山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用

樊乃境，王冬梅，高悅，郭亞男，程天賦，房慶喜，范志軍*

1(東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，黑龍江 哈爾濱，150030)2(黑龍江省北大荒綠色健康食品有限責(zé)任公司，黑龍江 佳木斯，154000)

免疫能力低下是一種暫時性或永久性免疫功能障礙狀態(tài)，并且由于免疫系統(tǒng)遭到破壞，機(jī)體對病原體和外界刺激更加敏感，極大地危害人體健康。因此，通過一些切實(shí)可行的措施，提高機(jī)體免疫力，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，是營養(yǎng)學(xué)家和醫(yī)務(wù)工作者目前面臨的且急需解決的重大課題。目前，常采用免疫增強(qiáng)劑進(jìn)行調(diào)節(jié)機(jī)體免疫能力，如左旋咪唑、卡介苗、糖皮質(zhì)激素等。但此類藥物具有毒副作用強(qiáng)和生產(chǎn)成本高的缺陷，并且大多數(shù)免疫調(diào)節(jié)藥物并不適用于慢性或預(yù)防性的用途[1]?？茖W(xué)家們正在積極尋求和研究天然、安全的保證身體健康以及調(diào)節(jié)人體疲勞、增強(qiáng)免疫力的保健功能食品。在眾多的保健功能食品研究中，蛋白肽不乏是重點(diǎn)研究對象之一，尤其是在水解形成多肽后的保健效果已被科學(xué)家廣泛確認(rèn)。

免疫活性肽是一類能促進(jìn)和激活人體免疫能力的小分子活性肽，隨著人們對免疫活性肽研究的關(guān)注和深入，其發(fā)揮免疫功效的機(jī)理和結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系將被揭開。目前已經(jīng)在臨床上將免疫活性肽研發(fā)成免疫調(diào)節(jié)劑，用于治療免疫缺陷疾病或者是自身免疫性疾病等[2-3]，具有廣闊的應(yīng)用前景。目前，從谷物蛋白[4]、豆類蛋白[5]、牛奶蛋白[6]、魚蛋白[7]、小麥蛋白[8]和貝類蛋白[9]中分離的肽已用于改善免疫功能低下的動物和患者的免疫功能。研究表明，食源性免疫活性肽對特異性和非特異性免疫應(yīng)答均能發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，但是關(guān)于免疫活性肽對免疫系統(tǒng)組織學(xué)基礎(chǔ)的調(diào)控作用缺乏系統(tǒng)的研究[2,4-7]。

山藥是一種藥食同源的食材，具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗衰老、調(diào)節(jié)血脂血壓和體內(nèi)酸堿平衡等功效[10]。目前，對山藥功能因子的研究多集中在山藥多糖和糖蛋白的提取純化[11-13]及其生物活性[14]，如分離出的糖蛋白組分CYG1和CYG2具有α-葡萄糖苷酶抑制劑的作用[14]。但山藥蛋白質(zhì)中的氨基酸種類極為豐富，含有人體所必需的8種氨基酸且占總量25.32%，氨基酸評分、化學(xué)評分、營養(yǎng)指數(shù)等指標(biāo)也均高于大豆分離蛋白和玉米蛋白，這些均說明了山藥蛋白是一種營養(yǎng)價值極高的優(yōu)質(zhì)植物蛋白源[15]。目前關(guān)于山藥蛋白的研究較少，關(guān)于山藥蛋白肽的研究僅限于水解工藝的優(yōu)化[16-18]及山藥多肽啤酒[15]的制備工藝。因此，本實(shí)驗(yàn)采用隔天皮下注射環(huán)磷酰胺構(gòu)建免疫能力低下小鼠模型，通過口腔灌胃低、中、高不同劑量的山藥蛋白肽，并與空白對照組、陰性對照組相比較，從機(jī)體免疫系統(tǒng)(免疫器官、免疫細(xì)胞和免疫活性物質(zhì))進(jìn)行探討山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用，以期為山藥蛋白肽免疫活性的深入研究及深度開發(fā)利用提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動物

