荔枝核研究進(jìn)展及其質(zhì)量標(biāo)志物預(yù)測(cè)分析

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(1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,廣西南寧 530001;2.廣西優(yōu)勢(shì)中成藥與民族藥開(kāi)發(fā)工程技術(shù)中心,廣西南寧 530020;3.中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,廣東廣州 510275)

荔枝屬于無(wú)患子科荔枝屬(Sapindaceae Litchi),荔枝核為無(wú)患子科植物荔枝LitchichinensisSonn的干燥成熟種子[1],其樹(shù)根、花蜜、果實(shí)均可入藥[2],別名為荔仁、枝核或大荔核[3]。我國(guó)荔枝年產(chǎn)量可達(dá)兩百萬(wàn)噸,且每年有大量荔枝核被用來(lái)加工荔枝干、荔枝罐頭和荔枝酒[4],在此期間,荔枝核被大量丟棄,人們單一的認(rèn)為它是副產(chǎn)品,沒(méi)有利用價(jià)值,不僅對(duì)環(huán)境造成污染,同時(shí)也造成了資源的浪費(fèi)。中醫(yī)研究表明,荔枝核具有行氣散結(jié)、理氣祛寒、止痛等功效,根據(jù)這一特性,荔枝核可用作治療寒病腹痛、睪丸腫痛、胃痛、婦女氣滯血痛等疾病的一味良藥[1]。其歷史悠久,始載于《本草衍義》[5],在《中華藥?！穂6]、《中藥大辭典》[7]中均有記載,且荔枝被稱為“南國(guó)四大果品之一”?，F(xiàn)有研究證明荔枝核具有降血糖、抗腫瘤、抗病毒、抑制乳腺增生以及抗肝損傷等藥理作用[8]。荔枝核藥用價(jià)值高,因此,對(duì)于荔枝核的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)也需進(jìn)一步完善。

表1 荔枝核中黃酮類化合物[11-12]Table 1 Flavonoids in Litchi Semen[11-12]

荔枝核成分復(fù)雜,但在2015年版《中國(guó)藥典》中并未規(guī)定其質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn),為了完善荔枝核質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),增強(qiáng)人們對(duì)荔枝核的保護(hù)意識(shí),本文簡(jiǎn)要綜述荔枝核近年來(lái)的化學(xué)成分及藥理作用,并在此基礎(chǔ)上,進(jìn)行質(zhì)量標(biāo)志物的預(yù)測(cè)分析,為以后荔枝核的深入研究提供理論依據(jù)和參考。

1 荔枝核的主要有效成分

荔枝核中主要有黃酮類、多糖類、甾體類、鞣質(zhì)類、揮發(fā)油和氨基酸等化學(xué)成分[9]。

1.1 黃酮類

目前,從荔枝核中分離得到的黃酮類化合物有黃酮醇類和二氫黃酮類。近年來(lái),有學(xué)者首次從荔枝核中分離出5-反式香豆酰奎寧酸、3-O-反式香豆?？鼘幩?、山柰酚3-O-(6-O-啡?；?-β-D-葡萄糖基-(1→ 2)-α-L-鼠李糖-7-O-α-L-鼠李糖苷、順式對(duì)羥基肉桂酸、反式對(duì)羥基桂皮酸、falandin B[10]五種黃酮類成分。姜振國(guó)[11]采用硅膠柱層析的方法從荔枝核50%乙醇部位分離得到10個(gè)單體化合物,其中四個(gè)屬于黃酮類。董旭喆[12]用70%乙醇提取荔枝核并經(jīng)過(guò)乙酸乙酯萃取之后,分離鑒定出了52種化合物,其中黃酮類有17個(gè)。圖1為黃酮類化合物結(jié)構(gòu),表1為已從荔枝核中分離鑒定出的黃酮類化合物。

