核黃素介導(dǎo)的光動(dòng)力技術(shù)的研究進(jìn)展

林以琳,邱建清,李世洋,曾紹校,林少玲

(福建農(nóng)林大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院,福建福州 350000)

核黃素是人體必需的維生素,具有一定的熒光性及光敏特性。近年來,核黃素作為人體生命活動(dòng)不可缺少的維生素,對(duì)改善生物體的新陳代謝以及促進(jìn)人體的生長發(fā)育發(fā)揮著重要的作用。但核黃素作為一類重要光敏劑[1],在光生物學(xué)上具有一定的光動(dòng)力治療特性。據(jù)報(bào)道,核黃素是異四氧嘧啶環(huán)激發(fā)產(chǎn)生的一種光敏劑,當(dāng)氧化劑存在時(shí),核黃素被氧化且在492～495 nm或517～527 nm的激發(fā)光發(fā)射范圍內(nèi)可以檢測到熒光。核黃素光敏特性在治療腫瘤癌癥等疾病中已得到充分的應(yīng)用,且作用效果顯著。

目前,應(yīng)用較為廣泛的光敏劑主要有姜黃素、亞甲基藍(lán)、血啉甲醚等。光敏劑作為光動(dòng)力技術(shù)的核心要素,參與光動(dòng)力反應(yīng)的全過程。因此,開發(fā)天然、有效、具有營養(yǎng)價(jià)值的光敏劑對(duì)于光動(dòng)力技術(shù)的突破具有重大研究價(jià)值。光動(dòng)力技術(shù)作為一種新型的治療手段,能夠有效地作用于目標(biāo)物,且不損傷鄰近組織,在腫瘤與癌癥的治療當(dāng)中已得到廣泛的關(guān)注。相較于傳統(tǒng)的放療、化療方式,光動(dòng)力技術(shù)具有高效、安全、經(jīng)濟(jì)環(huán)保等特點(diǎn)[2-3]。核黃素是一類新型的具有營養(yǎng)價(jià)值的光敏劑,已被應(yīng)用于腫瘤癌癥、植物病蟲害及生物體中病毒和有害微生物的控制。

因此,本文綜述了核黃素作為光敏劑的光動(dòng)力技術(shù)的研究進(jìn)展,總結(jié)了核黃素介導(dǎo)的光動(dòng)力技術(shù)在治療疾病、病蟲害以及生物體中發(fā)揮的應(yīng)用,并就其對(duì)人體健康的影響進(jìn)行總結(jié),為將其進(jìn)一步應(yīng)用于食品安全領(lǐng)域提供參考。

表1 核黃素的功能Table 1 Functions of riboflavin

1 核黃素的生理功能及光學(xué)特性

1899年,英國化學(xué)家Wynter Blyth在牛奶中提取出一種亮黃色的色素,并將其命名為乳黃素,即核黃素[4]。核黃素作為水溶性B族維生素,微溶于水,呈強(qiáng)黃綠色熒光,其化學(xué)結(jié)構(gòu)如圖1所示。核黃素主要由黃素單核苷酸(FMN)和黃素鳥嘌呤二核苷酸(FAD)兩種重要成分組成,參與機(jī)體復(fù)雜氧化反應(yīng)。如表1所示,核黃素具有利尿、降血脂和改善心臟功能的作用,是生物體生命活動(dòng)中必不可少的維生素[5],其生理功能主要包括:核黃素作為線粒體能量代謝的參與者,不僅可以改善其能量代謝,還可以作為自由基清除劑,清除脂質(zhì)過氧化產(chǎn)生的自由基對(duì)線粒體功能的損害,從而對(duì)線粒體起到保護(hù)作用;在機(jī)體中具有遞氫的作用且具有極強(qiáng)的氧化能力[6],在鐵-硫簇(Fe-S)物質(zhì)存在時(shí)可生成超氧負(fù)離子自由基,在光敏化后可進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為羥基自由基[7-10],對(duì)于氧活性物質(zhì)的產(chǎn)生具有重要的作用等。因其具有廣泛的生理功能,現(xiàn)已被世界衛(wèi)生組織作為評(píng)估人體身體與營養(yǎng)代謝狀況的指標(biāo)之一[11]。