SPF(Specitic pathogen tree)級昆明種小鼠，雌雄各半，體重(25±2)g。

1.1.2 試劑

山藥蛋白肽，實(shí)驗(yàn)室自制，水解度42.5%；山藥蛋白，實(shí)驗(yàn)室自制，蛋白純度93.2%；鐵棍山藥，產(chǎn)地河南焦作；注射用環(huán)磷酰胺(cyclophos phamide，CY)，江蘇盛迪醫(yī)藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H32020857；鹽酸左旋咪唑片(LH)，廣西南國藥業(yè)有限公司；胎牛血清，Hyclone；DMEM培養(yǎng)基、胰酶，Gibco；青霉素-鏈霉素溶液，碧云天生物技術(shù)有限公司；PBS，索萊寶生物科技有限公司；LPS，Biosharp；切片用石蠟，山東寶麗來有限公司；蘇木精染色素，上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司；伊紅染色素，上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司；乳酸脫氫酶測定試劑盒，南京建成生物工程研究所；酸性磷酸酶測定試劑盒，南京建成生物工程研究所；無水碳酸鈉，汕頭市西隴化工廠有限公司；亞硝酸鈉，衡陽市凱信化工試劑有限公司；鈉石灰，上海納輝干燥試劑廠；小鼠IL-1α、IL-6、IFN-γ、IgG、IgM ELISA試劑盒，上海酶聯(lián)生物科技有限公司。

1.1.3 儀器與設(shè)備

HF-90 CO2恒溫培養(yǎng)箱，上海力申科學(xué)儀器有限公司；AE31倒置顯微鏡，麥克奧迪實(shí)業(yè)集團(tuán)有限公司；SW-CJ-IF 型超凈工作臺，北京東聯(lián)哈爾儀器制造有限公司；MEK-7222血細(xì)胞分析儀，北京東聯(lián)哈爾儀器制造有限公司；MULTISKAN MK3型酶標(biāo)儀，美國Thermo公司；LEICA RM2235 石蠟切片機(jī)，德國徠卡有限公司；101-1型電熱鼓風(fēng)恒溫干燥箱，上海東星建材實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；BD-326型臥式冷凍冰柜，青島海爾冷凍總公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 山藥蛋白肽的制備

山藥蛋白肽制備工藝：

山藥蛋白→加水(底物濃度為7%)→加熱處理(95 ℃、10 min)→冷卻→調(diào) pH 10，溫度50 ℃→加7%胰蛋白酶→恒溫恒pH水解4.5 h→滅酶(95 ℃、10 min)→冷卻→調(diào) pH 9，溫度60 ℃→加7%堿性蛋白酶→恒溫恒pH水解3 h→滅酶(95 ℃、10 min)透析脫鹽12 h→冷凍干燥→山藥蛋白肽(水解度為42.48%)

1.2.2 山藥蛋白肽的氨基酸組成分析

稱取一定質(zhì)量的山藥蛋白肽置于水解管中，加入6 mol/L 10 mL鹽酸溶液，重復(fù)抽取真空充NL后封口，置于110 ℃恒溫干燥箱內(nèi)水解24 h，取出冷卻后過濾，將濾液定容至50 mL，準(zhǔn)確吸取1 mL，于50 ℃真空干燥后采用蒸餾水溶解過濾，采用氨基酸自動分析儀測定其氨基酸組成。

1.2.3 動物分組及給藥

將小鼠隨機(jī)分為6組，具體給藥方法如表1所示。每組每天灌胃(ig)給藥，連續(xù)灌胃給藥10 d，同時，除正常對照組外，其余各組隔天皮下注射(Sc)環(huán)磷酰胺制造免疫能力低下小鼠模型。

表1 動物實(shí)驗(yàn)分組及給藥情況

1.2.4 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠免疫器官的影響

1.2.4.1 體重及免疫器官指數(shù)測定

末次給藥后予小鼠禁食12 h，宰殺前進(jìn)行稱體重并記錄，頸椎脫臼法處死，分別取胸腺和脾臟稱濕重，如公式(1)、公式(2)所示計算小鼠胸腺、脾臟指數(shù):