1.2 多糖類

多糖是由糖苷鍵結(jié)合的糖鏈,是由多個(gè)單糖組成的聚合糖高分子碳水化合物。郭放[13]研究荔枝核經(jīng)水提醇沉得到的多糖(LSEP),并發(fā)現(xiàn)此多糖成分是由(1→4,1→6)連接的Glc組成,側(cè)鏈由Man及Gal組成,末端由Man構(gòu)成,其主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖等單糖組成,且大孔樹(shù)脂水洗脫部分主要是鼠李糖,大孔樹(shù)脂30%乙醇洗脫部分和95%乙醇洗脫部分主要是葡萄糖。錢(qián)力[14]通過(guò)研究荔枝核多糖提取的最佳工藝,得到在最佳工藝條件下其多糖含量為5.72%。且近幾年來(lái)對(duì)于荔枝核多糖的研究主要集中于提取方法方面的優(yōu)化[15-16],建議可以采用柱前衍生-高效液相色譜法來(lái)分析多糖的單糖組成。

圖1 荔枝核黃酮類化合物結(jié)構(gòu)類型Fig.1 Structural types of flavonoids from Litchi Semen

1.3 甾體類化合物

荔枝核中含有的甾體類化合物有皂苷和甾醇兩種。徐新亞[17]在荔枝核中首次分離得到五種苷類成分,并對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定,分別為(-)-松脂素4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、苯乙基β-D-吡喃葡萄糖苷、乙基β-D-吡喃葡萄糖苷、乙基α-D-吡喃葡萄糖苷、胞苷。屠鵬飛[18]等經(jīng)過(guò)不同溶劑萃取,并通過(guò)GC-MS分析鑒定出了13種甾醇類化合物,分別是硬脂酸、β-谷甾醇、豆甾醇、(24R)-5α-豆甾烷-3,6-二酮、豆甾烷-22-烯-3,6-二酮、3-羰基甘遂烷-7,24-二烯-21-酸、胡蘿卜苷、豆甾醇-β-D-葡萄糖苷、1H-imidazole-4-carboxylic acid,2,3-dihydro-2-oxo,methyl ester、喬松素-7-新橙皮糖苷、D-1-O-甲基-肌-肌醇、半乳糖醇、肌-肌醇。圖2為荔枝核中已知的甾體類化合物的結(jié)構(gòu)式。

圖2 荔枝核甾體類化合物Fig.2 Nucleosteroids from Litchi Semen

1.4 鞣質(zhì)類

鞣質(zhì)又名單寧,是一類能與大分子蛋白質(zhì)或生物堿結(jié)合發(fā)生反應(yīng)并生成沉淀的結(jié)構(gòu)復(fù)雜的多元酚類化合物[19],從化學(xué)結(jié)構(gòu)上進(jìn)行分類,可以分為可水解鞣質(zhì)和縮合鞣質(zhì)兩大類,而水解鞣質(zhì)則可根據(jù)水解的酚酸類化合物的不同,分為鞣花鞣質(zhì)和沒(méi)食子酸酯鞣質(zhì)兩大類鞣質(zhì)。鐘世順[20]采用顏色-沉淀反應(yīng)對(duì)鞣質(zhì)進(jìn)行鑒別,采用干酪素法進(jìn)行含量測(cè)定,并以鞣質(zhì)含量為指標(biāo)優(yōu)選出最佳提取方法,進(jìn)而得出荔枝核鞣質(zhì)類成分為縮合鞣質(zhì)。Xu等[21]通過(guò)HPLC分離得到八種鞣質(zhì)類成分,分別是:litchitannin A1、litchitanninA2、aesculitannin A、epicatechin(2β→O→7,4β→8)-epiafzelechin-(4α→8)-epicatechin、原花青素A6、原花青素A1、原花青素A2和epi-catechin-(7,8-bc)-4β-(4-hydroxyphe-nyl)-dihydro-2(3H)-pyranone。且查閱相關(guān)文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)對(duì)于鞣質(zhì)類成分的研究少之又少,建議可以從其含量以及藥效活性方面進(jìn)行研究。