圖1 核黃素的化學(xué)結(jié)構(gòu)Fig.1 Chemical structure of riboflavin

核黃素主要存在于蔬菜和動(dòng)物的食物中,是多種氧化還原酶的輔酶,具有抗炎、抑癌和抗氧化等作用,熱穩(wěn)定性強(qiáng),對(duì)光極其敏感[15]。核黃素在強(qiáng)堿或可見光、紫外線下時(shí)不穩(wěn)定,光照及紫外照射會(huì)引起核黃素不可逆的分解[16]。在337 nm激光作用下,核黃素僅產(chǎn)生三重激發(fā)態(tài);而在248 nm激光作用下,可產(chǎn)生三重態(tài)激發(fā)和氧化型自由基,導(dǎo)致細(xì)胞衰老甚至死亡,因此核黃素是一種有效的光敏劑[17]。已有研究發(fā)現(xiàn),核黃素經(jīng)酯化作用可產(chǎn)生2′,3′,4′,5′-四乙酸核黃素,其具有延長壽命、保持良好的光敏特性的特點(diǎn)[18]。此外,研究表明核黃素可以結(jié)合微生物中的核酸,阻礙核酸的復(fù)制從而發(fā)揮光敏作用[19]。

2 核黃素介導(dǎo)的光動(dòng)力技術(shù)

2.1 光動(dòng)力技術(shù)的概述

光動(dòng)力技術(shù)(PNST)指光源與光敏劑相互作用產(chǎn)生活性氧物質(zhì)(ROS),殺死有害物質(zhì)的新型冷殺菌方法。通過氧、光敏劑和可見光幾個(gè)基本要素之間的相互作用生成ROS,利用氧化作用破壞生物靶分子的結(jié)構(gòu),當(dāng)破壞程度超過一定閾值,生物靶分子則會(huì)發(fā)生氧化損傷,導(dǎo)致細(xì)胞死亡[20]。近年來,光動(dòng)力技術(shù)作為一種非手術(shù)代替療法在治療惡性腫瘤中已得到廣泛應(yīng)用[21],成為治療癌前病變或皮膚腫瘤的常規(guī)方法;光動(dòng)力技術(shù)有效地滅活單增李斯特菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌等致病菌,保障了食品安全。

按光敏劑本身性質(zhì)可分為:內(nèi)源性光敏劑(5-擬氨基酮戊酸等)和外源性光敏劑(即第二代光敏劑)。按光敏劑的一般分類方法可分為:第一代光敏劑(血卟啉衍生物的混合劑)、第二代光敏劑(卟啉類衍生物)和第三代光敏劑(卟啉類衍生物與生物學(xué)特性的物質(zhì)結(jié)合)。其中,第三代光敏劑處于研制階段,其改善了常規(guī)光敏劑的缺陷、提高靶向性,具有特異性識(shí)別功能[22],如酞菁類物質(zhì)及Npe6等,具有良好的發(fā)展前景[23]。

2.2 核黃素介導(dǎo)光動(dòng)力技術(shù)的作用機(jī)理

核黃素作為一類具有營養(yǎng)價(jià)值的光敏劑[24],其介導(dǎo)的光動(dòng)力作用機(jī)理,如圖2所示:在光照條件下,基態(tài)(S0)核黃素吸收光能量生成壽命極短的單線態(tài)激發(fā)態(tài)(S1)后躍遷至三重激發(fā)態(tài)(T1)。在水環(huán)境中,通過光照的核黃素可產(chǎn)生大量的活性氧,如:1O2、O2·-和·OH。此時(shí),大量的活性氧與三重激發(fā)態(tài)核黃素(T1)發(fā)生氧化作用,導(dǎo)致有害物質(zhì)的結(jié)構(gòu)及功能發(fā)生改變,從而破壞有害物質(zhì)的正常生理活性,導(dǎo)致其死亡。在反應(yīng)停止后,核黃素可從三重激發(fā)態(tài)(T1)直接恢復(fù)至穩(wěn)定的激態(tài),而不會(huì)降解[25-27]。

圖2 核黃素介導(dǎo)的光動(dòng)力作用機(jī)理Fig.2 Mechanism of photodynamictechnology mediated by riboflavin

