磁化水培養(yǎng)淡褐奧德蘑菌絲提升運動耐力的原理分析*

孫群群

（黔南民族師范學院，貴州 都勻 558000）

淡褐奧德蘑（Oudemansiella canarii）又稱熱帶小奧德蘑、“奧德京菇”等[1]。淡褐奧德蘑通體呈灰白色、褐色或淡褐色，褶緣粗糙、菌柄常彎曲。與寬褶菇十分相似，最明顯的是淡褐奧德蘑菌褶邊緣有暗褐色顆粒。野生多淡褐奧德蘑生長于在林中腐木，在我國黑龍江、海南和吉林等地都有分布，奧德蘑屬有30多個品種，大多數(shù)品種都可以食用。淡褐奧德蘑是一種近年來才人工馴化的野生新菌種[2]，富含蛋白質(zhì)、膳食纖維、礦物質(zhì)和維生素，而且菌肉肉質(zhì)細嫩、菌柄清脆味道鮮美，是一種不可多得的新型食用菌。除食用外，淡褐奧德蘑還含有一些乙酸乙酯、蘑酮和粘蘑菌素等物質(zhì)，具有抑菌、抑制人體淋巴細胞、癌細胞和腫瘤細胞生長的功效[3]，在國內(nèi)消費升級和食用菌產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)型的重要時期，發(fā)展淡褐奧德蘑的馴化人工栽培，挖掘其食藥用價值具有十分廣闊的市場前景。以淡褐奧德蘑為研究對象，研究磁化水對淡褐奧德蘑的生物學效應(yīng)，并就淡褐奧德蘑對運動能力的影響開展研究。

1 材料與方法

1.1 菌種試劑

淡褐奧德蘑菌株，由北京市農(nóng)林科學院植物保護環(huán)境保護研究所提供。

試驗所需試劑：鄰苯三酚、硫酸亞鐵、水楊酸鈉，天津市天力化學試劑有限公司；鹽酸、雙氧水、磷酸氫二鈉、氫氧化鈉、蒸餾水等，洛陽市化學試劑廠。以上試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器設(shè)備

DMJA-GC東磁加愛磁化器，最大磁化能力8 000 GS，由橫店集團東磁股份有限公司生產(chǎn)。將純凈水經(jīng)磁化器的磁場通道，循環(huán)磁化30 min得試驗用磁化水。

FA2004電子天平，上海精密科學儀器有限公司；HH-S21-4型電熱恒溫浴鍋，上海圣科儀器設(shè)備有限公司；101-1型電熱恒溫干燥箱，上海實驗儀器總廠；7230G型可見分光光度計，上海精密科學儀器有限公司。

1.3 培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基[4]：馬鈴薯100 g、瓊脂10 g、硫酸鎂0.5 g、硫酸鈣0.5 g、葡萄糖10 g。以上材料加純凈水500 mL得馬鈴薯培養(yǎng)基，為空白對照組（CK）；加磁化水500 mL得磁化培養(yǎng)基，為試驗組。于恒溫箱（25±2）℃中設(shè)置2周，制成試驗用培養(yǎng)基。

2 磁化水對淡褐奧德蘑菌株生長的影響

2.1 不同培養(yǎng)基的影響

在試驗組培養(yǎng)基上接種4 mm2的淡褐奧德蘑菌塊，共5個重復；對照組（CK）也接種等量菌塊。將接種好的6組菌種置于恒溫箱（25±2）℃培養(yǎng)5 d，每天觀察菌絲增長量和長勢，測量菌絲體生長速度，菌絲生長速度（V，%）的計算公式為：

式中：S為菌絲總增長量（mm），以菌落邊緣增長長度為準；D為培養(yǎng)天數(shù)（d）。

試驗結(jié)果如表1所示。

表1 淡褐奧德蘑菌絲體生長速度比較Tab.1 Comparison of mycelial growth rate of Oudemansiella canarii

