甘草對尖吻鱸生長特性、消化酶及免疫酶的影響

王一福　周勝杰　楊蕊　于剛　王志　馬振華

摘要：【目的】探究添加不同水平甘草粉的飼料對尖吻鱸幼魚生長特性、消化酶及免疫酶的影響，為甘草在尖吻鱸飼料中的添加應(yīng)用提供參考依據(jù)?！痉椒ā繉⒏什莘郯床煌壤砑又溜暳现校缓髮馕趋|幼魚進行飼料投喂試驗，添加量0%為對照組，1%、3%和5%為試驗組，各組均設(shè)3個平行，試驗周期56 d，測定淀粉酶（AMS）、脂肪酶（LPS）、胰蛋白酶（TRYP）、胃蛋白酶（PP）、總抗氧化能力（T-AOC）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）、過氧化物酶（POD）、過氧化氫酶（CAT）、丙二醛（MDA）和溶菌酶（LZM）等指標(biāo)，并對尖吻鱸消化酶指標(biāo)與生長特性指標(biāo)間、免疫酶指標(biāo)與存活率間進行相關(guān)分析?！窘Y(jié)果】3%和5%試驗組尖吻鱸的存活率（SR）顯著高于對照組（P<0.05，下同）;各試驗組的體長增長率（BLGR）均顯著高于對照組;增重率（WGR）和特定生長率（SGR）在5%試驗組顯著升高;前腸AMS活力在3%和5%試驗組顯著升高;肝臟AMS、前腸LPS、肝臟LPS和胃LPS活力在各試驗組均顯著升高;前腸TRYP活力在1%和5%試驗組顯著升高;PP活力在5%試驗組顯著升高。WGR、SGR與肝臟AMS活力呈顯著正相關(guān)。肝臟T-AOC活力在各試驗組均顯著升高，CAT活力、GSH-PX活力和POD活力在1%試驗組顯著升高，MDA含量在5%試驗組顯著下降;血清T-AOC活力和CAT活力在各試驗組均顯著升高，GSH-PX活力在3%試驗組顯著升高，LZM活力在1%和5%試驗組顯著下降。SR與肝臟T-AOC、肝臟T-SOD、血清T-AOC、血清CAT和血清GSH-PX活力呈顯著正相關(guān)，與血清MDA含量及血清T-SOD活力呈顯著負相關(guān)?！窘Y(jié)論】飼料中添加3%～5%甘草粉可更好地提高尖吻鱸消化酶活性、促進魚體增長，協(xié)助殺菌，提高尖吻鱸的存活率;添加1%～3%甘草粉可增強尖吻鱸抗氧化能力，減少肝過氧化物積累。因此，飼料中添加適量的甘草對尖吻鱸幼魚具有促進消化及提高免疫的作用。

關(guān)鍵詞： 甘草;尖吻鱸;生長特性;消化酶;免疫酶

中圖分類號： S963.14? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻標(biāo)志碼： A 文章編號：2095-1191（2020）12-3116-10

Abstract：【Objective】This study was conducted to explore the effects of different levels of glycyrrhiza meal in feed on growth performance，digestive enzymes and immune enzymes of juvenile Lates calcarifer，and aimed to provide refe-rence for the addition of glycyrrhiza to the L. calcarifer feed. 【Method】The glycyrrhiza meal was added to the feed at di-fferent proportions，L. calcarifer were fed with experimental diets. 0% glycyrrhizameal was used as the control group，1%，5%，9% glycyrrhizameal were the testing groups. Each group was set to be three parallelgroups，the experiment lasted 56 d.The indexes includingamylase（AMS），lipase（LPS），trypsin（TRYP），pepsin（PP），total antioxidant capacity（T-AOC），total superoxide dismutase（T-SOD），glutathione peroxidase（GSH-PX），peroxidase（POD），catalase（CAT），malondialdehyde（MDA） and lysozyme（LZM） were determined. The correlation between digestive enzyme indexes and growth chara-cteristic indexes and the correlation between immune enzyme indexes and survival rate of L. calcarifer were analyzed. 【Result】The survival rate increased significantly in the 3% and 5% group compared to control group（P<0.05， the same below）. The growth rate of body length（BLGR） in all test groups was significantly higher than that of the control group. Weight gain rate（WGR） and special growth rate（SGR） increased significantly in the 5% group. In foregut，AMS activity increased significantly in the 3% and 5% group. Liver AMS activity，foregut LPS activity，liver LPS activity， gastric LPS activity increased significantly in each test group. Intestinal TRYP activity increased significantly in the 1% and 5% group. Stomach PP activity increased significantly in the 5% group.There was? significant positive correlation between WGR，SGR and liver AMS. Liver T-AOC activity increased significantly in each test group. Liver CAT activity， GSH-PX activity and POD activity increased significantly in the 1% group. Liver MDA content decreased significantly in the 5% group. Serum T-AOC activity and CAT activity increased significantly in each test group. Serum GSH-PX activity increased significantly in the 3% group. Serum LZM activity decreased significantly in the 1% and 5% groups. There was significant positive correlation between SR and activities of liver T-AOC，liver T-SOD，serum T-AOC，serum CAT，serum GSH-PX. There was significant negative correlation between SR and serum MDA，serum T-SOD. 【Conclusion】Adding 3%-5% glycyrrhiza in the feed can promote the digestive enzyme activity of the L. calcarifer，and improve fish body growth. It helps inhibit bacteria to improve the survival rate of L. calcarifer. Adding 1%-3% can improve antioxidant capacity and reducethe accumulation of liver peroxides. Therefore，the proper addition of glycyrrhiza in the diet has the effect of promoting digestion and improving immunity to L. calcarifer.

