聚乙二醇雙官能基異端修飾的研究進(jìn)展

張佳唯，廉明明，石立旺，張大鵬，唐淑坤，彭海生

·綜述·

聚乙二醇雙官能基異端修飾的研究進(jìn)展

張佳唯，廉明明，石立旺，張大鵬，唐淑坤，彭海生

150076 黑龍江，哈爾濱商業(yè)大學(xué)藥學(xué)院（張佳唯）；163319 黑龍江，哈爾濱醫(yī)科大學(xué)大慶校區(qū)藥學(xué)院（廉明明、石立旺、張大鵬、唐淑坤、彭海生）

聚乙二醇（PEG）是一種惰性、非致癌性聚合物，目前是修飾生物活性分子和納米粒子表面的首選聚合物之一[1-2]。聚乙二醇已被證明可以增強(qiáng)疏水性藥物、蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)體的溶解性、提高穩(wěn)定性和延長循環(huán)時(shí)間[3-4]。此外，PEG 還能通過增強(qiáng)滲透和保留（EPR）效應(yīng)實(shí)現(xiàn)特異性腫瘤靶向治療[5-6]。PEG 現(xiàn)已成為生物技術(shù)和生物醫(yī)學(xué)界關(guān)注的焦點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于大分子與表面的連接、藥物和脂質(zhì)體的靶向性、納米顆粒功能化等諸多領(lǐng)域[7-11]。

近年來，科研工作者們將重點(diǎn)放在將兩個(gè)不同生物活性部分連接到單個(gè) PEG 鏈上，從而使靶向基團(tuán)和治療劑同時(shí)與單個(gè) PEG 鏈連接[12-14]。我們把這種可以連接兩個(gè)不同生物活性部分的 PEG 稱為異雙官能 PEG，異雙官能 PEG 具有 X-PEG-Y 結(jié)構(gòu)，其中 X 和 Y 是不同的功能基團(tuán)，可以定向選擇性連接不同基團(tuán)，應(yīng)用于大分子與表面的連接，位點(diǎn)特異性藥物和脂質(zhì)體的靶向性，以及納米顆粒的功能化[15]。例如一端為甲氧基封端的 PEG（MeO-PEG）可以在其另一端修飾為巰基、羥基、氨基、羧基等活性基團(tuán)。巰基可以進(jìn)一步與金表面連接形成納米金；羧基、氨基、巰基等活性基團(tuán)可以與蛋白和多肽連接，提高其分子大小，增加水溶性，優(yōu)化其特征的同時(shí)還可以保留其主要生物活性；異雙官能 PEG 還可以與紫杉醇等疏水性抗癌藥物連接形成疏水膠束，達(dá)到緩釋作用；將異雙官能 PEG 一端與靶向基因相連，另外一端與治療劑相連，不僅可以延長藥物在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間減少給藥頻率，還可以實(shí)現(xiàn)藥物的靶向治療，具有提高藥效的潛力[16-18]。這種異雙官能的 PEG在有機(jī)合成、高分子合成、多肽合成[19]、藥物的緩釋控釋以及靶向釋藥等方面均有廣闊的應(yīng)用前景。

異雙官能 PEG 衍生物的合成方法可分為三類。第一類通過鏈?zhǔn)奖对龇ǐ@得；第二類無需色譜純化即可合成雙官能聚乙二醇；第三類通過去環(huán)化法。本綜述將根據(jù)以上三種分類方式介紹近年來異雙官能基聚乙二醇的合成方法及研究進(jìn)展。

