卓千蒞
上海海洋大學(xué),上海 200000
雙RNA 病毒之所以會(huì)對(duì)水生動(dòng)物構(gòu)成極大的威脅,是因?yàn)殡pRNA 病毒的傳播途徑較廣,而且可以侵染的宿主較多。不僅如此,如果水生動(dòng)物在感染雙RNA 病毒之后可以存活,則不會(huì)表現(xiàn)出任何不良反應(yīng),但該水生動(dòng)物體內(nèi)卻含有雙RNA 病毒,會(huì)對(duì)整個(gè)水域的水生動(dòng)物形成威脅。要想檢測(cè)雙RNA 病毒,實(shí)施相應(yīng)的防治措施,還是需要從雙RNA 病毒的侵染機(jī)制入手。
雙RNA 病毒以負(fù)鏈RNA 為模板進(jìn)行基因組復(fù)制,共包含VP1-5 五種蛋白。研究發(fā)現(xiàn),VP2 蛋白作為雙RNA 病毒的主結(jié)構(gòu)蛋白,是雙RNA 病毒能夠侵染宿主的根本原因。
雙RNA 病毒本身具有較高的侵染性,大多數(shù)水生動(dòng)物都可以作為雙RNA 病毒的宿主。雙RNA 病毒侵染宿主,主要是通過和含有特定基因組的細(xì)胞的細(xì)胞膜蛋白進(jìn)行結(jié)合實(shí)現(xiàn)的。水生動(dòng)物自身的免疫體系決定了雙RNA 病毒侵染的成功率較高。而觀察發(fā)現(xiàn),雙RNA 病毒同樣可以侵染哺乳動(dòng)物,但是雙RNA 病毒在哺乳動(dòng)物體內(nèi)無法正常完成復(fù)制,所以無法對(duì)哺乳動(dòng)物造成傷害[1]。
雙RNA 病毒的危害主要存在于兩個(gè)方面:一方面,被感染的水生動(dòng)物會(huì)在短時(shí)間內(nèi)發(fā)病并死亡,致死率較高,而病毒可以在水生動(dòng)物所在水域迅速進(jìn)行傳播,引起水生動(dòng)物大面積死亡。相關(guān)生物研究報(bào)告顯示最高的致死率高達(dá)90.0%。不僅如此,國外生物研究機(jī)構(gòu)在感染病毒動(dòng)物的子代中同樣發(fā)現(xiàn)了該病毒,該發(fā)現(xiàn)表明雙RNA 病毒會(huì)對(duì)魚群產(chǎn)生嚴(yán)重的威脅。另一個(gè)方面,雙RNA 病毒會(huì)破壞被感染水生動(dòng)物的免疫系統(tǒng),當(dāng)被感染動(dòng)物的免疫能力受到破壞之后,水環(huán)境中的其他病原就可以輕松入侵水生動(dòng)物機(jī)體,進(jìn)一步提高水生動(dòng)物的死亡率。雙RNA 病毒對(duì)水生動(dòng)物極具威脅,會(huì)嚴(yán)重威脅到水域中同一水生動(dòng)物種群的數(shù)量。
診斷雙RNA 病毒的方法有免疫學(xué)檢測(cè)和RTPCR 兩類。其中免疫學(xué)檢測(cè)主要通過檢測(cè)水生動(dòng)物體內(nèi)是否存在雙RNA 病毒抗體,確定水域中的水生動(dòng)物是否被侵染。該檢測(cè)方法雖然實(shí)施流程較為簡便,但是檢測(cè)結(jié)果的可靠性較低,多個(gè)方面的因素都會(huì)影響到檢測(cè)結(jié)果,而RT-PCR 方法檢測(cè)精度高,能夠精準(zhǔn)評(píng)估水域內(nèi)水生動(dòng)物群落是否被雙RNA 病毒侵染,該檢測(cè)方法也是目前國內(nèi)外主要使用的檢測(cè)方法之一。RT-PCR 方法檢測(cè)的準(zhǔn)確度為95.4%,可以有效檢測(cè)水域中攜帶病毒的魚類[2]。
檢測(cè)工作進(jìn)行期間,先要根據(jù)養(yǎng)殖水域的面積,以及待檢測(cè)魚類的尾數(shù)確定采樣標(biāo)準(zhǔn),采樣數(shù)量原則上不低于該魚類尾數(shù)的0.5%。采樣期間要?jiǎng)潊^(qū)域采集樣本,需覆蓋整個(gè)養(yǎng)殖水域。采樣結(jié)束后,對(duì)所采集的樣本進(jìn)行檢測(cè),確定所有檢測(cè)樣本中是否存在雙RNA 病毒,統(tǒng)計(jì)檢測(cè)結(jié)果呈陽性的樣本數(shù),并根據(jù)樣本中感染雙RNA 病毒的魚類的尾數(shù),推算出養(yǎng)殖水域中感染雙RNA 病毒的總尾數(shù)。檢測(cè)人員應(yīng)該根據(jù)檢測(cè)結(jié)果,采取相應(yīng)的防治措施,及時(shí)給水域中魚群注射疫苗,并記錄檢測(cè)結(jié)果,用作和下一次檢測(cè)的對(duì)比數(shù)據(jù)[3]。
免疫防治是目前已知控制雙RNA 病毒最好的措施,現(xiàn)階段使用的疫苗為基于IPNV 結(jié)構(gòu)蛋白的多聯(lián)亞單位疫苗,在為水生動(dòng)物注射該疫苗之后,動(dòng)物體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,提高免疫能力,當(dāng)雙RNA 病毒侵染宿主動(dòng)物的時(shí)候,動(dòng)物的免疫系統(tǒng)會(huì)做出反應(yīng),導(dǎo)致雙RNA 病毒無法和特定細(xì)胞完成結(jié)合。就疫苗而言,經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn),雙RNA 病毒能夠成功侵染宿主主要依賴于VP2 蛋白,所以疫苗主要使用到的是雙RNA 病毒VP2 基因。免疫防治可以有效提高水域魚群的成活率,經(jīng)過免疫防治,魚群的成活率大幅提升[4]。
免疫防治是防控雙RNA 病毒侵染水生動(dòng)物的最佳選擇。為進(jìn)一步提高防治效果,還需要對(duì)免疫防治的結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)分析,統(tǒng)計(jì)水域中單種水生動(dòng)物在注射疫苗后的成活率,確定疫苗的效果。對(duì)魚類養(yǎng)殖戶而言,只有最大限度提高水域中水生動(dòng)物的成活率,才能使養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)收益得到保障[5]。所以,要開展全面的免疫防治評(píng)估工作,綜合考評(píng)疫苗的預(yù)防效果,以及在疫苗注射后,水域中水生動(dòng)物的成活率是否達(dá)到預(yù)期目標(biāo)。
雙RNA 病毒威脅較大,不利于水生動(dòng)物種群的生存,也會(huì)給水產(chǎn)養(yǎng)殖戶造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。為了有效防控雙RNA 病毒,確保水生動(dòng)物的成活率,需要采取完善的預(yù)防措施,定期檢測(cè),借助現(xiàn)代化檢測(cè)手段來提高檢測(cè)準(zhǔn)確率,并及時(shí)為水域中的水生動(dòng)物注射疫苗。