中草藥飼料添加劑對斷奶仔豬養(yǎng)分消化率、血液免疫性能的影響

■簡仕燕 吳文旋，2，3* 趙 鵬，4 王 菲 馬政發(fā) 郭子義

（1.貴州大學動物科學學院動物營養(yǎng)與飼料科學研究所，貴州貴陽550025；2.貴州大學新農村發(fā)展研究院，貴州貴陽550025；3.貴州省山地畜禽養(yǎng)殖污染控制與資源化技術工程實驗室，貴州貴陽550025；4.遵義市動物疫病預防控制監(jiān)測站，貴州遵義563000）

仔豬早期斷奶技術在我國高度集約化飼養(yǎng)條件下已成為一種關鍵技術[1]，但影響仔豬早期斷奶成功的因素比較復雜，如營養(yǎng)、環(huán)境和斷奶應激等都會造成“斷奶仔豬應激綜合征”，導致仔豬腹瀉、營養(yǎng)不良以及生長受阻，降低了養(yǎng)豬行業(yè)的效益[2]。為此，養(yǎng)豬場使用抗生素來提高仔豬生長性能，降低發(fā)病率；然而，由于抗生素的濫用，不僅使得仔豬的機體受損、腸道菌群產生耐藥性以及造成嚴重的環(huán)境污染，而且還威脅到人類的健康，且國家已在2020年1月1日起禁止在動物飼料中使用抗生素。因此尋求抗生素替代品成為當前動物營養(yǎng)研究的熱點。

中草藥所含的有效活性成分健康且豐富，既能在利于仔豬腸道吸收、改善仔豬健康狀況和增加仔豬抗病能力的條件下促進仔豬生長發(fā)育，且不易產生耐藥性，對保護環(huán)境和維持生態(tài)平衡起著積極的作用[3-5]。前人研究表明，黃柏、黃連、白頭翁、金蕎麥、朱砂蓮均有防治仔豬下痢的功效[6-8]，且黃柏搭配黃連有協(xié)同抗菌作用，黃芪有增強機體免疫功能的作用[9-12]。因此，本試驗借鑒前人搭配中草藥的原則，將白頭翁、黃連、黃柏、金蕎麥、黃芪、朱砂蓮制成新型中草藥添加劑飼喂斷奶仔豬，在已完成其對斷奶仔豬生長性能、腹瀉率、血漿生化指標影響的基礎上，進一步從養(yǎng)分消化率、血漿免疫性能等方面研究中草藥添加劑降低仔豬斷奶應激的影響，擴大抗生素替代品選擇面，為生產實踐提供技術積累。

1 材料方法

1.1 試驗設計

選用白頭翁、黃連、黃柏、金蕎麥、黃芪、朱砂蓮等6 味天然保健植物原料，粉碎過120 目篩后分別按照30∶10∶20∶20∶10∶10（組方1）和10∶30∶20∶20∶10∶10（組方2）兩個比例混合分裝制成中草藥飼料添加劑。選取150頭體況良好，體重（7.19±0.4）kg、斷奶日齡（24±2）d 接近的斷奶仔豬，公母各半，按照單因素隨機區(qū)組設計隨機分成5組：對照組、處理Ⅰ組、處理Ⅱ組、處理Ⅲ組、處理Ⅳ組，每個處理3 個重復，每個重復10頭仔豬。仔豬斷奶后先進入保育舍3 d，期間觀察仔豬健康狀況、合群性，逐漸飼喂處理日糧，然后進入試驗期。對照組飼喂常規(guī)日糧，處理Ⅰ組、處理Ⅱ組及處理Ⅲ、處理Ⅳ組在對照組的基礎上分別添加0.5%、1.0%中草藥飼料添加劑組方1 及0.5%、1.0%中草藥飼料添加劑組方2。試驗共持續(xù)30 d，其中第1～15 d為第一階段，第16～30 d為第二階段。試驗仔豬自由采食及飲水，喂量以有少量剩余為宜。每天8:00、12:00、18:00 準時飼喂。仔豬正常免疫，圈舍常規(guī)消毒、光照充足、干燥通風。準確記錄每組腹瀉仔豬頭數(shù)、每期試驗仔豬腹瀉數(shù)。每天觀察仔豬生長發(fā)育、采食及健康狀況。試驗仔豬日糧參照中國豬飼養(yǎng)標準（NY/T65—2004）配制，基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 仔豬基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平