1 通過鏈?zhǔn)奖对龇ǐ@得雙官能聚乙二醇

通過鏈?zhǔn)奖对龇ǐ@得雙官能聚乙二醇，是以被活化的四甘醇衍生物或設(shè)計(jì)一個(gè)連接起始物為起始合成原料，通過在四甘醇衍生物或連接起始物上逐步添加四甘醇、八甘醇或環(huán)氧乙烷等單體實(shí)現(xiàn)鏈長的延伸。2009 年英國研究人員將羥基保護(hù)基分為 Pd/H 條件下可以脫除的芐基保護(hù)基和酸性條件下可以脫除的叔丁基、三苯甲基保護(hù)基兩種類型。以廉價(jià)易得的四甘醇作為原料，合成一端為芐基保護(hù)，另一端為三苯甲基（BnO-EG8-OTr）或叔丁基（BnO-EG8-OBu）保護(hù)的八甘醇。將以上合成化合物在 Pd/H 條件下脫除芐基生成 HO-EG8-OTr 或 HO-EG8-OBu，酸性條件下脫除三苯甲基或叔丁基生成 BnO-EG8-OH。將后者的剩余羥基用 Ts 活化生成 BnO-EG8-OTs，與前者發(fā)生 Williamson 成醚反應(yīng)得 BnO-EG16-OTr 或 BnO-EG16-OBu，重復(fù)上述過程可得更高階單分布聚乙二醇（PEG32, PEG48）[20]（圖 1）。

六氫三嗪衍生物在堿性環(huán)境中狀態(tài)穩(wěn)定且滿足陰離子開環(huán)聚合（AROP）的要求。2016 年 Decker 及其同事對(duì)該結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)和理論研究，發(fā)現(xiàn)在酸性介質(zhì)中，六氫三嗪結(jié)構(gòu)單元可水解成醛和胺，這使得該類官能團(tuán)成為獲得伯胺而不影響AROP 的有效保護(hù)基[21-24]。2019 年，Blankenburg 和 Frey[25]首次使用市售的羥乙基六氫三嗪（TrAz）作為陰離子引發(fā)劑與環(huán)氧乙烷進(jìn)行開環(huán)聚合反應(yīng)，由于六氫三嗪由 3 個(gè)相連的氨基組成，且含有 3 個(gè)端羥基結(jié)構(gòu)，因此形成了具有六氫三嗪核的聚醚 3 臂星形聚合物。這些星形聚合物具有不耐酸的六氫三嗪核，酸性水解導(dǎo)致臂的開裂，便得到分子量范圍為 3 ~ 15 kg/mol 的窄分子量分布（Mw/Mn < 1.1）的 α-氨基-ω-羥基異雙官能聚乙二醇（NH2-PEG-OH）（圖 2）。此種異雙官能聚乙二醇在蛋白質(zhì)和藥物的表面修飾等方面是一種極具價(jià)值的生物結(jié)合結(jié)構(gòu)。

2014 年，Székely 等[26]報(bào)道了一種獲得異端、單分布的聚乙二醇新方法。以四甘醇為原料通過 3 ~ 4 步反應(yīng)，合成了一端羥基 4,4'-二甲氧基三苯基甲基（Dmtr）保護(hù)，另一端羥基保留（DmtrO-EG8-OH）或?qū)妆交酋；罨陌烁蚀佳苌铮―mtrO-EG8-OTs）。將 DmtrO-EG8-OH 與三溴甲基苯反應(yīng)，得到末端 Dmtr 保護(hù)的八甘醇三臂 PEG 結(jié)構(gòu)，將該結(jié)構(gòu)作為起始原料，通過二氯乙酸脫保護(hù)及 DmtrO-EG8-OH 參與的 Williamson 成醚反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)鏈的擴(kuò)增，重復(fù)上述反應(yīng)得到單分散三臂聚乙二醇結(jié)構(gòu)（單臂含56 個(gè)乙氧基重復(fù)單元）。鏈端衍生化后，通過溫和氫解方法斷裂核心三芐基結(jié)構(gòu)，得到一端有羥基，另一端甲苯磺酰活化或叔丁基酯衍生的單分布 PEG 鏈（HO-EG56-OTs、HO-EG56-OCH2COOBu）。游離的單鏈 PEG 結(jié)構(gòu)可進(jìn)一步衍生成具有良好交聯(lián)功能（-OH、-COOH、-NH2、-N3）的異端雙官能單分散聚乙二醇（圖 3）。

