靈芝多糖對運動疲勞及運動性免疫抑制影響*

李曉勇

（中原工學(xué)院信息商務(wù)學(xué)院，河南 鄭州 451191）

靈芝（Ganoderma lucidum Karst）是擔(dān)子菌門（Basidiomycota） 擔(dān)子菌綱（Basidiomycetes） 多孔菌科（Polyporales）真菌，菌蓋大部分是半圓形，形狀與腎形沒明顯差異，外形為傘狀，中國福建、湖南、廣西以及吉林等地盛產(chǎn)[1]。靈芝的功效包括補氣安神、強身健體等，往往用來診治心悸氣喘、頭暈?zāi)垦；颊遊1]。而靈芝多糖是靈芝的活性物質(zhì)，而主要成分為靈芝多糖的保健品，在治療腫瘤、神經(jīng)衰弱、免疫力較差的患者時，療效較佳[2]。

1 材料與方法

1.1 靈芝多糖的提取

根據(jù)泰山制藥廠靈芝多糖口服液提取流程進(jìn)行靈芝多糖的試驗室提取。靈芝粉末1 kg，以醇溶法去除脂質(zhì)，并對糖苷酶活性產(chǎn)生制約；以水提法完成靈芝多糖的提取，根據(jù)1∶20的原則于95℃熱水內(nèi)進(jìn)行3 h的浸提處理，重復(fù)3次。完成后，混勻3次所得浸提液，以真空凍干法完成濃縮處理，并且借助95%乙醇進(jìn)行15 h的濃縮液抽提操作，之后以離心操作完成沉淀的收集處理。采取真空干燥最終得到靈芝多糖粗提物。純化靈芝多糖粗提物，將雜蛋白剔除，于多糖溶液內(nèi)添加三氯甲烷與正丁醇，在0.5 h內(nèi)不斷振蕩，以離心操作處理之后，分離白色沉淀，并且完成脫鹽處理，此操作借助硼酸型DEAE株完成，之后可獲得純度較高的多糖，用苯酚-硫酸法對多糖水平進(jìn)行檢測，結(jié)果可知靈芝多糖純度超過99.5%。

1.2 靈芝多糖口服液的制備

根據(jù)泰山制藥廠的技術(shù)完成靈芝多糖口服液的整個制備流程，并且和吉林某醫(yī)療機構(gòu)共同協(xié)作，完成靈芝多糖含量為10 g·mL-1的靈芝多糖口服液研發(fā)與制備，同時研制了安慰劑口服液，其氣味、顏色以及口感與靈芝多糖口服液一致[3]。

1.3 靈芝多糖口服液動物試驗

于吉林省藥品檢驗所用小鼠進(jìn)行該試驗，根據(jù)研究可知，靈芝多糖口服液能夠顯著提升小鼠血紅蛋白水平，減小血乳酸水平及腦組織中自由基水平，并且能夠顯著強化小鼠免疫因子的活性與表達(dá)，試驗小鼠未產(chǎn)生相關(guān)并發(fā)癥[4]。

1.4 試驗對象

由中原工學(xué)院校自行車男隊與女隊內(nèi)抽選60人，并根據(jù)隨機分組的原則，將30人分為試驗組，另外30人分為對照組，試驗組內(nèi)包括10名女運動員、20名男運動員，年齡均值為（21±1.5） 歲；對照組內(nèi)包括11名女運動員與19名男運動員，年齡均值為（21±1.2） 歲。試驗組與對照組運動員都已經(jīng)接受過超過1年的專業(yè)自行車訓(xùn)練，年級都在大二或大二以上，這就意味著所有運動員都能夠適應(yīng)連續(xù)3個月的自行車專業(yè)訓(xùn)練。試驗組與對照組在一般資料上并不存在明顯差異（P>0.05）。

1.5 試驗方法

試驗組服用靈芝多糖口服液，劑量為10 mL，服藥頻次是2次/d，服藥時間是每天的早飯與晚飯后，連續(xù)口服6 d后，暫停服用1 d，按照此規(guī)律服用90 d。對照組口服安慰劑，劑量、治療周期、療程與試驗組一致。

1.6 訓(xùn)練方法

試驗組與對照組都接受90 d備賽培訓(xùn)，接受5 d的運動訓(xùn)練后，暫停訓(xùn)練1 d，并且將訓(xùn)練時間控制在8 h·d-1，主要針對常規(guī)自行車項目進(jìn)行訓(xùn)練，并且鍛煉運動員的力量能力，展開拉伸鍛煉。在訓(xùn)練之后的第1天、第15天與第30天都在空腹情況下進(jìn)行靜脈血的抽取，試驗室中進(jìn)行血液各項指標(biāo)的檢測[5]。檢測內(nèi)容是固定功率自行車的負(fù)重競賽，開始時運動員負(fù)荷的重量是50 kg，之后每分鐘增加10 kg，并且將騎行速度控制在60 r·min-1，當(dāng)運動員精力耗盡到不能維持60 r·min-1的騎速時，即停止[6]。將所有運動員的最大負(fù)荷功率與騎行時間、定量負(fù)荷心率詳細(xì)記錄。運動員總作功數(shù)借助自行車自動工具完成檢測，而遠(yuǎn)程心率則通過無線心率遙測儀進(jìn)行。為了能夠使得試驗方案的可執(zhí)行性得到保障，并且提升檢測的可靠性與所得結(jié)果的準(zhǔn)確性，由1名教練針對4名運動員的訓(xùn)練方案執(zhí)行效果進(jìn)行監(jiān)督。

