• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    慢性心肌缺血不同造模方式的比較

    2020-04-03 13:35胡柳吳妍韓銓
    中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥 2020年5期
    關(guān)鍵詞:小鼠

    胡柳 吳妍 韓銓

    [摘要]目的 比較兩種不同慢性心肌缺血造模方式之間的差異及優(yōu)劣情況。方法 選取雄性ICR小鼠30只,根據(jù)造模方式的不同分為皮下注射組、緩釋泵釋放組、正常對(duì)照組,每組各10只。皮下注射組于小鼠腰背部皮下注射異丙腎上腺素(ISO)30 mg/(kg·d),連續(xù)注射14 d;緩釋泵釋放組于小鼠腰背部皮下埋入微量緩釋泵,ISO釋放量30 mg/(kg·d);正常對(duì)照組小鼠皮下注射等劑量生理鹽水。采用心肌酶譜、心臟切片TTC染色等指標(biāo)衡量小鼠的心肌缺血程度。結(jié)果 皮下注射組與緩釋泵釋放組小鼠的造模死亡率比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);皮下注射組與緩釋泵釋放組小鼠的心臟心肌肥大指數(shù)高于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);皮下注射組與緩釋泵釋放組小鼠的心肌肥大指數(shù)比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);緩釋泵釋放組小鼠的心肌缺血面積百分比高于皮下注射組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);緩釋泵釋放組小鼠的心肌酶譜各項(xiàng)指標(biāo)和肌鈣蛋白(cTnT)水平高于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);皮下注射組小鼠的血清α-羥丁酸脫氧酶(α-HBDH)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)及同工酶(mAST)、cTnT水平均高于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);皮下注射組小鼠的血清肌酸激酶(CK)及同工酶(CK-MB)、乳酸脫氧酶(LDH)水平與正常對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);緩釋泵釋放組與皮下注射組小鼠的心肌酶譜各項(xiàng)指標(biāo)及cTnT水平比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 皮下注射及緩釋泵釋放ISO兩種方式均可以造成小鼠心肌肥大,緩釋泵釋放則能更大程度上誘導(dǎo)小鼠出現(xiàn)心肌缺血,緩釋泵釋放同時(shí)在更大程度上造成了心肌功能的損傷。

    [關(guān)鍵詞]慢性心肌缺血;異丙腎上腺素;緩釋泵;皮下注射;小鼠

    [中圖分類號(hào)] R541? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1674-4721(2020)2(b)-0007-05

    [Abstract] Objective To compare the differences and advantages between different methods of chronic myocardial ischemia. Methods Thirty male ICR mice were selected and divided into subcutaneous injection group, sustained-release pump release group and control group according to different modeling methods, with 10 rats in each group. In the subcutaneous group, Isoproterenol (ISO) 30 mg/(kg·d) was injected subcutaneously into the lumbar back of the mice for 14 days. The release pump group was placed subcutaneously in the lumbar back of the mice. The ISO release amount was 30 mg/(kg·d). The control group was injected subcutaneously with an equal dose of physiological saline. Myocardial ischemia was measured by myocardial zymogram and heart section TTC staining. Results There was no significant difference in the mortality between the subcutaneous injection group and the sustained-release pump release group (P>0.05). The cardiac hypertrophy index of the mice in the subcutaneous injection group and the sustained-release pump release group was higher than that in the normal control group, and the difference was statistically significant (P<0.05). There was no significant difference in the cardiac hypertrophy index between the subcutaneous injection group and the sustained-release pump release group (P>0.05). The myocardial ischemic area of the mice in the sustained-release pump release group was higher than that of the subcutaneous injection group, and the difference was statistically significant (P<0.05). The myocardial enzymes and cardiac troponin T (cTnT) level of the mice in the sustained-release pump release group were higher than those in the normal control group, and the differences were statistically significant (P<0.05). The levels of α-hydroxybutyrate deoxygenase (α-HBDH), aspartate aminotransferase (AST), isozyme (mAST) and cTnT in the subcutaneous group were higher than those in the normal control group, and the differences were statistically significant (P<0.05). While the levels of creatine kinase (CK) and isoenzyme (CK-MB) and lactate deoxygenase (LDH) in the subcutaneous group were not significantly different from those of the normal control group (P>0.05). There was no significant difference in myocardial zymogram and cTnT between the sustained-release pump release group and the subcutaneous injection group (P>0.05). Conclusion Both subcutaneous injection and sustained release pump release ISO can cause myocardial hypertrophy in mice, sustained release pump can induce myocardial ischemia in mice to a greater extent, and sustained release pump also causes damage to myocardial function to a greater extent.

    [Key words] Chronic myocardial ischemia; Isoproterenol; Sustained release pump; Percutaneous injection; Mice

    心血管疾病是我國(guó)導(dǎo)致居民死亡的第一病因,而且患病率仍將持續(xù)增加[1],因此,研究心血管疾病的病因和發(fā)病機(jī)制對(duì)于提高人民的健康水平、延長(zhǎng)壽命具有重大意義[2]。心肌缺血(myocardial ischemia)是指由于心臟出現(xiàn)生理或病理性的血液灌注減少,從而導(dǎo)致心臟相應(yīng)的供氧減少,最終引起心肌能量代謝異常,不能維持心臟正常工作狀態(tài)的一種病理狀態(tài)。