由表1可以看出，淡褐奧德蘑菌株在不同培養(yǎng)基上的生長速度和長勢表現(xiàn)出了很大的差異性。5個磁化水試驗組與對照組相比，長勢均好于對照組。第2組長勢最好，菌絲生長速度最高為6.20 mm·d-1，與對照組相比增長率為27.0%。而5組平均菌絲生長速度為6.11 mm·d-1，平均增長率為25.2%。肉眼觀察淡褐奧德蘑菌株菌絲體的生長狀態(tài)，5個試驗組外觀上明顯更稠密，與對照組相比生長更加茂盛。菌絲生長速度加快的原因分析可能是由于通過磁化后的水分子密度加大，表面的分子親和度加大，吸引了更多的氧分子，從而加快了菌株細胞的新陳代謝，從而促進了菌絲細胞分裂生長速度。

2.2 不同磁化強度的影響

為了驗證上述猜想，探討磁化水對淡褐奧德蘑菌株的生物學效應(yīng)，采用不同磁化強度的水制備馬鈴薯培養(yǎng)基對淡褐奧德蘑菌株菌絲生長情況進行試驗。

采用磁化器對500 mL純凈水進行磁化，分5組進行，循環(huán)磁化時間分別為30 min、60 min、90 min、120 min、150 min，對應(yīng)的理論磁化強度分別為0.1 T、0.2 T、0.3 T、0.4 T和 0.5 T。配制馬鈴薯基礎(chǔ)培養(yǎng)基5組，分別5組不同磁化時間的磁化水作為試驗組，對照組用500 mL純凈水代替磁化水。均接種等量淡褐奧德蘑菌塊培養(yǎng)5 d，每天記錄菌絲增長量，按式（1）計算菌絲生長速度。試驗結(jié)果如表2所示。

由表2可以看出，0.3 T組的磁化水菌絲生長速度最高達6.84 mm·d-1，與對照組相比增長率最高達39.0%。雖然5組磁化水的平均菌絲生長速度為5.98 mm·d-1，均高于對照組的4.92 mm·d-1，前面0.1 T、0.2 T、0.3 T組菌絲生長速度呈穩(wěn)步上升趨勢，說明磁化的生物學效應(yīng)表現(xiàn)良好，適當增加磁化強度能夠加快菌絲的生長速度，表現(xiàn)出了正生物學效應(yīng)。原因可能是磁化提高了菌絲細胞的攜氧能力，提高了菌絲細胞壁的滲透性，從而使細胞獲得了更多的氧和其它微量元素，促進了細胞分裂生長。但繼續(xù)加大磁化強度后，在0.4 T組和0.5 T組，菌絲生長速度總體呈下降趨勢，特別是最后一組0.5 T組增長率僅為0.4%，與對照組幾乎沒有差異性，說明過高的磁場對淡褐奧德蘑菌株的生長沒有太多的生物學效應(yīng)，不能促進菌絲的生長。分析其原因可能是磁場過大，已經(jīng)破壞了菌絲細胞壁，干擾了細胞的正常生長，或是過大的磁場強度直接殺死了部分菌絲細胞，抑制了菌絲生長。

表2 不同磁化強度對淡褐奧德蘑菌絲體生長速度的影響Tab.2 Effect of different magnetization on the growth rate of Oudemansiella canarii mycelium

3 淡褐奧德蘑還原力測定

將接種的淡褐奧德蘑菌種正常培養(yǎng)成熟后采摘（從接種到子實體成熟約30 d～40 d），經(jīng)清凈、晾干、切片后在80℃下烘箱中烘干60 min，上粉碎機制成粉，過80目篩，得淡褐奧德蘑粉末備用。配制不同濃度的淡褐奧德蘑樣品溶液，取8只潔凈試管編號，精確秤取 0、0.02 g、0.04 g、0.06 g、0.08 g、0.10 g、0.12 g、0.14 g 淡褐奧德蘑粉末 8 份，各加入 5.0 mL乙醚溶解，配制成濃度為 0、4 mg·mL-1、8 mg·mL-1、12 mg·mL-1、16 mg·mL-1、20 mg·mL-1、24 mg·mL-1、28 mg·mL-1的樣品溶液。分別吸取不同濃度的樣品溶液 2.5 mL 加入 0.2 mol·L-1pH 6.6 的磷酸緩沖溶液2.5 mL和 1%的鐵氰化鉀2.0 mL，混勻后50℃水浴20 min，冷卻后加入10%FeCl32.5 mL。然后以4 000 r·min-1離心10 min，取上層清液5.0 mL，加蒸餾水 5.0 mL 和 0.1%FeCl31.0 mL，待充分混合反應(yīng)10 min，以蒸餾水為參照，于700 nm處測定吸光度，吸光度越大則說明還原力越強，試驗結(jié)果如表3。