圖 1 鏈?zhǔn)奖对龇?/p>

圖 2 α-氨基-ω-羥基雙官能 PEG 的合成策略

2013 年，意大利Zona 等[27]報(bào)道了以廉價(jià)的四甘醇為起始原料，在堿性條件兩端羥基與溴丙烯反應(yīng)，高產(chǎn)率得到雙溴丙烯修飾（收率93%）或單溴丙烯修飾產(chǎn)物（收率51%）。其中前者可通過 O3氧化再還原策略實(shí)現(xiàn)四甘醇的鏈增長，得到六甘醇，理論重復(fù)上述過程可得高階單分布聚乙二醇。作者還應(yīng)用單丙烯基修飾的四甘醇為原料，首先將游離羥基衍生成可參與點(diǎn)擊反應(yīng)的疊氮基，另一側(cè)丙烯基實(shí)現(xiàn)了多種官能團(tuán)轉(zhuǎn)化，例如炔基修飾、乙?；鶐€基、雙乙酰基巰基、羥基、醛基、羧基、氨基、生物素修飾等（圖 4）。

2 無需色譜純化合成雙官能聚乙二醇

近年來，已存在一些制備單分散聚乙二醇的方法。然而，由于聚乙二醇極性高，常規(guī)相色譜法難以純化所需產(chǎn)物。因此，通常需要反相色譜法或凝膠滲透色譜法。這種冗長的純化方法極大地限制了單分散 PEG 的可用性。為此，氟化物技術(shù)提供了許多方便的純化方法，如氟化物液相萃取、氟化物固相萃?。‵SPE）和氟化物高效液相色譜（FHPLC）。2014 年，武漢大學(xué)Li 等[28]設(shè)計(jì)了一個(gè)氟化物標(biāo)簽作為 PEG 中羥基的保護(hù)基團(tuán)及氟純化的分離標(biāo)記。在合成過程中，成功地采用了氟化物固相萃取來簡(jiǎn)化純化。首先以 4-(甲氧羰基)苯基硼酸和-(全氟辛基)-乙基碘化物為原料通過 3 步反應(yīng)合成了含溴的氟化合物標(biāo)簽（Rf-Br）。市場(chǎng)上具有確定的分子量且價(jià)格合理的四甘醇被選為合成組成部分。用三苯基選擇性地保護(hù)四甘醇中的一個(gè)羥基后，通過對(duì)甲苯磺?；罨Ｓ嗔u基，合成改性的四甘醇 TrO-EG4-OTs。將改性四甘醇重復(fù)地連接到氟標(biāo)記物上（圖 5），便合成了具有 4n（n = 2，3，4，5）四甘醇單元的單分散 PEG。這樣，所有的合成中間體都含有一個(gè)氟標(biāo)簽，在脫保護(hù)和偶聯(lián)鏈延伸循環(huán)過程中，氟固相萃?。‵SPE）和固相萃取（SPE）可以有效地純化中間體。

圖 3 基于 Homostar 合成單分散雙官能 PEG

圖 4 引入烯丙基來控制聚乙二醇單/雙向延伸

2016 年，Wawro 等[29]報(bào)道了一種大規(guī)模合成單側(cè)對(duì)甲苯磺酰修飾且單分散寡聚聚乙二醇的新方法，該方法無需色譜純化，合成工藝簡(jiǎn)單，產(chǎn)率高，純度高。單對(duì)甲苯磺酰聚乙二醇（HO-PEGn-Ts）是合成各種異端雙官能聚乙二醇衍生物的重要中間體。以市售廉價(jià)的四甘醇為原料，通過非選擇性的部分三苯甲基保護(hù)（步驟一），剩余羥基的對(duì)甲苯磺酰基活化（步驟二），以及與四甘醇發(fā)生的 Williamson 成醚反應(yīng)（步驟三），和隨后體系剩余羥基的 Ts 活化（步驟四）最終實(shí)現(xiàn)鏈增長。重復(fù)步驟三、四，可實(shí)現(xiàn)不同鏈長單端 Ts、單端三苯甲基修飾的寡聚聚乙二醇（TrO-PEGn-OTs，n = 8，12，16）與雙側(cè)三苯甲基修飾寡聚聚乙二醇（TrO-PEG-OTr）的混合物共合成。最后通過 Pd/C 加氫反應(yīng)，脫除體系中全部三苯甲基，所得產(chǎn)物即為單側(cè)羥基 Ts 保護(hù)的寡聚聚乙二醇（HO-PEGn-OTs，n = 8，12，16）與未修飾寡聚聚乙二醇（HO-PEG-OH）的混合物。應(yīng)用這兩類物質(zhì)在有機(jī)相、水相中溶解性的不同，經(jīng)由乙酸乙酯和鹽水的液-液萃取實(shí)現(xiàn) HO-PEGn-OTs 的高效分離與純化。由于 HO-PEGn-OTs 兩側(cè)端基表現(xiàn)出完全不同的反應(yīng)性，可以進(jìn)一步修飾成異雙官能團(tuán) PEG 化合物（圖 6），如疊氮基、氨基、巰基、羧酸基團(tuán)等。采用高效液相色譜法，對(duì)產(chǎn)品的單分散性進(jìn)行了驗(yàn)證。它具有無色譜純化和高純度的特點(diǎn)，據(jù)報(bào)道，這是第一個(gè)生產(chǎn)不對(duì)稱取代單分散聚乙二醇的無色譜合成方法。

