不同煎煮方式對(duì)復(fù)方丹參湯劑丹酚酸B溶出的影響

古遠(yuǎn)美

【摘 要】 目的：觀察復(fù)方丹參湯劑不同煎煮方法對(duì)藥方有效成分溶出的影響。方法：選用我院煎藥室制備的復(fù)方丹參湯劑進(jìn)行研究，中藥成分包括梔子、丹參、地黃等10味中藥材。采用砂鍋煎煮、高壓煎藥機(jī)煎煮、兩煎常壓煎藥機(jī)煎煮3種方法進(jìn)行復(fù)方丹參湯劑制備。使用高效液相色譜儀對(duì)煎液內(nèi)丹酚酸B含量進(jìn)行測(cè)定，使用C18柱，流動(dòng)相為乙腈-甲醛-甲酸-水（10∶30∶1∶59），檢測(cè)波長(zhǎng)為286mm，流速為1.0mL/min，進(jìn)樣量為10μL。結(jié)果：砂鍋煎煮、高壓煎藥機(jī)煎煮、兩煎常壓煎藥機(jī)煎煮法所制得的復(fù)方丹參湯劑內(nèi)丹酚酸B的RSD值分別為3.31%、1.16%、1.25%，平均質(zhì)量濃度為2.534g/L、2.673g/L、2.766g/L。結(jié)論：兩煎常壓煎藥機(jī)煎煮法更適合中醫(yī)臨床制備復(fù)方丹參湯劑，可彌補(bǔ)傳統(tǒng)煎煮法不足，保證藥物質(zhì)量。

【關(guān)鍵詞】 復(fù)方丹參湯劑；煎煮方式；有效成分

【中圖分類號(hào)】R284 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517（2017）03-0043-02

隨著人們就醫(yī)理念的改變，中醫(yī)療法得到臨床廣泛關(guān)注。中藥湯劑具有起效快、吸收快、作用持久、并發(fā)癥少等優(yōu)勢(shì)[1]。但中藥湯劑的傳統(tǒng)煎煮方式操作較為復(fù)雜，以水為溶媒，需準(zhǔn)確控制時(shí)間、次數(shù)、劑量、溫度及儲(chǔ)存條件，耗時(shí)長(zhǎng)且費(fèi)力，煎煮所得湯劑保存難度較大，不利于患者服用[2-3]。臨床早期煎煮湯劑主要以高壓式單煎為主，隨著醫(yī)療技術(shù)、煎藥機(jī)的不斷發(fā)展與更新，臨床研究制出兩煎常壓煎藥機(jī)，并逐漸應(yīng)用于中藥湯劑煎煮中[4]。但臨床研究人員對(duì)不同煎煮方法制備的湯劑質(zhì)量具有不同看法。為此，研究采用砂鍋煎煮、高壓煎藥機(jī)煎煮、兩煎常壓煎藥機(jī)煎煮3種煎煮方法對(duì)我院常用的復(fù)方丹參湯劑進(jìn)行煎煮與制備，并分析其有效成分含量，以保證湯劑制備質(zhì)量。

1 儀器與材料

1.1 儀器 YFML20 型常壓煎藥機(jī)（北京東華原醫(yī)療設(shè)備有限責(zé)任公司）；GNG型電氣式高壓煎藥機(jī)；AE240型電子天平，Agilent 1100型高效液相色譜儀。

1.2 材料 復(fù)方丹參湯劑包括梔子、丹參及地黃等10味中藥材，所有藥材均由安徽新興中藥材飲片有限公司提供，經(jīng)我院經(jīng)驗(yàn)資深的中藥醫(yī)師鑒定，符合中國(guó)藥典相關(guān)要求。丹酚酸B對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所），乙腈、甲醛為色譜純；水作為超純水，其他試劑均作為分析純。

