姬松茸支鏈氨基酸的抗運(yùn)動(dòng)疲勞作用

劉 誠(chéng)

（平頂山職業(yè)技術(shù)學(xué)院，河南 平頂山 467000）

姬松茸（Agaricus blazei）原產(chǎn)巴西高山，故又稱(chēng)“巴西蘑菇”。醫(yī)學(xué)研究表明姬松茸具有抗疲勞功效，還對(duì)骨質(zhì)疏松有一定療效[1]。姬松茸也是一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高的健康食用菌，富含多種人體必需氨基酸、蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)元素，能夠有效提高人體機(jī)能[1]。人們把蛋白質(zhì)中常見(jiàn)3種氨基酸，即纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸統(tǒng)稱(chēng)為支鏈氨基酸（branched chain amino acids，BCAA）[2]，許多運(yùn)動(dòng)營(yíng)養(yǎng)保健品中都含有支鏈氨基酸，它可以促進(jìn)人體肌肉合成代謝，輔助合成肌肉形成所需的其它氨基酸，對(duì)人體肌肉的增長(zhǎng)具有一定的效果[3]。

1 材料與方法

1.1 試劑

全血乳酸（LD） 測(cè)試盒、血尿素氮（BUN） 測(cè)試盒、乳酸脫氫酶（LDH）測(cè)定試劑盒均由北京綠源伯德生物科技有限公司生產(chǎn)。

1.2 儀器設(shè)備

本試驗(yàn)所用的主要儀器設(shè)備如表1所示。

表1 試驗(yàn)主要儀器設(shè)備Tab.1 Main test instruments and equipment

1.3 姬松茸樣品溶液

姬松茸樣品溶液采用超聲波輔助法提取[4]。試驗(yàn)所用鮮姬松茸采購(gòu)自上海市閔行區(qū)盛之鑫食品經(jīng)營(yíng)部，將鮮姬松茸切片，在80℃下烘箱中烘干30 min后，上粉碎機(jī)制成粉，過(guò)80目篩；取姬松茸粉末加水混合，放入SL-SM系列超聲波微波組合反應(yīng)系統(tǒng)中，按標(biāo)準(zhǔn)程序進(jìn)行游離氨基酸提取，最終得姬松茸樣品溶液。

2 抗疲勞試驗(yàn)方法

試驗(yàn)選用健康昆明二級(jí)小鼠，雌雄各半，體重(20±5)g。分籠飼養(yǎng)，每籠10只，飼養(yǎng)條件為標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物飼料喂養(yǎng)，自由飲食和飲水；在動(dòng)物房飼育室中進(jìn)行，相對(duì)濕度維持在（50±10）%，溫度維持在（26±2）℃，室內(nèi)照明控制在12 h/12明暗交替周期。

每批小鼠適用性喂養(yǎng)7 d后分組，選用健康雌雄各半小鼠120只，分成2組進(jìn)行試驗(yàn)，每組40只。試驗(yàn)組每日定時(shí)經(jīng)口灌胃姬松茸樣品溶液1次，劑量為2 g·kg-1體重；對(duì)照組（CK） 每日定時(shí)經(jīng)口灌胃1次，同樣體積的純凈水。每日上午進(jìn)行定時(shí)游泳訓(xùn)練15 min，下午進(jìn)行小鼠灌胃試驗(yàn)，連續(xù)30 d。

2.1 抗疲勞負(fù)重游泳

在小鼠最后1次灌胃0.5 h后，每組各取小鼠10只對(duì)其進(jìn)行負(fù)重游泳試驗(yàn)，在小鼠尾部系其體重5%的鉛皮，將小鼠放置于水桶中，水溫維持在（25.0±2.0）℃左右，記錄小鼠入水至全部身體沉入水中的時(shí)間作為小鼠負(fù)重游泳時(shí)間。

2.2 全血乳酸（LD） 試驗(yàn)

乳酸是糖一種無(wú)氧代謝物，反映了機(jī)體組織供氧和代謝狀態(tài)，是一項(xiàng)重要的疲勞程度數(shù)據(jù)。在小鼠末次灌胃0.5 h后，每組各取小鼠10只并對(duì)其進(jìn)行負(fù)重游泳試驗(yàn)，在小鼠尾部系其體重5%的鉛皮，將小鼠放置于30 cm左右的水桶中，水溫維持在（25.0±2.0）℃左右，讓小鼠游泳30 min后采取摘眼球的方法進(jìn)行小鼠取血并同時(shí)制備小鼠血清，采用分光光度法測(cè)定全血乳酸含量。