1.7 身體基本數(shù)據(jù)檢測

完成自行車專業(yè)訓(xùn)練之后，針對試驗組與對照組運動員的各項體征指標(biāo)進(jìn)行檢測，其中就涵蓋心率、體重、肌肉水平、體脂率等[7]。

1.8 免疫指標(biāo)檢測

T淋巴細(xì)胞區(qū)別于B淋巴細(xì)胞的獨特標(biāo)志是前者表面有CD2分子，即為紅細(xì)胞受體（ER），這種受體能與動物的紅細(xì)胞結(jié)合形成玫瑰花結(jié)，稱E-玫瑰花環(huán)實驗。E-玫瑰花環(huán)試驗中常用的是總花環(huán)（Et）試驗和活性花環(huán)（Ea）試驗，完成Et-總花環(huán)測試以及Ea-總花環(huán)形成測試，以雙抗夾心ELISA法進(jìn)行血漿內(nèi)IgA、IgM、IgG水平的檢測。

1.9 統(tǒng)計學(xué)分析

2 試驗結(jié)果

2.1 一般資料比較

試驗組和對照組運動員訓(xùn)練結(jié)束后資料對比情況見表1。

從表1可以看出，90 d運動訓(xùn)練完成之后，所有運動員的體重都沒有顯著改變（P>0.05），試驗組相對于訓(xùn)練之前，體脂率顯著降低（P<0.05），相較于對照組而言，也明顯降低（P<0.05）。試驗組肌肉水平相對于專業(yè)訓(xùn)練之前有顯著提升，相較于對照組而言，也有顯著提升（P<0.05）。

表1 兩組運動員在訓(xùn)練結(jié)束后一般資料對比情況Tab.1 Comparison of general information between the two groups of athletes after training

2.2 運動訓(xùn)練效果對比分析

完成訓(xùn)練之后，所有運動員最長負(fù)荷時間、總做功、最大負(fù)荷心率、平均心率都產(chǎn)生顯著改善（P<0.05），并且相對于對照組而言，試驗組平均心率顯著減小（P<0.05），總作功顯著提升（P<0.05），最大負(fù)荷心率顯著提升（P<0.05），最長負(fù)荷時間顯著增大（P<0.05），具體研究數(shù)值如表1所示。

2.3 血紅蛋白和血乳酸水平對比分析

2組運動員在服藥前后中血紅蛋白量的對比數(shù)值如表2所示。

表2 兩組運動員在服藥前后中血紅蛋白量的對比情況Tab.2 Comparison of hemoglobin levels between the two groups before and after taking the drug

從表2可知，完成訓(xùn)練之后，所有運動員血漿內(nèi)血紅細(xì)胞體積比、血紅蛋白水平、血乳酸都相對于訓(xùn)練之前存在明顯的差異（P<0.05），試驗組血紅蛋白水平相對于對照組而言，顯著提升（P<0.05）；試驗組血細(xì)胞體積比相對于對照組顯著提升（P<0.05），試驗組血乳酸水平顯著減?。≒<0.05）。試驗組血乳酸水平相對于專業(yè)訓(xùn)練開始之前顯著減小，但是對照組則相對于專業(yè)訓(xùn)練之前出現(xiàn)稍微提升的情況。

2.4 免疫學(xué)指標(biāo)對比分析

完成專業(yè)訓(xùn)練之后，所有運動員的Et-總花環(huán)與Ea-總花環(huán)含量相對于專業(yè)訓(xùn)練之前都明顯減?。≒<0.05），試驗組也明顯優(yōu)于對照組（P<0.05），具體數(shù)值如下表3所示。

從表3可以看出，所有運動員血漿內(nèi)IgG、IgM、IgA水平與專業(yè)訓(xùn)練之前存在較大的差異（P<0.05），并且相對于對照組而言，試驗組運動員提升的程度更加明顯（P<0.05）。

表3 兩組運動員在花環(huán)形成數(shù)據(jù)及免疫學(xué)指標(biāo)的對比Tab.3 Comparison of the garland formation data and immunological indexes between the two groups of athletes

3 結(jié)論

經(jīng)專業(yè)訓(xùn)練后，血紅蛋白水平恢復(fù)到正常水平，表明運動員已經(jīng)對運動強度產(chǎn)生良好的適應(yīng)性，運動員運動能力也顯著增強[9]。在大部分體能性鍛煉中，運動員血漿中血紅蛋白水平其實和運動員的身體狀態(tài)存在較大關(guān)聯(lián)性，若是運動員的血紅蛋白水平相對較高，訓(xùn)練效果更佳[10]。本研究中，試驗組與對照組體重并未產(chǎn)生較大改變，但是相對于對照組來說，試驗組體脂率顯著減小，肌肉水平明顯提升，這就表示靈芝多糖不但能夠使得體重得到保持，還能夠減小脂肪含量，進(jìn)而實現(xiàn)肌肉密度的提升[11]。給予運動員靈芝多糖后，其負(fù)荷運動時間、功率自行車總作功、運動心率以及最大負(fù)荷運動心率都顯著提升，這就表示靈芝多糖能夠顯著強化心肺功能，進(jìn)而增強運動員的運動綜合實力。