玉米皮替代玉米粉對湘東黑山羊內(nèi)臟脂肪組織脂肪代謝的影響

王琪　駱東梅　王榮　楊大盛　文江南　王敏　韓雪峰　譚支良

摘要：【目的】明確玉米皮替代玉米粉對山羊脂肪代謝的影響，為玉米皮在反芻動物養(yǎng)殖生產(chǎn)中的合理應(yīng)用提供參考依據(jù)。【方法】選擇10月齡左右、體重（17.50±2.67 kg/只）相近的健康雄性湘東黑山羊20只，隨機分成2組[玉米粉組（CM組）和玉米皮（CG組）]，每組10只。山羊日糧精粗比為75∶25，CM組飼喂基礎(chǔ)飼糧，CG組飼喂以玉米皮完全替代玉米粉的試驗飼糧。飼喂60 d后進行屠宰，迅速采集網(wǎng)膜脂肪組織（簡稱網(wǎng)膜脂）、腸系膜脂肪組織（簡稱系膜脂）和腎周脂肪組織（簡稱腎周脂），通過Agilent 7890A氣相色譜儀和實時熒光定量PCR檢測其脂肪酸組成及脂肪代謝相關(guān)基因的表達情況?！窘Y(jié)果】與CM組相比，CG組山羊網(wǎng)膜脂中的豆蔻酸（C14：0）、十七烷酸（C17：0）、硬脂酸（C18：0）、反式油酸（C18：1n9t）及花生酸（C20：0）含量顯著（P<0.05，下同）或極顯著（P<0.01，下同）上升;系膜脂中的十七烷酸和α-亞麻酸（C18：3n3）含量顯著上升，肉豆蔻酸含量顯著下降;而腎周脂的脂肪酸組成無顯著變化（P>0.05，下同）。山羊內(nèi)臟脂肪的飽和脂肪酸總含量、單不飽和脂肪酸總含量及多不飽和脂肪酸總含量在CG組與CM組間均無顯著差異。在脂肪代謝相關(guān)基因表達方面，與CM組相比，CG組山羊網(wǎng)膜脂中的乙酰輔酶A羧化酶基因（ACC）極顯著上調(diào)表達;系膜脂中的脂肪酸去飽和酶1基因（FADS1）極顯著下調(diào)表達，鋅指蛋白類轉(zhuǎn)錄因子2（KLF2）、鋅指蛋白類轉(zhuǎn)錄因子4（KLF4）、膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1基因（SREBP1）則顯著上調(diào)表達;腎周脂中的SREBP1基因極顯著下調(diào)表達。【結(jié)論】以玉米皮替代玉米粉會不同程度地影響湘東黑山羊內(nèi)臟脂肪組織中某些脂肪酸含量及脂肪代謝相關(guān)基因表達，但對內(nèi)臟脂肪組織的飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸及多不飽和脂肪酸含量均無顯著影響，即以玉米皮代替玉米粉對山羊內(nèi)臟脂肪組織脂肪酸組成的總體影響較小，可在實際生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。

關(guān)鍵詞： 湘東黑山羊;玉米皮;玉米粉;脂肪酸組成;脂肪代謝相關(guān)基因

中圖分類號： S816.41? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標志碼： A 文章編號：2095-1191（2020）12-3049-08

Abstract：【Objective】The objective of this study was to investigate the effects of replacing corn meal with corn gluten on fat metabolism of goat， and to provide reference for the application of corn gluten in ruminant production. 【Method】Twenty healthy male Xiangdong black goats with similar body weight（17.50±2.67 kg/goat）and age（10 months） were randomly divided into two groups[corn meal（CM） group and corn gluten（CG） group）] of 10 each. The roughage to concentrate ratio was 75∶25. The CM group was fed with basic diet， and the CG group was fed with the experimental diet in which the corn meal was completely replaced with the corn gluten. After 60 d of feeding， goats were slaughtered， and the omental adipose tissue（OM）， mesenteric adipose tissue（ME） and perirenal adipose tissue （PE） were sampled quickly. Agilent 7890A gas chromatograph and real-time fluorescence quantitative PCR were used to detect the fatty acid composition and the expression of genes related to fat metabolism. 【Result】Compared with the CM group， the myristic acid （C14：0）， heptadecanoic acid （C17：0）， stearic acid （C18：0）， transoleic acid （C18：1n9t） and arachidic acid （C20：0） content in OM of CG group increased significantly（P<0.05， the same below） or extremely significantly（P<0.01， the same below）; heptadecanoic acid and α-linolenic acid（C18：3n3） content in ME significantly increased， myristic acid content significantly decreased; the fatty acid composition of PE did not significantly change（P>0.05， the same below）. The saturated fatty acids， monounsaturated fatty acids and polyunsaturated fatty acids of goat visceral fat were not significantly different between CG and CM group. In terms of fat metabolismrelated gene expression， compared with the CM group， the gene expression of the acetyl-coenzyme A carboxylase（ACC） in OM of the CG group up-regulated extremely significantly; the gene expression of fatty acid desaturase 1（FADS1） in ME was significantly down-regulated，and the gene expression of Krüppel-like factor 2（KLF2）， Krüppel-like factor 4（KLF4）， sterol regulatory element binding protein-1（SREBP1） were significantly up-regulated; the expression of SREBP1 gene in PE was extremely significantly down-regulated. 【Conclusion】Replacing corn meal with corn gluten affects with varying degrees the content of certain fatty acids in visceral adipose tissue and the expression of fat metabolism related genes， but has no significant effect on the contents of saturated fatty acids， monounsaturated fatty acids and polyunsaturated fatty acids. Generally，replacing corn meal with corn gluten has little effect on the overall fatty acid composition of goat visceral fat， and can be applied in ruminant production.

