、PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率

103例患者術(shù)后隨訪1～3年，平均隨訪(2.1±0.3)年，死亡48例，死亡率為46.60%。死亡患者癌組織中PD-1、PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率顯著高于存活患者[62.50% vs.21.82%，87.50% vs.43.64%，P<0.05]，見(jiàn)表2。

表2 死亡和存活患者癌組織中PD-1、PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率[n(%)]

組別nPD-1PD-L1死亡患者4830(62.50)42(87.50)存活患者5512(21.82)24(43.64)χ2值-17.565613.1593P值-0.00000.0003

2.3 不同病理分期中PD-1表達(dá)陽(yáng)性率

不同分化程度、不同TNM分期PD-1表達(dá)陽(yáng)性率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表3。

表3 不同病理分期中PD-1表達(dá)陽(yáng)性率[n(%)]

項(xiàng)目n陽(yáng)性χ2值P值分化程度低分化2812(42.86)中分化5520(36.36)高分化2010(50.00)0.80120.6699TNM分期I～I(xiàn)I5119(37.25)III～I(xiàn)V5223(44.23)0.51880.4713

2.4 不同病理分期中PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率

不同分化程度PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；TNM分期中III～I(xiàn)V期患者PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率顯著高于I～I(xiàn)I期患者[78.85% vs.29.41%，P<0.05]，見(jiàn)表4。

表4 不同病理分期中PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率[n(%)]

項(xiàng)目n陽(yáng)性χ2值P值分化程度低分化2817(60.71)中分化5527(49.09)高分化2012(60.00)1.32760.5149TNM分期I～I(xiàn)I5115(29.41)III～I(xiàn)V5241(78.85)25.36200.0000

3 討論

本研究結(jié)果得出，在胃癌組織中PD-1和PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率顯著高于癌旁組織(P<0.05)，且在死亡患者中PD-1和PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率顯著高于癌旁組織(P<0.05)。證實(shí)胃癌中PD-1和PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率較高，且PD-1和PD-L1表達(dá)情況和患者預(yù)后有一定相關(guān)性。本研究結(jié)果另得出，胃癌TNM分期越高患者，PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率越高(P<0.05)，進(jìn)一步證實(shí)PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率和腫瘤分期、分級(jí)有重要相關(guān)性，今后臨床中可通過(guò)檢測(cè)PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率，對(duì)胃癌患者疾病嚴(yán)重程度、預(yù)后輔助進(jìn)行判定。有學(xué)者在胃癌患者病理組織中同樣分析PD-1和PD-L1表達(dá)情況和患者預(yù)后相關(guān)性，同樣證實(shí)PD-1和PD-L1表達(dá)陽(yáng)性率越高，患者腫瘤惡性程度越高，預(yù)后越差[6]。

綜上所述，胃癌組織中PD-1和PD-L1表達(dá)水平較高，PD-L1表達(dá)水平和病理特征有一定相關(guān)性，PD-1和PD-L1與患者預(yù)后有一定相關(guān)性。