不同保存時間和溫度對血漿凝血Ⅷ、Ⅸ因子活性的影響

李毓龍，張正超，賀臘

（簡陽市人民醫(yī)院檢驗科,四川 簡陽）

0 引言

凝血Ⅷ、Ⅸ因子缺乏是血友病最常見的原因，而新鮮冰凍血漿（Fresh frozen plasma，F(xiàn)FP）恰恰能補充這兩項凝血因子，對于血友病患者出血的止血，Ⅷ、Ⅸ因子具有非常重要的作用。目前FFP常規(guī)運用于臨床手術(shù)輸血患者，適應(yīng)證主要有3類：預(yù)防出血（預(yù)防性輸注）、止血（治療性輸注）和血漿置換[1]。傳統(tǒng)理論認(rèn)為FFP在37℃融化后應(yīng)立即給患者輸注，然臨床治療過程中經(jīng)常因各種原因?qū)е乱讶诨腇FP不能及時輸給患者，且融化后的血漿不能重新冰凍，此時血漿液化狀態(tài)下的保存就至關(guān)重要了。筆者對我市中心血站提供的FFP隨機抽查40份，將融化后的FFP在（4±2）℃、（22±2）℃溫度保存至72h，在不同的時間點進(jìn)行不同保存溫度凝血因子Ⅷ、Ⅸ活性水平檢測，現(xiàn)報告如下。均希森美康醫(yī)用電子（上海）有限公司提供。

1.2 取樣方法

隨機抽取40份FFP（50 mL人份）37℃水浴完全融化后分別置 0、6、12、24、48、72h，嚴(yán)格按無菌操作技術(shù)要求抽取血漿 2mL注入試管內(nèi)，分別放置4℃和22℃冰箱，按照不同保存時間檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計數(shù)資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示，不同時點采取單因素方差分析，采用配對t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

1 材料與方法

1.1 樣本來源

40份FFP均來成都市中心血站，CPD-A 抗凝新鮮血液分離制備而成。實驗儀器：SYSMEX CS5100全自動凝血分析儀。試劑

2.1 FFP融化后在4℃和22℃保存6h，Ⅷ凝血因子活性與0h比較差異無顯著意義(P＞0.05)，但超過12h，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；FFP融化后在4℃和22℃保存24h，Ⅸ凝血因子活性與0h比較差異無顯著意義(P＞0.05)，但超過48h，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表1、表2。

表1 4℃不同保存時間Ⅷ、Ⅸ凝血因子檢測結(jié)果 Mean±SD

表2 22℃不同保存時間Ⅷ、Ⅸ凝血因子檢測結(jié)果 Mean±SD

2.2 兩個不同保存溫度下在同一保存時間點Ⅷ因子活性幾乎相同，完全線性先關(guān)，相關(guān)度r=0.999，線性方程為y=1.0005x-0.0274（見圖1）；兩個不同保存溫度下在同一保存時間點Ⅸ因子活性幾乎相同，完全線性先關(guān)，相關(guān)度r=0.999，線性方程為y=1.0003x-0.018（見圖2）。

圖1 Ⅷ因子活性相關(guān)性

圖2 Ⅸ因子活性相關(guān)性

3 討論

新鮮冰凍血漿（FFP）是臨床輸血治療中最常用的成分血之一，是指采血后6-8h內(nèi)在4℃左右下離心分離，速凍并保存于-18℃以下的血漿[2]。如今，成分輸血在臨床運用極其廣泛，F(xiàn)FP大量運用于凝血因子缺乏[3]、彌散性血管內(nèi)凝血[4]、血栓性血小板減少性紫癜[5]、華法林效應(yīng)的逆轉(zhuǎn)[6]、嚴(yán)重肝臟疾病[7]、外科出血[8]等患者。FFP是臨床上凝血因子缺乏尤其是Ⅷ、Ⅸ因子缺乏的血友病等疾病的替代療法。隨著技術(shù)的發(fā)展和醫(yī)療的便、宜，同臨床上大多數(shù)血液制品一樣，F(xiàn)FP的使用日益增多，其不合理使用以及輸注后導(dǎo)致的感染和非感染性危險越來越受到關(guān)注[9]。本研究通過對不同的時間點進(jìn)行不同保存溫度凝血因子Ⅷ、Ⅸ活性水平檢測，旨在探討FFP融化后的臨床應(yīng)用，以期達(dá)到臨床療效，減少無效輸注率。

FⅧ是不穩(wěn)定因子，本次實驗結(jié)果表明：隨著時間的延長其活性明顯降低，在融化后12h活性下降明顯，這與FⅧ因子在體外半衰期只有12-24h有關(guān)[10]；FⅨ是穩(wěn)定因子，在融化后6、12、24h保存其活性下降不明顯，48h后FⅨ活性下降明顯。本研究結(jié)果同時表明凝血因子Ⅷ、Ⅸ在4和22℃保存時活性水平衰減無差異，與文獻(xiàn)報道基本一致[2][11]。所以，臨床手術(shù)輸血治療過程中，需要輸注FFP時，應(yīng)在其融化后盡快輸注為好。在沒有新鮮冰凍血漿或新鮮冰凍血漿緊缺的情況下，如果輸注目的是為了補充凝血因子Ⅷ、Ⅸ，可以用冷沉淀來替代FFP進(jìn)行治療。在輸血工作中時若出現(xiàn)FFP融化后不能及時輸給患者，只有在融化后6h內(nèi)輸注以糾正Ⅷ因子缺乏是最有效的。因為新鮮冰凍血漿融化后凝血因子活性隨放置時間的不同呈下降趨勢，所以這要求我們臨床醫(yī)務(wù)工作者在新鮮冰凍血漿融化后盡快輸注，這樣才能有效地補充患者凝血因子，做到避免血液成分的浪費，達(dá)到止血的目的，以確保臨床治療的最佳效果。