1.5 揮發(fā)性成分

荔枝核揮發(fā)油的主要化學(xué)成分為酯、烯、萘等。徐多多等[22]通過(guò)水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油,采用GC-MS法對(duì)化學(xué)成分進(jìn)行鑒定,最終測(cè)出53種揮發(fā)性成分。張媛等[23]對(duì)荔枝核成分進(jìn)行GC-MS分析,共鑒定出30種脂溶性成分,其中棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸和2-辛基-環(huán)丙烷辛酸占脂溶性成分的88.80%。饒長(zhǎng)全等[24]采用超臨界CO2萃取法,對(duì)荔枝核揮發(fā)性成分進(jìn)行GC-MS分析,共鑒定出67種化合物,其中甾醇含量最高。

1.6 氨基酸

荔枝核中含有大量的游離氨基酸,王洋[25]采用離子色譜法測(cè)定出了9種氨基酸,分別是精氨酸、賴氨酸、丙氨酸、蘇氨酸、甘氨酸、絲氨酸、組氨酸、苯丙胺酸和酪氨酸,其中蘇氨酸、精氨酸和甘氨酸占總氨基酸含量的64%。黃雪松等[26]在荔枝核的水、醇提取物中共檢出21種游離氨基酸,在王洋的基礎(chǔ)上多出了天冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸、纈氨酸、半胱氨酸、異亮氨酸和亮氨酸等,其中4個(gè)未知,有6種人體必需氨基酸,占總氨基酸的44%。

2 藥理作用

近年來(lái)研究表明,荔枝核具有抗腫瘤、抗病毒、抗炎、降血糖、改善糖脂代謝、抑制乳腺增生以及抗肝損傷等藥理作用[27]。

2.1 抗腫瘤

荔枝核水提物和醇提物、含藥血清以及單體活性成分均具有一定的抑瘤作用,且初步判斷其抗腫瘤藥效成分為黃酮類和四環(huán)二萜類化合物。陳泳暉等[28]發(fā)現(xiàn)荔枝核含藥血清對(duì)小鼠EAC移植性腫瘤、S180移植性腫瘤和肝癌移植性腫瘤均有抑制作用,且抑瘤率分別為31.30%～29.27%、32.53%～29.45%和37.40%～35.11%;同時(shí)發(fā)現(xiàn)荔枝核顆粒劑的抑瘤率微高于荔枝核水提液。Chung等[29]通過(guò)觀察荔枝核提取物對(duì)A549腺癌細(xì)胞和NCI-H661癌細(xì)胞EGFR信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期和凋亡的影響,發(fā)現(xiàn)在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,LCSE能有效地減少癌細(xì)胞的數(shù)量,誘導(dǎo)生長(zhǎng)抑制、細(xì)胞周期停滯和凋亡死亡。Hsu等[30]研究了荔枝核乙醇提取物(LCSP)對(duì)結(jié)直腸癌Colo320dm和SW480細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期和凋亡的影響,結(jié)果表明,LCSP能顯著誘導(dǎo)大腸癌細(xì)胞凋亡,且呈劑量依賴性,抑制了細(xì)胞周期。猜測(cè)其抑瘤作用原理可能與促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡有關(guān),且對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)具有直接的抑制作用。

2.2 抗病毒

近年來(lái),有關(guān)荔枝核抗病毒的報(bào)道并不少見(jiàn),包括單純皰疹病毒、體外抗腺病毒、抗鴨乙肝病毒、流感病毒等多種病原體,且發(fā)現(xiàn)其抗病毒功效僅次于夏枯草,并有多數(shù)報(bào)道指出其抗病毒成分是黃酮類成分,但也有認(rèn)為是荔枝核皂苷類成分在起作用。猜測(cè)可能是由于病原體的不同,起療效的成分也會(huì)有差異。楊艷等[31]研究了荔枝核黃酮類化合物的體外抗腺病毒(Adv)的作用,采用CPE和MTT等方法檢測(cè)黃酮類化合物作用于Adv不同階段的抗病毒作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其TC50和IC50分別為 116.83,15.46 mg/L,且病毒抑制率最高可達(dá)84.31%。推測(cè)其抗Adv具體機(jī)制可能是通過(guò)抑制細(xì)胞內(nèi)某種酶的作用或是通過(guò)干擾線粒體功能影響能量合成從而達(dá)到抗病毒生物合成的作用。王娟等[32]同樣也采用CPE和病毒抑制率確定其體外抗病毒活性,結(jié)果發(fā)現(xiàn),黃酮類成分對(duì)HSV-1有直接的滅活作用。