    心血管疾病的康復(fù)機(jī)制研究的關(guān)鍵技術(shù)之一是復(fù)制心肌缺血?jiǎng)游锬P汀=⑦m當(dāng)?shù)膭?dòng)物模型,不僅為該病的發(fā)病機(jī)制和病理生理改變提供重要的資料,更重要的是能夠促進(jìn)新藥的開發(fā),推進(jìn)臨床診斷的各種治療方法的進(jìn)步。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,皮下注射大劑量異丙腎上腺素(Isoproterenol,ISO)會(huì)導(dǎo)致大小鼠急性心肌缺血損傷[3-7],這種損傷與人的急性心肌缺血較為相似, 故可作為評(píng)價(jià)藥物抗心肌缺血的動(dòng)物模型[8]。ISO的作用機(jī)制為興奮β1受體,使心肌興奮性提高、收縮加快、心率加快、代謝旺盛,增加心肌耗氧量,從而造成心臟負(fù)荷過(guò)重,同時(shí)興奮β2受體,使外周血管擴(kuò)張,回心血量減少,動(dòng)脈壓降低,冠脈流量減少。

    實(shí)驗(yàn)研究過(guò)程中,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型應(yīng)在滿足與疾病相似性、重復(fù)性、可靠性等前提下,盡可能模擬人類心肌缺血疾病的發(fā)生、發(fā)展?fàn)顟B(tài),可以為探求心肌缺血疾病的病因、發(fā)病機(jī)制、臨床治療提供更好的研究基礎(chǔ)。目前,現(xiàn)有的心肌缺血的模型大致可以分為以下幾類:急性心肌缺血模型、慢性心肌缺血模型、可控性心肌缺血模型和離體心肌缺血模型。本研究的主要目的,是比較皮下注射和皮下緩釋泵釋放兩種給藥方式下,哪種慢性心肌缺血模型的造模方式更穩(wěn)定,小鼠存活率更高,心肌缺血狀態(tài)更明顯,從而為今后對(duì)于冠心病的研究提供可靠的動(dòng)物模型。

    1對(duì)象與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    本研究實(shí)驗(yàn)所用動(dòng)物為ICR小鼠,共30只,雄性,18~22 g,SPF級(jí),均購(gòu)于浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào):SCXK(浙)2019-0002。小鼠均自由攝食和飲水,適應(yīng)性飼養(yǎng)1周左右后,開始實(shí)驗(yàn)操作。

    1.2主要儀器與試劑

    1.2.1實(shí)驗(yàn)試劑

    ISO注射液(上海禾豐制藥有限公司,生產(chǎn)批號(hào):6E20003,規(guī)格:0.5 mg/ml);生理鹽水(江蘇長(zhǎng)江藥業(yè)有限公司,批準(zhǔn)文號(hào):國(guó)A20070002);水合氯醛(中國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)上海化學(xué)試劑公司,生產(chǎn)批號(hào):20120720)。

    1.2.2實(shí)驗(yàn)儀器

    微量緩釋泵(Alzet,model 1002),0.22 μm濾膜,1 ml注射器,剃毛刀,手術(shù)器械。

    1.3實(shí)驗(yàn)分組及處理

    1.3.1動(dòng)物分組

    將30只雄性ICR小鼠隨機(jī)分為三組,每組各10只。正常對(duì)照組小鼠皮下注射生理鹽水,10 μl/g,連續(xù)注射14 d;皮下注射組小鼠皮下注射ISO,給藥量為30 mg/(kg·d)[9],10 μl/g,連續(xù)注射14 d;緩釋泵釋放組小鼠皮下植入含有ISO的緩釋泵,給藥量為30 mg/(kg·d),6 μl/d,連續(xù)注射14 d,緩釋泵內(nèi)ISO濃度=小鼠重量×30 mg/(kg·d)×14 d/(1000×6 μl/d×14 d)。

    1.3.2緩釋泵的制備

    1.3.2.1配制ISO溶液? 使用劑量為30 mg/(kg·d),所用ISO溶液的濃度為100 mg/ml(預(yù)計(jì)小鼠重量為20 g)。①稱取200 mg ISO,加入2 ml的生理鹽水溶液,充分溶解;②0.22 μm濾膜過(guò)濾ISO溶液;③無(wú)菌條件下取出緩釋泵,放在干凈的紗布上,注意不要污染;④稱量記錄空泵重量,一般約為0.5 g,取出注射裝置,安裝上注射管,吸取約0.2 ml的ISO溶液,左手垂直手持緩釋泵,右手持注射管,垂直插到管底,緩慢推注射器,并緩慢上提注射器,直至有液體流出,擦拭掉流出的液體,并安裝上pump的頭部插件;⑤再次稱量記錄注入ISO后緩釋泵的重量,兩次相差應(yīng)該大于90 mg,否則吸出ISO再次灌注緩釋泵;⑥將緩釋泵置入無(wú)菌的0.9%生理鹽水中,37℃孵箱中過(guò)夜(>6 h)。

    1.3.2.2緩釋泵的植入? ①配制4%水合氯醛,麻醉小鼠,以0.2 ml/20 g劑量進(jìn)行腹腔注射;②小鼠背部脫毛,酒精消毒后,于兩塊肩胛骨中間,與體軸呈90°剪開一個(gè)小口子,使用鑷子沿著口子在小鼠背部掏一個(gè)口袋,用來(lái)放緩釋泵;③將泵放入口袋中,縫合背部,并涂上青霉素鈉,將小鼠放在保溫墊上待完全蘇醒后,放回籠中。

    1.4觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法

    1.4.1觀察指標(biāo)