2.3 核黃素光敏劑介導(dǎo)的光動(dòng)力技術(shù)的應(yīng)用

2.3.1 在腫瘤治療中的應(yīng)用 腫瘤癌癥的治療主要包括射線放療、全身熱療、基因療法。Long等[28]通過培養(yǎng)有無缺失核黃素的HEK293T和NIH3T3細(xì)胞,并觀察細(xì)胞的增殖狀態(tài),研究發(fā)現(xiàn)缺乏核黃素致使NIH3T3和HEK293T細(xì)胞的腫瘤發(fā)生率增強(qiáng)2倍。此外,與正常HEK293T細(xì)胞相比,小鼠的致瘤性增強(qiáng)。Tutino等[29]采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)和Western blotting方法檢測人體結(jié)腸癌細(xì)胞和大腸癌患者組織中的基因及蛋白表達(dá)水平,結(jié)果表明核黃素促進(jìn)了直腸癌細(xì)胞(CRC)的表達(dá),減少了RFVTs 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá),以上發(fā)現(xiàn)為核黃素介導(dǎo)光動(dòng)力技術(shù)治療腫瘤奠定基礎(chǔ)。

皮膚癌是一種惡性腫瘤,通常發(fā)生于皮膚的暴露部位,如手臂、面部、頭部等,對(duì)患者的生活造成了較大的困擾,其發(fā)病機(jī)制包括皮膚免疫系統(tǒng)的損傷、關(guān)鍵酶的誘導(dǎo)、細(xì)胞周期的延長等[30]。20世紀(jì)主要以維A酸、異維A酸或紫外線對(duì)皮膚病進(jìn)行治療,其療效相對(duì)穩(wěn)定,但其必須作用于早期階段的病患,不能根治皮膚病[31]。21世紀(jì),核黃素作為光敏劑的光動(dòng)力療法掀起了熱潮,其結(jié)合了早期治療皮膚病的方法,能夠從根本上解決皮膚病帶來的問題,效果顯著[32]。Miller等[33]將近紅外熒光分子探針與熒光分子成像結(jié)合對(duì)皮膚鱗狀細(xì)胞癌(SCC)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明,內(nèi)源性熒光核黃素作為一種熒光探針對(duì)皮膚鱗狀細(xì)胞癌進(jìn)行監(jiān)測的同時(shí),還有效降低了癌細(xì)胞活力。Salman等[34]采用順鉑、核黃素與光照聯(lián)合的方法治療小鼠皮膚瘤,研究發(fā)現(xiàn),光照下核黃素的抗增殖作用顯著增強(qiáng),可誘導(dǎo)皮膚癌細(xì)胞凋亡,有效降低了正常細(xì)胞的壞死,且治療的效果較好。由此表明,核黃素作為一種光敏劑對(duì)于皮膚癌的治療具有重要的意義。

2.3.2 在眼部疾病中的應(yīng)用 眼睛是人類重要的器官,但眼病的快速發(fā)展已嚴(yán)重困擾人類的正常生活。世界衛(wèi)生組織曾統(tǒng)計(jì):至2020年,全球因眼病造成的失明人數(shù)將多達(dá)7600萬人[35]。目前,治療眼病的方法主要有:激素療法、放射療法或手術(shù)療法,但其對(duì)于機(jī)體本身造成了潛在的損傷[36]。目前,Foschini等基于核黃素介導(dǎo)的光動(dòng)力技術(shù)原理發(fā)明了一種治療圓錐角膜的核黃素離子導(dǎo)入裝置,將裝置安放于待治療的眼睛上,施加0.5～5 min的陰極電流,在紫外光下輻照5～30 min,從而獲得核黃素的角膜交聯(lián),此方法為眼病的治療提供新的有效手段[37]。此外,Lombardo等[38]發(fā)明了一種基于核黃素與紫外線的光動(dòng)力技術(shù)角膜治療的無創(chuàng)光學(xué)方法,研究發(fā)現(xiàn),基質(zhì)內(nèi)核黃素濃度及其紫外線照射角膜中的核黃素消耗量與治療所致基質(zhì)硬化效應(yīng)呈極顯著正相關(guān)。Hagem等[39]利用甲基纖維素與核黃素常規(guī)照射和紫外線照射(UVA)下眼角膜膠原交聯(lián)(CXL),研究發(fā)現(xiàn),兩年后患者眼睛的視力得到改善,且使用核黃素與甲基纖維素可減少照射時(shí)間,加速CXL的治療。