Key words： Xiangdong black goat; corn gluten; corn meal; fatty acid composition; genes related to fat metabolism

Foundation item： National Natural Science Foundation of China（31872386）; National Science and Technology Support Program（2018YFD0501800）

0 引言

【研究意義】我國是玉米種植大國，也是玉米加工大國，其生產(chǎn)加工的產(chǎn)品已廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥及食品等行業(yè)。世界上70%～75%的玉米被應(yīng)用于飼料加工，而我國玉米需求總量的78%用作畜禽飼料（宋振華等，2019）。玉米在加工過程中會產(chǎn)生大量的副產(chǎn)品，包括玉米皮、玉米胚芽粕、酒糟及其可溶物等（王玉強等，2019），其中玉米皮產(chǎn)量最高，占玉米加工總量的20%（楊小倩等，2019）。玉米皮的主要成分是纖維和蛋白質(zhì)等，且蛋白質(zhì)含量較高，具有一定營養(yǎng)價值。因此，根據(jù)玉米皮的營養(yǎng)組成及反芻家畜能有效消化利用飼料中粗纖維的特點，將玉米皮應(yīng)用于反芻動物日糧生產(chǎn)，不僅可提高玉米的綜合利用率，增加產(chǎn)品附加值，還能降低反芻家畜養(yǎng)殖的飼料成本。【前人研究進展】反芻動物日糧中的淀粉和纖維含量變化會影響機體脂肪酸組成（段智勇，2006）。Beckman和Weiss（2005）研究發(fā)現(xiàn)，隨著日糧中性洗滌纖維與淀粉的比例上升，荷斯坦奶牛乳中的乳脂率也隨之上升;Rossi等（2016）研究證實，飼喂高淀粉日糧（>25%）能降低公牛肌肉中的飽和脂肪酸含量，增加不飽和脂肪酸含量;Oliveira等（2017）研究發(fā)現(xiàn)，與高淀粉日糧（50%）相比，飼喂中淀粉日糧（35%）能增加羔羊肌肉組織飽和脂肪酸和順式脂肪酸的含量，減少反式脂肪酸含量，特別是C18：1t10;Tsiplakou等（2017）研究表明，與飼喂低淀粉日糧山羊相比，飼喂高淀粉日糧山羊母乳中的C14：1、C15：0、C16：1、C17：0、C17：1和C20：3n-3比例顯著降低。玉米粉的淀粉含量在72%左右（Huntington et al.，1997），玉米皮則纖維含量較高（中性洗滌纖維含量56.5%，酸性洗滌纖維含量16.6%），即玉米粉和玉米皮在淀粉及纖維含量方面存在明顯差異（林謙等，2013）。至今，雖然已有學(xué)者對玉米皮作為動物飼料的營養(yǎng)價值進行評估研究，但有關(guān)于玉米皮在反芻動物日糧中的應(yīng)用研究鮮見報道。王芳等（2016）通過體外產(chǎn)氣法評定玉米、玉米皮、麩皮、苜蓿草粉、苜蓿干草和玉米秸稈等6種反芻動物飼料原料的營養(yǎng)價值，結(jié)果發(fā)現(xiàn)玉米體外發(fā)酵24 h的產(chǎn)氣量、理論最大產(chǎn)氣量、干物質(zhì)降解率及能值均最高，營養(yǎng)價值較高，但玉米皮與玉米體外發(fā)酵24 h產(chǎn)氣量、干物質(zhì)降解率及代謝能值均無顯著差異。謝飛（2017）研究發(fā)現(xiàn)，玉米皮的代謝能值及其有機物全腸道消化率在生豬不同體重階段差異不顯著，但隨著生豬體重的増加這2項指標均呈上升趨勢。明雷等（2019）研究表明，玉米皮發(fā)酵飼料不僅質(zhì)地柔軟、適口性好，有利于增加生豬采食量，還能提高豬體免疫能力，改善豬肉品質(zhì)，提高飼料利用率，有效提高生豬養(yǎng)殖的經(jīng)濟效益。曾繪錦等（2019）研究發(fā)現(xiàn)肉兔對玉米皮蛋白質(zhì)和氨基酸的消化率較高，并指出玉米皮可作為肉兔的非常規(guī)飼料原料以彌補飼料資源不足。張牧州等（2020）研究表明，利用玉米皮和大豆皮組合代替飼糧中一定比例的玉米和玉米秸稈，有利于育肥羊的生長及提高瘤胃代謝效率?！颈狙芯壳腥朦c】由于玉米皮與玉米粉在淀粉和纖維含量上存在明顯差異，以玉米皮替代玉米粉會引起日糧淀粉和纖維水平發(fā)生變化，進而有可能對動物機體的脂肪代謝產(chǎn)生影響。因此，在反芻動物日糧中以玉米皮替代玉米粉并推廣應(yīng)用前，有必要進一步明確玉米皮替代玉米粉對機體脂肪代謝的影響。【擬解決的關(guān)鍵問題】探究山羊日糧中玉米皮完全替代玉米粉時，其脂肪組織中脂肪酸組成及脂肪酸代謝相關(guān)基因的表達差異，旨在明確玉米皮替代玉米粉對山羊脂肪代謝的影響，為玉米皮在反芻動物養(yǎng)殖生產(chǎn)中的合理應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 動物試驗及其飼養(yǎng)管理

