煎煮液有效成分的溶出率研究

楊群　薄雯映　韓鵬　劉亞偉　劉夢(mèng)奇　朱志國(guó)

【摘 要】 目的：探索煎藥機(jī)的加水量對(duì)煎煮液有效成分溶出的影響。方法：以補(bǔ)陽還五湯為研究對(duì)象，對(duì)煎煮加水量進(jìn)行考察，以阿魏酸及黃芪甲苷含量為考核指標(biāo)，通過HPLC測(cè)定阿魏酸及黃芪甲苷含量，比較5種不同加水量公式的有效成分溶出差異。結(jié)果：公式4煎煮液中的阿魏酸及黃芪甲苷含量跟1、3基本無差別，表明1、3號(hào)藥液的有效成分未達(dá)到最大溶出。在保證煎煮量一致、溶出率最大的前提下，為提高藥材的利用率，可適當(dāng)減少藥方中的藥材重量。結(jié)論：從有效成分的溶出比例來看，水平4中的有效成分溶出最充分。

【關(guān)鍵詞】 加水量;有效成分;溶出

【中圖分類號(hào)】R942 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2020）4-0035-04

Study on Dissolution Rate of Active Components of Decoction in Decoction Machine

YANG Qun1 BO Wenying2 HAN Peng1 LIU Yawei1 LIU Mengqi1 ZHU Zhiguo1*

1.Jiuxin Traditional Chinense Medicine industry Co.，Ltd.，Wuhan 430050，China;

2.Research Institute of Jiuxin Chinense Traditional （WuHan） Co.，Ltd.，Wuhan 430050，China

Abstract：Objective Exploring the effect of adding water to decoction on the dissolution of effective components of decoction.Methods Taking Buyang Huanwu Decoction as the main research object，analyzing the effect of the amount of water，taking the content of ferulic acid and astragalus as the evaluation index，measuring the content of ferulic acid and astragaloside by HPLC，comparing the difference in the dissolution of active components with five different water additions.Results The content of ferulic acid and astragaloside in Formula 4 decoction solution were the same as that of 1 and 3，which showing that the active ingredient of 1 and 3 do not reached the maximum dissolution.On the premise of ensuring the same amount of decocting and the maximum dissolution rate，In order to improve the utilization of medicinal materials，could reduce the weight of medicinal herbs in the prescription.Conclusion According to the dissolution ratio of the active ingredients，level 4 is the best.

Key words：The Weight of Adding Water;Active Components; Dissolution

湯劑是中醫(yī)藥傳統(tǒng)的劑型之一，其質(zhì)量直接影響臨床的藥效，而加水量與煎取量是決定質(zhì)量的重要參數(shù)[1]。其中，加水量是影響藥物有效成分溶出率的關(guān)鍵因素[2]，如加水不足，易導(dǎo)致藥材有效成分不易被煎出，加水過多，易導(dǎo)致藥液濃度低，影響服用劑量。