    在給藥14 d后,①摘取小鼠眼球,取全血和血清,比較三組小鼠心肌酶譜及肌鈣蛋白(cTnT)水平,心肌酶譜指標(biāo)包括α-羥丁酸脫氫酶(α-HBDH)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)及同工酶(mAST)、肌酸激酶(CK)及同工酶(CK-MB)、乳酸脫氧酶(LDH);②測(cè)量小鼠的體重及心臟重量,并記錄,使用心肌肥大指數(shù)(HW/BW)作為衡量心臟肥大的指標(biāo)[10];③心臟組織切片進(jìn)行心肌缺血TTC染色;④統(tǒng)計(jì)小鼠死亡率。

    1.4.2 TTC染色

    小鼠處死后取心臟,刀片垂直心臟長(zhǎng)軸將其橫切為5~6片,每片約為2 mm。展平后置于1% TTC溶液中,37℃避光孵育20 min后置于10%中性甲醛(0.1 mol/L PBS配制)中。于染色后第1周對(duì)4個(gè)橫切片的正反兩面進(jìn)行圖像采集,照片采用Photoshop 3S Extended軟件計(jì)算心肌缺血面積。心肌缺血面積百分比(%)=心肌缺血面積/橫切片總面積×100%[11]。

    1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,采用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2結(jié)果

    2.1皮下注射組與緩釋泵釋放組小鼠造模死亡率的比較

    給藥14 d后,皮下注射組小鼠存活8只,死亡2只,死亡率為20%;而緩釋泵釋放組小鼠存活10只,無(wú)死亡,死亡率為0%。皮下注射組與緩釋泵釋放組小鼠的造模死亡率比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.222,P=0.136)。

    2.2三組小鼠心臟肥大及心肌缺血情況的比較

    皮下注射組與緩釋泵釋放組小鼠的HW/BW高于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);皮下注射組與緩釋泵釋放組小鼠的HW/BW比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);緩釋泵釋放組小鼠的心肌缺血面積百分比高于皮下注射組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)(表1、圖1)。

    2.3三組小鼠心肌酶譜及cTnT水平的比較

    緩釋泵釋放組小鼠的血清α-HBDH、AST、mAST、CK及CK-MB、LDH水平均高于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);皮下注射組小鼠的血清α-HBDH、AST、mAST水平高于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);皮下注射組小鼠的血清CK、CK-MB、LDH水平與正常對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);皮下注射組與緩釋泵釋放組的心肌酶譜各項(xiàng)指標(biāo)比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。緩釋泵釋放組與皮下注射組小鼠的cTnT水平均高于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);皮下注射組與緩釋泵釋放組的cTnT水平比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表2)。

    3討論

    心血管疾病現(xiàn)如今已成為威脅人類生命健康的最主要的疾病之一,而心肌缺血性疾病又是在心血管疾病總發(fā)病率中占比較高的一類疾病。心血管疾病的相關(guān)基礎(chǔ)研究的難點(diǎn)之一就是建立合適可重復(fù)的心肌缺血?jiǎng)游锬P?。建立適當(dāng)?shù)膭?dòng)物模型,不僅能為該病的發(fā)病機(jī)制和病理生理改變的研究奠定基礎(chǔ),更重要的是能推動(dòng)新藥的開發(fā),促進(jìn)臨床診斷和各種治療方法的進(jìn)步。在已有文獻(xiàn)報(bào)道的心肌缺血模型中,動(dòng)物種類和造模方法較多,應(yīng)用不同動(dòng)物建立的心肌缺血模型具有不同特點(diǎn),因此建議根據(jù)研究實(shí)驗(yàn)的要求選擇適當(dāng)?shù)膭?dòng)物和造模方法[12]。

    ISO是一種非特異性β-腎上腺素受體激動(dòng)劑,在小鼠心肌缺血、心臟肥大等病理模型中應(yīng)用廣泛[6]。有文獻(xiàn)報(bào)道顯示,皮下注射大劑量ISO會(huì)導(dǎo)致大小鼠急性心肌缺血損傷[6-7],這種損傷的病理變化與人的急性心肌缺血病理過(guò)程較為相似,因此可以應(yīng)用其來(lái)進(jìn)行心肌缺血?jiǎng)游锬P偷乃幮гu(píng)價(jià)。且有研究顯示,在小鼠腰背部皮下包埋微量緩釋泵,給予ISO劑量分別為0.3、3、30 mg/(kg·d),2周后均可以誘導(dǎo)出心肌缺血及心臟肥大[13]。另有學(xué)者報(bào)道稱,于小鼠背部皮下注射ISO 5 mg/(kg·d),持續(xù)1周[14],或者腰背部皮下包埋微量緩釋泵,給予ISO 5 mg/(kg·d),持續(xù)2周[15],也均可引起明顯的心臟肥大和心肌缺血癥狀。

    在前期實(shí)驗(yàn)中,筆者已經(jīng)探索到腹腔注射ISO無(wú)法穩(wěn)定成模,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)中期即會(huì)呈現(xiàn)較高的死亡率。且相關(guān)研究顯示,小鼠皮下注射ISO有一定可能性會(huì)出現(xiàn)皮下硬結(jié),呈現(xiàn)不同程度的發(fā)硬和黑痂,并且會(huì)隨著造模天數(shù)的增加,逐漸加重,最終可能影響藥物吸收,無(wú)法達(dá)到有效的造模劑量,導(dǎo)致造模失敗[16-18]。另一方面,雖然腹腔注射吸收快,但極有可能因?yàn)檠簝?nèi)藥物濃度迅速達(dá)到高峰,導(dǎo)致藥物單次劑量過(guò)大而造成實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死亡率增加[18-19]。因此,在本研究中,引入了ALzet微量緩釋泵,與皮下注射ISO的造模方法進(jìn)行比較。本研究結(jié)果顯示,采用腰部皮下包埋微量緩釋泵釋放ISO 30 mg/(kg·d)或腰背部皮下注射ISO 30 mg/(kg·d)2周均可以成功誘導(dǎo)小鼠出現(xiàn)顯著的心肌肥大和心肌缺血癥狀,這一結(jié)果與相關(guān)研究報(bào)道一致[13]。且微量緩釋泵造模得到的心肌缺血狀態(tài)更為嚴(yán)重。