2.3.3 在病蟲害領(lǐng)域的應(yīng)用 核黃素介導(dǎo)的光動(dòng)力技術(shù)在植物水平上已被用于研究棉蚜的致死情況。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn),光照可促使棉蚜產(chǎn)生核黃素,內(nèi)源性核黃素與光的相互作用產(chǎn)生的活性氧可引起細(xì)胞DNA氧化損傷,但外源核黃素對(duì)DNA具有一定的保護(hù)作用[40]。因此,過量表達(dá)的核黃素會(huì)累積DNA損傷,進(jìn)一步引起細(xì)胞內(nèi)促紅細(xì)胞生成素的積累,導(dǎo)致棉蚜死亡。此外,研究表明,植物不僅可以通過自身的生長代謝產(chǎn)生核黃素,還能經(jīng)體外注射核黃素來防止植物病蟲害、促進(jìn)植物生長[41],如鄧晟[42]在ParA1蛋白對(duì)煙草抗病性的研究中發(fā)現(xiàn),只有在光源照射下的ParA1蛋白對(duì)細(xì)胞的誘導(dǎo)作用受到核黃素的抑制,而且這種抑制完全阻斷了過敏反應(yīng)的進(jìn)行,其可能通過活性氧產(chǎn)生的羥自由基的負(fù)調(diào)控過程,核黃素的含量在抑制過敏反應(yīng)過程中發(fā)生了明顯的變化。同時(shí),丁錦平等[43]在研究抑制棉花枯萎病菌生長時(shí)發(fā)現(xiàn),當(dāng)核黃素的濃度大于0.5 mg/mL,能顯著的抑制不同階段棉花枯萎菌絲的生長,以期為植物病蟲害的防治提供一定的參考價(jià)值。

2.3.4 在其他生物體中的應(yīng)用 在波長為320～400 nm的廣譜近紫外線照射下,核黃素有效降低高等真核生物菌株(如真菌、動(dòng)物細(xì)胞等)的存活率,并且隨著濃度的提高,其存活率相應(yīng)下降[44]。在類似的光譜儀中,核黃素處理的小鼠胚胎纖維細(xì)胞的DNA損傷比空白組更嚴(yán)重;同時(shí),與空白組對(duì)照,熒光燈照射對(duì)小鼠糖尿病的胚胎纖維細(xì)胞DNA損傷更嚴(yán)重[45]。王志勇等[46]在探討核黃素介導(dǎo)的光動(dòng)力技術(shù)對(duì)病毒的滅活過程中也發(fā)現(xiàn)了類似現(xiàn)象,在紫外燈照射下,300 μmol/L核黃素作用10 min就可將水泡性口腔炎病毒殺死。因此,核黃素作為光敏劑在對(duì)病毒殺傷的同時(shí),對(duì)動(dòng)物細(xì)胞可能也會(huì)產(chǎn)生一定的損傷。此外核黃素對(duì)于某些酶類物質(zhì)的生理功能也存在一定的影響[47],張兆霞等[48]利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳研究核黃素對(duì)溶菌酶的影響,發(fā)現(xiàn)在可見光波段下的核黃素對(duì)溶菌酶造成不可修復(fù)性損傷,經(jīng)對(duì)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中的產(chǎn)物進(jìn)行分析,結(jié)果表明:可見光的光照時(shí)間、核黃素的濃度等條件因素與溶菌酶的損傷呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系,其作用機(jī)制符合光敏損傷機(jī)制。