選擇10月齡左右、體重（17.50±2.67 kg/只）相近的健康雄性湘東黑山羊20只，隨機分成2組，即玉米粉組（CM組）和玉米皮組（CG組），每組10只。試驗日糧參照NRC-2012標準，精粗糧比為75∶25。CM組飼喂基礎(chǔ)飼糧，基礎(chǔ)飼糧中粗料為花生藤;CG組飼喂用玉米皮完全替代玉米粉的試驗飼糧，日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗周期60 d，其中預(yù)飼周期10 d，正式周期50 d，均單欄飼養(yǎng)。

1. 2 樣品采集

飼養(yǎng)試驗結(jié)束禁食24 h、禁水12 h，然后進行屠宰，迅速采集網(wǎng)膜脂肪組織（簡稱網(wǎng)膜脂）、腸系膜脂肪組織（簡稱系膜脂）和腎周脂肪組織（簡稱腎周脂），經(jīng)液氮速凍后-80 ℃冷凍保存。

1. 3 脂肪酸組成測定

將脂肪組織冷凍干燥后研碎，稱取約0.5 g樣品，置于15 mL的離心管中，加入4 mL苯—石油醚混合溶劑（按體積比1∶1混合），密閉浸提24 h后，以苯—石油醚混合溶劑補充揮發(fā)試劑，再加入4 mL氫氧化鉀—甲醇溶液（0.4 mol/L）快速甲酯化，振蕩混勻3 min后靜置30 min。加入適量超純水，靜置分層，經(jīng)9200×g離心10 min后，取上層溶液置于1.5 mL的離心管中，加入適量無水硫酸鈉除去殘留水分。取200 μL上清液，加入800 μL正己烷稀釋，經(jīng)0.22 μm濾膜過濾后備用。采用Agilent 7890A氣相色譜儀（美國Agilent公司）檢測上清液中的脂肪酸含量，具體操作步驟參照Ichihara等（1996）的方法。采用峰面積歸一化法進行定量，各脂肪酸含量均以單個脂肪酸在總甲酯化脂肪酸中所占的質(zhì)量百分比表示。

1. 4 實時熒光定量PCR檢測

使用RNAios Plus試劑（TaKaRa公司）提取總RNA，再以NanoDrop 2000超微量紫外分光光度計（美國Thermo公司）測定總RNA濃度，同時測定OD260 nm/OD280 nm，當其比值在1.8～2.1即為高純度RNA;采用1%變性瓊脂糖凝膠電泳鑒定總RNA完整性，當28S rRNA條帶與18S rRNA條帶的灰度值比為2：1即RAN完整性較好。