(1)

(2)

1.2.4.2 脾臟病理學(xué)切片測定

取完好無損的同一部位脾臟用PBS緩沖液洗凈，儲存于10%中性多聚甲醛溶液中固定，橫切一塊脾臟組織，不同濃度乙醇常規(guī)脫水后石蠟包埋，切3 mm切片于溫水浴中展平，平鋪于載玻片上置于37 ℃恒溫箱過夜后在4 ℃冰箱內(nèi)保存，HE染色鏡檢觀察。

1.2.5 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠免疫細(xì)胞的影響

1.2.5.1 腹腔巨噬細(xì)胞中乳酸脫氫酶(lactic dehtdrogenase,LDH)及酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACPase)活性的測定

將小鼠脾臟器官采用4 ℃的生理鹽水沖洗干凈，置于15 mL的離心管中，并加入相當(dāng)于小鼠脾臟19倍重量的生理鹽水，在4 ℃下將離心管充分勻漿，制成5%脾臟組織液，3 000 r/min離心10 min，取上清液備用，按照說明書方法進(jìn)行檢測LDH、ACPase酶活性。

1.2.5.2 對免疫能力低下小鼠淋巴細(xì)胞增殖能力的影響

末次給藥1 h后處死動物，75%酒精浸泡5 min，無菌環(huán)境中取出脾臟，剪碎后過200目醫(yī)用紗布，收集得到脾細(xì)胞懸液，1 000 r/min離心5 min，取細(xì)胞沉淀，加4 mL紅細(xì)胞裂解液吹打均勻，室溫靜置5 min后，1 000 r/min離心5 min，取沉淀采用4 mL PBS洗滌3遍，重懸中含10 %胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)基中，置于37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2 h，去除貼壁細(xì)胞，懸浮的細(xì)胞為脾淋巴細(xì)胞，然后按5×106/孔密度接種于6孔板進(jìn)行培養(yǎng)。將處于對數(shù)生長期的脾細(xì)胞按照1×104/孔密度接種于96孔板，按照試驗(yàn)分組進(jìn)行培養(yǎng)12 h后，按照說明書采用WST-1法檢測細(xì)胞增殖率。

1.2.6 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠免疫活性物質(zhì)的影響

1.2.6.1 對免疫能力低下小鼠血清IL-1α、IL-6、IFN-γ含量的影響

末次給藥后，小鼠禁食12 h，小鼠眼框采取50 μL，采用ELISA法進(jìn)行檢測IL-1α、IL-6、IFN-γ含量。

1.2.6.2 對免疫能力低下小鼠血清IgM、IgG含量的影響

末次給藥后，小鼠禁食12h，小鼠眼框采取50 μL，采用ELISA法進(jìn)行檢測IgM、IgG含量。

1.2.7 數(shù)據(jù)處理方法

每組實(shí)驗(yàn)平行測定至少3次，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表示為均值±標(biāo)準(zhǔn)差，利用SPSS軟件對數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行方差分析，并采用Duncan法進(jìn)行組間比較，P<0.05表示差異顯著，采用Origin 8.5 對數(shù)據(jù)結(jié)果作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 山藥蛋白肽的氨基酸組成分析

山藥蛋白肽的氨基酸組成分析見表2。

由表2可知，山藥蛋白肽(iron yam peptides，IYPs)的氨基酸組成中谷氨酸含量最高可達(dá)18.73%，其次是天冬氨酸和亮氨酸，且疏水性氨基酸(37.6%)和堿性氨基酸(17.6%)共占55.2%。這表明山藥蛋白肽含有極其豐富的疏水性氨基酸和極性氨基酸。

