免疫組織化學(xué)檢測(cè)在NSCLC鑒別診斷中的應(yīng)用

程化朋

據(jù)相關(guān)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，近幾年肺癌的發(fā)病率在全球范圍內(nèi)表現(xiàn)為上升的趨勢(shì)，并且擁有極高的致死率，在惡性腫瘤致死的患者中，肺癌在男性患者和女性患者中分別占到第一位和第三位。雖然現(xiàn)階段人們明確認(rèn)知到煙草所具備的危害性，但我國(guó)煙民總數(shù)仍處于較高水平，對(duì)于年齡超過(guò)40歲的男性而言，肺癌仍為重要致死因素[1]。作為惡性腫瘤疾病之一，肺癌的診斷往往具有一定的滯后性，多數(shù)患者都是肺癌晚期才得以確診，而且以活檢小標(biāo)本為主要獲取源，其中約有50%左右無(wú)法準(zhǔn)確分型非小細(xì)胞癌組織學(xué)[2]，分子靶向治療時(shí)代的來(lái)臨，組織學(xué)分型面臨著巨大的挑戰(zhàn)，對(duì)此，WHO提出，免疫組化在肺癌組織分型中具有積極意義[3-4]。所以本次以我院于2018年1月—2019年8月期間經(jīng)病理檢查確診為非小細(xì)胞肺癌的120例患者為研究對(duì)象，通過(guò)免疫組化Envi-sion二步法展開(kāi)如下研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以我院于2018年1月—2019年8月期間經(jīng)病理檢查確診為非小細(xì)胞肺癌的120例患者為研究對(duì)象，納入標(biāo)準(zhǔn)：患者或其家屬了解并授權(quán)本次研究；排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）檢查前存在放化療史；（2）存在靶向治療史；本研究通過(guò)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核；120例患者中包括男性93例，女性27例，年齡區(qū)間為33歲～77歲，均值（61.34±10.20）歲；其中鱗癌組59例，腺癌組61例。

1.2 方法

以4%中性甲醛對(duì)所有標(biāo)本固定，常規(guī)石蠟包埋切片，HE染色對(duì)其組織形態(tài)進(jìn)行觀察，通過(guò)免疫組化Envi-sion二步法檢測(cè)，以PBS代替一抗充當(dāng)陰性對(duì)照，而陽(yáng)性對(duì)照則為已知陽(yáng)性片，EDTA抗原熱修復(fù)切片，然后滴加TTF-1、NapsinA、P63以及CK5/6一抗，常規(guī)孵育、洗滌，然后取DAKO提供的辣根過(guò)氧化物酶滴加，充當(dāng)二抗，常規(guī)孵育，DAB顯色之后，對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行復(fù)染，然后脫水、封片、鏡檢。

1.3 觀察指標(biāo)

分析腺癌、鱗癌患者的蛋白表達(dá)情況，包括TTF-1、NapsinA、P63以及CK5/6。判定標(biāo)準(zhǔn)如下：無(wú)色或是陽(yáng)性細(xì)胞分＜10%，記作0分；淺黃色、黃色，或是陽(yáng)性細(xì)胞分區(qū)間為10%-50%，記作1分；棕黃色，或是陽(yáng)性細(xì)胞分＞50%，記作2分；若兩項(xiàng)結(jié)果超過(guò)2分，屬于陽(yáng)性，反之為陰性[5]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本次研究所采用的統(tǒng)計(jì)學(xué)工具為SPSS 19.0，研究數(shù)據(jù)記錄形式以計(jì)數(shù)資料為參考，即例數(shù)/百分比（n/%），經(jīng)χ2檢驗(yàn)，若結(jié)果顯示P＜0.05，則判定差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義存在。

2 結(jié)果

腺癌組患者在TTF-1、NapsinA方面的陽(yáng)性表達(dá)率更高，而鱗癌組患者在P63、CK5/6方面的陽(yáng)性表達(dá)率更高，二者對(duì)比，組間差異存在明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。如表1。

3 討論

作為世界范圍內(nèi)發(fā)生率較高的一種惡性腫瘤類疾病，肺癌對(duì)人們生命安全具有較高的威脅性，據(jù)有關(guān)資料統(tǒng)計(jì)[6]，現(xiàn)階段，肺癌在我國(guó)的發(fā)生率以及致死率均居于癌癥首位。而肺癌患者中，約有80%左右為非小細(xì)胞肺癌，常見(jiàn)的包括大細(xì)胞癌、鱗癌以及腺癌，近些年，有關(guān)腺癌、鱗癌的臨床鑒別逐漸受到關(guān)注，分析原因，主要包括兩個(gè)方面：其一，近十年，隨著醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展，肺癌分子靶向治療面臨著更高的要求，例如腺癌普遍存在基因活化情況，而晚期鱗癌普遍存在PD-1單抗Nivolumab[7-8]；其二，只有非鱗非小細(xì)胞肺癌才能接受培美曲塞、貝伐單抗等藥物的治療，若患者為鱗癌，誤用上述藥物，會(huì)出現(xiàn)重度不良反應(yīng)，嚴(yán)重的甚至?xí)滤繹9]。對(duì)此，WHO提出，免疫組化在肺癌組織分型中具有積極意義，認(rèn)為患者的TTF-1、P63均呈現(xiàn)陰性結(jié)果，有很高的特異性可以認(rèn)定為腺癌[10]；若TTF-1呈現(xiàn)陰性，P63呈現(xiàn)陽(yáng)性，則屬于鱗癌；若TTF-1、P63均呈現(xiàn)陽(yáng)性，需要檢測(cè)患者的CK5/6，若為陰性結(jié)果，且TTF-1、P63比值較低，認(rèn)為鱗癌可能性較大[11]；而NapsinA也具有較高的特異性，若腺癌患者TTF-1呈現(xiàn)陰性低分，NapsinA常見(jiàn)于陽(yáng)性[12]?；谏鲜鲅芯坷碚?，本次以我院于2018年1月—2019年8月期間經(jīng)病理檢查確診為非小細(xì)胞肺癌的120例患者為研究對(duì)象，通過(guò)免疫組化Envision二步法展開(kāi)研究，結(jié)果顯示，腺癌組患者在TTF-1、NapsinA方面的陽(yáng)性表達(dá)率更高，而鱗癌組患者在P63、CK5/6方面的陽(yáng)性表達(dá)率更高，二者對(duì)比，組間差異存在明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。可見(jiàn)通過(guò)對(duì)肺癌活檢標(biāo)本進(jìn)行免疫組化檢測(cè)，可以有效鑒別非小細(xì)胞肺癌分型。

表1 腺癌、鱗癌患者蛋白表達(dá)陽(yáng)性率對(duì)比[例（%）]

綜上所述，以免疫組織化學(xué)檢測(cè)方法檢測(cè)肺癌活檢標(biāo)本，觀察非小細(xì)胞肺癌中蛋白的具體表達(dá)，可以有效鑒別鱗癌、腺癌，提供確診率，有利于患者的后期治療。