    心肌中通常存在多種心肌酶,其中包括AST、LDH及同功酶、α-HBDH和CK及CK-MB,通常將這一組與心肌損傷相關(guān)的酶合稱為心肌酶譜,對(duì)心肌梗死具有重要的診斷意義[20]。LDH、CK、AST及mAST在維持心肌正常生理功能方面發(fā)揮著重要的作用。存在于組織中的LDH其活力比存在于血清中的LDH高得多,所以當(dāng)出現(xiàn)組織壞死時(shí),該酶即從組織中釋放入血,而使血清中的酶活力升高。在正常情況下,AST存在于組織細(xì)胞內(nèi),其中心肌細(xì)胞中含量最高,血清中含量極少。當(dāng)心肌細(xì)胞由于缺血而受到損傷時(shí),細(xì)胞內(nèi)的AST釋放入血,使血清AST含量升高,臨床一般也將其視為心肌梗死的輔助檢查指標(biāo)[20]。當(dāng)心肌發(fā)生缺血或梗塞時(shí),心肌受損,導(dǎo)致心肌細(xì)胞內(nèi)的心肌酶釋放入血,血液中酶活性增高,進(jìn)一步造成心肌的損傷?!阏J(rèn)為,血清中AST、CK、LDH含量升高程度與心肌梗死程度成正相關(guān),因此血清中LDH、AST、CK及其同工酶的活性可作為衡量心肌缺血程度的指標(biāo)[20]。

    本研究結(jié)果顯示,緩釋泵釋放組小鼠的血清α-HBDH、AST、mAST、CK及CK-MB、LDH水平均高于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);皮下注射組小鼠的血清α-HBDH、AST、mAST水平高于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);皮下注射組小鼠的血清CK、CK-MB、LDH水平與正常對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。提示兩組均在一定程度上造成了心肌功能的損傷,而皮下注射組對(duì)于小鼠心肌功能的損傷程度低于緩釋泵釋放組。

    cTnT作為心肌細(xì)胞所特有的一種調(diào)鈣蛋白,具有較高的心肌特異性,是反映心肌壞死的血清標(biāo)志物,對(duì)評(píng)價(jià)心肌細(xì)胞損傷同樣具有重要意義。cTnT 存在于心肌細(xì)胞的細(xì)肌絲中,是心肌肌鈣蛋白復(fù)合體中的一種多肽亞單位,具有高度的心肌特異性,當(dāng)缺血缺氧造成心肌細(xì)胞損傷時(shí),細(xì)胞膜通透性增加,大量cTnT釋放入血,使血清中cTnT濃度迅速升高[20]。cTnT具有入血時(shí)間早、濃度高、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)等特點(diǎn),對(duì)于不同程度的心肌缺血具有較高的靈敏度及特異性,在監(jiān)測(cè)心肌梗死的發(fā)展、治療及預(yù)后上具有重要意義。cTnT相比較于經(jīng)典的酶學(xué)指標(biāo)CK-MB具有更高的敏感性,并且診斷窗口期更寬,因此,近年來(lái)cTnT成為了心肌缺血早期和晚期診斷的重要實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。

    本研究中使用的兩種造模方法具有不同的特點(diǎn),皮下注射ISO相較于其他造模方法,不需要手術(shù)開腹、開胸,對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物損傷小,死亡率低于腹腔注射的造模方法[21]; Alzet微量緩釋泵造價(jià)較高,且無(wú)法重復(fù)利用,應(yīng)用該方法單次實(shí)驗(yàn)成本會(huì)相應(yīng)提高。但微量緩釋泵給藥過(guò)程穩(wěn)定且只需一次操作,相較于一般的手術(shù)造模方法對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物傷害較小,人為操作失誤而引起的系統(tǒng)誤差小,小鼠存活率高,得到的心肌缺血模型穩(wěn)定且可重復(fù)。綜上所述,本研究認(rèn)為于ICR小鼠腰背部皮下包埋微量緩釋泵,給予ISO 30 mg/(kg·d)2周,可以建立穩(wěn)定顯著的心肌肥大和心肌缺血模型,該方法操作簡(jiǎn)單,且能保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物較高的存活率,但造價(jià)相對(duì)較高。為進(jìn)一步心血管疾病的研究提供了模型參考,值得推廣。

    [參考文獻(xiàn)]

    [1]王文,朱曼璐,王擁軍,等.中國(guó)心血管病報(bào)告2012[J].中國(guó)循環(huán)雜志,2013,28(6):408-412.

    [2]楊承志,田愛炬,孟增慧,等.異丙腎上腺素誘導(dǎo)FVB/N小鼠心臟肥大模型的建立[J].北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2014, 46(6):906-910.

    [3]韓慧媛,譚風(fēng)華,張明升.黃芪注射液對(duì)心肌缺血損傷的保護(hù)作用[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2001,32(3):200-201.