表2 山藥蛋白肽的氨基酸組成分析

2.2 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠體重增長率和免疫器官的影響

2.2.1 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠體重的影響

山藥蛋白肽對各組小鼠體重增長率的影響結(jié)果見表3。

表3 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠體重的影響

體重增長率能直接或間接反映出機(jī)體健康狀況。小鼠體重增長率的下降也是免疫能力低下模型造模成功的標(biāo)志[19-20]。由表3可知，與正常組相比，其他組別的體重增長率均有不同程度的下降，這表明免疫能力低下小鼠模型構(gòu)建成功；山藥蛋白肽低、中、高劑量組較陰性模型組的體重增長率均有所上升，且呈現(xiàn)量效關(guān)系。這說明山藥蛋白肽對CY所導(dǎo)致的體重下降具有一定的恢復(fù)作用，可以改善免疫能力低下引起的體重下降。

2.2.2 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠免疫器官的影響

山藥蛋白肽對各組小鼠免疫器官指數(shù)的影響結(jié)果見表4。

表4 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠的免疫器官指數(shù)影響

注：*為與陰性對照組差異顯著，且P<0.05；#為與正常對照組差異顯著，且P<0.05(下同)

機(jī)體免疫器官的發(fā)育和狀態(tài)直接決定著免疫系統(tǒng)的應(yīng)答能力[21-22]。目前，免疫器官指數(shù)是反映和評價機(jī)體免疫系統(tǒng)和免疫狀態(tài)的重要指標(biāo)之一[23]。由表4可知，與正常組相比，模型組的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)顯著下降，說明CY能抑制小鼠免疫器官的發(fā)育并誘發(fā)免疫器官發(fā)生萎縮；與CY陰性對照組相比，山藥蛋白肽低、中、高劑量組的小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)均有不同程度的改善，且呈現(xiàn)量效關(guān)系，山藥蛋白肽高劑量組和正常組的胸腺指數(shù)并無顯著性差異(P>0.05)。這表明山藥蛋白肽能明顯緩解CY構(gòu)建的免疫能力低下小鼠免疫器官的萎縮，并促進(jìn)其發(fā)育，增強(qiáng)免疫能力。

2.2.3 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠脾臟病理學(xué)切片的影響

脾臟是機(jī)體最大的淋巴器官，也是血液循環(huán)中的過濾器官，按組織結(jié)構(gòu)可分為白髓和紅髓兩部分[24]。白髓是T、B淋巴細(xì)胞的集中之處，主要發(fā)揮防御外界微生物感染的作用。紅髓位于白髓周圍，由脾索和脾竇組成，能夠發(fā)揮過濾血液、清除凋亡細(xì)胞和吞噬病原體的功能[25]。脾臟發(fā)揮生物功能的基礎(chǔ)是完整、正常的網(wǎng)狀組織結(jié)構(gòu)。研究結(jié)果顯示正常組脾臟結(jié)構(gòu)中的紅髓和白髓的界限明顯，脾索所形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)均勻，所圍成的脾竇分布均勻，在光鏡下無肉眼可見的病理變化；陰性對照組脾臟結(jié)構(gòu)的紅髓和白髓界限消失，脾索所圍成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)遭到嚴(yán)重破壞，幾乎變成了單一的組織細(xì)胞，脾竇明顯變大；與陰性對照組相比，山藥蛋白肽低劑量組的脾臟網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)有所恢復(fù)，但是仍存在脾竇增大，紅髓白髓界限明顯；山藥蛋白肽中劑量組的脾臟網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)較為明顯，脾竇變窄，紅髓白髓界限清晰；山藥蛋白肽高劑量組的脾臟結(jié)構(gòu)中紅髓白髓界限清晰，脾索所形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)較為質(zhì)密均勻，脾竇分布較為均勻。結(jié)果表明山藥蛋白肽對環(huán)磷酰胺導(dǎo)致的小鼠脾臟的病理變化有顯著的改善作用，并呈現(xiàn)量效關(guān)系。

2.3 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠免疫細(xì)胞的影響

2.3.1 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠腹腔巨噬細(xì)胞活力的影響

山藥蛋白肽對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞中LDH和ACPase酶活性的影響結(jié)果見表5。