2 方法

2.1 復(fù)方丹參湯劑煎煮制備 ①砂鍋煎煮：根據(jù)處方量稱取中藥材，加1.2L水進(jìn)行30min浸泡，使用武火將藥材加熱煮沸，后使用文火煎煮30min，對(duì)所得藥液進(jìn)行過(guò)濾得到煎液，藥渣加1L水再次進(jìn)行煎煮20min，煮沸后濾出煎液，將2次煎液混合，濃縮為600mL并進(jìn)行分包裝，每袋100mL，注明批次，在室溫條件下進(jìn)行保存，備用；重復(fù)制備5批。②高壓煎藥機(jī)煎液：根據(jù)處方量稱取中藥材，加2.2L水進(jìn)行30min浸泡，在110℃溫度下進(jìn)行加熱煮沸50min，將煎液濾出，濃縮成600mL并進(jìn)行分包裝，每袋100mL，注明批次，在室溫條件下進(jìn)行保存，備用；重復(fù)制備5批。③兩煎常壓煎藥機(jī)煎液：根據(jù)處方量稱取中藥材，加1.2L水進(jìn)行30min浸泡，加熱煎煮并煮沸30min，將煎液濾出；藥渣加1L水進(jìn)行第2次煎煮，煮沸20min，后將煎液濾出，將2次煎液合并，濃縮成600mL并進(jìn)行分包裝，每袋100mL，注明批次，在室溫條件下進(jìn)行保存，備用；重復(fù)制備5批。

2.2 色譜測(cè)定條件 型號(hào)：Luna C18柱（4.6mm×250mm，5μL），流動(dòng)相為乙腈-甲醛-甲酸-水（10∶[KG-*3/5]30∶[KG-*3/5]1∶[KG-*3/5]59），檢測(cè)波長(zhǎng)為286mm，流速為1.0mL/min，進(jìn)樣量為10μL。丹酚酸B的計(jì)算理論板數(shù)≥2000。

2.3 對(duì)照品溶的制備 精密稱取10mg丹酚酸B對(duì)照品，放于50mL量瓶?jī)?nèi)，加適量水進(jìn)行稀釋到刻度并搖勻，得到對(duì)照品。

2.4 供試品溶液的制備 精密量取1mL復(fù)方丹參湯劑，放于50mL量瓶?jī)?nèi)，加適量水進(jìn)行稀釋到刻度并搖勻，使用0.45μm微孔濾膜對(duì)藥液進(jìn)行過(guò)濾，所得續(xù)濾液即為供試品。

2.5 線性關(guān)系考察 精密稱取10mg丹酚酸B對(duì)照品，置于20mL量瓶?jī)?nèi)，加適量水進(jìn)行稀釋到刻度并搖勻，作為對(duì)照品儲(chǔ)備溶液。精密稱取定量對(duì)照品儲(chǔ)備溶液，加水分別稀釋為5、25、100、125、200、300、400、500mg/L等一系列溶液，依次分開(kāi)進(jìn)樣，橫坐標(biāo)為丹酚酸B對(duì)照品質(zhì)量濃度，縱坐標(biāo)為峰面積，線性回歸方程Y=817.33X-766.22，r=0.999，表示丹酚酸B對(duì)照品質(zhì)量濃度范圍為21～417mg/L，與峰面積存在良好線性關(guān)系。

2.6 精密度試驗(yàn) 根據(jù)要求精密稱取10μL丹酚酸B對(duì)照品溶液，進(jìn)行6次重復(fù)進(jìn)樣，結(jié)果顯示丹酚酸B對(duì)照品峰面積積分值RSD為1.57%，儀器具有良好的精密度。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 根據(jù)試驗(yàn)要求稱取同一批次兩煎常壓煎藥機(jī)煎液，參照上述2.4中供試品溶液制備方法制備供試品溶液6份，參照2.2色譜條件進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示丹酚酸B對(duì)照品的平均質(zhì)量濃度為2.782g/L，RSD為1.02%，說(shuō)明重復(fù)性試驗(yàn)具有良好的重復(fù)性。

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 根據(jù)試驗(yàn)要求精密稱取10μL 2.4項(xiàng)供試品溶液，分別在0、1、3、5、7、9、12h進(jìn)行進(jìn)樣，結(jié)果顯示峰面積RSD為0.54%，說(shuō)明12h內(nèi)供試品溶液穩(wěn)定性較好。

2.9 加樣回收試驗(yàn) 根據(jù)要求精密量取9份同一批次2.782g/L復(fù)方丹參湯劑，1mL/份，分別放于50mL量瓶?jī)?nèi)，分成三組，每組分別加入0.8mL、1.0mL、1.2mL的2.748g/L丹酚酸B對(duì)照品溶液，對(duì)丹酚酸B含量進(jìn)行測(cè)定，經(jīng)計(jì)算低質(zhì)量濃度、中質(zhì)量濃度及高質(zhì)量濃度的RSD，平均加樣回收率分別為1.81%、96.06%、1.62%、98.48%，0.77%、98.48%。

