血清HE4檢測在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的臨床應(yīng)用

熊戌霞，蔡偉鵬，房綺梅，王英

(中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院檢驗科，廣東 廣州）

0 引言

乳腺癌是目前威脅全世界女性健康的惡性腫瘤之一，近年來乳腺癌在中國的發(fā)病率逐年上升并有年輕化趨勢，嚴(yán)重危害女性健康，已成為當(dāng)今社會重大公共衛(wèi)生問題[1]。腫瘤標(biāo)志物也廣泛用于評價治療療效，早期診斷復(fù)發(fā)和評價預(yù)后中。在乳腺癌中，最常用腫瘤標(biāo)志物CA153，但它的敏感性和特異性也相對較低，多種腫瘤標(biāo)志物也被研究，但是沒有在臨床實踐中應(yīng)用[2,3]。

人附睪上皮分泌蛋白4（HE4）是近年來研究比較熱門的一種新型腫瘤標(biāo)志物，研究發(fā)現(xiàn)人附睪蛋白4（HE4）在乳腺癌組織中也表達(dá)[4]，但其在血清中的表達(dá)水平，以及其在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的臨床應(yīng)用價值研究甚少，本研究擴(kuò)大了血清樣本量，進(jìn)一步探討HE4在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的表達(dá)，并分析其臨床應(yīng)用價值。

1 材料和方法

1.1 一般資料

收集2016年12月至2017年8月在中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院初次診斷為乳腺腫物的住院女性患者的血清，所有患者全部經(jīng)空心針穿刺或組織病理確診，其中乳腺良性疾病患者77例（包括乳腺囊性增生癥、乳腺纖維腺瘤、導(dǎo)管瘤、乳腺炎性病變等），平均（39.6±11.6）歲；乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者200例，平均（50.2±10.9）歲，腫瘤分期均按NCCN2007年修訂的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行TNM分期；另選取91例健康女性為健康對照組，平均（41.3±11.8）歲，均為隨機(jī)選取健康女性。

通過病例系統(tǒng)以及病理系統(tǒng)查詢診斷為乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者的臨床病理資料，包括患者年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、腫瘤大小、TNM分期以及ER、PR、HER2狀態(tài)。剔除標(biāo)準(zhǔn)：手術(shù)前進(jìn)行過化療放療患者，合并其他癌癥的患者以及資料不全者。

1.2 方法

所有研究對象均抽取清晨空腹靜脈血3mL，待血凝固后分離血清（-20℃保存），采用電化學(xué)發(fā)光免疫檢測法檢測血清HE4水平。使用儀器為Cobas e602型全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)。以上所有操作步驟嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析，呈偏態(tài)分布數(shù)據(jù)用中位數(shù)表示，3組數(shù)據(jù)間比較用非參數(shù)Kruskal-Wallis（H檢驗），兩兩之間的比較用Mann-Whitney （U檢驗），采用受試者工作特征（ROC）曲線確定臨界值。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組與乳腺良性疾病組及正常對照組血清HE4水平

乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組、乳腺良性疾病組和正常對照組間HE4水平（見表1），三組間HE4水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義（H=39.213，P＜0.01），乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組HE4中位數(shù)明顯高于正常對照組和乳腺良性疾病組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。經(jīng)過兩兩比較，正常對照組與乳腺良性疾病組之間HE4水平，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；正常對照組與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌之間HE4水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義，乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組HE4含量明顯高于正常對照組（P＜0.05）；乳腺良性疾病組與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組之間HE4水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義，乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組HE4含量明顯高于乳腺良性疾病組（P＜0.05）。

表1 3組間HE4水平[中位數(shù)(四分位數(shù))]

2.2 血清HE4水平與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌臨床病理特征之間的關(guān)系

HE4的水平與患者年齡、月經(jīng)狀態(tài)、腫瘤大小、淋巴結(jié)狀態(tài)、臨床分期以及ER和PR狀態(tài)有明顯相關(guān)（P＜0.05）。HE4水平與HER2狀態(tài)無關(guān)（P＞0.05）。