2014 年，Zhang 等[30]介紹了一種利用簡(jiǎn)單、廉價(jià)的 THP（2-四氫吡喃）醚保護(hù)/脫保護(hù)策略快速、可擴(kuò)展合成雙官能化聚乙二醇的方法，THP 保護(hù)基在催化量的 TsOH 下便可脫除，脫保護(hù)后易于去除多余的水溶性雙羥基 PEG 和 THP 醚（圖 7），無需柱色譜分離，工藝簡(jiǎn)便。THP 在中性和堿性條件下具有良好的穩(wěn)定性，是一種高效的醇保護(hù)基團(tuán)。因而在中性或堿性條件下將合適的官能團(tuán)（R = Ts, Bn）結(jié)合到單 THP 保護(hù)的 PEG 上形成雙官能 PEG，單 THP 保護(hù)的四甘醇通過 NaH 脫質(zhì)子化，并與甲苯磺?；髥蜹HP 保護(hù)的四甘醇偶聯(lián)，得到鏈長延伸的八甘醇衍生物。這些結(jié)果表明，該方法可以快速合成單官能和雙官能聚乙二醇衍生物，操作簡(jiǎn)便無需色譜純化，且純度高。

圖 5 氟化物標(biāo)簽法合成雙官能 PEG

圖 6 對(duì)甲苯磺酸鹽雜化雙官能 PEG 及其衍生物的合成

圖 7 THP 醚保護(hù)/脫保護(hù)無色譜法合成單/雙官能化 PEG

圖 8 固相合成法逐步合成雙官能 PEG

2017 年，美國Khanal和Fang[31]報(bào)道了一種用固相技術(shù)逐步合成單分散聚乙二醇及其衍生物的方法。以廉價(jià)的四甘醇為原料，通過 3 ~ 4 步反應(yīng)，合成了一端羥基 4,4'-二甲氧基三苯基甲基（Dmtr）保護(hù)，另一端被對(duì)甲苯磺酰活化的四甘醇衍生物（DmtrO-EG4-OTs）。選擇 Wang 樹脂作為固體載體，首先用BuOK 等堿處理樹脂，使其暴露出醇鹽端基，DmtrO-EG4-OTs 單體通過 Williamson 成醚反應(yīng)偶聯(lián)到聚苯乙烯固體載體，接下來通過反復(fù)的 Williamson 成醚反應(yīng)逐步加入 DmtrO-EG4-OTs 單體實(shí)現(xiàn)鏈延伸。最后用三氟乙酸將鏈擴(kuò)增后的 PEG 從固體載體上切下，便以高收率獲得了具有不同末端端基的 PEG 產(chǎn)品（圖8）。

2009 年，La Ferla等[32]提出了一種新的、簡(jiǎn)單的、通用的 PEG 不對(duì)稱化方法。該方法基于將聚乙二醇的一個(gè)末端羥基與固體載體連接，然后將剩余的自由羥基轉(zhuǎn)化為不同的功能基團(tuán)（Br、N3、SSH、OBn）或進(jìn)行鏈的延伸。最終將其從固體載體上裂解，即獲得雙官能聚乙二醇。研究者使用硅膠 60（230 ~ 400 目）作為起始原料，用 3-氨基丙基-三乙氧基硅烷在 Dean-Stark 裝置中回流，通過硅烷化反應(yīng)制備了硅膠表面氨基修飾的甲苯懸浮液。隨后用丁二酸酐處理固體載體，將表面氨基轉(zhuǎn)化為游離羧基。作者將聚乙二醇通過酯鍵單端連接到固體載體上，再將余下的“自由”羥基進(jìn)行官能化，最后將該官能化的聚乙二醇經(jīng)氨甲醇溶液處理，從硅膠載體上裂解下來，最后用 MeOH 過濾和洗滌，濾液低壓濃縮，無需進(jìn)一步純化程序即可獲得產(chǎn)率良好的異端基聚乙二醇衍生物，所得化合物的剩余羥基可進(jìn)一步改性以產(chǎn)生其他期望的雙官能聚合物（圖 9）。