表5 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠脾臟LDH、ACPase活性的影響

乳酸脫氫酶活性直接影響機(jī)體胞內(nèi)細(xì)胞糖酵解釋放能量的速率[26]。巨噬細(xì)胞吞噬作用所需的能量也來源于糖酵解，并且LDH催化糖酵解的過程中會產(chǎn)生大量的乳酸,從而引起巨噬細(xì)胞胞內(nèi)pH值下降，有利于巨噬細(xì)胞胞內(nèi)免疫活性物質(zhì)和免疫功能的應(yīng)答[27]。酸性磷酸酶是高等動物巨噬細(xì)胞中溶酶體酶系的標(biāo)志酶之一[28]。當(dāng)外界病原體入侵機(jī)體時，巨噬細(xì)胞能發(fā)揮識別功能并啟動免疫應(yīng)答機(jī)制吞噬病原體進(jìn)行胞內(nèi)裂解，而以ACPase為主的溶菌體酶是發(fā)揮胞內(nèi)裂解的主要物質(zhì)[29]。因此，LDH和ACPase酶是巨噬細(xì)胞活力的標(biāo)志酶，其活性反映了巨噬細(xì)胞的活化能力和非特異性免疫水平。由表5可知，與正常組相比，陰性對照組的LDH、ACPase酶活性顯著降低(P<0.05)，表明環(huán)磷酰胺對腹腔巨噬細(xì)胞中的LDH、ACPase酶活性有顯著的抑制作用；與模型組相比，山藥蛋白肽中、高劑量組均可顯著提高脾臟中LDH酶活性(P<0.05)，并且山藥蛋白肽高劑量組的脾臟LDH酶活力和正常組無顯著性差異(P>0.05)；山藥蛋白肽高劑量組可顯著提高脾臟中ACPase酶活性(P<0.05)。結(jié)果表明山藥蛋白肽可以在一定程度上緩解免疫能力低下小鼠脾臟中LDH、ACPase酶活性的降低，提高巨噬細(xì)胞活力，從而增強(qiáng)免疫能力。

2.3.2 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠淋巴細(xì)胞增殖的影響

山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠淋巴細(xì)胞增殖能力的影響結(jié)果見圖1。

圖1 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖能力的影響

淋巴細(xì)胞增殖是細(xì)胞免疫和體液免疫級聯(lián)反應(yīng)中的重要環(huán)節(jié)。淋巴細(xì)胞的增殖能力在一定程度上反映了淋巴細(xì)胞功能的高低，也一定程度體現(xiàn)了機(jī)體體液免疫的能力[30]。由圖1可知，與正常組相比，CY陰性對照組的淋巴細(xì)胞增殖能力顯著下降(P<0.05)；與CY陰性對照組相比，山藥蛋白肽低、中、高劑量組可以顯著提升淋巴細(xì)胞增殖能力(P<0.05)，并且山藥蛋白肽高劑量組和正常組差異不顯著(P>0.05)。結(jié)果表明山藥蛋白肽可以顯著緩解CY導(dǎo)致的免疫能力低下小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖能力的降低，且呈現(xiàn)量效關(guān)系。

2.4 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠免疫活性物質(zhì)的影響

2.4.1 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠白介素水平的影響

山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠血清白介素水平的影響結(jié)果見表6。

表6 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠血清白介素水平的影響

IL-1α是IL-1家族中的典型代表之一，又稱淋巴細(xì)胞活化因子，在免疫和炎癥反應(yīng)及機(jī)體生長代謝方面有著不可或缺的功能[31]。IL-6是由機(jī)體多種免疫細(xì)胞產(chǎn)生的一種糖蛋白，主要作用的靶細(xì)胞是B淋巴細(xì)胞，又稱為B細(xì)胞刺激因子。IFN-γ是特異性免疫的調(diào)節(jié)劑，能誘導(dǎo)Th0型細(xì)胞分化成Th1型細(xì)胞，并且能激活巨噬細(xì)胞、細(xì)胞毒性T細(xì)胞和清除胞內(nèi)病原體[32]。由表6可知，與正常組相比，CY陰性對照組的血清IL-1α、IL-6、IFN-γ均顯著下降(P<0.05)，這表明CY可引起機(jī)體白介素水平的顯著下降，降低機(jī)體免疫防御能力；與陰性對照組相比，山藥蛋白肽中、高劑量組可以顯著提升IL-1α、IL-6、IFN-γ水平(P<0.05)，且高劑量組IL-1α和IFN-γ水平和正常組無顯著性差異(P>0.05)。結(jié)果表明山藥蛋白肽可以顯著緩解CY導(dǎo)致的免疫能力低下小鼠體內(nèi)白介素水平的降低，且呈現(xiàn)量效關(guān)系。