2.3 乳酸脫氫酶（LDH）和血尿素氮（BUN）試驗(yàn)

乳酸脫氫酶影響機(jī)體組織的能量代謝，而尿素氮?jiǎng)t是機(jī)體組織蛋白質(zhì)代謝的最終產(chǎn)物，這兩項(xiàng)指標(biāo)也是反映機(jī)體組織疲勞程度的重要參考。在小鼠末次灌胃0.5 h后，每組各取小鼠10只并對(duì)其進(jìn)行負(fù)重游泳試驗(yàn)，在小鼠尾部系其體重5%的鉛皮，將小鼠放置于30 cm左右的水桶中，水溫維持在（25.0±2.0）℃左右，讓小鼠游泳30 min后采取摘眼球取血的方法進(jìn)行小鼠取血并同時(shí)制備小鼠血清，采用分光光度法測(cè)定乳酸脫氫酶的含量和血尿素氮的含量。

3 試驗(yàn)結(jié)果與討論

3.1 對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響

分別對(duì)2組小鼠灌胃30 d，然后進(jìn)行負(fù)重游泳試驗(yàn)并記錄時(shí)間，試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。

表2 不同組分對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響Tab.2 Effects of different component on burden swimming time of mice

由表2可知，試驗(yàn)組小鼠負(fù)重游泳時(shí)間較對(duì)照組增加較多，說(shuō)明姬松茸中富含的支鏈氨基酸能很好的增加小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，對(duì)運(yùn)動(dòng)耐力的增加效果良好。

3.2 對(duì)小鼠血清LD的影響

分別對(duì)2組小鼠灌胃30 d，然后進(jìn)行負(fù)重游泳30 min，取小鼠血清進(jìn)行LD測(cè)定，結(jié)果如表3所示。

表3 不同組分對(duì)運(yùn)動(dòng)后小鼠LD的影響Tab.3 Effects of different component on blood lactic acid of mice

由表3可知，姬松茸組小鼠的LD含量較對(duì)照組基本相同，姬松茸組小鼠的LD含量和對(duì)照組小鼠的LD含量沒(méi)有有顯著性差異。這說(shuō)明姬松茸中的支鏈氨基酸對(duì)運(yùn)動(dòng)后小鼠LD的產(chǎn)生抑制作用不明顯，在減少LD的生成和積累方面效果不顯著。

3.3 對(duì)小鼠血清LDH的影響

分別對(duì)2組小鼠灌胃30 d，然后進(jìn)行負(fù)重游泳30 min，取小鼠血清進(jìn)行LDH測(cè)定，結(jié)果如表4所示。

表4 不同組分對(duì)運(yùn)動(dòng)后小鼠乳酸脫氫酶的影響Tab.4 Effects of different component on lactate dehydrogenate acid of mice

由表4可知，姬松茸組小鼠血清中LDH活性低于對(duì)照組，且與對(duì)照組比較有顯著性差異。雖然小鼠在運(yùn)動(dòng)過(guò)程中其體內(nèi)的部分細(xì)胞受損或死亡，導(dǎo)致胞漿中的LDH滲入血清中，使血清中LDH活性升高，但姬松茸樣品溶液能夠有效抑制這一過(guò)程，降低LDH在血清中的含量。結(jié)果表明，姬松茸中的支鏈氨基酸對(duì)血清中LDH活性有一定抑制作用，一定程度上減少LDH的活性，因此姬松茸中的支鏈氨基酸具有保護(hù)機(jī)體免受運(yùn)動(dòng)損傷的作用。

3.4 對(duì)小鼠血清BUN的影響

分別對(duì)2組小鼠灌胃30 d，然后進(jìn)行負(fù)重游泳30 min，取小鼠血清進(jìn)行BUN測(cè)定，結(jié)果如表5所示。

表5 不同組分對(duì)運(yùn)動(dòng)后小鼠BUN的影響Tab.5 Effects of different component on blood lactic acid of mice

由表5可知，姬松茸組小鼠的BUN含量較對(duì)照組有較一定幅度的降低，姬松茸組小鼠運(yùn)動(dòng)后BUN含量與對(duì)照組BUN含量無(wú)顯著性差異（P>0.05）。這說(shuō)明姬松茸中的支鏈氨基酸對(duì)運(yùn)動(dòng)后小鼠BUN的產(chǎn)生有一定的抑制作用，可以一定程度上減少蛋白質(zhì)和含氮化合物的分解代謝，從而提高機(jī)體能量物質(zhì)的儲(chǔ)備和利用，在運(yùn)動(dòng)中獲得更充足的能量以緩解機(jī)體對(duì)負(fù)荷的不適應(yīng)，具有一定的抗疲勞效果。