圖 9 硅膠負(fù)載型雙官能 PEG 的合成

3 通過去環(huán)化制備雙官能聚乙二醇

2014 年，Zhang 等[33]開發(fā)了一種基于大環(huán)硫酸鹽（MCS）的單分散聚乙二醇（M-PEGs）及其單官能化衍生物的制備方法。將雙側(cè)醇羥基的 PEG 在 DIEA、DMAP 等堿性條件下緩慢添加 SOCl2使其轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的環(huán)狀硫酸鹽，在開環(huán)反應(yīng)中充當(dāng)保護(hù)基團(tuán)和活化基團(tuán)。寡聚乙二醇的大環(huán)化提供的大環(huán)硫酸鹽（最多 62 個(gè)乙氧基重復(fù)單元的大環(huán)）作為一系列單官能化 M-PEG 的通用前體。在不進(jìn)行基團(tuán)保護(hù)和活化的情況下，通過 MCS 開環(huán)反應(yīng)，可以制備一系列 M-PEG。然后進(jìn)一步通過 MCS 的一鍋法親核開環(huán)反應(yīng)探索了 PEG 的單官能化，得到四甘醇（Nu-PEG-OH），將其與一系列含 O-、S-、C-、N- 和 F- 的親核試劑反應(yīng)，方便地制備了多種單官能化四甘醇（圖 10）。這些開環(huán)反應(yīng)表明 MCS 對(duì)親核試劑具有高度反應(yīng)性。因此，這種基于 MCS 的 PEG 單官能化方法為合成單官能化 PEG 衍生物提供了一種新的高效替代方法。

圖 10 PEG 經(jīng)大環(huán)硫酸酯的單官能化

圖 11 冠醚去環(huán)化制備異雙官能低聚乙二醇

2013 年，Abronina 等[34]提出了一種基于冠醚（18-冠-6）去環(huán)化制備異端雙官能寡聚聚乙二醇衍生物（n = 6，7）的新方法。該方法合成的異雙官能團(tuán) PEG 比相同鏈長的市售 PEG 的合成操作簡(jiǎn)便，成本低廉。該方法成功的關(guān)鍵是使用硝基苯作為反應(yīng)溶劑，使反應(yīng)溫度提高到 135 ℃。冠醚（18-冠-6）與 ZrCl4在該高溫條件下發(fā)生開環(huán)反應(yīng)，生成產(chǎn)物 HO-PEG6-Cl。將其與 NaN3（DMF，75 ℃）反應(yīng)，獲得疊氮化物 HO-PEG6-N3。應(yīng)用該中間體進(jìn)一步合成了一系列更有價(jià)值的異端雙官能聚乙二醇，如一端氨基，一端羧基的聚乙二醇以及具有六乙二醇基間隔基的 N-乙酰氨基葡萄糖衍生物（圖 11）。

4 結(jié)語與展望

聚乙二醇具有多種獨(dú)特的性能，在生物醫(yī)藥領(lǐng)域中的應(yīng)用非常廣泛。特別是異雙官能聚乙二醇，比同端基聚乙二醇更有利于進(jìn)行分子裁剪，能夠選擇性地進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)，從而可以獲得結(jié)構(gòu)清晰可控的生物醫(yī)藥材料，滿足一些特殊的應(yīng)用需求。因此，異雙官能聚乙二醇聚合物的制備一直是國際上研究的熱點(diǎn)。研究人員已經(jīng)證明，異雙官能聚乙二醇不僅可以延長體內(nèi)循環(huán)，降低患者給藥頻率，還可以將藥物附著到靶向部位。據(jù)先前報(bào)道已證明，雙官能的 PEG 可以同時(shí)與靶向和藥物連接實(shí)現(xiàn)靶向治療的作用。異雙官能 PEG 也成為生物傳感器和其他通過將靶向部分連接到表面等離子共振 SPR 傳感器和納米顆粒的分析設(shè)備發(fā)展的關(guān)鍵組成部分。本文綜述了許多制備雜化異雙官能 PEG 的合成技術(shù)，為進(jìn)一步研究這些材料的潛在應(yīng)用提供了一個(gè)平臺(tái)。