取1 μg總RNA，使用PrimeScriptTM RT reagent Kit with gDNA Eraser反轉(zhuǎn)錄試劑盒（TaKaRa公司）進行反轉(zhuǎn)錄。該試劑盒含有去除基因組DNA的gDNA Eraser，可有效除去基因組DNA。反轉(zhuǎn)錄合成的cDNA置于-80 ℃下保存?zhèn)溆?。根?jù)GenBank已公布的山羊基因序列，使用Primer Premier 6.0進行目的基因和β-actin基因（內(nèi)參基因）擴增引物設(shè)計，以Primer BLAST工具在線分析引物特異性。所有引物委托生工生物工程（上海）股份有限公司合成，具體引物序列及參數(shù)見表2。在Lightcycler 480Ⅱ?qū)崟r熒光定量PCR系統(tǒng)（瑞士Roche公司）中，按照TaKaRa定量試劑盒TB Green? Premix Ex TaqTM Ⅱ（Tli RNaseH Plus）說明進行實時熒光定量PCR檢測。該定量試劑盒含有Tli RNaseH，可抑制因cDNA中殘存mRNA對實時熒光定量PCR造成的阻害作用。反應(yīng)體系10.0 μL：SYBR GreenⅠ熒光染料預(yù)混試劑5.0 μL，上、下游引物（10 μmol/L）各0.3 μL，cDNA模板1.0 μL，滅菌雙蒸去離子水3.4 μL。擴增程序：95 ℃預(yù)變性30 s;95 ℃ 5 s，60 ℃ 30 s，進行40個循環(huán)。根據(jù)目的基因和內(nèi)參基因的閾值循環(huán)數(shù)（Ct），采用2-ΔΔCt法計算樣品中各目的基因的相對表達量。

1. 5 統(tǒng)計分析

所有試驗數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2013整理后，采用SPSS 19.0進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2. 1 玉米皮替代玉米粉對山羊內(nèi)臟脂肪脂肪酸組成的影響

2. 1. 1 玉米皮替代玉米粉對山羊網(wǎng)膜脂脂肪酸組成的影響 由表3可看出，CG組山羊網(wǎng)膜脂中的肉豆蔻酸（C14：0）、十七烷酸（C17：0）、硬脂酸（C18：0）、反油酸（C18：1n9t）及花生酸（C20：0）含量顯著（P<0.05，下同）或極顯著（P<0.01，下同）高于CM組山羊（P<0.05，下同），但網(wǎng)膜脂中的棕櫚酸（C16：0）、棕櫚油酸（C16：1）、油酸（C18：1n9c）及亞油酸（C18：2n6c）等脂肪酸含量不存在組間差異（P>0.05，下同）。雖然肉豆蔻酸、十七烷酸、硬脂酸、反油酸和花生酸等脂肪酸含量在兩處理組間存在差異，但飽和脂肪酸總含量（69.79% vs 70.81%）、單不飽和脂肪酸總含量（27.46% vs 26.58%）和多不飽和脂肪酸總含量（2.76% vs 2.61%）在兩處理組間并無顯著差異。

2. 1. 2 玉米皮替代玉米粉對山羊系膜脂脂肪酸組成的影響 由表4可看出，CG組山羊系膜脂中的十七烷酸和α-亞麻酸（C18：3n3）含量顯著高于CM組山羊，而肉豆蔻酸含量顯著低于CM組山羊，棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸和反油酸等脂肪酸含量在兩處理組間無顯著差異。由于只有十七烷酸、α-亞麻酸和肉豆蔻酸3種脂肪酸含量在兩處理組間存在差異，且這3種脂肪酸含量所占比例較低，因此飽和脂肪酸總含量（71.69% vs 71.73%）、單不飽和脂肪酸總含量（25.51% vs 25.60%）和多不飽和脂肪酸總含量（2.80% vs 2.67%）在CM組和CG組間均無顯著差異。

2. 1. 3 玉米皮替代玉米粉對山羊腎周脂脂肪酸組成的影響 由表5可看出，山羊腎周脂中的各脂肪酸含量在CM組和CG組間均無顯著差異，對應(yīng)的飽和脂肪酸總含量、單不飽和脂肪酸總含量和多不飽和脂肪酸總含量在兩處理組間也無顯著差異。

2. 2 玉米皮替代玉米粉對山羊內(nèi)臟脂肪組織脂肪代謝相關(guān)基因表達的影響

2. 2. 1 玉米皮替代玉米粉對山羊網(wǎng)膜脂脂肪代謝相關(guān)基因表達的影響 由表6可看出，CG組山羊網(wǎng)膜脂中的ACC基因相對表達量極顯著高于CM組山羊，而FADS1、CD36、HSL、KLF2、KLF4和SREBP1等基因的相對表達量在兩處理組間無顯著差異。