    [4]方永奇,吳啟端,王麗新,等.補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)急性心肌缺血大鼠心電圖及自由基影響的初步研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2001,12(1):11-12.

    [5]閔清,白育庭,吳基良,等.羅痛定對(duì)大鼠心肌缺血的保護(hù)作用[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2001,20(9):554-555.

    [6]Rona G,Chappel CI,Balazs T,et al.An infarct-like myocardial lesion and other toxic manifestations produced by isoproterenol in the rat[J].Arch Pathol,1959,67(4):443-455.

    [7]徐叔云.藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1991,897.

    [8]賈廣樂(lè),董培智.對(duì)腎上腺素性心肌缺血模型大鼠相關(guān)指標(biāo)的探討[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào),2005,13(2):106-109.

    [9]楊勇,容蓉,陳明強(qiáng),等.異丙腎上腺素誘導(dǎo)小鼠急性心肌缺血模型的方法比較[J].中藥藥理與臨床,2010,26(5):153-155.

    [10]祝旭東,李菁媛,蘇敬陽(yáng),等.異丙腎上腺素誘導(dǎo)小鼠心肌肥厚模型的方法優(yōu)化[J].解剖科學(xué)進(jìn)展,2018,24(3):275-277.

    [11]王燕,胡慧媛,趙美瞇,等.TTC 染色評(píng)價(jià)豚鼠離體心臟缺血/再灌注損傷梗死面積的適宜觀察時(shí)間及計(jì)算方法[J].中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2013,42(2):160-164.

    [12]盧志強(qiáng),張艷軍,崔廣智,等.心肌缺血模型的制作方法研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào),2012,28(8):1053-1057.

    [13]Iaccarino G,Tomhave ED,Lefkowitz RJ,et al.Reciprocal in vivo regulation of myocardial G protein-coupled receptor kinase expression by beta-adrenergic receptor stimulation and blockade[J].Circulation,1999,98(17):1783-1789.

    [14]Yang C,Yang H,Wu J,et al.No overt structural or functional changes associated with PEG-coated gold nanoparticles accumulation with acute exposure in the mouse heart[J].Toxicol Lett,2013,222(2):197-203.

    [15]Ma X,Song Y,Chen C,et al.Distinct actions of intermittent and sustained beta-adrenoceptor stimulation on cardiac remodeling[J].Sci China Life Sci,2011,54(6):493-501.

    [16]鄒磊,李一鳴,楊建云,等.甾體類固醇衍生物 AGE對(duì)60Coγ射線輻射C57小鼠治療作用[J].科學(xué)技術(shù)與工程,2015,15(17):29-33.

    [17]秦文艷,陳賀,朱竟赫,等.不同氫化可的松小鼠腎陽(yáng)虛模型制備方法對(duì)比研究[J].實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué),2017,34(4):11-14.

    [18]袁勇華,鄭雪明,何學(xué)華,等.腹腔注射異丙腎上腺素誘導(dǎo)FVB/N小鼠心臟重塑模型[J].中國(guó)當(dāng)代兒科雜志,2018,10(6):508-513

    [19]安禎祥,何遠(yuǎn)利,王敏.四氯化碳不同給藥途徑復(fù)合乙醇誘導(dǎo)大鼠肝纖維化模型的研究[J].貴州醫(yī)藥,2016,40(1):6-8.

    [20]朱鴻哲.中藥天七方對(duì)大鼠急性心肌缺血保護(hù)作用及機(jī)理的研究[D].哈爾濱:黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),2014.

    [21]陳蓉,謝梅林.異丙腎上腺素致小鼠心肌纖維化模型的制備及評(píng)價(jià)[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào),2014,30(9):1325-1328.

    (收稿日期:2019-07-25? 本文編輯:閆? 佩)