2.3.5 核黃素降解產(chǎn)物介導(dǎo)的光動(dòng)力技術(shù)的應(yīng)用 核黃素的降解產(chǎn)物比核黃素本身穩(wěn)定,且核黃素的降解產(chǎn)物2′,3′,4′,5′-四乙酸核黃素(2′,3′,4′,5′-tetraacetylriboflavin(RTA))介導(dǎo)的光動(dòng)力技術(shù)在降解有毒有害物質(zhì)中也發(fā)揮了極大的作用。羅沙砷是一種典型的有機(jī)砷飼料添加劑,用于治療腸道寄生蟲,可提高飼料的品質(zhì),但羅沙砷的自然界降解率低,降解產(chǎn)物具有毒性。因此,Meng等[49]以RTA為光敏劑,進(jìn)行光催化降解硝羥苯胂酸,經(jīng)90 min光照后,硝羥苯胂酸降解為As(III),進(jìn)而氧化為As(V),達(dá)到降解的目的。但迄今為止,RTA作為光敏劑介導(dǎo)的光動(dòng)力技術(shù)的研究報(bào)道還較少,其有效性和安全性仍需進(jìn)一步探究。

2.4 核黃素對(duì)食品品質(zhì)的影響

核黃素作為維生素的重要組成部分,其存在于動(dòng)物內(nèi)臟、奶類、蛋類、豆制品、蔬菜中。迄今為止,核黃素的多數(shù)研究還停滯于其營養(yǎng)價(jià)值的利用、維持其營養(yǎng)素不遭受破壞等[50-51]。Boyaci等[52]通過擠壓技術(shù)研究玉米營養(yǎng)素的破壞程度,結(jié)果表明核黃素的損耗量與溫度、含水量有關(guān);因此,降低溫度或適量注射二氧化碳有利于保持微量營養(yǎng)素的結(jié)構(gòu),獲得品質(zhì)較優(yōu)良的玉米。此外,Jung等[53]采用分光光度計(jì)法研究核黃素介導(dǎo)的光動(dòng)力技術(shù)檢測飲料中抗壞血酸含量,結(jié)果表明在核黃素和光照下,抗壞血酸的氧化速度極快,相較于高效液相色譜法,核黃素介導(dǎo)的光動(dòng)力技術(shù)具有更高的準(zhǔn)確度。到目前為止,核黃素作為光敏劑的光動(dòng)力在食品安全領(lǐng)域的應(yīng)用報(bào)道較少見。因此,基于核黃素的功能與研究背景,有望通過核黃素介導(dǎo)的光動(dòng)力技術(shù)應(yīng)用于食品安全領(lǐng)域,進(jìn)而加強(qiáng)食品的安全性。

3 核黃素介導(dǎo)的光動(dòng)力技術(shù)對(duì)人體健康及食品的影響

3.1 對(duì)人體健康的影響

葉酸是一種有效的核黃素光敏劑,抗氧化劑和α-葉酸含量控制著人體的衰老狀態(tài)[54]。據(jù)統(tǒng)計(jì),人體每日所需的維生素B2較穩(wěn)定(1～2 mg),人體在正常狀態(tài)下的核黃素含量就會(huì)引起光敏反應(yīng)(8 mmol/kg),且葉酸對(duì)光照尤為敏感[55]。已有研究表明皮膚暴露在陽光下,可促使體內(nèi)核黃素發(fā)生化學(xué)反應(yīng),形成不同程度的激發(fā)態(tài),通過電子轉(zhuǎn)移與嘌呤堿基作用(鳥嘌呤和腺嘌呤的反應(yīng)),導(dǎo)致人體部分細(xì)胞的DNA損傷,增加皮膚癌的發(fā)病率[56]。研究發(fā)現(xiàn),通過內(nèi)濾作用的類胡蘿卜素可預(yù)防核黃素的光敏反應(yīng)對(duì)人體造成的損傷[57]。因此,當(dāng)高強(qiáng)度的陽光照射時(shí),可通過攝入適量的類胡蘿卜素來預(yù)防葉酸的光氧化從而降低人體的損傷,預(yù)防衰老。