2.3 抗炎

核因子-кB(NF-кB)是一種對(duì)眾多炎癥因子的轉(zhuǎn)錄具有調(diào)控作用的蛋白質(zhì)分子,而一般在高血糖狀態(tài)下,炎癥因子分泌過(guò)多。研究發(fā)現(xiàn),荔枝核有效部位群可抑制大鼠血清中炎癥因子的分泌,同時(shí)也可抑制大鼠胰腺組織中NF-КB p65蛋白的表達(dá),促進(jìn)IκBα蛋白的表達(dá),可見(jiàn),其可能是通過(guò)NF-кB通路來(lái)抑制炎癥的表達(dá)[33]。秦楠[34]通過(guò)腹腔注射鏈脲佐菌素制備高脂小鼠模型,然后灌胃荔枝核皂苷來(lái)探討其對(duì)炎癥因子的影響,發(fā)現(xiàn)荔枝核皂苷能夠明顯抑制血清中炎癥因子IL-1β、IL-6的表達(dá),同時(shí)抑制了MCP-1和ICAM-1的蛋白表達(dá),這也正是荔枝核抗炎的機(jī)制之一。

2.4 改善糖脂代謝

糖脂代謝異常性疾病主要有糖尿病、胰島素抵抗和高血脂癥等,更有學(xué)者提出2型糖尿病就是一種慢性炎癥疾病,因此抑制了炎癥因子的表達(dá)就可改善糖脂代謝。也有人猜測(cè)其主要是通過(guò)調(diào)節(jié)糖脂代謝過(guò)程中酶的活性及表達(dá),以及腸道菌群等來(lái)實(shí)現(xiàn)的。Li等[35]采用RT-PCR法測(cè)定大鼠胰腺組織中GRP78的mRNA和CHOP的mRNA水平,結(jié)果發(fā)現(xiàn)荔枝核提取物明顯改善T2DM大鼠空腹血糖、血清TG水平和耐糖量。也有學(xué)者研究了荔枝核干預(yù)糖尿病的發(fā)病機(jī)制,采用代謝組學(xué)策略,通過(guò)提高胰島素的mRNA水平降低了胰島素抵抗指數(shù)和尿液中葡萄糖的水平,同時(shí),荔枝核提取物通過(guò)增加葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(Glu)2、glu4、胰島素受體(IR)和紅外底物-2(IRS2)的表達(dá)來(lái)調(diào)節(jié)葡萄糖和脂肪酸的代謝[36]。

2.5 抑制乳腺增生

乳腺增生與內(nèi)分泌失調(diào)密切相關(guān),其多表現(xiàn)為雌激素增多、孕激素降低或者雌孕激素比例失調(diào)等。Lin等[37]探討荔枝核皂苷對(duì)大鼠乳腺增生的影響及雌激素信號(hào)通路的影響,分別測(cè)定乳頭的直徑和高度,檢測(cè)血清雌二醇(E2)和孕激素(P)含量的變化,結(jié)果發(fā)現(xiàn)低劑量組和高劑量組的LSE可以使HMG大鼠乳頭直徑和高度降低,同時(shí)使血清E2的含量降低,血清P含量升高,使乳腺增生得到抑制。其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)雌激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑從而降低雌激素水平有關(guān)。同時(shí)其還進(jìn)一步探討了荔枝核皂苷能顯著下調(diào)乳腺增生大鼠乳腺組織ERα、細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶ERK以及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子VEGF的表達(dá),從而減弱乳腺增生達(dá)到治療目的[38]。