2.4.2 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠免疫球蛋白的影響

表7 山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠血清IgG、IgM的影響

IgG是體液免疫應(yīng)答所產(chǎn)生的主要抗體，約占血清中抗體總量的80%，具有抗菌、中和病毒及免疫調(diào)節(jié)等生物活性[33]。IgM是機(jī)體初次免疫應(yīng)答中分泌最早的抗體，在抵御原發(fā)性感染的過程中發(fā)揮著重要作用[34]。由表7可知，與正常組相比，CY陰性對照組的IgG水平顯著下降(P<0.05)，這說明CY可以抑制機(jī)體IgG、IgM的分泌和表達(dá)；與CY陰性對照組相比，山藥蛋白肽低、中、高劑量組可以顯著提升IgG、IgM水平(P<0.05)，且山藥蛋白肽高劑量組IgM水平和正常組無顯著性差異(P>0.05)。結(jié)果表明山藥蛋白肽可以顯著緩解CY導(dǎo)致的免疫能力低下小鼠體內(nèi)免疫球蛋白水平的降低，且呈現(xiàn)量效關(guān)系。

食源性肽的免疫活性受肽的氨基酸組成、序列、長度、電荷和結(jié)構(gòu)[35]所影響。AHN[36]和HE[37]的研究表明，肽的免疫學(xué)活性與其包含豐富的疏水性氨基酸有關(guān)，這是因?yàn)槭杷鶊F(tuán)可以和細(xì)胞膜相互作用，促使其免疫活性增強(qiáng)，且具有免疫活性的肽末端多是堿性的氨基酸。同時VO等[38]的研究表明當(dāng)肽鏈的氨基酸殘基上具有一個或多個谷氨酰胺、谷氨酸、酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸和天冬氨酸等時，能促進(jìn)食源性肽的免疫調(diào)節(jié)活性。因此，疏水性氨基酸和堿性氨基酸的含量高低對免疫活性具有重要的作用。通過氨基酸組成分析發(fā)現(xiàn)山藥蛋白肽含有極其豐富的疏水性氨基酸和堿性氨基酸，且谷氨酸和天冬氨酸含量較高。這可能是山藥蛋白肽具有極佳免疫活性的構(gòu)效原因之一。

3 結(jié)論

本課題采用隔天皮下注射CY制造免疫功能低下小鼠模型，通過口腔灌胃不同劑量的山藥蛋白肽，并與空白對照組、陰性對照組相比較，測定山藥蛋白肽的氨基酸組成及其對機(jī)體免疫系統(tǒng)(免疫器官、免疫細(xì)胞和免疫活性物質(zhì))的影響。結(jié)果表明，山藥蛋白肽含有極其豐富的疏水性氨基酸和堿性氨基酸；且能提高CY誘導(dǎo)免疫能力低下小鼠的體重生長率、免疫器官指數(shù)和改善脾臟病理學(xué)變化；提高免疫能力低下小鼠體內(nèi)LDH酶、ACPase酶活性和脾臟淋巴細(xì)胞增殖能力；同時能提高免疫能力低下小鼠的細(xì)胞因子(IL-1α、IL-6、IFN-γ)和免疫球蛋白(IgG、IgM)的水平，且呈現(xiàn)量效關(guān)系。這表明山藥蛋白肽可以通過促進(jìn)免疫能力低下小鼠的中樞和外周免疫器官的發(fā)育、改善機(jī)體免疫細(xì)胞狀態(tài)、調(diào)節(jié)體內(nèi)免疫活性物質(zhì)的分泌表達(dá)，提高機(jī)體免疫能力，發(fā)揮其免疫活性。