2. 2. 2 玉米皮替代玉米粉對山羊系膜脂脂肪代謝相關(guān)基因表達的影響 由表7可看出，與CM組相比，CG組山羊系膜脂組織中的FADS1基因呈極顯著下調(diào)表達，KLF2、KLF4和SREBP1基因則呈顯著上調(diào)表達; FASN、ACC、CD36和HSL等基因的相對表達量在兩處理組間無顯著差異。

2. 2. 3 玉米皮替代玉米粉對山羊腎周脂脂肪代謝相關(guān)基因表達的影響 由表8可看出，與CM組相比，CG組山羊腎周脂組織中的SREBP1基因呈極顯著下調(diào)表達，而FASN、ACC、FADS1、CD36、HSL、KLF2和KLF4等基因的相對表達量在兩處理組間無顯著差異。

3 討論

本研究中，玉米皮完全替代玉米粉引起山羊日糧養(yǎng)分，特別是淀粉和纖維含量發(fā)生變化。其中，玉米粉組山羊日糧的淀粉含量為50.4%，中性洗滌纖維含量為27.3%;而玉米皮組日糧的淀粉含量為13.11%，中性洗滌纖維含量為44.9%。飼料原料種類及其養(yǎng)分含量（淀粉與纖維的比例）的改變會直接影響反芻動物機體脂肪代謝。Mushi等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，未補充精料的東非小山羊網(wǎng)膜脂組織中十七烷酸和花生四烯酸的比例明顯高于補充精料的東非小山羊。安雪姣等（2018）研究表明，在飼喂低精粗比日糧的羔羊腎周脂、皮下及尾部脂肪組織中，亞油酸、α-亞麻酸、飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸、n3系多不飽和脂肪酸、n6系多不飽和脂肪酸含量及多不飽和脂肪酸與飽和脂肪酸比值（∑PUFA/∑SFA）均顯著高于飼喂高精粗比日糧的羔羊。本研究結(jié)果表明，山羊日糧中以玉米皮代替玉米粉能增加山羊網(wǎng)膜脂組織中的豆蔻酸、十七烷酸、硬脂酸、反油酸和花生酸含量，以及系膜脂組織中的十七烷酸和α-亞麻酸含量，同時降低系膜脂組織中的豆蔻酸含量，與Mushi等（2010）、安雪姣等（2018）的相關(guān)研究結(jié)果相似，即玉米皮完全替代玉米粉會引起日糧淀粉、纖維含量發(fā)生變化，從而影響山羊內(nèi)臟網(wǎng)膜脂和系膜脂組織中某些脂肪酸含量的變化。但在本研究中，玉米皮完全替代玉米粉并未引起山羊腎周脂脂肪酸組成的變化，對山羊內(nèi)臟網(wǎng)膜脂、系膜脂和腎周脂組織中的飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸及多不飽和脂肪酸總含量也未產(chǎn)生顯著影響。

淀粉和纖維經(jīng)反芻動物瘤胃發(fā)酵后，產(chǎn)生揮發(fā)性脂肪酸，進而會影響動物機體的乳脂及體脂組成，其中乙酸和丁酸作為脂肪合成的重要前體物，分別以乙酰輔酶A和羥丁酸的形式參與脂肪酸合成。已有研究表明，降低日糧粗飼料比例能降低奶牛瘤胃內(nèi)脂肪的水解和氫化程度，從而促使乳脂和體脂中的不飽和脂肪酸比例增加（楊舒黎等，2007）。本課題組的相關(guān)研究也發(fā)現(xiàn)，山羊日糧中以玉米皮完全替代玉米粉后，山羊瘤胃中的乙酸和丙酸濃度無明顯變化，但丁酸濃度顯著降低，戊酸和異丁酸濃度顯著升高。由于瘤胃乙酸和丙酸濃度在玉米粉組與玉米皮組間無差異，且丁酸在揮發(fā)性脂肪酸中所占比例較小，對脂肪代謝的影響不及乙酸，因此以玉米皮完全替代玉米粉僅對部分脂肪酸組成產(chǎn)生影響，并未影響飽和性脂肪酸及不飽和脂肪酸含量。玉米皮替代玉米粉后，除淀粉和纖維含量發(fā)生變化外，日糧粗蛋白水平也存在一定差異（17.4% vs 11.1%）。He等（2018）研究表明，增加日糧蛋白水平能提高荷斯坦牛血漿中部分不飽和脂肪酸的比例，但不影響棕櫚酸和亞油酸的比例?？梢姡占Z淀粉和纖維因素外，日糧蛋白水平變化可能也會對動物機體脂肪組織的脂肪酸組成產(chǎn)生一定影響。