2.6 改善記憶力

2型糖尿病患者常伴有認(rèn)知功能低下及學(xué)習(xí)記憶力降低,Ye等[39]探討荔枝核水提物對(duì)學(xué)習(xí)記憶障礙模型的改善作用及其機(jī)制。通過(guò)采用皮下注射d-半乳糖建立學(xué)習(xí)記憶障礙模型。采用水迷宮試驗(yàn)測(cè)定小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力,檢測(cè)腦組織中晚期糖基化終產(chǎn)物(AGEs)含量、一氧化氮(NO)和乙酰膽堿(ACh)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性和乙酰膽堿酯酶(AChE)活性,結(jié)果得到荔枝核水提物能明顯改善小鼠學(xué)習(xí)記憶能力,降低血清AGEs水平,降低腦組織NO含量和NOS活性。其可能與抑制過(guò)多的衰老和減少腦細(xì)胞損傷有關(guān)。Tang等[40]研究了荔枝核提取物(LSE)對(duì)認(rèn)知障礙大鼠T2DM的神經(jīng)保護(hù)、認(rèn)知功能改善和潛在機(jī)制的影響,采用Morris水迷宮法評(píng)價(jià)了其對(duì)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶的改善作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn),LSE由8種主要成分和20種左右的次要成分組成,對(duì)T2DM大鼠具有明顯的預(yù)防神經(jīng)元損傷和改善認(rèn)知功能的作用。其機(jī)制可能與其改善胰島素抵抗,減輕高胰島素血癥所致的海馬神經(jīng)元損傷、血清中β-淀粉樣蛋白Aβ沉積及Tau蛋白異常磷酸化有關(guān)。

2.7 抗氧化

2.8 抗肝損傷

目前研究認(rèn)為,酒精性肝損傷發(fā)生的機(jī)制是酒精導(dǎo)致的氧化應(yīng)激。Qin等[43]研究了荔枝總黃酮對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1誘導(dǎo)的大鼠肝星狀細(xì)胞核易位的影響,發(fā)現(xiàn)在活化的hsc-t6中,TFL以濃度依賴性的方式抑制了NF-κB的核易位。黃玉影等[44]研究荔枝核有效部位群對(duì)非酒精性脂肪肝的治療作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)SLEC能顯著降低NAFLD大鼠血清TG、LDL-C、NEFA和肝脂質(zhì)含量,提高血清SOD含量。其作用機(jī)制與調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、降低非酒精性脂肪肝水平、改善胰島素抵抗指數(shù)、抗氧化應(yīng)激和下調(diào)肝組織固醇調(diào)節(jié)元件調(diào)節(jié)蛋白-1c基因與蛋白表達(dá)有關(guān)。黃紅等[45]通過(guò)實(shí)驗(yàn)表明TFL可使Smad3、Smad4、TIMP-1蛋白表達(dá)明顯下降,改善大鼠肝纖維化。

3 荔枝核質(zhì)量標(biāo)志物(Q-marker)的預(yù)測(cè)分析

荔枝作為果品,深受人們喜愛(ài),不僅味美,而且營(yíng)養(yǎng)十分豐富,含有大量的果糖、維生素、蛋白質(zhì)、檸檬酸等,對(duì)人體有補(bǔ)益作用。研究表明,荔枝核含有豐富的活性物質(zhì),且含有大量的淀粉,因此可用來(lái)發(fā)酵酒精,而且荔枝核含有花青素及酚類物質(zhì),可作為降血脂功能食品的良好原材料[46]。所以,從某種程度上講,荔枝核也屬于“藥食同源”的產(chǎn)品。為了能夠建立科學(xué)的質(zhì)量控制方法,劉昌孝院士提出了“中藥質(zhì)量標(biāo)志物” 這一概念,它是指:存在于中藥材和中藥產(chǎn)品中固有的次生代謝物,或加工過(guò)程中形成的化學(xué)物質(zhì);來(lái)源于某藥物(飲片)特有的而不是來(lái)源于其他藥材的化學(xué)物質(zhì);有明確的化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性;可以進(jìn)行定性鑒別和定量測(cè)定的物質(zhì);“君”藥首選原則,兼顧“臣”、“佐”、“使”藥的代表性物質(zhì),作為反應(yīng)中藥安全性和有效性的標(biāo)志性物質(zhì)[47]。