    猜你喜歡
    小鼠
    小鼠大腦中的“冬眠開關(guān)”
    雄性更擅長(zhǎng)應(yīng)對(duì)急性壓力,雌性更擅長(zhǎng)應(yīng)對(duì)慢性壓力
    腸道細(xì)菌改變小鼠更難克服恐懼
    發(fā)現(xiàn)少睡基因
    多吃“回鍋油”或可促癌癥發(fā)展
    PSGL—1+/—;IL—2—/—小鼠模型的構(gòu)建
    寵物小鼠
    小老鼠的鐘聲
    免费高清在线观看视频在线观看| 欧美+日韩+精品| 国产欧美日韩精品一区二区| 天堂俺去俺来也www色官网 | 国产成人freesex在线| 欧美不卡视频在线免费观看| 2021天堂中文幕一二区在线观| 美女国产视频在线观看| 色播亚洲综合网| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 深爱激情五月婷婷| 国产精品一区www在线观看| 真实男女啪啪啪动态图| 99视频精品全部免费 在线| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 色播亚洲综合网| 特大巨黑吊av在线直播| 国内精品一区二区在线观看| 热99在线观看视频| 毛片一级片免费看久久久久| 午夜久久久久精精品| 网址你懂的国产日韩在线| eeuss影院久久| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 久久午夜福利片| 99热这里只有精品一区| 成人亚洲欧美一区二区av| 免费观看a级毛片全部| 偷拍熟女少妇极品色| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 日本一本二区三区精品| 国产成人精品久久久久久| 爱豆传媒免费全集在线观看| 久久久久精品性色| 国产午夜精品一二区理论片| 国产三级在线视频| 偷拍熟女少妇极品色| 久久99热6这里只有精品| 欧美高清成人免费视频www| 久久精品人妻少妇| 观看美女的网站| 成人鲁丝片一二三区免费| 日韩在线高清观看一区二区三区| 精华霜和精华液先用哪个| 国产黄色小视频在线观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 一区二区三区乱码不卡18| 欧美三级亚洲精品| 大话2 男鬼变身卡| 亚洲成色77777| 肉色欧美久久久久久久蜜桃 | 亚洲精品456在线播放app| 少妇熟女欧美另类| 特大巨黑吊av在线直播| 午夜精品一区二区三区免费看| 18+在线观看网站| 一个人看的www免费观看视频| 麻豆久久精品国产亚洲av| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 久久99热这里只有精品18| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 天天躁日日操中文字幕| 国产精品嫩草影院av在线观看| 久久精品国产亚洲网站| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 日韩国内少妇激情av| 欧美日韩在线观看h| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 干丝袜人妻中文字幕| 国产伦理片在线播放av一区| 又大又黄又爽视频免费| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产高清三级在线| 国产高潮美女av| 日韩av免费高清视频| 亚洲国产色片| 搞女人的毛片| 久久99热这里只有精品18| 国产在视频线精品| 波多野结衣巨乳人妻| 日日啪夜夜撸| 一个人观看的视频www高清免费观看| 亚洲欧美日韩东京热| 日韩人妻高清精品专区| 91在线精品国自产拍蜜月| 晚上一个人看的免费电影| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 亚洲熟女精品中文字幕| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 乱码一卡2卡4卡精品| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 丰满人妻一区二区三区视频av| 日本欧美国产在线视频| 日韩在线高清观看一区二区三区| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 午夜福利视频精品| 欧美一级a爱片免费观看看| 午夜福利高清视频| 国产综合精华液| 国产精品蜜桃在线观看| 亚洲国产高清在线一区二区三| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 久久久久性生活片| 亚洲成色77777| 日韩欧美三级三区| 亚洲最大成人手机在线| 熟妇人妻不卡中文字幕| 超碰97精品在线观看| 亚洲国产欧美人成| 嫩草影院精品99| 毛片一级片免费看久久久久| 秋霞在线观看毛片| 九色成人免费人妻av| 搡老妇女老女人老熟妇| 能在线免费观看的黄片| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 色5月婷婷丁香| 两个人的视频大全免费| 看非洲黑人一级黄片| 久久久久久国产a免费观看| 97热精品久久久久久| 日本黄色片子视频| 午夜免费观看性视频| 天堂中文最新版在线下载 | 天堂√8在线中文| 国产精品久久久久久精品电影| 亚洲av.av天堂| 草草在线视频免费看| 欧美一区二区亚洲| 国内精品宾馆在线| 久久精品久久久久久久性| 乱码一卡2卡4卡精品| 黄色配什么色好看| 久久久久久九九精品二区国产| 亚洲国产av新网站| 在线观看美女被高潮喷水网站| 久久久久精品性色| 亚洲国产精品国产精品| 伊人久久精品亚洲午夜| 中文字幕av成人在线电影| 最近最新中文字幕免费大全7| 综合色丁香网| 99热全是精品| 联通29元200g的流量卡| 全区人妻精品视频| 亚洲欧美日韩无卡精品| 春色校园在线视频观看| 国产成人一区二区在线| 国产成年人精品一区二区| 精品人妻熟女av久视频| 99久久九九国产精品国产免费| 久久久久久久久久黄片| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 亚洲av成人av| 亚洲成人一二三区av| 久久久久久久久久人人人人人人| 在线a可以看的网站| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 亚洲精品影视一区二区三区av| 免费少妇av软件| 国产精品国产三级专区第一集| 久久6这里有精品| 亚洲不卡免费看| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 成人午夜精彩视频在线观看| 亚洲怡红院男人天堂| 成人性生交大片免费视频hd| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 精品午夜福利在线看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 精品酒店卫生间| 国产成人91sexporn| 成人特级av手机在线观看| 国产av码专区亚洲av| 亚洲自拍偷在线| 日韩欧美三级三区| 国产精品久久视频播放| 51国产日韩欧美| 观看免费一级毛片| 成人亚洲欧美一区二区av| 又大又黄又爽视频免费| 免费黄色在线免费观看| 99视频精品全部免费 在线| 激情五月婷婷亚洲| 午夜久久久久精精品| 精品人妻偷拍中文字幕| 久久6这里有精品| 精品一区二区三卡| 