Key words： glycyrrhiza; Lates calcarifer; growth characteristics; digestive enzymes; immune enzymes

Foundation item：Guangxi Innovation Driven Development Special Project（Guike AA18242031）;Science and Technology Innovation Group Project of Chinese Academy of Fishery Sciences（2020TD55）; Central Public-interest Scien-tific Institution Basal Research Project of South China Sea Fisheries Research Institute of Chinese Academy of Fishery Sciences（2018ZD01，2017ZD01）

0 引言

【研究意義】尖吻鱸（Lates calcarifer）作為我國廣泛養(yǎng)殖的魚種，其食用價值和商用價值均較高，但近年來隨著養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴大，其養(yǎng)殖環(huán)境逐漸變得惡劣，常受到弧菌病及寄生蟲病的威脅，且感染死亡率極高。研發(fā)中藥飼料添加劑可提高尖吻鱸的免疫力，降低用藥污染，維持養(yǎng)殖環(huán)境的穩(wěn)定性，其無害、無殘留的特點有利于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的持續(xù)發(fā)展，對提高水產(chǎn)品安全及保證人類健康具有重要意義。【前人研究進展】甘草及其提取物在抑菌及抗氧化方面均有顯著作用。陸清兒和童朝明（2008）、楊靜等（2017）研究發(fā)現(xiàn)甘草總黃酮對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、雙歧桿菌及綠膿桿菌均具有一定的抑制作用;張光輝等（2019）利用人工配制的1，1-二苯基-2-苦基肼（DPPH）自由基檢測發(fā)現(xiàn)甘草中的黃酮類化合物甘草素、甘草甲苷和甘草乙苷對DPPH自由基的平均清除率分別達51.56%、44.85%和34.53%;趙森銘等（2019）發(fā)現(xiàn)甘草水提物中的半甘草異黃酮B也具有較強的抗氧化能力。中藥添加劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中已得到廣泛應(yīng)用，在黃鱔（Monopterus albus）（李金龍等，2013）、草魚（Ctenopharyngodon idellus）（譚娟等，2015）、閃光鱘（Acipenser stellatus）（齊茜等，2016）、鯽魚（Carassius auratus）（陳思航等，2018）、珍珠龍膽（Epinephelus lanceolatus ♂×E. fuscoguttatus ♀）（徐安樂等，2018）、凡納濱對蝦（Litopenaeus vannamei）（葉建生等，2018）和中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）（周永昌等，2019）等養(yǎng)殖品種中均有研究，使用中藥添加劑后，黃鱔的增重率、消化酶及總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）等指標(biāo)顯著提高，草魚的增重率和SOD活性顯著提高，閃光鱘的增重率顯著提高，珍珠龍膽的腸道脂肪酶、腸道胰蛋白酶和SOD活性顯著提高，鯽魚的誘食活性及增重率顯著提高，凡納濱對蝦的存活率及SOD活性顯著提高，中華絨螯蟹的增重率、特定生長率、T-AOC和SOD等指標(biāo)顯著提高?？梢?，中藥具有提高機體抗氧化能力、增強抵抗力，提高存活率及誘食促進消化等優(yōu)點?！颈狙芯壳腥朦c】尖吻鱸在育苗（陸忠康，1998）、飼料添加（林黑著等，2010;袁豐華等，2010）、生長發(fā)育（趙旺等，2017;周勝杰等，2018b）及環(huán)境脅迫（胡靜等，2018;劉亞娟等，2018）等方面已有較多研究報道，但以中藥作為飼料添加劑的研究較少，尤其鮮見將甘草粉作為尖吻鱸飼料添加劑?！緮M解決的關(guān)鍵問題】在尖吻鱸飼料中添加不同比例的甘草粉，研究其對尖吻鱸生長特性、消化酶及非特異性免疫酶活性的影響，豐富尖吻鱸中草藥飼料添加劑的應(yīng)用種類，論證甘草作為尖吻鱸飼料添加劑的可行性，為其實際生產(chǎn)應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 試驗用魚及投喂管理

試驗用尖吻鱸由中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所熱帶水產(chǎn)研究開發(fā)中心自行培育。取體表光滑、無損傷、攝食良好、反應(yīng)機敏、游動活潑的尖吻鱸360尾，隨機平均分成4組[甘草粉添加量分別為0（對照）、1%、3%和5%]，每組3個平行，每個平行30尾魚，分別對其進行飼料投喂試驗。投喂試驗在熱帶水產(chǎn)研究開發(fā)中心流水式海水養(yǎng)殖桶中進行，各組尖吻鱸初始平均體重分別為13.53、13.95、13.96和14.27 g，初始平均體長分別為8.83、8.45、9.03和8.79 cm。試驗期間觀察并記錄其進食情況和死亡狀況，同時進行水質(zhì)檢測。主要水質(zhì)指標(biāo)如下：溫度（25～29）℃、pH 7.6～8.1、氨氮<0.01 mg/L、亞硝酸鹽<0.02 mg/L。每天投喂2次，時間分別為上午9：00和下午3：00，采用飽食法投喂，即投喂到尖吻鱸停止攝食為止。投喂后1 h左右進行吸底，將糞便吸出，以免污染水體。下午4：30左右進行1次換水，換水量控制在2/3左右，試驗周期為8周（56 d）。

1. 2 試驗飼料制備

試驗所用飼料及其配方由中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所熱帶水產(chǎn)研究開發(fā)中心自行設(shè)計和制作，嚴格把控質(zhì)量。其中甘草粉購自亳州市德永堂生物科技有限公司，罐裝180 g，無添加劑。配方信息見表1。

1. 3 取樣方法及生長性能測定

試驗結(jié)束后停食24 h，稱總重。每組試驗3個平行，每個平行取3尾，每組共9尾，MS222麻醉后進行取樣。紙巾擦拭體表，吸干水分，用滅菌的解剖工具進行解剖，取其肝臟和血液，整個操作步驟置于冰袋上進行。將每個平行的同種組織或器官混合后待測，置于-80 ℃超低溫冰箱保存?zhèn)溆?，測定時稱其重量，按比例加入預(yù)冷的0.9%生理鹽水，冰浴勻漿制成10%的勻漿液，按照試劑盒說明進行離心取上清液，最后將其稀釋成不同種酶測試所需的最適濃度。另外，每個平行隨機取3尾魚，分別測定體長、體重、內(nèi)臟重量和肝臟重量。增重率（WGR）、特定生長率（SGR）、臟體比（VSI）、肝體比（HSI）、體長增長率（BLGR）、肥滿度（CF）、飼料系數(shù)（FCR）和存活率（SR）的計算公式（李卓佳等，2011;趙書燕等，2017）如下：