3.1 基于不同產(chǎn)地成分含量差異的質(zhì)量標(biāo)志物Q-marker分析

荔枝屬于典型的熱帶、亞熱帶水果,在我國(guó)主要產(chǎn)自于廣西、廣東、海南等省。荔枝核中含有多種化學(xué)成分,如皂苷類、黃酮類、酚酸類、蒽醌類、揮發(fā)油、甾醇、萜類內(nèi)酯、有機(jī)酸及酯、氨基酸肽類、糖類及礦物微量元素等。其中黃酮、皂苷被認(rèn)為是荔枝核主要有效成分。黃曉兵等[48]對(duì)五個(gè)產(chǎn)地荔枝核中藥飲片黃酮、皂苷、多酚等有效成分含量進(jìn)行比較研究,發(fā)現(xiàn)廣東惠東的荔枝核黃酮及多酚含量最高,其次是陽(yáng)西荔枝核,廣西靈山的含量最低。而陽(yáng)西荔枝核的皂苷含量最高,下來(lái)是廣東惠東、從化、東莞、廣西靈山。因此,從荔枝核中的黃酮、多酚以及皂苷含量的高低來(lái)反映出不同產(chǎn)地之間的關(guān)系。故可做荔枝核藥用植物Q-marker篩選的重要參考。

3.2 基于傳統(tǒng)藥性的Q-marker預(yù)測(cè)分析

中藥的性能是對(duì)中藥作用的基本性質(zhì)和特征的高度概括,是中藥基礎(chǔ)理論的核心,包括性味歸經(jīng)、升降浮沉、有無(wú)毒性等問(wèn)題。荔枝核味甘、微苦,性溫,歸肝、胃經(jīng),隨著臨床實(shí)踐和不斷深入,“甘、微苦”不僅是口嘗之味,即“甜中帶點(diǎn)苦味”,而且代表的是功能之味。嚴(yán)永清等[49]研究了460個(gè)常用中藥中172個(gè)甘味藥材,發(fā)現(xiàn)甘味藥材大多會(huì)有糖類、蛋白質(zhì)和氨基酸,生物堿、苷類和有機(jī)酸類次之。根據(jù)以上分析,荔枝核中的多糖類成分應(yīng)是其“甘味”的物質(zhì)基礎(chǔ)。而“苦”味藥材大多含有生物堿,萜類和苷類次之。因此萜類成分應(yīng)是其“苦味”的物質(zhì)基礎(chǔ),應(yīng)將其作為荔枝核Q-marker選擇的重要依據(jù)。

3.3 基于傳統(tǒng)功效Q-marker預(yù)測(cè)分析

荔枝核作為一味傳統(tǒng)中藥,在《本草綱目》中記載著荔枝核具有行氣散瘀、祛寒止疼的功效,可用于治療代謝紊亂、疝痛、腹痛等癥狀。在現(xiàn)代藥理研究中,荔枝核具有降血糖、抗腫瘤、抗氧化等功效[27]。荔枝核中黃酮類成分如喬松素-7-O-β-D-葡萄糖苷、金粉蕨素、槲皮素以及甾醇類如原兒茶醛、原兒茶酸、胡蘿卜苷、β-谷甾醇均具有降血糖的功效[50],且黃酮類成分還具有抗腫瘤和抗病毒的功效[51]。這些化學(xué)成分發(fā)揮的作用與荔枝核傳統(tǒng)功效相對(duì)應(yīng),是荔枝核傳統(tǒng)功效重要的物質(zhì)基礎(chǔ),可以作為荔枝核質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)篩選的重要依據(jù)。