目前，文獻(xiàn)中關(guān)于煎藥機(jī)加水量的報(bào)道較多，王麗等[3]通過對(duì)3類不同功效處方的吸水性研究，總結(jié)出按照煎藥機(jī)使用說明書中加水量參考公式：加水量（mL）=吸收常量（mL/g）×飲片質(zhì)量+預(yù)取藥液量（mL）+損耗量（200mL）（式中吸收常量 KO=1.5mL/g），補(bǔ)益劑 KO值為參考公式中吸收常量的0.9倍，解表劑KO值為參考公式中吸收常量的1.3倍，一般藥劑為 KO值，這樣的加水量為最合適。唐素勤[4]報(bào)道煎藥機(jī)的加水量一般為計(jì)劃所得藥量的1.2倍。張家成等[5]使用煎煮機(jī)對(duì)旋覆代赭湯進(jìn)行煎煮，得出最佳加水量為9倍藥材重量。田杰等[6]按照廠家提供的加水公式Q = 1.1×W+F×400+400（Q為加水量，W為劑量，1.1為吸水系數(shù)，F(xiàn)×400∶[KG-*3/5]F代表劑數(shù)，400代表一劑藥煎煮量，分裝為2袋，另一個(gè)400為管道失水量）進(jìn)行加水試驗(yàn)，得出部分藥方需再加水才能煎出需要的袋數(shù)，此加水公式基本能符合要求。蔣炬輝[7]隨機(jī)抽取40組代煎中藥處方，進(jìn)行藥量和藥渣的稱量，通過計(jì)算吸水系數(shù)、水分的蒸發(fā)量，建立剩余量與蒸發(fā)量之間的關(guān)系方程，最終得到關(guān)系式為：加水量=吸水系數(shù)×藥量+蒸發(fā)量+所需藥水量（吸水系數(shù)=1.1782）。李彬[8]隨機(jī)抽取門診處方50張，進(jìn)行加水及煎煮實(shí)驗(yàn)，得出加水量與吸水系數(shù)、蒸發(fā)量有關(guān)，與蓄水系數(shù)無關(guān)，加水量可通過公式：加水量=吸水系數(shù)×藥量+蒸發(fā)量+所需量（吸水系數(shù)為1.15）來確定。戴麗莉等[9]通過測(cè)量煎藥機(jī)的水分蒸發(fā)量、擠壓出液量，并結(jié)合上述參數(shù)建立煎藥機(jī)的加液量數(shù)學(xué)模型：加液量=每味中藥飲片的吸水率×飲片質(zhì)量+蒸發(fā)量+所需出液量-煎藥機(jī)擠壓功能參數(shù)×處方中飲片總質(zhì)量，后采用實(shí)際的中藥復(fù)方驗(yàn)證該數(shù)學(xué)模型，得出實(shí)際出液量與理論出液量之間的百分比在±5%以內(nèi)。

然而，加水量與煎煮液有效成分含量差異方面的研究報(bào)道比較少，暫無法獲取準(zhǔn)確的加水量，以使藥材的有效成分能充分溶出。為進(jìn)一步研究加水量與有效成分溶出率之間的關(guān)系，我司以補(bǔ)陽還五湯為研究材料，選用多種加水量公式，同時(shí)用HPLC測(cè)定補(bǔ)陽還五湯中的阿魏酸及黃芪甲苷含量，通過比較不同加水量條件下藥材中有效成分的含量，確定同重量藥材的最適加水量，為提高藥材的煎煮質(zhì)量提供借鑒意義。

1 材料

東華YFY-13型煎藥機(jī)、MS204S電子分析天平、Ulti Mate 3000 液相色譜儀、Agilent 1260 高效液相色譜系統(tǒng)（Chemstation Open-Lab工作站）、VWD檢測(cè)器。

補(bǔ)陽還五湯藥材購自湖北省中醫(yī)院，均符合《中國(guó)藥典》（2015版）[10]各項(xiàng)下規(guī)定。阿魏酸、黃芪甲苷對(duì)照品購自中國(guó)食品藥品檢定研究院，甲醇、乙腈均為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 選用以下5種加水量公式：①加水量=1.2×所需出液量;②加水量=9×飲片重量;③加水量=吸水系數(shù)×飲片重量+蒸發(fā)量+所需出液量-擠壓功能參數(shù)×飲片重量;④加水量=吸水系數(shù)×飲片重量+蒸發(fā)量+所需出液量-擠壓功能參數(shù)×飲片重量+1000;⑤加水量=吸水系數(shù)×飲片重量+蒸發(fā)量+所需出液量-擠壓功能參數(shù)×飲片重量+2000。

查閱文獻(xiàn)確定吸水系數(shù)為1.1[6-8]，擠壓功能參數(shù)為40%[9]，蒸發(fā)量按公式=0.0195×所需出液量+37.92[7]計(jì)算。

補(bǔ)陽還五湯組成：黃芪（125g）、當(dāng)歸（6g）、赤芍（5g）、地龍（3g）、川芎（3g）、紅花（3g）、桃仁（3g）。遵醫(yī)囑設(shè)定每袋包裝量200mL，1付藥2袋。

分別稱取5付劑量共5份，按以上5種加水量公式加入冷水，浸泡30min，選用同樣的煎藥參數(shù)（溫度105～115℃，壓力0.08～0.1Mpa，時(shí)間30分鐘），分別在煎藥機(jī)中煎煮，達(dá)到時(shí)間后，機(jī)器自動(dòng)擠出藥渣，藥液自動(dòng)打入打包機(jī)并封口。

2.2 阿魏酸含量測(cè)定

2.2.1 色譜條件 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈-0.085%磷酸溶液（17∶[KG-*3/5]83）為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為316nm;柱溫35℃;進(jìn)樣量：10μL。