WGR（%）=（Wt-W0）/W0 ×100

SGR（%/d）=（lnWt-lnW0）/t×100

VSI（%）=內(nèi)臟重量/魚體重量×100

HSI（%）=肝臟重量/魚體重量×100

BLGR（%）=（Lt-L0）/L0×100

CF=體重/體長3×100

FCR=投喂飼料重量/魚增重量

SR（%）=每桶試驗結(jié)束魚數(shù)/試驗開始魚數(shù)×100

式中，Wt為終末平均重量（g），W0為初始平均重量（g），Lt為終末平均體長（cm），L0為初始平均體長（cm），t為養(yǎng)殖試驗天數(shù)（d）。

1. 4 酶活指標(biāo)測定

采用試劑盒（南京建成生物有限公司）進行相關(guān)指標(biāo)測定，包括淀粉酶（AMS）、脂肪酶（LPS）、胰蛋白酶（TRYP）、胃蛋白酶（PP）、總抗氧化能力（T-AOC）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）、過氧化物酶（POD）、過氧化氫酶（CAT）、丙二醛（MDA）和溶菌酶（LZM）。其中，血清酶活力用U/mL表示，組織酶活力用U/mg可溶性蛋白（prot）表示，個別酶含量單位以試劑盒為準(zhǔn)。

1. 5 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0進行相關(guān)分析、單因素方差分析及多重比較，并運用Excel 2016制圖。

2 結(jié)果與分析

2. 1 甘草對尖吻鱸生長性能的影響

在飼料中添加不同水平的甘草粉，投喂尖吻鱸56 d后，其生長指標(biāo)測定結(jié)果見表2。相對于對照組，各試驗組尖吻鱸的WGR及SGR均呈上升趨勢，且在5%試驗組呈顯著升高（P<0.05，下同）。各試驗組尖吻鱸的BLGR均顯著高于對照組。隨著飼料中甘草添加量的增加，F(xiàn)CR呈現(xiàn)下降趨勢，至5%時顯著低于對照組。各試驗組尖吻鱸的SR呈先上升后下降的變化趨勢，且在3%試驗組達最大值，其中3%和5%試驗組的SR顯著高于對照組。HSI在3%試驗組最高，在5%試驗組最低，但各組間無顯著差異（P>0.05，下同）。VSI則在1%試驗組達最大值，5%試驗組的臟體比最小，各組間也無顯著差異。對照組的CF最高，但各組間差異不顯著。

2. 2 甘草對尖吻鱸消化酶的影響

飼料中添加不同水平的甘草粉，投喂尖吻鱸56 d后，其AMS活力如圖1-A所示，隨著飼料中甘草粉添加量的增加，尖吻鱸前腸和肝臟中的AMS活力呈先上升后下降的變化趨勢，均在3%試驗組達最大值，前腸中3%和5%試驗組的AMS活力顯著高于對照組;肝臟中各試驗組尖吻鱸的AMS活力均顯著高于對照組;尖吻鱸胃中的AMS活力則呈先升后降再升的變化趨勢，在3%試驗組達最小值，顯著低于對照組。

隨著飼料中甘草粉添加量的增加，尖吻鱸胃和肝臟中LPS活力呈上升趨勢，在5%試驗組達最大值，且各試驗組尖吻鱸的LPS活力均顯著高于對照組;在前腸中LPS活力則呈先上升后下降的變化趨勢，在3%試驗組達最大值，各試驗組尖吻鱸的LPS活力也顯著高于對照組（圖1-B）。

飼料中添加不同水平的甘草粉，尖吻鱸前腸TRYP活力呈先上升后下降再上升的變化趨勢，其中1%和5%試驗組顯著高于對照組，3%試驗組顯著低于對照組（圖2）;尖吻鱸PP活力則呈上升趨勢，5%試驗組顯著高于對照組（圖3）。

以WGR和SGR為評判指標(biāo)，尖吻鱸攝食添加不同水平甘草的飼料后，其WGR和SGR與肝臟AMS活力的相關(guān)性最高，具有顯著性，與其他消化酶均無顯著相關(guān)性（表3）。

2. 3 甘草對尖吻鱸免疫酶的影響

飼料中添加不同水平的甘草粉，投喂尖吻鱸56 d后，其POD、CAT及GSH-PX活力測定結(jié)果分別見圖4、表4和表5。試驗組尖吻鱸肝臟中POD活力相對于對照組均有所增加，且在1%試驗組顯著升高;血清中CAT活力在各試驗組均顯著高于對照組，且在3%試驗組達最大值，GSH-PX活力在3%試驗組也達最大值并顯著高于對照組;肝臟中CAT活力和GSH-PX活力則在1%試驗組達最大值，并顯著高于對照組。

飼料中添加不同水平的甘草粉對尖吻鱸T-SOD、T-AOC活力及MDA含量的影響見表6～表8。隨著飼料中甘草粉添加量的增加，尖吻鱸血清T-SOD活力呈下降趨勢，在5%試驗組達最小值;肝臟中T-SOD活力呈先上升后略有下降的變化趨勢，在3%試驗組達最大值。但血清和肝臟中的T-SOD活力在各組間均無顯著差異（表6）。

尖吻鱸血清中T-AOC活力與血清T-SOD活力的變化趨勢相反，隨著飼料中甘草粉添加量的增加呈上升趨勢，在5%試驗組達最大值，且各試驗組均顯著高于對照組;肝臟中T-AOC活力與肝臟T-SOD活力的變化趨勢接近，先升高后下降，但各試驗組的T-AOC活力均顯著高于對照組（表7）。

尖吻鱸血清中MDA含量在1%試驗組最高、3%試驗組最低，3%試驗組相比對照組顯著下降，1%和5%試驗組相對于對照組均無顯著變化;隨著飼料中甘草粉添加量的增加，尖吻鱸肝臟中MDA含量呈下降趨勢，5%試驗組相對于對照組顯著下降（表8）。

飼料中添加不同水平的甘草粉對尖吻鱸血清LZM活力的影響見圖5。相對于對照組，尖吻鱸血清LZM活力在1%和5%試驗組呈顯著下降，而3%試驗組無顯著變化。

以SR為評判指標(biāo)，尖吻鱸攝食添加不同水平甘草粉的飼料后，其SR與肝臟T-SOD活力、肝臟T-AOC活力、血清T-AOC活力、血清CAT活力和血清GSH-PX活力呈顯著正相關(guān)，且與肝臟T-SOD活力相關(guān)性最高，與血清T-SOD活力和血清MDA含量呈顯著負相關(guān)（表9）。