1.2 測定指標

1.2.1 養(yǎng)分消化率

在正試期第12～15 d及27～30 d每天下午隨排隨收新鮮糞便，加入10%的HCl 固氮后立即置于-20 ℃冰箱保存；同時在采集糞便期間每天采集飼糧樣品，混勻后制備成分析試樣，參照《飼料分析及飼料質量檢測技術》[13]測定總能（GE）、干物質（DM）、粗蛋白（CP）、粗脂肪（EE）、粗纖維（CF）、粗灰分（Ash）、酸不溶灰分（AIA）。GE 采用氧彈式熱量計測定（6400 CALORIMETER，Parr），CP 采用全自動凱氏定氮儀（K1100F，濟南海能儀器）測定，CF 采用Van Soest 纖維素分析法（FIBRETHERM automatic system FT12，德國）測定，采用乙醚浸提法測定EE，AIA及Ash采用灼燒法檢測。采用內源指示劑法（AIA 法）測定日糧養(yǎng)分消化率，計算公式如下：

養(yǎng)分消化率（%）=100-100×[飼料中AIA 含量（%）/糞中AIA 含量（%）]×[糞中養(yǎng)分含量（%）/飼料中養(yǎng)分含量（%）]

1.2.2 血液免疫指標

血樣采集及血漿制備：在正試期第16、31 d 每組每個重復內隨機抽取3 頭仔豬（每組9 頭），空腹稱重后采用一次性肝素抗凝真空采血管采集前腔靜脈血5 ml，3 000 r/min 離心15 min，分離血漿，-20 ℃冰箱保存待測。檢測指標包括：免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）、干擾素γ（IFNγ）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細胞介素4（IL-4）、白細胞介素2（IL-2）。試劑盒及檢測方法由武漢基因美生物有限公司提供，檢測儀器為全波段酶標儀（MUL?TISKAN Sky, Thermo Scientific）。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)先采用Microsoft Excel 2010 軟件進行初步處理，再用SAS 9.2 進行單因素方差分析。采用Duncan's法進行平均值多重比較，各組間差異顯著性水平定為P＜0.05。試驗數(shù)據(jù)以“平均值±標準差”（Mean±SD）表示。

2 結果與分析

2.1 對養(yǎng)分消化率的影響

表2 中草藥飼料添加劑對斷奶仔豬養(yǎng)分消化率的影響(%)

由表2可見，試豬采食15 d后，處理Ⅱ組DM分別高于對照組、處理Ⅳ組6.02%、6.45%(P＜0.05)；處理Ⅱ組、處理Ⅲ組CP 分別高于對照組5.68%、6.55%（P＜0.05），分別高于處理Ⅳ組6.94%、7.85%(P＜0.05)；處理Ⅲ組EE高于對照組6.24%(P＜0.05)；各組CF和Ash差異不顯著(P＞0.05)。至30 d，處理Ⅲ組CP 分別高于對照組、處理Ⅱ組、處理Ⅳ組8.32%、10.00%、8.87%(P＜0.05)；處理Ⅲ組EE 高于對照組、處理Ⅳ組6.43%、6.23%(P＜0.05)；各組DM、CF、Ash差異不顯著(P＞0.05)。

2.2 對血液免疫性能的影響

表3 可見，15 d 時，處理Ⅳ組IgM 分別高于對照組、處理Ⅰ組、處理Ⅱ組24.84%、19.12%、15.47%（P＜0.05）；處理Ⅲ組、處理Ⅳ組IgG分別高于對照組、處理Ⅰ組、處理Ⅱ組31.99%、16.03%、34.70%及33.67%、17.50%、36.42%（P＜0.05）；處理Ⅲ組IFN-γ高于處理Ⅳ組24.49%（P＜0.05）；處理Ⅱ組、處理Ⅲ組、處理Ⅳ組TNF-α分別高于對照組21.61%、19.46%、38.42%（P＜0.05），高于處理Ⅰ組20.68%、18.54%、37.35%（P＜0.05）；各組IL-4與IL-2無顯著差異（P＞0.05）。至30 d，處理Ⅲ組、對照組IgG 分別高于處理Ⅰ組、處理Ⅱ組18.19%、15.00%及16.90%、13.73%（P＜0.05）；其余指標差異不顯著（P＞0.05）。