3.4 基于中藥配伍環(huán)境的Q-marker預(yù)測(cè)分析

配伍是中藥運(yùn)用的主要形式,是按一定的原則將兩種以上的藥物配合在一起使用,是為了協(xié)調(diào)藥物偏性、增強(qiáng)藥物療效以及減輕毒副作用,并且同一位味藥材在不同配伍中有著不同的藥效基礎(chǔ)。

3.4.1 藥對(duì)配伍 藥對(duì)配伍就是兩味藥(個(gè)別為三味藥)成對(duì)使用,是臨床上常用的相對(duì)固定的配伍形式,也是中藥配伍運(yùn)用的最小單位?！吨兴幩帉?duì)大全》[52]中記載:“荔枝核-橘核”配伍,荔枝核甘溫,散寒邪作用較強(qiáng),兼能快脾氣,益肝血。橘核溫化散結(jié)。二藥皆性溫入肝經(jīng),均能散滯、消疝、止痛。然而荔枝核偏入血分,橘核偏入氣分。二藥配伍,相須為用,行氣散寒止痛之功大增。臨床上常用于治療小腸疝氣、氣滯淋痛。小茴香-荔枝核配伍用于治療婦女慢性附件炎、慢性盆腔炎。

3.4.2 復(fù)方配伍 中藥復(fù)方是中藥臨床應(yīng)用的主要形式。如荔枝核、土鱉蟲(chóng)、鱉甲、莪術(shù)、赤芍、丹參、烏藥、水蛭、甘草等十味中藥配伍得到荔枝方,具有益氣滋陰、活血祛瘀的功效,治療子宮肌瘤具有很好的效果[53]。陳廣輝等[54]運(yùn)用荔枝核配伍淫羊藿、熟地黃、紫河車、黃精、沙苑子、黃芪、當(dāng)歸等制成養(yǎng)精湯,具有溫陽(yáng)益精、益氣養(yǎng)血、活血通絡(luò)的功效,用于治療精子異常導(dǎo)致的不育癥。

3.4.3 經(jīng)典方配伍 經(jīng)典方源于古代,沿用至今。如荔核散出自《世醫(yī)得效方》[55],由荔枝核、沉香、木香、八角茴香、小茴香、川楝子肉六味中藥配伍組成,具有行氣散結(jié)、祛寒止痛的功效。用于寒凝氣滯之疝氣,陰核腫大等癥。而出自于《婦人良方》[56]中的蠲痛散,是由荔枝核、香附子兩味中藥配伍而成,用于治療婦人血?dú)獯掏?室女月經(jīng)不通。

中藥配伍之后一般有著多方面的療效,而在臨床應(yīng)用中,對(duì)于不同的病癥應(yīng)采用不同的配伍治療。因此,荔枝核質(zhì)量標(biāo)志物的篩選應(yīng)聯(lián)系到其臨床應(yīng)用,對(duì)綜合藥效的有效物質(zhì)群進(jìn)行考慮。

3.5 基于新的藥效用途的Q-marker預(yù)測(cè)分析

目前,荔枝核總黃酮大多在肝纖維化、乙型肝炎病毒方面具有治療作用,但是荔枝核在現(xiàn)代臨床應(yīng)用中,也用于治療腎纖維化疾病,猜測(cè)其可能使腎病大鼠纖維黏連蛋白和Ⅵ型膠原蛋白的表達(dá)有關(guān)。劉淼等[57]證實(shí)了荔枝核總黃酮可以使FN、Col Ⅵ蛋白的表達(dá)下降,從而產(chǎn)生抗腎纖維化作用。因此,應(yīng)將黃酮類化合物作為荔枝核Q-marker的重要參考依據(jù)。