[1] Ukawa M, Ando H, Shimizu T, et al. Pharmaceutics of nanoparticles// Lu ZR, Sakuma S. Nanomaterials in pharmacology. New York: Humana Press, 2016:219-238.

[2] Furusho H, Kitano K, Hamaguchi S, et al. Preparation of stable water-dispersible PEGylated gold nanoparticles assisted by nonequilibrium atmospheric-pressure plasma jets. Chem Mater, 2009, 21(15):3526-3535.

[3] Yang C, Liu SQ, Venkataraman S, et al. Structure-directing star-shaped block copolymers: supramolecular vesicles for the delivery of anticancer drugs. J Control Release, 2015, 208:93-105.

[4] Kataoka K, Harada A, Nagasaki Y. Block copolymer micelles for drug delivery: design, characterization and biological significance. Adv Drug Deliv Rev, 2012, 64(1):37-48.

[5] Kircheis R, Schüller S, Brunner S, et al. Polycation-based DNA complexes for tumor-targeted gene delivery in vivo. J Gene Med, 2015, 1(2):111-120.

[6] Yan X, Scherphof GL, Kamps JA. Liposome opsonization. J Liposome Res, 2005, 15(1-2):109-139.

[7] Nelson CE, Kintzing JR, Hanna A, et al. Balancing cationic and hydrophobic content of PEGylated siRNA polyplexes enhances endosome escape, stability, blood circulation time, and bioactivity in vivo. ACS Nano, 2013, 7(10):8870-8880.

[8] Bartlett DW, Su H, Hildebrandt IJ, et al. Impact of tumor-specific targeting on the biodistribution and efficacy of siRNA nanoparticles measured by multimodality in vivo imaging. Proc Natl Acad Sci U S A, 2007, 104(39):15549-15554.

[9] Xiao K, Li Y, Luo J, et al. The effect of surface charge on in vivo biodistribution of PEG-oligocholic acid based micellar nanoparticles. Biomaterials, 2011, 32(13):3435-3446.

[10] Duncan R, Vicent MJ. Polymer therapeutics-prospects for 21st century: the end of the beginning. Adv Drug Deliv Rev, 2013, 65(1):60-70.

[11] Chen H, Chen Y, Sheardown H, et al. Immobilization of heparin on a silicone surface through a heterobifunctional PEG spacer. Biomaterials, 2005, 26(35):7418-7424.

[12] Hiki S, Kataoka K. Versatile and selective synthesis of "click chemistry" compatible heterobifunctional poly(ethylene glycol)s possessing azide and alkyne functionalities. Bioconjug Chem, 2010, 21(2):248-254.

[13] Nagasaki Y, Kutsuna T, Iijima M, et al. Formyl-ended heterobifunctional poly(ethylene oxide): synthesis of poly(ethylene oxide) with a formyl group at one end and a hydroxyl group at the other end. Bioconjug Chem, 1995, 6(2):231-233.

[14] Akiyama Y, Otsuka H, Nagasaki Y, et al. Selective synthesis of heterobifunctional poly(ethylene glycol) derivatives containing both mercapto and acetal terminals. Bioconjug Chem, 2000, 11(6):947-950.

[15] Chen X, Park R, Hou Y, et al. MicroPET imaging of brain tumor angiogenesis with 18F-labeled PEGylated RGD peptide. Eur J Nucl Med Mol Imaging, 2004, 31(8):1081-1089.

[16] Lima AA, Soares-Sobrinho JL, Silva JL, et al. The use of solid dispersion systems in hydrophilic carriers to increase benzonidazole solubility. J Pharm Sci, 2011, 100(6):2443-2451.