2.2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取阿魏酸對(duì)照品12.46mg，加70%甲醇定容至25mL，即得0.4984g·L-1對(duì)照品儲(chǔ)備液。

2.2.3 供試品溶液的制備 分別精密量取1～5號(hào)補(bǔ)陽還五湯藥液30mL，置蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，向殘?jiān)芯芗尤爰状?0mL，密塞，稱定重量，加熱回流30min，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液濾過，即得。

2.2.4 線性關(guān)系考察 精密量取阿魏酸對(duì)照品溶液 0.1、0.4、0.8、1.6、3 mL，分別置于10mL量瓶中，加70%甲醇定容至刻度，搖勻。然后進(jìn)樣分析，以峰面積值為縱坐標(biāo)（Y），進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)（X），進(jìn)行線性回歸分析，得線性方程Y = 237.48X+ 35.807，r=0.9998，阿魏酸線性關(guān)系良好。

2.2.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取用于線性關(guān)系考察的對(duì)照品溶液5μL，進(jìn)樣分析，連續(xù)測(cè)定6次，記錄阿魏酸的峰面積，計(jì)算RSD，結(jié)果RSD<0.50%。

2.2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一份供試品溶液，分別在0、2、4、8、12、24、48 h進(jìn)樣分析，測(cè)定峰面積，計(jì)算RSD，結(jié)果RSD（n=6）<2.00%。

2.2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一份藥液，按已確定的方法平行制備6份供試品溶液，進(jìn)樣分析，計(jì)算RSD，結(jié)果RSD（n=6）<2.00%。

2.2.8 加樣回收率試驗(yàn) 取已知組分含量的同一藥液9份，分別加入高、中、低濃度的對(duì)照品溶液各3份，按照2.2.3方法制備供試品溶液，進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果9個(gè)樣本的平均回收率>98.00%，RSD（n=9）<1.00%。

2.3 黃芪甲苷含量測(cè)定

2.3.1 色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈-水（32：68）為流動(dòng)相;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè);進(jìn)樣量：10μL。

2.3.2 對(duì)照品溶液的制備 取黃芪甲苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，即得。

2.3.3 供試品溶液的制備 分別精密量取1～5號(hào)補(bǔ)陽還五湯藥液30mL，加水飽和正丁醇振搖提取3次，每次20mL，合并3次正丁醇液，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移定容至5mL量瓶中，濾膜濾過，即得。

2.3.4 線性關(guān)系考察 精密量取黃芪甲苷對(duì)照品溶液0.1、0.5、1.0、5.0、10.0 mL，分別置于10 mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻。然后進(jìn)樣分析，以峰面積值為縱坐標(biāo)（Y），進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)（X），進(jìn)行線性回歸分析，得線性方程Y = 9.8756X+ 13.3325，r=0.9999，黃芪甲苷線性關(guān)系良好。

2.3.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取用于線性關(guān)系考察的對(duì)照品溶液5μL，進(jìn)樣分析，連續(xù)測(cè)定6次，記錄黃芪甲苷的峰面積，計(jì)算RSD，結(jié)果RSD<0.50%。

2.3.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一份供試品溶液，分別在0、2、4、8、12、24、48 h進(jìn)樣分析，測(cè)定峰面積，計(jì)算RSD，結(jié)果RSD（n=6）<2.00%。

2.3.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一份藥液，按已確定的方法平行制備6份供試品溶液，進(jìn)樣分析，計(jì)算RSD，結(jié)果RSD（n=6）<2.00%。

2.3.8 加樣回收率試驗(yàn) 取已知組分含量的同一藥液9份，以高、中、低濃度加入對(duì)照品溶液，按已確定的方法制備供試品溶液，進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果9個(gè)樣本的平均回收率>98.00%，RSD（n=9）<1.00%。