脂肪組織脂肪酸組成變化除了受飼糧因素影響外，可能還受潛在分子機制的調(diào)控。ACC是脂肪酸合成反應(yīng)中的一種限速調(diào)節(jié)酶，具有催化乙酰輔酶A（acetyl-CoA）形成丙二酸單酰輔酶A（malonyl-CoA）的羧化作用。反芻動物機體脂肪酸從頭合成產(chǎn)生的棕櫚酸是由ACC和FASN利用乙酰輔酶A與丙二酸單酰輔酶A合成（Bionaz and Loor，2008;肖榮等，2018）。C16以上的長鏈脂肪酸，主要源于飼料脂肪的消化吸收（Chirala and Wakil，2004）。本研究結(jié)果表明，與玉米粉組相比，玉米皮組山羊系膜脂組織中的ACC基因呈極顯著上調(diào)表達，但棕櫚酸含量并未發(fā)生顯著變化，可能是FASN基因表達量無顯著差異導(dǎo)致;而網(wǎng)膜脂組織中的肉豆蔻酸、十七烷酸、硬脂酸、反油酸和花生酸含量顯著或極顯著增加，可能與玉米皮完全替代玉米粉后造成山羊日糧組成差異有關(guān)。FADS1可在△5位發(fā)生去飽和作用，促使二十碳三烯酸、二十碳四烯酸去飽和而分別生成花生四烯酸和二十碳五烯酸（鄒嬌，2019）。在本研究中，與玉米粉組相比，玉米皮組山羊系膜脂組織中的FADS1基因呈下調(diào)表達，同時花生四烯酸含量稍有降低。CD36作為脂肪酸轉(zhuǎn)運體，可結(jié)合多種配體，包括長鏈游離脂肪酸和氧化性低密度脂蛋白等（Hua et al.，2015）;KLF2調(diào)控脂肪分化過程，而KLF4參與細胞增殖、分化等生命過程;SREBP1優(yōu)先調(diào)控表達與脂肪酸合成有關(guān)的基因（Edwards et al.，2000;Moon et al.，2001;Currie et al.，2013），即ACC、FASNCD36、KLF2和KLF4等一系列脂肪代謝酶均受SREBP1基因調(diào)控（Shimano，2001）。王小芳（2016）研究發(fā)現(xiàn)，日糧能量和蛋白水平對36～40 kg階段灘羊尾部脂肪和腎周脂中的KLF2、KLF4、KLF5和KLF15基因表達有顯著影響。本研究中，與玉米粉組相比，玉米皮組山羊系膜脂組織中的KLF2、KLF4和SREBP1基因呈顯著上調(diào)表達，可能與系膜脂一些脂肪酸含量的變化有關(guān)。此外，玉米皮組山羊腎周脂組織中的SREBP1基因相對表達量極顯著下調(diào)，但其脂肪酸組成并未發(fā)生改變，且腎周脂組織中的ACC、FADS1、CD36和HSL等基因表達水平均無顯著變化，說明僅SREBP1基因表達水平發(fā)生變化尚不足以影響脂肪酸的組成。

4 結(jié)論

以玉米皮替代玉米粉會不同程度地影響湘東黑山羊內(nèi)臟脂肪組織中某些脂肪酸含量及脂肪代謝相關(guān)基因表達，但對內(nèi)臟脂肪組織的飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸及多不飽和脂肪酸含量均無顯著影響，即以玉米皮代替玉米粉對山羊內(nèi)臟脂肪組織脂肪酸組成的總體影響較小，可在實際生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。

參考文獻：

安雪姣，文禹粱，宋淑珍，蔡原，吳建平，趙生國. 2018. 羔羊日糧精粗比對其肉及脂肪組織中脂肪酸組成的影響[J]. 草業(yè)科學(xué)，35（3）：654-662. [An X J，Wen Y L，Song S Z，Cai Y，Wu J P，Zhao S G. 2018. Effect of dietary concentrate to forage ratio on the fatty acid composition of the meat and fat tissues of lambs[J]. Pratacultural Science，35（3）：654-662.]

段智勇. 2006. 反當動物日糧中淀粉與纖維的組合效應(yīng)及其機理的研究[D]. 杭州：浙江大學(xué). [Duan Z Y. 2006. Study of associative effects between starch and neutral detergent fiber in ruminants[D]. Hangzhou：Zhejiang University.]