表3 不同濃度的淡褐奧德蘑還原力測定Tab.3 Determination of reducing power of Oudemansiella canarii with different concentrations

由表3可知，淡褐奧德蘑的還原能力隨濃度的增大開始是增加的，但后來還原能力有所下降。

4 淡褐奧德蘑抗氧化性能的測定

通過測定羥自由基含量來對淡褐奧德蘑抗氧化性能進行測定，其原理是根據(jù)Fenton反應(yīng)原理，過氧化氫與二價鐵混合產(chǎn)生·OH，后者反應(yīng)活性高，存在時間短，加入的水楊酸能與·OH生成在510 nm處有強吸收的有色物質(zhì)，若加入的樣品有抗氧化性就會與水楊酸形成競爭，使有色物減少，吸光度降低，即在此波長下可以測出·OH的生成情況，進而檢測出樣品氧化的抗活性。在2.0 mL不同濃度的淡褐奧德蘑樣品溶液中加入依次加入6 mmol·L-1硫酸亞鐵溶液1 mL、水楊酸2.0 mL和6 mmol·L-1氧化氫溶液2 mL過氧化氫溶液6 mmol·L-1，40℃水浴保溫，30 min后在500 nm處測吸光度，用2 mL蒸餾水代替過氧化氫溶液測定本底吸光度，進行3個平行試驗，取其平均值作為試驗結(jié)果，試驗結(jié)果以清除率E表示，清除率（E，%）的計算公式為：

式中：A1為樣品吸光度；A2為本底吸光度；A0為空白。

淡褐奧德蘑清除羥自由基的試驗結(jié)果如圖1所示。

由圖1可知，隨著淡褐奧德蘑樣品溶液濃度增加，清除率不斷上升，濃度達到12 mg·mL-1時，清除率達到最大值41.6%，隨后不斷下降，當樣品溶液濃度達到約22 mg·mL-1后清除率甚至出現(xiàn)了負值，這說明淡褐奧德蘑清除羥自由基時濃度在12 mg·mL-1左右時清除效果最好，超過這一濃度清除效果反而降低，濃度過高反而會促進羥自由基的生成。

5 結(jié)論

淡褐奧德蘑是一種新型的食用菌，其食（藥）用價值還有待進一步挖掘。目前對于其生物學效應(yīng)的研究還比較少，本文中針對磁化水對淡褐奧德蘑的生物學效應(yīng)進行了研究，結(jié)果表明磁化水對淡褐奧德蘑菌絲體生長有一定的影響，磁化水能促進菌絲細胞分裂生長，加快菌絲體的生長速度，適當增加磁化強度能夠加快菌絲的生長速度，呈現(xiàn)正生物學效應(yīng)。磁化生物學效應(yīng)可以縮短淡褐奧德蘑的制種時間和生長周期。但過大的磁化強度會對菌絲生長產(chǎn)生抑制作用。

淡褐奧德蘑對運動能力的影響主要表現(xiàn)在其具有一定的還原能力和抗氧化性，一定濃度的樣品溶液可以清除機體自由基，減少自由基對人體細胞的氧化，減少人體組織細胞的非正常損耗，促進新陳代謝從而延緩運動性疲勞。還原能力表明了淡褐奧德蘑這種抗氧化劑具有的活性，可以加快運動能力的恢復，增加運動耐力。

試驗結(jié)果可以作為人工栽培淡褐奧德蘑的參考。受研究條件限制，菌種磁化的機理尚不太清楚，有關(guān)淡褐奧德蘑其它的生物學效應(yīng)的作用機理和對運動能力的具體影響還需后期進一步研究。