亚洲av成人精品一二三区| 午夜爱爱视频在线播放| 波野结衣二区三区在线| 99九九线精品视频在线观看视频| 精品一区二区三卡| 日本wwww免费看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 波野结衣二区三区在线| 观看美女的网站| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 只有这里有精品99| 国产精品熟女久久久久浪| 伦精品一区二区三区| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 成人av在线播放网站| 国产成人freesex在线| 亚洲av福利一区| 成人二区视频| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 国产精品一二三区在线看| 国产老妇女一区| 国产精品精品国产色婷婷| 国产在视频线在精品| 国产黄色免费在线视频| 最近手机中文字幕大全| 看十八女毛片水多多多| 激情 狠狠 欧美| 亚洲国产精品国产精品| 3wmmmm亚洲av在线观看| 少妇熟女欧美另类| 边亲边吃奶的免费视频| 成人无遮挡网站| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 精品久久久久久成人av| 中文欧美无线码| 日本一二三区视频观看| 亚洲色图av天堂| 久久久久久国产a免费观看| 色尼玛亚洲综合影院| 国产黄色免费在线视频| 男人爽女人下面视频在线观看| 久久久久国产网址| 青春草亚洲视频在线观看| videos熟女内射| 大话2 男鬼变身卡| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 亚洲最大成人中文| 午夜日本视频在线| 美女国产视频在线观看| 偷拍熟女少妇极品色| 国产精品熟女久久久久浪| 国产日韩欧美在线精品| 久久99热这里只有精品18| a级毛色黄片| 亚洲欧美精品自产自拍| 午夜老司机福利剧场| 国产成人一区二区在线| 亚洲最大成人av| videos熟女内射| 91av网一区二区| 成人av在线播放网站| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲国产av新网站| 欧美另类一区| 少妇人妻一区二区三区视频| 一夜夜www| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲,欧美,日韩| 婷婷色麻豆天堂久久| 国模一区二区三区四区视频| 久久久久久久久久久免费av| 18禁在线播放成人免费| 日韩在线高清观看一区二区三区| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 中文字幕久久专区| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 亚洲av不卡在线观看| 久久热精品热| 在现免费观看毛片| 国产有黄有色有爽视频| 国产高清有码在线观看视频| 高清视频免费观看一区二区 | 国产色爽女视频免费观看| av免费观看日本| 亚洲精品成人av观看孕妇| 身体一侧抽搐| 高清欧美精品videossex| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲精品久久午夜乱码| 亚洲在久久综合| 一级a做视频免费观看| 亚洲天堂国产精品一区在线| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 欧美丝袜亚洲另类| 日韩av不卡免费在线播放| 大香蕉97超碰在线| 免费av不卡在线播放| 久久综合国产亚洲精品| 亚洲精品一二三| 国产亚洲91精品色在线| 国产免费又黄又爽又色| xxx大片免费视频| 久久精品国产亚洲av天美| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 大话2 男鬼变身卡| 久久国内精品自在自线图片| 国产老妇女一区| 久久6这里有精品| 国产伦在线观看视频一区| 精品久久国产蜜桃| 日韩一区二区视频免费看| 国产成年人精品一区二区| 直男gayav资源| 3wmmmm亚洲av在线观看| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产黄频视频在线观看| 国产69精品久久久久777片| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 美女cb高潮喷水在线观看| 夫妻性生交免费视频一级片| 欧美成人一区二区免费高清观看| 国产高清不卡午夜福利| 六月丁香七月| 欧美不卡视频在线免费观看| 91久久精品国产一区二区成人| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 精品一区二区三卡| 亚洲内射少妇av| 日本一本二区三区精品| 777米奇影视久久| av在线老鸭窝| xxx大片免费视频| 国产色爽女视频免费观看| 国产成人91sexporn| 欧美成人午夜免费资源| 久久这里只有精品中国| 成人亚洲精品av一区二区| 日本色播在线视频| 欧美 日韩 精品 国产| 蜜臀久久99精品久久宅男| 久99久视频精品免费| 精品一区二区三区人妻视频| 久久久久网色| 欧美精品一区二区大全| 成人性生交大片免费视频hd| 日韩一本色道免费dvd| 国产淫片久久久久久久久| 国产免费福利视频在线观看| 久久久久网色| 男女啪啪激烈高潮av片| 人妻系列 视频| 在线观看av片永久免费下载| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产高潮美女av| 国产片特级美女逼逼视频| 寂寞人妻少妇视频99o| 亚洲精品国产av成人精品| 波野结衣二区三区在线| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 久久久久久久久久人人人人人人| 亚洲精品影视一区二区三区av| 女人久久www免费人成看片| 久久人人爽人人爽人人片va| 大片免费播放器 马上看| 中国国产av一级| 精品人妻一区二区三区麻豆| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 精品久久久久久久久av| 别揉我奶头 嗯啊视频| 成年女人看的毛片在线观看| 国国产精品蜜臀av免费| 国产精品伦人一区二区| 国产有黄有色有爽视频| 国产精品女同一区二区软件| 中文在线观看免费www的网站| 国产黄色免费在线视频| 性色avwww在线观看| 亚洲精品一二三| 亚洲av免费在线观看| 国产单亲对白刺激| 国产免费一级a男人的天堂| 一区二区三区四区激情视频| 国产探花在线观看一区二区| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 九草在线视频观看| 男女边吃奶边做爰视频| 直男gayav资源| 美女大奶头视频| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 国产探花在线观看一区二区| 色综合站精品国产| 高清视频免费观看一区二区 | 国产伦理片在线播放av一区| 国产av国产精品国产| 看免费成人av毛片| 一区二区三区免费毛片| 国产午夜福利久久久久久| 老司机影院成人| 国产精品综合久久久久久久免费| 久99久视频精品免费| 男人舔奶头视频| 国产视频内射| 亚洲熟女精品中文字幕| 久久精品国产亚洲av天美| 久久久久久久久大av| 老女人水多毛片| 国产精品一区二区三区四区久久| 波多野结衣巨乳人妻| 中国国产av一级| 