3 討論

3. 1 甘草對尖吻鱸生長性能的影響

甘草中含有多種活性成分，主要包括甘草皂苷類的甘草皂苷、甘草酸和甘草次酸，甘草黃酮類的甘草總黃酮、甘草苷及甘草多糖等，其本身散發(fā)特殊的香氣且味甘（付道斌等，2018;李想和李冀，2019），可改變飼料口味，增強動物的食欲，在獸用藥及飼料添加方面均有廣泛應(yīng)用。已有研究表明，甘草及其所含物質(zhì)可提高肉仔雞的平均日增重及飼料轉(zhuǎn)化率（王麗榮等，2004），促進灘羔羊的采食速度和采食量，提高增質(zhì)量效果（吳瑛等，2006），提高豬的平均日增重（賈春英和李海，2011）。在凡納濱對蝦飼料中添加甘草酸后，添加組凡納繽對蝦的SGR顯著高于對照組（Chen et al.，2010）;在黃鱸飼料中添加甘草和黃芪投喂后，添加組黃鱸的WGR、長度、SGR及飼料轉(zhuǎn)化率均有顯著提高（Elabd et al.，2016）。本研究中，尖吻鱸飼料添加甘草粉后也有類似的效果，各甘草添加組尖吻鱸的WGR和SGR均高于對照組，且添加量為5%時顯著高于對照組;各甘草添加組的魚體BLGR也顯著高于對照組，說明飼料中添加甘草對尖吻鱸生長有一定的促進作用。

在SR方面，凡納濱對蝦飼料中添加甘草酸投喂后進行攻毒測試時發(fā)現(xiàn)其添加組的SR明顯高于對照組（Chen et al.，2010）;甘草粗提物能顯著提高鯽魚感染細菌后的SR（王文博等，2007）。本研究中，各甘草添加組尖吻鱸的SR與對照組相比均呈升高趨勢，且添加量為3%和5%的SR顯著高于對照組，說明添加甘草粉同樣有利于提高尖吻鱸的SR。同時，本研究在進行飼養(yǎng)投喂過程中發(fā)現(xiàn)，由于水溫降低，對照組的部分魚體出現(xiàn)白點病，但添加甘草粉的試驗組并未發(fā)現(xiàn)。有研究表明，甘草總黃酮對大腸桿菌、雙歧桿菌、綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌等均有抑制作用（楊靜等，2017），甘草查爾酮A等還可協(xié)同氟康唑抑制白念珠菌活性（王元花等，2017）。因此，本研究中試驗組尖吻鱸的SR升高可能與甘草的抑菌作用有關(guān)。

3. 2 甘草對尖吻鱸消化酶的影響

國內(nèi)外對魚體消化酶的研究結(jié)果復(fù)雜多樣，魚的種類、飼料成分的變化及外部環(huán)境的改變均會對消化酶活力造成影響（Garling and Wilson，1976;黎軍勝等，2004;周勝杰等，2018a）。大量研究表明，中藥添加劑對魚類的消化酶具有促進作用，如中藥可提高花鱸（劉慧吉等，2008）、斑點叉尾鮰（劉鴻艷等，2010）、羅非魚（牟洪生和劉慧娟，2012）等的消化酶活力。同樣，甘草具有相似作用，如團頭魴幼魚飼料中添加甘草次酸后，其腸道中的LPS和蛋白酶活力均有顯著升高，腸道AMS活力也有輕微上升（蔡東森等，2015）。本研究中甘草粉的添加對尖吻鱸也有相似效果：在飼料中添加5%甘草粉，魚體的前腸AMS、TRYP和PP活力顯著升高，各甘草添加組尖吻鱸的肝臟AMS活力及前腸、胃和肝臟中的LPS活力均顯著升高。通過WGR、SGR與消化酶活力相關(guān)分析研究發(fā)現(xiàn)，盡管甘草能顯著提高尖吻鱸的各種消化酶活力，增強尖吻鱸的消化力，但WGR和SGR僅與肝臟AMS活力呈顯著正相關(guān)，添加量為5%時消化酶活力最好，WGR和SGR最高。

3. 3 甘草對尖吻鱸免疫酶的影響

免疫酶是機體免疫系統(tǒng)的重要組成部分，每種免疫酶均有其存在的作用與意義。機體的酶和非酶抗氧化防御系統(tǒng)與活性氧的清除能力相關(guān)（Zhao et al.，2013），SOD和GSH-PX是機體重要的抗氧化酶，T-AOC直接反映機體的抗氧化能力（Cheng et al.，2015;Tan et al.，2016）;GSH-PX可在谷胱甘肽存在的情況下消除脂質(zhì)過氧化物，抑制脂質(zhì)過氧化的傳播（Koneri et al.，2008）;CAT則負責(zé)催化組織器官中的H2O2;POD的主要作用是催化分解生物體內(nèi)的氧化物或過氧化物;LZM在血清中主要存在于中性粒細胞、單核細胞和吞噬細胞，可水解細菌細胞壁，使細菌細胞內(nèi)部滲透壓不同而破裂，通過此途徑殺滅病原微生物（劉紅柏等，2006）。而MDA是脂質(zhì)過氧化的分解產(chǎn)物（Gutteridge，1995），被廣泛用作脂質(zhì)過氧化的標(biāo)記物（Mansour，2000），其升高的水平可反映肝細胞脂質(zhì)過氧化損傷的程度（Hu et al.，2000）?？寡趸富盍Φ奶岣呖蓭椭鷻C體提高抗應(yīng)激能力。