表3 中草藥飼料添加劑對斷奶仔豬血漿免疫相關指標的影響

3 討論

3.1 中草藥飼料添加劑對斷奶仔豬養(yǎng)分消化率的影響

張世昌等[14]用三顆針、黃芪、山楂3種中藥為添加劑飼喂斷奶仔豬后，顯著改善了仔豬的耗料增重比和腹瀉率，并顯著提高了粗蛋白、粗脂肪、粗灰分和磷的消化率。游永波等[15]用以蒼術、山楂、神曲和甘草為主的10味中草藥配伍添加劑飼喂生長豬，其粗蛋白、粗脂肪和粗灰分的消化率均顯著提高。方熱軍等[16]研究表明，與抗生素相比，1%的中草藥添加劑提高干物質消化率2.28%，提高表觀氮存留率6.32%。總體來看，本試驗研究結果表明中草藥飼料添加劑可提高早期斷奶仔豬養(yǎng)分消化率，這得到以上學者研究報道的支持。這可能是因為黃柏、黃連含有的小檗堿抑制了仔豬病原微生物的生長，提高蛋白酶和脂肪酶活性，利于營養(yǎng)物質的消化吸收[17-20]。這也印證了本課題組前期研究結果，處理組生長速度高于對照組（簡仕燕等，2019）[21]。

3.2 中草藥飼料添加劑對斷奶仔豬血漿免疫指標的影響

增強機體抗病力是提高生長性能的重要前提，眾多研究均表明，中草藥飼料添加劑有利于提高斷奶仔豬免疫性能。Yue等[22]發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過30 d的飼養(yǎng)試驗后，0.9%千里光超微粉組可以顯著提高血清中IgA、IgG、IgM含量。馬玉芳等[23]報道，斷奶仔豬采食含黃芪、魚腥草等制成中草藥飼料添加劑后，在第14、28 d 時血清IgG 水平均顯著提高。張世昌等[24]指出，飼喂斷奶仔豬0.25%的黃芪、三顆針、山楂制成的中草藥飼料添加劑可提高IgG、IgA、IgM 含量。謝紅兵[25]發(fā)現(xiàn)，斷奶仔豬采食0.4%方劑D（由絞股藍、茵陳、板藍根、甘草組成）后，其IL-2、IFN-γ顯著高于抗生素組。王鵬[26]在斷奶仔豬日糧添加1.0%、2.0%中草藥飼料添加劑（陳皮、神曲、山楂、黃芩提取物），研究發(fā)現(xiàn)其TNF-α高于基礎日糧組、顯著高于抗生素添加組。以上結果與本試驗結果總體趨勢一致，這與中草藥原料的理化特性有關。其中，黃芪可益氣、健脾升陽，提高動物機體免疫力，能消除氟苯尼考誘導的免疫抑制作用，增強機體免疫功能；黃芪多糖等免疫增強劑能顯著提高環(huán)磷酰胺所致免疫抑制模型小鼠的免疫功能[27]，提高IgG等的濃度[28]。肖華麗等[29]報道，白頭翁可以增強巨噬細胞的吞噬率，提高免疫功能。路西明等[30]研究顯示，金蕎麥能促進機體生長發(fā)育，增強動物機體特異性免疫和非特異性免疫機能。王航等[31]認為，黃連所含的生物堿可改變巨噬細胞膜蛋白構象從而激活巨噬細胞，增強其吞噬和呼吸爆發(fā)功能。范文彤[32]、張芮琪等[33]報道，黃芪多糖可增加IL-2 的產生和提高其活性、提高腹腔巨噬細胞百分率及吞噬指數(shù)，增強體液免疫，促進T 淋巴免疫細胞功能，顯著提高小鼠的非特異性免疫功能。戴玲等[34]研究顯示，白頭翁蛋白在體內顯著增強小鼠腹腔巨噬細胞吞噬中性紅的作用，并可誘導巨噬細胞產生一氧化氮，對巨噬細胞分泌IL-1亦有一定的提高作用，對小鼠腹腔巨噬細胞有免疫增強作用。Zhu等[35]、周霞等[36]指出，黃連素是從黃連中提取或人工合成的一種異喹啉類生物堿，具有抗炎和抑制免疫反應等作用?？傊?，中草藥飼料添加劑可提高斷奶仔豬血液免疫機能，增強抵抗力。

4 結論

綜上所述，飼喂中草藥飼料添加劑可提高斷奶仔豬養(yǎng)分利用率、增強免疫性能，是替代抗生素的重要選擇?？傮w上分析，處理Ⅲ組優(yōu)于其余處理組，可在生產實踐上應用替代抗生素。