4 結(jié)論

對(duì)姬松茸支鏈氨基酸的抗疲勞作用進(jìn)行了試驗(yàn)研究，通過(guò)小鼠動(dòng)物試驗(yàn)表明，姬松茸支鏈氨基酸的對(duì)小鼠的肌肉能力提升有較好的效果、能顯著增加小鼠耐力。小鼠肌肉的生長(zhǎng)與蛋白質(zhì)有很大關(guān)系，優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)是肌肉生長(zhǎng)的重要來(lái)源，氨基酸是蛋白質(zhì)組成重要材料。而支鏈氨基酸是肌肉蛋白的重要組成部分，占到了近30%的比例。在小鼠負(fù)重游泳試驗(yàn)中，小鼠肌肉中的支鏈氨基酸的消耗很快，而灌胃姬松茸樣品溶液是一種額外的支鏈氨基酸補(bǔ)充，可以提高小鼠運(yùn)動(dòng)能力，延緩疲勞的產(chǎn)生，減緩肌肉疲勞，幫助小鼠肌肉恢復(fù)到正常的支鏈氨基酸水平，從試驗(yàn)結(jié)果上也證明了這一點(diǎn)；另外支鏈氨基酸的功能除了幫助合成蛋白質(zhì)外，還體現(xiàn)在其作為氮的載體，是輔助合成肌肉合成所需其它氨基酸的基礎(chǔ)。支鏈氨基酸通過(guò)刺激胰島素等相關(guān)激素的產(chǎn)生來(lái)促進(jìn)肌肉對(duì)氨基酸的吸收、支鏈氨基酸作為一種促合成劑對(duì)肌肉的耐力和生長(zhǎng)起頭十分重要的作用。

血清試驗(yàn)表明，姬松茸支鏈氨基酸能降低血清中的LDH和BUN含量，保護(hù)機(jī)體免受運(yùn)動(dòng)損傷，具有一定的抗疲勞效果。血清中的乳酸脫氫酶是一種體內(nèi)能量代謝過(guò)程中產(chǎn)生的酶，在內(nèi)臟等組織中廣泛存在，當(dāng)有機(jī)體組織受損傷時(shí)，乳酸脫氫酶被釋放到血液中，表現(xiàn)出很高的活性。通過(guò)檢測(cè)血清中的乳酸脫氫酶活力就可以輔助診斷一些心梗、肝病等疾病。當(dāng)出現(xiàn)機(jī)體運(yùn)動(dòng)損傷時(shí)，如常見(jiàn)的橫紋肌損傷、大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練后的肌肉疲勞性損傷也會(huì)出現(xiàn)乳酸脫氫酶的增高。單純從運(yùn)動(dòng)學(xué)角度看，乳酸脫氫酶增高只是表明肌肉組織已經(jīng)受損，或者是營(yíng)養(yǎng)不良產(chǎn)生的機(jī)體疲勞感；但從臨床上看，還可能伴隨有心肌梗塞、肝臟等疾病，但可以通過(guò)連續(xù)的觀察乳酸脫氫酶的變化來(lái)確定具體病因。通過(guò)給小鼠灌胃姬松茸樣品溶液，測(cè)量其乳酸脫氫酶的變化情況發(fā)現(xiàn)，負(fù)重游泳運(yùn)動(dòng)小鼠體內(nèi)的LDH含量有所降低，表明姬松茸中的支鏈氨基酸能夠減輕機(jī)體細(xì)胞受損情況，抑制LDH的增加。

而血尿素氮?jiǎng)t表明了機(jī)體腎功能的健康情況，是血漿中除蛋白質(zhì)以外的一種含氮化合物。氨基酸脫氨基后即可合成尿素，成為人體蛋白質(zhì)代謝的最終產(chǎn)物。尿素氮的升高意味著機(jī)制腎功能的失調(diào)。小鼠負(fù)重游泳運(yùn)動(dòng)后體內(nèi)的BUN含量應(yīng)有所升高，但給小鼠灌胃姬松茸樣品溶液，測(cè)量其BUN變化情況發(fā)現(xiàn)有一定的降低，這說(shuō)明姬松茸中的支鏈氨基酸減少了小鼠體內(nèi)蛋白質(zhì)和含氮化合物的分解代謝，抑制了運(yùn)動(dòng)疲勞的產(chǎn)生。但試驗(yàn)也顯示，姬松茸中的支鏈氨基酸對(duì)小鼠血清LD作用不明顯，具體原因還需要進(jìn)一步的試驗(yàn)研究。