已有研究表明，飼料中添加甘草粉可提高機體抗氧化酶活性，且對不同物種所促進的免疫酶種類有所差異。凡納濱對蝦飼料中添加甘草酸后，其添加組SOD活力明顯高于對照組（Chen et al.，2010）;在黃鱸飼料中添加甘草和黃芪投喂后發(fā)現(xiàn)，添加組可顯著提高黃鱸的SOD、GSH-PX、CAT和LZM活性（Elabd et al.，2016）;不同的應(yīng)激源會顯著降低SOD活力，但投喂甘草的試驗組能有效修復(fù)下降，達到可控制的水平（Elabd et al.，2017）;在卡拉庫綿羊的飼料中添加4.5%甘草提取物投喂后發(fā)現(xiàn)，添加組的T-AOC和SOD活力較對照組分別增加1.8和1.2倍，有效提高了抗氧化狀態(tài)（Guo et al.，2019）;飼料中添加發(fā)酵甘草，能提高石斑魚肝臟SOD、GSH-PX和T-AOC活力（翁秦江等，2019）;甘草提取物對用CCl4誘導(dǎo)的鯉魚肝損傷模型具有保護作用，CCl4可使肝細胞中的SOD和GSH-PX活力明顯降低，但經(jīng)甘草提取液處理的肝細胞能升高至正常水平（Yin et al.，2011）。本研究結(jié)果顯示甘草粉的添加對尖吻鱸也有相似效果：在飼料中添加1%甘草粉，魚體的肝臟GSH-PX、CAT和POD活力顯著升高;添加3%甘草粉，血清GSH-PX活力顯著升高;各甘草添加組的肝臟T-AOC活力、血清T-AOC活力和血清CAT活力均顯著高于對照組，肝臟T-SOD活力比對照組提高23.5%;證明甘草對尖吻鱸抗氧化系統(tǒng)有促進作用，為機體提供更好的保護。通過SR與免疫酶活力相關(guān)分析研究發(fā)現(xiàn)，SR與肝臟T-AOC、肝臟T-SOD、血清T-AOC、血清CAT和血清GSH-PX呈顯著正相關(guān)，說明抗氧化酶活力的提高，可增強機體的抗應(yīng)激能力，提高尖吻鱸的SR。

有研究表明，甘草對MDA的產(chǎn)生具有抑制作用。CCl4可使肝細胞中的MDA含量顯著升高，但經(jīng)甘草提取液處理的肝細胞能抑制MDA含量升高（Yin et al.，2011）;以添加甘草的飼料投喂斜帶石斑魚8周后進行亞硝酸鹽脅迫，甘草添加組的肝臟MDA含量也比對照組顯著降低（翁秦江等，2019）。本研究中，肝臟MDA含量隨著飼料中甘草添加量的增加呈下降趨勢，且在5%試驗組呈顯著下降，與前人研究結(jié)果相似。說明甘草具有一定的護肝作用，可減少尖吻鱸的肝臟過氧化物積累，在添加量為5%時效果最好。

甘草對于LZM活力也有一定的影響。用添加甘草甜素的飼料投喂點帶石斑魚7 d后部分添加組LZM活力升高，而投喂14 d后部分添加組有輕微下降（崔培等，2013）;動物血清中的LZM活性可以因機體接觸抗原性物質(zhì)或免疫刺激劑而上升（韓永峰等，2018）。本研究結(jié)果表明，尖吻鱸血清中的LZM活力在1%和5%試驗組顯著低于對照組?？赡苁怯捎诟什菥哂休^強的抑菌作用，殺滅水體中的病菌減少了機體接觸抗原性物質(zhì)，而導(dǎo)致尖吻鱸血清中的LZM活力下降。

4 結(jié)論

飼料中添加3%～5%甘草粉可更好地提高尖吻鱸消化酶活性、促進魚體增長，協(xié)助殺菌，提高尖吻鱸的存活率;添加1%～3%甘草粉可增強尖吻鱸抗氧化能力，減少肝過氧化物積累。因此，飼料中添加適量的甘草對尖吻鱸幼魚具有促進消化及提高免疫的作用。

參考文獻：

蔡東森，蔣廣震，張定東，魯康樂，錢妤，徐超，劉文斌. 2015. 添加甘草次酸的飼料對團頭魴幼魚腸道消化吸收酶活性和胴體組成的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，43（6）：212-214. [Cai D S，Jiang G Z，Zhang D D，Lu K L，Qian Y，Xu C，Liu W B. 2015. Effects of glycyrrhetinic acid on digestive and absorptive enzyme activity and carcass composition of Megalobrama amblycephala[J]. Jiangsu Agricultural Sciences，43（6）：212-214.]

陳思航，路宏朝，尚書鳳，王琦，顏文博，王楊科. 2018. 6味中草藥添加對鯽魚誘食和生長的影響[J]. 陜西理工大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），34（5）：67-70. [Chen S H，Lu H Z，Shang S F，Wang Q，Yan W B，Wang Y K. 2018. Effects of six kinds of feed additive from Chinese herbal medicine on feeding attractant and growth to Carassius auratus[J]. Journal of Shaanxi University of Technology（Na-tural Science Edition），34（5）：67-70.]

崔培，陳成勛，王慶奎，邢克智，趙海運. 2013. 喂食甘草甜素對點帶石斑魚非特異性免疫力的影響[J]. 飼料工業(yè)，34（6）：12-16. [Cui P，Chen C X，Wang Q K，Xing K Z，Zhao H Y. 2013. Effects of glycyrrhizin on nonspecific immunity of Epinephelus malabaricus[J]. Feed Industry，34（6）：12-16.]

付道斌，廖成水，路霞，王曉利，辛玲，肖宜航，宋香朋. 2018. 甘草多糖對小鼠及鼠傷寒沙門菌生長性能的影響[J]. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，47（6）：139-143. [Fu D B，Liao C S，Lu X，Wang X L，Xin L，Xiao Y H，Song X P. 2018. Effect of glycyrrhiza polysaccharide on growth performance of mice and Salmonella typhimurium[J]. Journal of Henan Agricultural Sciences，47（6）：139-143.]

韓永峰，吳桃，賈振榮，薛樹平，張麗霞. 2018. 甘草與復(fù)方五倍子對黃河鯉非特異性免疫力影響的研究[J]. 中國水產(chǎn)，（9）：91-93. [Han Y F，Wu T，Jia Z R，Xue S P，Zhang L X. 2018. Effects of licorice and compound Galla Chinensis on nonspecific immunity of Cyprinus chinensis in Yellow River[J]. China Fisheries，（9）：91-93.]

胡靜，周勝杰，楊蕊，楊其彬，劉亞娟，馬振華. 2018. 亞硝酸鹽脅迫對尖吻鱸稚魚抗氧化酶活性及皮質(zhì)醇的影響[J]. 海洋科學(xué)，42（4）：132-140. [Hu J，Zhou S J，Yang R，Yang Q B，Liu Y J，Ma Z H. 2018. Effect of acute nitrite on antioxidant enzymes and cortisol in juvenile Lates calcarifer[J]. Marine Sciences，42（4）：132-140.]