表2 乳腺浸潤性導(dǎo)管癌臨床病理特征與患者血清HE4水平的關(guān)系

2.3 確定Cut-off(臨界值)

根據(jù)200例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者和168例非乳腺浸潤性導(dǎo)管癌對照者血清HE4的檢測結(jié)果，用ROC曲線計算約登指數(shù)最大時對應(yīng)的值，即為Cut-off值。測得HE4的ROC曲線下方的區(qū)域為 0.672，臨界值為 55.15pmol/L（P＜0.05），見圖 1。

圖1 乳腺浸潤性導(dǎo)管癌癌患者HE4的ROC曲線

3 討論

血清腫瘤標(biāo)志物在惡性腫瘤的應(yīng)用，除了可以協(xié)助診斷之外，對于惡性疾病的早期篩選，療效評價，復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移監(jiān)測及預(yù)后評估等方面發(fā)揮著重要作用，對提高患者的生存率和生存質(zhì)量上有極為重要的意義[5]。乳腺浸潤性導(dǎo)管癌在乳腺癌發(fā)病中所占比例最高，它的復(fù)發(fā)和預(yù)后主要受臨床病理分期和臨床病理特征所影響，本文主要通過研究血清HE4水平在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌臨床病理中表達(dá)，并探討其在臨床應(yīng)用。

人附睪分泌蛋白4（HE4）屬于乳清酸性4-二硫化中心（WFDC）蛋白家族，是新近提出的腫瘤標(biāo)志物，首先由Kirchhoff等[6,7]學(xué)者在附睪組織中發(fā)現(xiàn)，是具有免疫保護(hù)作用的蛋白酶抑制劑家族，正常人中僅在附睪、呼吸道上皮細(xì)胞、唾液腺及生殖道表達(dá)。HE4也在眾多腫瘤中高表達(dá)，對卵巢漿液性癌、子宮內(nèi)膜癌、肺癌和乳腺癌等疾病早期診斷和檢測復(fù)發(fā)具有重要作用[8,9]，多項研究表明[10,11]HE4是乳腺癌新的腫瘤標(biāo)志物及預(yù)后監(jiān)測指標(biāo)。HE4的表達(dá)與乳腺癌淋巴結(jié)浸潤有關(guān)，并且可能是乳腺癌復(fù)發(fā)的一個預(yù)測因素[12]。本研究發(fā)現(xiàn)乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者HE4水平與患者年齡、月經(jīng)狀態(tài)相關(guān)（P＜0.05）且HE4高表達(dá)時，預(yù)示著乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者腫瘤較大、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移可能性高，臨床分期較高（P＜0.05）,對患者進(jìn)行HE4的監(jiān)測，利于術(shù)后早期復(fù)發(fā)的檢測，提高患者生存質(zhì)量。

乳腺是ER、PR的靶器官，ER、PR是調(diào)節(jié)性器官細(xì)胞生長發(fā)育的雌激素和孕激素受體，在正常乳腺上皮細(xì)胞及乳腺癌細(xì)胞內(nèi)均含有雌二醇受體和孕激素受體。ER、PR是乳腺癌重要預(yù)測激素。乳腺癌ER、PR陽性表達(dá)說明其分化程度高，惡性度低，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移慢，預(yù)后好，對各種治療尤其是內(nèi)分泌治療敏感性高[13]。本研究發(fā)現(xiàn)乳腺浸潤性導(dǎo)管癌ER、PR陽性狀態(tài)時HE4表達(dá)水平更低（P＜0.05），有利于乳腺癌的療效及預(yù)后判斷。

本研究用ROC曲線，以良性組及正常組為參照，發(fā)現(xiàn)HE4在55.15pmol/L時診斷指數(shù)最大，靈敏度和特異性分別為53.5%和74.4%，AUCROC為0.672。本研究結(jié)果與蔡徐山等[14,15]研究結(jié)果（以62.5pmol/L為界限值）相似，差異可能與研究對象和樣本量有關(guān)。

綜上所述，血清HE4檢測在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌治療及預(yù)后判斷，術(shù)后早期復(fù)發(fā)以及高危人群隨訪等有重要的臨床意義。