3.6 基于化學(xué)成分的可測(cè)性Q-marker預(yù)測(cè)分析

化學(xué)成分的可測(cè)性是Q-marker確定的另一個(gè)重要依據(jù),目前中藥化學(xué)成分主要通過(guò)色譜來(lái)進(jìn)行測(cè)定[58],荔枝核的Q-marker在色譜上進(jìn)行定性鑒別和定量測(cè)定,便于建立質(zhì)量評(píng)價(jià)方法,制定科學(xué)可行的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

根據(jù)以上分析,黃酮類、多糖類、甾體皂苷類、鞣質(zhì)類和萜類等成分是荔枝核Q-marker的重要選擇。多糖類成分復(fù)雜,由眾多單糖組成,分子量大,其活性部位不明確,而且含量很難直接測(cè)定,目前多采用紫外可見(jiàn)光度計(jì)進(jìn)行多糖含量的測(cè)定,若采用高效液相色譜法測(cè)定則應(yīng)將多糖將降解為單糖,而黃酮類、甾體皂苷、萜類等操作簡(jiǎn)便,可直接采用色譜法進(jìn)行測(cè)定。有學(xué)者對(duì)荔枝核化學(xué)成分進(jìn)行了研究,如甾體皂苷類的β-谷甾醇和原兒茶酸[59-60],萜類化合物的芍藥苷等[53],而對(duì)于荔枝核中較難分離成含量較低的成分,則應(yīng)采取新的檢測(cè)方法。

3.7 基于可入血化學(xué)成分的Q-marker預(yù)測(cè)分析

中藥有效性的控制是質(zhì)量控制的基礎(chǔ),雖然中藥化學(xué)成分的組成十分復(fù)雜,但化學(xué)成分必須吸收入血并達(dá)到一定的血藥濃度才可以在體內(nèi)產(chǎn)生一系列藥理作用或發(fā)揮療效。通過(guò)分析給藥原型成分及其代謝產(chǎn)物,基于化合物-靶點(diǎn)-通路對(duì)其顯效方式進(jìn)行探討,篩選出荔枝核藥效成分。鐘世順等[61]研究荔枝核皂苷在調(diào)節(jié)糖調(diào)節(jié)受損大鼠血流動(dòng)力學(xué)及血脂譜,改善其代謝紊亂及缺氧狀態(tài),并測(cè)定了豆甾醇、對(duì)羥基苯甲醛、胡蘿卜苷和山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷等屬于荔枝核的原型成分,可將此類化合物作為篩選荔枝核Q-marker的重要依據(jù)。

4 結(jié)論

我國(guó)是荔枝栽培最早的國(guó)家,隨著其加工的迅速發(fā)展,荔枝核等副產(chǎn)品必然會(huì)大大增加,再者其屬于傳統(tǒng)中藥,所以今后對(duì)荔枝核的再利用也將成為研究的焦點(diǎn)。我國(guó)中藥種類繁多、成分復(fù)雜,但現(xiàn)行的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中并未對(duì)特定藥材實(shí)行“針對(duì)性”或“專屬性”的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法,從而無(wú)法反映不同藥材之間的“特異性”。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的日益成熟,中藥Q-marker的研究思路和參照方法也越來(lái)越完善。對(duì)荔枝核的質(zhì)量進(jìn)行全面、準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)有利于荔枝核產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。

本文在對(duì)荔枝核化學(xué)成分和藥理作用綜述的基礎(chǔ)上,結(jié)合Q-marker概念,根據(jù)其不同產(chǎn)地間的關(guān)系、臨床新用途、可測(cè)成分、藥性和藥效、入血成分和配伍環(huán)境對(duì)Q-marker的篩選進(jìn)行了預(yù)測(cè)。后期,本課題組還將對(duì)荔枝核Q-marker的預(yù)測(cè)進(jìn)行深入的研究,以便完善荔枝核的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。同時(shí),將廢棄的荔枝核變廢為寶,讓人們體會(huì)到其價(jià)值,不僅可以合理的利用資源且不被浪費(fèi),所以荔枝副產(chǎn)品的深加工將具有很大的社會(huì)意義。