賈春英，李海. 2011. 甘草粉在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的應(yīng)用[J]. 畜牧獸醫(yī)科技信息，（4）：98-99. [Jia C Y，Li H. 2011. Application of licorice powder in pig production[J]. Chinese Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine，（4）：98-99.]

黎軍勝，李建林，吳婷婷. 2004. 飼料成分與環(huán)境溫度對奧尼羅非魚消化酶活性的影響[J]. 中國水產(chǎn)科學(xué)，11（6）：585-588. [Li J S，Li J L，Wu T T. 2004. Effects of feed composition and environmental temperature on activities of digestive enzyme of tilapia（Oreochromis niloticus×O. aureus）[J]. Journal of Fishery Sciences of China，11（6）：585-588.]

李金龍，胡毅，郇志利，戴振炎，肖調(diào)義，毛盼，劉莊鵬，張俊智. 2013. 復(fù)方中草藥對黃鱔生長、非特異性免疫及腸道消化酶活性的影響[J]. 飼料工業(yè)，34（16）：26-30. [Li J L，Hu Y，Huan Z L，Dai Z Y，Xiao D Y，Mao P，Liu Z P，Zhang J Z. 2013. Effects of compound Chinese herbs on the growth，non-specific immunity and intestinal digestive enzyme activity of Monopterus albus[J]. Feed Industry，34（16）：26-30.]

李想，李冀. 2019. 甘草提取物活性成分藥理作用研究進展[J]. 江蘇中醫(yī)藥，51（5）：81-86. [Li X，Li J. 2019. Research progress on pharmacology of active constituents of licorice extract[J]. Jiangsu Journal of Traditional Chinese Medicine，51（5）：81-86.]

李卓佳，袁豐華，林黑著，陸鑫，楊其彬. 2011. 地衣芽孢桿菌對尖吻鱸生長和消化酶活性的影響[J]. 臺灣海峽，30（1）：43-48. [Li Z J，Yuan F H，Lin H Z，Lu X，Yang Q B. 2011. Effects of Bacillus licheniformis supplement on growth performance and digestive enzymes activities of the sea bass，Lates calcarifer[J]. Journal of Oceanography in Taiwan Strait，30（1）：43-48.]

林黑著，袁豐華，李卓佳，陸鑫，楊其彬，陳旭. 2010. 光合細菌PS2對尖吻鱸的生長、消化酶及非特異性免疫酶的影響[J]. 南方水產(chǎn)，6（1）：25-29. [Lin H Z，Yuan F H，Li Z J，Lu X，Yang Q B，Chen X. 2010. Effects of dietary photosynthetic bacteria PS2 on growth performance，digestive enzymes and nonspecific immune enzymes of sea bass（Lates calcarifer）[J]. South China Fisheries Science，6（1）：25-29.]

劉紅柏，盧彤巖，張春燕，孫大江，白秀娟. 2006. 黃芪對史氏鱘抗氧化能力及免疫力的影響[J]. 大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報，21（3）：231-235. [Liu H B，Lu T Y，Zhang C Y，Sun D J，Bai X J. 2006. Effects of the aqueous extract of astragalus root Astragalus membranaceus on immunity and antio-xidation in Amur sturgeon（Acipenser schrencki Brandt）[J]. Journal of Dalian Ocean University，21（3）：231-235.]

劉鴻艷，鄭宗林，王乙力. 2010. 中草藥發(fā)酵提取物對斑點叉尾鮰生長性能和腸道消化酶活性的影響[J]. 飼料廣角，（15）：43-45. [Liu H Y，Zheng Z L，Wang Y L. 2010. Effects of fermented herbal extract on growth performance and digestive enzyme activities in intestines of Channel Catfish[J]. Feed China，（15）：43-45.]

劉慧吉，劉剛，李耕，姜志強. 2008. 復(fù)方中草藥添加劑對花鱸幼魚生長和消化酶活性的影響[J]. 飼料工業(yè)，29（6）：4-7. [Liu H J，Liu G，Li G，Jiang Z Q. 2008. Effects of compound Chinese herbal additives on the growth and digestive enzyme activity of Lateolabrax japonicus[J]. Feed Industry，29（6）：4-7.]

劉亞娟，胡靜，周勝杰，彭曉瑜，馬振華. 2018. 急性氨氮脅迫對尖吻鱸稚魚消化酶及抗氧化酶活性的影響[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報，49（10）：2087-2095. [Liu Y J，Hu J，Zhou S J，Peng X Y，Ma Z H. 2018. Effects of acute ammonia nitrogen stress on antioxidant enzymes activity and digestive enzymes activity in larval Lates calcarifer[J]. Journal of Southern Agriculture，49（10）：2087-2095.]

陸清兒，童朝明. 2008. 甘草多糖對主要病原菌的抑殺菌試驗[J]. 科學(xué)養(yǎng)魚，（12）：57. [Lu Q E，Tong C M. 2008. Inhibition of Glycyrrhiza uralensis Ficsh polysaccharides against major pathogenic bacteria[J]. Scientific Fish Far-ming，（12）：57.]

陸忠康. 1998. 尖吻鱸Lates calcarifer（Bloch）養(yǎng)殖技術(shù)及其發(fā)展前景[J]. 現(xiàn)代漁業(yè)信息，（9）：12-16. [Lu Z K. 1998. Breeding technology of Lates calcarifer（Bloch） and its development prospect[J]. Modern Fishery Information，（9）：12-16.]

牟洪生，劉慧娟. 2012. 中草藥復(fù)方A對羅非魚消化酶活性的影響[J]. 廣州城市職業(yè)學(xué)院學(xué)報，6（2）：66-70. [Mou H S，Liu H J. 2012. Effects of Chinese herbal compound A on tilapias digestive enzyme activity[J]. Journal of Guangzhou City Polytechnic，6（2）：66-70.]