2.10 樣品測(cè)定 稱取砂鍋煎煮、高壓煎藥機(jī)煎煮、兩煎常壓煎藥機(jī)煎煮所得的復(fù)方丹參湯劑，各5份，分別參照1.2.4中供試品溶液制備方法進(jìn)行供試品溶液制備，參照2.2色譜條件進(jìn)行峰面積測(cè)定，使用外標(biāo)法對(duì)供試品溶液內(nèi)丹酚酸含量進(jìn)行計(jì)算，平均質(zhì)量濃度結(jié)果分別顯示為2.534、2.673、2.766，RSD結(jié)果分別為3.31%、1.16%、1.25%。

3 討論

中藥湯劑是指中藥粗顆粒、中藥飲片加水煎煮并煮沸后，清除藥渣、濾取藥液所得的液體制劑，被廣泛應(yīng)用于中醫(yī)臨床指標(biāo)。中藥湯劑能充分滿足中醫(yī)辨證治療需求，患者服用后可快速吸收，且起效快、作用強(qiáng)，可加快病情好轉(zhuǎn)速度[5]。臨床制備中藥湯劑多采用煎煮方法，包括砂鍋煎煮、高壓煎藥機(jī)煎煮、兩煎常壓煎藥機(jī)煎煮等；部分研究人員針對(duì)不同煎煮方法制備的中藥湯劑質(zhì)量存在爭(zhēng)議。

研究結(jié)果顯示，三種煎煮方法所煎煮溶液的高效液相色譜儀結(jié)果顯示，其所含成分一致；但兩煎常壓煎藥機(jī)煎煮法制備的藥液內(nèi)具有較高的丹酚酸B含量，高壓煎藥機(jī)煎煮所得藥液內(nèi)丹酚酸B含量低于兩煎常壓煎藥機(jī)煎煮法，砂鍋煎煮法所得藥液內(nèi)丹酚酸B含量最低。分析原因?yàn)閮杉宄杭逅帣C(jī)煎煮法具有一定的機(jī)械裝置，可對(duì)藥渣殘留藥汁進(jìn)行擠壓，充分?jǐn)D壓出藥渣內(nèi)所含有效成分，增加藥液濃度，促使藥液藥效得到最佳發(fā)揮；兩煎常壓煎藥機(jī)是在一定的密閉系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行藥物煎煮，可避免或減少藥物有效成分揮發(fā)；同時(shí)兩煎常壓煎藥機(jī)經(jīng)2次藥物煎煮，可充分提取藥物有效成分。傳統(tǒng)1次煎煮所得藥物有效成分的有效提取率約為50%，2次可提高至75%～80%，3次可提高至90%～95%，避免有效成分流失[6]。藥物煎煮過(guò)程中，其有效成分由藥材組織水?dāng)U散到藥材外部溶液，在藥材內(nèi)外液濃度達(dá)到平衡時(shí)，有效成分停止溶出，在此情況下濾出藥液并加入清水，可形成新的濃度差，利于臨床繼續(xù)提取藥物有效成分[7]。高壓煎藥機(jī)在藥材煎煮期間存在一定局限性，無(wú)法進(jìn)行攪拌，藥物只能煎煮1次，有效成分提取率較低。高壓煎藥機(jī)的工作壓力高達(dá)152～203kPa，溫度高達(dá)105～120℃；而兩煎常壓煎藥機(jī)可在常壓條件下進(jìn)行煎煮，溫度不高于100℃，可在保留先煎后下的傳統(tǒng)煎煮操作情況下，進(jìn)行2次煎煮湯劑，且所得湯劑具有服用方便、無(wú)菌及高效等優(yōu)勢(shì)，臨床應(yīng)用價(jià)值更高[8]。

綜上所述，兩煎常壓煎藥機(jī)煎煮所得的復(fù)方丹參湯劑有效成分溶出率高于砂鍋煎煮、高壓煎藥機(jī)煎煮，可彌補(bǔ)傳統(tǒng)煎煮法服用、攜帶不足等不足，降低熱敏性對(duì)有效成分的破壞風(fēng)險(xiǎn)，提高藥物有效成分提取率，保證藥物質(zhì)量，為中醫(yī)臨床煎煮藥材提供參考依據(jù)。

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（收稿日期：2016-11-29 編輯：穆麗華）