林謙，戴求仲，蔣桂韜，王向榮，張旭，王照群，張建華. 2013. 玉米及其加工副產(chǎn)品的營養(yǎng)價值評定[J]. 中國飼料，（4）：18-21. [Lin Q，Dai Q Z，Jiang G T，Wang X R，Zhang X，Wang Z Q，Zhang J H. 2018. Evaluation of nutritional value of corn and by-products[J]. China Feed，（4）：18-21.]

明雷，王松，明宏璋. 2019. 玉米皮發(fā)酵飼料對豬生長性能、肉品質(zhì)的影響及經(jīng)濟效益分析[J]. 飼料工業(yè)，40（19）：20-23. [Ming L，Wang S，Ming H Z. 2019. Effect of corn skin fermented feed on growth performance and meat quality of pigs and economic benefit analysis[J]. Feed Industry，40（19）：20-23.]

宋振華，朱瀟靜，姜文廷，胡乾勇，魏琳琳，王平. 2019. 不同氨處理對玉米秸稈糖化效果的影響[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報，31（6）：107-110. [Song Z H，Zhu X J，Jiang W T，Hu Q Y，Wei L L，Wang P. 2019. Effect of different ammonia pretreatments on saccharification of corn straw[J]. Acta Agriculturae Jiangxi，31（6）：107-110.]

王芳，徐元君，?？←?，趙勐，張養(yǎng)東，張開展，卜登攀. 2016. 體外產(chǎn)氣法評價反芻動物飼料營養(yǎng)價值的研究[J]. 中國畜牧獸醫(yī)，43（1）：76-83. [Wang F，Xu Y J，Niu J L，Zhao M，Zhang Y D，Zhang K Z，Bu D P. 2016. Nutrient value evaluation of different type feeds by in vitro gas production method[J]. Chinese Animal Husbandry and Veterinary Medicine，43（1）：76-83.]

王小芳. 2016. 日糧營養(yǎng)水平對灘羊脂類代謝相關(guān)基因mRNA表達影響的研究[D]. 楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué). [Wang X F. 2016. Studies on effect of dietary nutritional levels on mRNA expression of genes related to lipid metabolism in Tan sheep[D]. Yangling：Northwest A & F University.]

王玉強，趙倩明，沈宇，孫盛楠，趙國琦. 2019. 日糧中添加米糠和玉米胚芽粕對泌乳奶牛瘤胃發(fā)酵及微生物菌群的影響[J]. 揚州大學(xué)學(xué)報（農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版），40（3）：65-71. [Wang Y Q，Zhao Q M，Shen Y，Sun S L，Zhao G Q. 2019. Effects of rice bran and corn germ meal on rumen fermentation and microbial flora in lactating dairy cows[J]. Journal of Yangzhou University（Agriculture and Life Science Edition），40（3）：65-71.]

肖榮，李軍，李成萍，郭彥，辛友志，張海燕，周國利. 2018. IL-33/ST2信號通路與脂肪代謝關(guān)系研究進展[J]. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，47（12）：1-6. [Xiao R，Li J，Li C P，Guo Y，Xin Y Z，Zhang H Y，Zhou G L. 2018. Research progress on IL-33/ST2 pathway and its relationship with fat metabolism[J]. Journal of Henan Agricultural Sciences，47（12）：1-6.]

謝飛. 2017. 不同體重階段豬常用飼料原料有效能比較研究[D]. 北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué). [Xie F. 2017. Comparative digestibility of energy in common feed ingredients to barrows at different body weights[D]. Beijing：China Agricultural University.]

楊舒黎，胡志勇，王加啟. 2007. 奶牛瘤胃脂肪酸代謝研究進展[J]. 中國奶牛，（3）：14-17. [Yang S L，Hu Z Y，Wang J Q. 2007. Research progress on rumen fatty acid meta-bolism in dairy cows[J]. China Dairy Cattle，（3）：14-17.]

楊小倩，郅慧，張輝，孫佳明. 2019. 玉米不同部位化學(xué)成分、藥理作用、利用現(xiàn)狀研究進展[J]. 吉林中醫(yī)藥，39（6）：837-840. [Yang X Q，Zhi H，Zhang H，Sun J M. 2019. Research progress on chemical components，pharmacolo-gical activity and utilization status of different parts[J]. Jilin Journal of Traditional Chinese Medicine，39（6）：837-840.]

曾繪錦，田剛，魯院院，曾亭軒，蔡景義. 2019. 玉米皮對生長肉兔的營養(yǎng)價值評定[J]. 動物營養(yǎng)學(xué)報，31（8）：3674-3681. [Zeng H J，Tian G，Lu Y Y，Zeng T X，Cai J Y. 2019. Nutritional value evaluation of corn bran for gro-wing rabbits[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition，31（8）：3674-3681.]