齊茜，劉洪柏，麥麗開，潘鵬，王荻，劉曉勇. 2016. 復(fù)方中草藥對閃光鱘生長及血液生化指標(biāo)的影響[J]. 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，38（1）：160-167. [Qi Q，Liu H B，Mai L K，Pan P，Wang D，Liu X Y. 2016. Effects of Chinese medicinal herb compound additives on growth and blood biochemical indicator of Acipenser stellatus[J]. Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis，38（1）：160-167.]

譚娟，鄧雨飛，曹宇艦，姚益洲，馬超. 2015. 飼料中添加復(fù)方中草藥對草魚幼魚生長、肌肉成分及免疫相關(guān)酶活性的影響[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，42（10）：109-113. [Tan J，Deng Y F，Cao Y J，Yao Y Z，Ma C. 2015. Effects of Chinese herbal compound in feed on growth，muscle composition and immune-related enzyme activities of juvenile grass carp（Ctenopharyngodon idellus）[J]. Guangdong Agricultural Sciences，42（10）：109-113.]

王麗榮，張海棠，劉保國，董永軍，王承民，王艷榮，石敏，張詠麗. 2004. 甘草多糖的提取及其對肉仔雞生長性能的影響[J]. 飼料工業(yè)，25（8）：44-45. [Wang L R，Zhang H T，Liu B G，Dong Y J，Wang C M，Wang Y R，Shi M，Zhang Y L. 2004. Effect of glycyrrhiza polysacchride on the growth performance of broiler[J]. Feed Industry，25（8）：44-45.]

王文博，方平，林小濤，夏磊，齊長寶，汪建國，孫軍. 2007. 甘草粗提物對鯽的抗應(yīng)激及免疫保護功效研究[J]. 淡水漁業(yè)，37（4）：3-6. [Wang W B，F(xiàn)ang P，Lin X T，Xia L，Qi C B，Wang J G，Sun J. 2007. Effect of liquorice extracts on the resistance of Carassius auratus to stress and pathogen infection[J]. Fresh Water Fisheries，37（4）：3-6.]

王元花，閻芳，金永生. 2017. 甘草有效成分的提取及協(xié)同氟康唑抗真菌活性研究[J]. 藥學(xué)服務(wù)與研究，17（3）：218-222. [Wang Y H，Yan F，Jin Y S. 2017. Extraction of active ingredients from roots of Glycyrrhiza uralensis Fisch. and their synergistic antifungal activity with fluconazole[J]. Pharmaceutical Care and Research，17（3）：218-222.]

翁秦江，李澤鑫，魯康樂，王玲，張春曉，宋凱. 2019. 亞硝酸鹽脅迫下發(fā)酵甘草對斜帶石斑魚血液指標(biāo)與抗氧化能力的影響[J]. 飼料研究，42（5）：24-27. [Weng Q J，Li Z X，Lu K L，Wang L，Zhang C X，Song K. 2019. Effect of different levels of fermented licorice on the blood index and antioxidant ability of grouper under nitrite stress[J]. Feed Research，42（5）：24-27.]

吳瑛，袁守亮，盧世林. 2006. 甘草作為獸用藥和飼料的應(yīng)用研究[J]. 飼料研究，（9）：18-21. [Wu Y，Yuan S L，Lu S L. 2006. Application of glycyrrhiza as animal medicine and feed[J]. Feed Research，（9）：18-21.]

徐安樂，黎中寶，上官靜波，胡曉偉，黃永春，林茂松，林澤濱. 2018. 復(fù)方中草藥對珍珠龍膽石斑魚生長、非特異性免疫及消化酶活性的影響[J]. 海洋學(xué)報，40（12）：49-57. [Xu A L，Li Z B，Shangguan J B，Hu X W，Huang Y C，Lin M S，Lin Z B. 2018. Effects of compound Chinese herbal medicine on growth performance，non-specific immunity and digestive enzyme activity of pearl gentian grouper[J]. Acta Oceanologica Sinica，40（12）：49-57.]

楊靜，常小強，王霞，孫德梅，王新靈. 2017. 甘草活性成分提取及抑菌活性研究[J]. 河南科學(xué)，35（10）：1587-1591. [Yang J，Chang X Q，Wang X，Sun D M，Wang X L. 2017. Extraction and antimicrobial activity of active components from glycyrrhiza[J]. Henan Science，35（10）：1587-1591.]

葉建生，閻斌倫，王興強. 2018. 中草藥制劑對凡納濱對蝦非特異性免疫的影響[J]. 揚州大學(xué)學(xué)報（農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版）， 39（1）：25-30. [Ye J S，Yan B L，Wang X Q. 2018. Effects of dietary traditional Chinese medicines on the non-special immune of Litopenaeus vannamei[J]. Journal of Yangzhou University（Agricultural and Life Science Edition），39（1）：25-30.]

袁豐華，林黑著，李卓佳，陸鑫，陳旭，楊其彬. 2010. 凝結(jié)芽孢桿菌對尖吻鱸的生長、消化酶及非特異性免疫酶的影響[J]. 上海海洋大學(xué)學(xué)報，19（6）：792-797. [Yuan F H，Lin H Z，Li Z J，Lu X，Chen X，Yang Q B. 2010. Effects of Bacillus coagulans on growth performance，digestive enzymes and nonspecific immune enzymes of sea bass（Lates calcarifer）[J]. Journal of Shanghai Ocean University，19（6）：792-797.]

張光輝，郭惠，張拴，趙忠孝，閆浩. 2019. 甘草苷的合成及抗氧化活性研究[J]. 化學(xué)與生物工程，36（10）：16-19. [Zhang G H，Guo H，Zhang S，Zhao Z X，Yan H. 2019. Synthesis and antioxidant activity of liquiritin[J]. Chemi-stry & Bioengineering，36（10）：16-19.]

趙森銘，李慧曉，張志超，辛愛玲，馬斌. 2019. 甘草水提后藥渣的化學(xué)成分及抗氧化活性研究[J]. 廣東藥科大學(xué)學(xué)報，35（5）：614-618. [Zhao S M，Li H X，Zhang Z C，Xin A L，Ma B. 2019. Study on chemical constituents and antioxidant activity of the residues of Glycyrrhiza uralensis Fisch. after water extraction[J]. Journal of Guangdong Pharmaceutical University，35（5）：614-618.]