2.4 結(jié)果與分析 煎藥機(jī)加水量如表1所示，測(cè)定的阿魏酸、黃芪甲苷含量如表2所示，不同加水量所煎煮出的有效成分含量如圖3所示。

由表2可知，水平2的阿魏酸、黃芪甲苷含量最低，水平3的阿魏酸含量最高，水平1的黃芪甲苷含量最高。經(jīng)分析，水平1所得藥液中有效成分阿魏酸、黃芪甲苷濃度都較高，隨著水量的增加，水平3、4所得藥液中阿魏酸、黃芪甲苷濃度沒有顯著增加或減少，說明水量增加后，增加了藥液中有效成分的溶出，向藥材中繼續(xù)加水，水平5中阿魏酸、黃芪甲苷的含量顯著減少（如圖3），說明水平5中的加水量過多，導(dǎo)致藥液中有效成分濃度降低。水平4的加水量相比1、3至少增加了38%，但藥液中的阿魏酸、黃芪甲苷濃度基本不變，說明水平4中的阿魏酸、黃芪甲苷的溶出持續(xù)維持平衡，并達(dá)到最大溶出，結(jié)合實(shí)際出液量，水平4的出液量誤差為30mL，數(shù)值最小，因此公式4加液量的效果最優(yōu)。

進(jìn)一步的，按已報(bào)道的煎藥機(jī)加水量公式進(jìn)行加水，雖然能得到較高濃度的藥液，但藥材中的有效成分沒有完成煎煮出來，造成了藥材的浪費(fèi)，若一味的增加煎煮的水量，導(dǎo)致煎煮出的藥液體積增大，超出所需藥液量，增加患者服用難度，造成藥液的浪費(fèi)。考慮在不增加補(bǔ)陽還五湯體積的前提下，可以適當(dāng)?shù)臏p少藥方中藥材的重量，保持藥液中有效成分的含量一致。根據(jù)以下公式可準(zhǔn)確計(jì)算藥方中減少的藥材重量：M=原飲片質(zhì)量-（原飲片質(zhì)量×所需藥液）/（所需藥液+1000）。通過計(jì)算493g補(bǔ)陽還五湯藥材即可煎煮出2000mL的藥液，相比原來需要740g藥材，減少了33%的藥材消耗。

本試驗(yàn)僅通過補(bǔ)陽還五湯進(jìn)行比較分析，存在一定的普適局限性，不一定適用于所有功效類型藥方，僅為同類藥方提供參考和研究基礎(chǔ)。后期，為驗(yàn)證這個(gè)公式的適用性，將對(duì)其他藥方進(jìn)行試驗(yàn)，進(jìn)一步驗(yàn)證公式的通用性。

3 討論

影響湯劑煎煮效果的因素有加水量、浸泡時(shí)間、煎煮時(shí)間、煎煮溫度、煎煮次數(shù)等，而加水量是一個(gè)重要的因素。已報(bào)道的加水量公式較多，其中公式3對(duì)藥液蒸發(fā)量、煎藥機(jī)擠壓的藥液都進(jìn)行了考慮，比較符合實(shí)際情況，該公式可準(zhǔn)確的計(jì)算出加水量，已有試驗(yàn)表明在實(shí)際操作過程中誤差較小[9]。但該文未對(duì)藥材有效成分的煎出率作考察，不清楚藥材的有效成分是否充分溶出。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，按公式3計(jì)算出的體積進(jìn)行加水煎煮時(shí)，藥材的有效成分未達(dá)到最大溶出。進(jìn)一步的，為使藥材的有效成分充分溶出，在保證藥液煎出量一致的前提下，可以通過減少藥方中藥材的用量，最大程度的提高藥物有效成分煎出率，一次煎成。目前，減少藥材重量的計(jì)算公式還在試驗(yàn)中，以期能準(zhǔn)確計(jì)算所需藥材重量，避免造成藥材的浪費(fèi)，保證湯劑的質(zhì)量。

中藥湯劑的煎煮質(zhì)量受多個(gè)因素影響，本研究?jī)H僅針對(duì)補(bǔ)陽還五湯煎煮中的加水量進(jìn)行了探討，更多影響因素以及因素之間的相互關(guān)系均沒有涉及，也僅選擇了一種藥方，不一定能反映普遍情況。本文從藥材方面著手，探討促進(jìn)藥物有效成分溶出的新思路，供中藥湯劑的煎煮人員以參考。

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（收稿日期：2019-12-02 編輯：劉 斌）

作者簡(jiǎn)介：楊群（1987-），男，漢族，碩士，初級(jí)職稱，研究方向?yàn)橹兴庂Y源、中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究。E-mail：379082464@qq.com

通信作者：朱志國(guó)（1978-），男，漢族，高級(jí)經(jīng)濟(jì)師。研究方向?yàn)橹兴幧罴庸ぁ-mail：379082464@qq.com