内射极品少妇av片p| 最近中文字幕高清免费大全6| 黄色配什么色好看| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 欧美xxⅹ黑人| 99热6这里只有精品| 久久99蜜桃精品久久| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 欧美3d第一页| 欧美bdsm另类| 国产色爽女视频免费观看| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 午夜视频国产福利| 一夜夜www| 久久久久久久久久久免费av| 大香蕉97超碰在线| 午夜日本视频在线| 如何舔出高潮| 国产精品久久久久久精品电影| 国产高清三级在线| av一本久久久久| 欧美+日韩+精品| 卡戴珊不雅视频在线播放| 欧美区成人在线视频| 国产老妇伦熟女老妇高清| 日韩av在线免费看完整版不卡| 99热这里只有是精品在线观看| 精华霜和精华液先用哪个| 亚洲图色成人| 精品午夜福利在线看| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 久久99热这里只频精品6学生| 看十八女毛片水多多多| 精品欧美国产一区二区三| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 三级国产精品片| 亚洲成人中文字幕在线播放| 精品人妻一区二区三区麻豆| 夫妻午夜视频| 亚洲最大成人中文| 日本一二三区视频观看| 亚洲精品一二三| 偷拍熟女少妇极品色| 欧美不卡视频在线免费观看| 日本欧美国产在线视频| 国产av在哪里看| 欧美成人精品欧美一级黄| 免费av毛片视频| 青春草视频在线免费观看| 我要看日韩黄色一级片| 国产毛片a区久久久久| 国产在视频线精品| 国产黄色免费在线视频| 成年av动漫网址| 亚洲精品乱久久久久久| 久久久欧美国产精品| 国产高清有码在线观看视频| 免费观看在线日韩| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 大片免费播放器 马上看| 欧美xxⅹ黑人| 色视频www国产| 少妇丰满av| 国产色爽女视频免费观看| 色综合站精品国产| 精品酒店卫生间| 国内精品宾馆在线| 久久99蜜桃精品久久| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲av成人av| 搞女人的毛片| 高清欧美精品videossex| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 特大巨黑吊av在线直播| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 久久亚洲国产成人精品v| 丝袜美腿在线中文| 国产免费福利视频在线观看| 成人鲁丝片一二三区免费| 亚洲国产精品专区欧美| 午夜免费观看性视频| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 国产人妻一区二区三区在| 街头女战士在线观看网站| 九九爱精品视频在线观看| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 欧美+日韩+精品| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 色吧在线观看| 久久久久免费精品人妻一区二区| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产永久视频网站| 18禁动态无遮挡网站| 精品午夜福利在线看| 麻豆成人av视频| 国产在视频线精品| 国产精品福利在线免费观看| 老女人水多毛片| 中国国产av一级| 大陆偷拍与自拍| 久99久视频精品免费| 国产一区二区在线观看日韩| 精品一区二区三卡| 国产高清有码在线观看视频| av在线蜜桃| 国产精品久久久久久久久免| 国产亚洲91精品色在线| 少妇熟女aⅴ在线视频| 国产精品熟女久久久久浪| 欧美日韩在线观看h| av在线老鸭窝| 国产视频首页在线观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 深爱激情五月婷婷| 熟女电影av网| 久久精品久久久久久久性| 哪个播放器可以免费观看大片| 欧美 日韩 精品 国产| 亚洲伊人久久精品综合| 中文字幕av在线有码专区| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 午夜福利在线在线| 精品人妻一区二区三区麻豆| 成人漫画全彩无遮挡| 人体艺术视频欧美日本| 久久精品久久久久久久性| 日韩欧美三级三区| 久久精品国产亚洲av涩爱| 婷婷色综合www| 国产精品无大码| 免费少妇av软件| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 1000部很黄的大片| 久久久久久久大尺度免费视频| 一边亲一边摸免费视频| 伦理电影大哥的女人| 亚洲欧美一区二区三区国产| 精品一区二区免费观看| 免费av观看视频| 一级毛片我不卡| 街头女战士在线观看网站| 亚洲在线自拍视频| 日本爱情动作片www.在线观看| 欧美xxⅹ黑人| 午夜福利成人在线免费观看| 麻豆国产97在线/欧美| h日本视频在线播放| 午夜激情福利司机影院| 99久久中文字幕三级久久日本| 亚洲性久久影院| 久久久色成人| 又大又黄又爽视频免费| 午夜免费男女啪啪视频观看| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 亚洲欧美精品专区久久| 老女人水多毛片| 日本av手机在线免费观看| 身体一侧抽搐| 免费黄网站久久成人精品| 成人特级av手机在线观看| 九九在线视频观看精品| 国产精品伦人一区二区| 精品久久国产蜜桃| 成人亚洲欧美一区二区av| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产精品一区二区三区四区久久| 99久久九九国产精品国产免费| 三级毛片av免费| 日韩大片免费观看网站| 亚洲人成网站在线观看播放| 深爱激情五月婷婷| 久久久久久久久久久免费av| 亚洲va在线va天堂va国产| 天堂中文最新版在线下载 | 国产成人a∨麻豆精品| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 99热6这里只有精品| 美女主播在线视频| 晚上一个人看的免费电影| 国内揄拍国产精品人妻在线| 午夜久久久久精精品| 日韩三级伦理在线观看| 黄色欧美视频在线观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 欧美最新免费一区二区三区| 午夜福利视频1000在线观看| 边亲边吃奶的免费视频| 久久99热6这里只有精品| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 日本一本二区三区精品| 日韩强制内射视频| 黄色一级大片看看| 男人和女人高潮做爰伦理| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 国产白丝娇喘喷水9色精品| 禁无遮挡网站| 国产极品天堂在线| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产亚洲91精品色在线| 久久久久免费精品人妻一区二区| 久久韩国三级中文字幕| 1000部很黄的大片| 超碰97精品在线观看| 国产成人91sexporn| 99久久精品一区二区三区| 嫩草影院新地址|