趙書燕，林黑著，黃忠，周傳朋，王珺，王蕓，戚常樂. 2017. 不同蛋白水平對2種規(guī)格石斑魚生長性能、血清生化及肌肉品質(zhì)的影響[J]. 南方水產(chǎn)科學(xué)，13（4）：87-96. [Zhao S Y，Lin H Z，Huang Z，Zhou C P，Wang J，Wang Y，Qi C L. 2017. Effect of dietary protein level on growth performance，plasma biochemical indices and flesh quality of grouper（Epinephelus lanceolatus×E. fuscoguttatus） at two growth stages[J]. South China Fisheries Science，13（4）：87-96.]

趙旺，胡靜，馬振華，于剛，楊蕊，王理. 2017. 尖吻鱸幼魚形態(tài)性狀對體質(zhì)量影響的通徑分析及生長曲線擬合[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報，48（9）：1700-1707. [Zhao W，Hu J，Ma Z H，Yu G，Yang R，Wang L. 2017. Path analysis and growth curve fitting of morphological traits to body weight of juvenile Lates calcarifer[J]. Journal of Southern Agriculture，48（9）：1700-1707.]

周勝杰，胡靜，于剛，楊其彬，楊蕊，劉亞娟，馬振華. 2018a. 光周期對尖吻鱸仔稚魚消化酶活性的影響[J]. 海洋科學(xué)，42（6）：63-69. [Zhou S J，Hu J，Yu G，Yang Q B，Yang R，Liu Y J，Ma Z H. 2018a. Effects of photoperiod on digestive enzyme activity in larval and juvenile barramundi Lates calcarifer（Bloch）[J]. Marine Sciences，42（6）：63-69.]

周勝杰，馬婷，胡靜，馬振華，楊其彬，陳旭，楊蕊，劉亞娟，孟祥君. 2018b. 尖吻鱸仔魚骨骼發(fā)育觀察[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報，49（3）：592-598. [Zhou S J，Ma T，Hu J，Ma Z H，Yang Q B，Chen X，Yang R，Liu Y J，Meng X J. 2018b. Skeleton development observation of Lates calcarifer larva fish[J]. Journal of Southern Agriculture，49（3）：592-598.]

周永昌，姜曉東，龍曉文，蔣火金，成永旭，吳旭干. 2019. 中草藥對中華絨螯蟹幼蟹生長及免疫力的影響[J]. 水產(chǎn)科學(xué)， 38（2）：188-193. [Zhou Y C，Jiang X D，Long X W，Jiang H J，Cheng Y X，Wu X G. 2019. Effects of Chinese herbal compounds on growth performance and immune capacities of Chinese mitten crab Eriocheir sinensis[J]. Fisheries Science，38（2）：188-193.]

Chen X R，Mai K S，Zhang W B，Wang X J，Ai Q H，Xu W，Liufu Z G，Ma H M，Tan B P. 2010. Effects of dietary glycyrrhizin on growth and nonspecific immunity of white shrimp，Litopenaeus vannamei[J]. Journal of the World Aquaculture Society， 41（5）：665-674.

Cheng C H，Yang F F，Ling R Z，Liao S A，Miao Y T，Ye C H，Wang A L. 2015. Effects of ammonia exposure on apoptosis， oxidative stress and immune response in puffer-fish（Takifugu obscurus）[J]. Aquatic Toxicology，164（1）：61-71.

Elabd H，Wang H P，Shaheen A，Yao H，Abbass A. 2016. Feeding Glycyrrhiza glabra（liquorice） and Astragalus membranaceus（AM） alters innate immune and physiological responses in yellow perch（Perca flavescens）[J].

Fish & Shellfish Immunology， 54：374-384.

Elabd H，Wang H P，Shaheen A，Yao H，Abbass A. 2017. Anti-oxidative effects of some dietary supplements on Yellow perch （Perca ?avescens） exposed to different physical stressors[J]. Aquaculture Reports，8：21-30.

Garling D L，Wilson R P. 1976. Optimum dietary protein to energy ratio for channel catfish fingerlings，Ictalurus punctatus[J]. Journal of Nutrition，106（9）：1368-1375.

Guo X F，Cheng L，Liu J F，Zhang S J，Sun X Z，Al-Marashdeh O. 2019. Effects of licorice extract supplementation on feed intake，digestion，rumen function，blood indices and live weight gain of Karakul sheep[J]. Animals，9（5）：279.

Gutteridge J M C. 1995. Lipid peroxidation and antioxidants as biomarkers of tissue damage[J]. Clinical Chemistry，41（2）：1819-1828.

Hu Y Y，Liu C H，Wang R P，Liu C，Liu P，Zhu D Y. 2000. Protective actions of salvianolic acid A on hepatocyte injured by peroxidation in vitro[J]. World Journal of Gastroenterology，6（3）：402-404.

Koneri R，Balaraman R，F(xiàn)irdous S M，Kumar M V. 2008. Hepatoprotective effects of Momordica cymbalaria Fenzl. against carbon tetrachloride induced hepatic injury in rats[J]. Pharmacologyonline，1：365-374.

Mansour M A. 2000. Protective effects of thymoquinone and desferrioxamine against hepatotoxicity of carbon tetrachloride in mice[J]. Life Sciences，66（26）：2583-2591.

Tan X H，Lin H Z，Huang Z，Zhou C P，Wang A L，Qi C L，Zhao S Y. 2016. Effects of dietary leucine on growth performance， feed utilization，non-specific immune respon-ses and gut morphology of juvenile golden pompano Trachinotus ovatus[J]. Aquaculture，465：100-107.

Yin G J，Cao L P，Xu P，Jeney G，Nakao M，Lu C P. 2011. Hepatoprotective and antioxidant effects of glycyrrhiza glabra extract against carbon tetrachloride（CCl4）-induced hepatocyte damage in common carp（Cyprinus carpio）[J]. Fish Physiology & Biochemistry，37（1）：209-216.

Zhao J，Liu Y，Zhou X Q，Li S H，Jiang J，Kuang S Y，Wu P，Jiang W D，Tang L，F(xiàn)eng L. 2013. Effects of dietary isoleucine on the immune response，antioxidant status and gene expression in the head kidney of juvenile Jian carp（Cyprinus carpio var. Jian）[J]. Fish & Shellfish Immunology，35（2）：572-580.

（責(zé)任編輯 羅 麗）