在高度工業(yè)化發(fā)展的今天,眼病如:白內(nèi)障、老年性黃斑變性(AMD)等是老年人群中日益增長的疾病。其病理與光化學(xué)反應(yīng)歷程存在直接關(guān)聯(lián)[58]。過去研究認(rèn)為,黃色素具有改善視力和防止紫外線激發(fā)的功能[59]。Tomany等[60]通過光動(dòng)力技術(shù),研究牛眼球晶狀體的蛋白病變中發(fā)現(xiàn):核黃素與晶體蛋白的結(jié)合參與了光敏反應(yīng)過程。在晶狀體中,色氨酸的氧化產(chǎn)物作為紫外線濾光器,對(duì)牛眼球具有保護(hù)作用。核黃素在治療眼病時(shí)可激活蛋白質(zhì)的氧化活性,因此在光動(dòng)力技術(shù)治療基礎(chǔ)眼角膜交聯(lián)手術(shù)中發(fā)揮主要作用[61]。從流行病學(xué)的角度來看,拖延治療眼病會(huì)導(dǎo)致老年人視力極速下降,甚至具有失明的可能性。研究表明,吸煙會(huì)增加體液中核黃素的濃度,是AMD發(fā)展的主要原因[62];類胡蘿卜素的攝入會(huì)大幅度的降低患AMD的風(fēng)險(xiǎn);某些類黃酮似乎也具有保護(hù)視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞免受氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的能力[63];大量攝入魚類也可以預(yù)防AMD的發(fā)生,其根本原因是一種長鏈U-3脂肪酸的有效調(diào)控[64]。因此,建議老年人群通過適當(dāng)增加魚類和海產(chǎn)品以及富含類胡蘿卜素和類黃酮的水果和蔬菜的攝入來降低患AMD的風(fēng)險(xiǎn)。

3.2 對(duì)食品穩(wěn)定性的影響

核黃素大量存在于肉類制品、乳制品和啤酒中,且對(duì)其品質(zhì)都具有實(shí)際生物意義。Frederiksen等[64]對(duì)光照下的肉制品進(jìn)行探究,發(fā)現(xiàn)在高氧包裝冷藏期間,高密度氧的環(huán)境可保持牛肉和豬肉的新鮮程度,以減少微生物的生長,用來維持肌紅蛋白鮮艷的紅色。但隨著貯藏時(shí)間的延長,肉質(zhì)很快出現(xiàn)松軟現(xiàn)象,研究表明這種現(xiàn)象與核黃素的作用息息相關(guān),高氧條件(80%)有利于核黃素發(fā)生光氧化,從而引起肉制品發(fā)生松軟現(xiàn)在,導(dǎo)致肉制品品質(zhì)下降。Sattar等[65]對(duì)自然光照射下的乳制品進(jìn)行感官評(píng)價(jià),發(fā)現(xiàn)經(jīng)自然光照射后,乳制品產(chǎn)生類似“紙板”或者“燒焦的羽毛”的味道;經(jīng)過分析,乳制品內(nèi)部發(fā)生了化學(xué)反應(yīng),促使牛奶的感官品質(zhì)發(fā)生變化,這歸因于牛奶中的天然物質(zhì)核黃素所致[66]。光照射下的啤酒也曾出現(xiàn)過類似變味的現(xiàn)象[41]。啤酒因含有核黃素,而具有強(qiáng)的光敏特性,光照后會(huì)產(chǎn)生一種類似于肛門腺排出的氣味,稱為“臭鼬”。研究表明,啤酒花中的苦味也是由核黃素所致[67]。

4 結(jié)論與展望

核黃素來源廣泛、價(jià)格低廉。近年來,核黃素作為藥物在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用實(shí)例日益增多,諸多研究已證實(shí)核黃素作為光敏劑在腫瘤、癌細(xì)胞、病蟲害等領(lǐng)域的應(yīng)用情況,為今后核黃素的大量開發(fā)和應(yīng)用于食品冷殺菌領(lǐng)域提供了良好的研究基礎(chǔ)。然而,大量研究顯示,核黃素的光敏感性對(duì)人體健康和食品穩(wěn)定性具有潛在的影響,大量的攝取或者攝取不足均會(huì)導(dǎo)致一些疾病的出現(xiàn)以及對(duì)食品品質(zhì)的影響。因此,本文綜述了核黃素介導(dǎo)的光動(dòng)力技術(shù)的研究進(jìn)展,表明其具有良好的研究基礎(chǔ)和在食品冷殺菌技術(shù)領(lǐng)域的應(yīng)用前景。此外,考慮到其可能存在的對(duì)人體健康的影響,在光動(dòng)力技術(shù)的應(yīng)用中,合理控制核黃素的使用量和光照強(qiáng)度是該技術(shù)需重點(diǎn)關(guān)注方向。