張牧州，郝小燕，項斌偉，張文佳，張宏祥，張建新. 2020. 玉米皮和大豆皮組合替代玉米和玉米秸稈對育肥羊生長性能和瘤胃代謝的影響[J]. 動物營養(yǎng)學(xué)報，32（2）：765-774. [Zhang M Z，Hao X Y，Xiang B W，Zhang W J，Zhang H X，Zhang J X. 2020. Effects of replacing corn and corn straw with corn husk and soybean hulls combination on growth performance and rumen metabolism in fattening sheep[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition，32（2）：765-774.]

鄒嬌. 2019. 奶山羊FADS2基因功能及轉(zhuǎn)錄調(diào)控機理初步研究[D]. 楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué). [Zou J. 2019. FADS2 gene function and transcriptional regulation mechanism preliminary study in dairy goats[D]. Yangling：Northwest A & F University.]

Beckman J L，Weiss W P. 2005. Nutrient digestibility of diets with different fiber to starch ratios when fed to lactating dairy cows[J]. Journal of Dairy Science，88（3）：1015-1023.

Bionaz M，Loor J J. 2008. Gene networks driving bovine milk fat synthesis during the lactation cycle[J]. BMC Genomics，9：366. doi：10.1186/1471-2164-9-366.

Chirala S S，Wakil S J. 2004. Structure and function of animal fatty acid synthase[J]. Lipids，39（11）：1045-1053.

Currie E，Schulze A，Zechner R，Walther T C，F(xiàn)arese Jr R V. 2013. Cellular fatty acid metabolism and cancer[J]. Cell Metabolism，18（2）：153-161.

Edwards P A，Tabor D，Kast H R，Venkateswaran A. 2000. Regulation of gene expression by SREBP and SCAP[J]. Biochimica et Biophysica Acta，1529（1-3）：103-113.

He Y，Yu Z T，Qiu Q H，Shao T Q，Niu W J，Xia C Q，Wang H B，Su H W，Cao B H. 2018. Effects of dietary protein levels and calcium salts of long-chain fatty acids on nitrogen mobilization，rumen microbiota and plasma fatty acid composition in Holstein bulls[J]. Animal Feed Scien-ce and Technology，246：1-10.

Hua W，Huang H Z，Tan L T，Wan J M，Gui H B，Zhao L，Ruan X Z，Chen X M，Du X G. 2015. CD36 mediated fa-tty acid-induced podocyte apoptosis via oxidative stress[J]. PLoS One，10（5）：e0127507.

Huntington G B. 1997. Starch utilization by ruminants：From basics to the bunk[J]. Journal of Animal Science，75（3）：852-867.

Ichihara K，Shibahara A，Yananoto K，Nakayama T. 1996. An improved method for rapid analysis of the fatty acids of glycerolipids[J]. Lipids，31（5）：535-539.

Moon Y A，Shah N A，Mohapatra S，Warrington J A，Horton J D. 2001. Identification of a mammalian long chain fatty acyl elongase regulated by sterol regulatory element-bin-ding proteins[J]. The Journal of Biological Chemistry，276（48）：45358-45366.

Mushi D E，Thomassen M S，Kifaro G C，Eik L O. 2010. Fatty acid composition of minced meat，longissimus muscle and omental fat from Small East African goats finished on different levels of concentrate supplementation[J]. Meat Science，86（2）：337-342.

Oliveira M A，Alves S P，Santos-Silva J，Bessa R J B. 2017. Effect of dietary starch level and its rumen degradability on lamb meat fatty acid composition[J]. Meat Science，123：166-172.

Rossi L G，F(xiàn)iorentini G，Neto A J，Vieira B R，Malheiros B R，Borghi T H，Berchielli T T. 2016. Impact of ground soybean and starch levels on the quality of meat from feedlot young Nellore bulls[J]. Meat Science，122：1-6.

Shimano H. 2001. Sterol regulatory element-binding proteins （SREBPs）：Transcriptional regulators of lipid synthetic genes[J]. Progress in Lipid Research，40（6）：439-452.

Tsiplakou E，Yiasoumis L，Maragou A C，Mavrommatis A，Sotirakoglou K，Moatsou G，Zervas G. 2017. The response of goats to different starch/NDF ratios of concentrates on the milk chemical composition，fatty acid pro?le，casein fractions and rennet clotting properties[J]. Small Ruminant Research，156：82-88.

（責(zé)任編輯 蘭宗寶）