[17] Iversen F, Yang C, Dagnaes-Hansen F, et al. Optimized siRNA-PEG conjugates for extended blood circulation and reduced urine excretion in mice. Theranostics, 2013, 3(3):201-209.

[18] Rabanel JM, Hildgen P, Banquy X. Assessment of PEG on polymeric particles surface, a key step in drug carrier translation. J Control Release, 2014, 185:71-87.

[19] Ewert KK, Kotamraju VR, Majzoub RN, et al. Synthesis of linear and cyclic peptide-PEG-lipids for stabilization and targeting of cationic liposome-DNA complexes. Bioorg Med Chem Lett, 2016, 26(6):1618- 1623.

[20] Rabanel JM, Hildgen P, Banquy X. Assessment of PEG on polymeric particles surface, a key step in drug carrier translation. J Control Release, 2014, 185:71-87.

[21] French AC, Thompson AL, Davis BG. High-purity discrete PEG-oligomer crystals allow structural insight. Angew Chem Int Ed Engl, 2009, 48(7):1248-1252.

[22] Sawatzky E, Drakopoulos A, R?lz M, et al. Experimental and theoretical investigations into the stability of cyclic aminals. Beilstein J Org Chem, 2016, 12:2280-2292.

[23] Pradipta AR, Tanaka K. Unexplored reactivity of N-Alkyl unsaturated imines: a simple procedure for producing optically active 1,3-diamines via a stereocontrolled formal [4+2] and [4+2+2] iminocycloaddition. Bull Chem Soc Japan, 2016, 89(3):337-345.

[24] Ashweek NJ, Coldham I, Haxell TF, et al. Preparation of diamines by lithiation-substitution of imidazolidines and pyrimidines. Org Biomol Chem, 2003, 1(9):1532-1544.

[25] Blankenburg J, Frey H. Convenient access to α-amino-ω-hydroxyl heterobifunctional peg and ppo via a sacrificial hexahydro-triazine star strategy. Macromol Rapid Commun, 2019, 40(9):e1900020.

[26] Székely G, Schaepertoens M, Gaffney PR, et al. Beyond PEG2000: synthesis and functionalisation of monodisperse PEGylated homostars and clickable bivalent polyethyleneglycols. Chemistry, 2014, 20(32): 10038-10051.

[27] Zona C, D'Orazio G, La Ferla B. Controlled-length efficient synthesis of heterobifunctionalized oligo ethylene glycols. Synlett, 2013, 24(6): 709-712.

[28] Li Y, Guo Q, Li XF, et al. Fluorous synthesis of mono-dispersed poly(ethylene glycols). Tetrahedron Lett, 2014, 55(13):2110-2113.

[29] Wawro AM, Muraokaabc T, Kinbara K. Chromatography-free synthesis of monodisperse oligo(ethylene glycol) mono-p- toluenesulfonates and quantitative analysis of oligomer purity. Polym Chem, 2016, 7(13):2389-2394.

[30] Zhang QX, Ren H, Baker GL. ChemInform abstract: A practical and scalable process to selectively monofunctionalize water-soluble α,ω-Diols. ChemInform, 2014, 45(46).

[31] Khanal A, Fang S. Solid phase stepwise synthesis of polyethylene glycols. Chemistry, 2017, 23(60):15133-15142.

[32] La Ferla B, Zona C, Nicotra F. Easy silica gel supported desymmetrization of PEG. Synlett, 2009, (14):2325-2327.

[33] Zhang J, Teng Z, Song Y, et al. Inhibition of monoacylglycerol lipase prevents chronic traumatic encephalopathy-like neuropathology in a mouse model of repetitive mild closed head injury. J Cereb Blood Flow Metab, 2015, 35(3):443-453.

[34] Abronina PI, Zinin AI, Orlova AV, et al. An easy access to asymmetrically substituted oligoethylene glycols from 18-crown-6. Tetrahedron Lett, 2013, 54(34):4533-4535.

國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（81671814）；國家自然科學(xué)基金青年基金（21506044）；黑龍江省自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目（ZD2016013）；黑龍江省自然科學(xué)基金青年基金（QC2015016）

彭海生，Email：fisher1688@163.com

2019-12-04

10.3969/j.issn.1673-713X.2020.02.020