CCL-18、IL-6、TNF-α在肺癌患者外周血和組織mRNA中表達(dá)情況及意義

劉苗苗 王亞豪 馬威

【摘要】 目的 探討CC家族趨化因子配體-18（CCL-18）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）在肺癌患者外周血、組織mRNA中表達(dá)情況以及臨床檢測價值。

方法 將2015年3月至2018年12月治療的82例肺癌患者的臨床資料作為觀察組，同時將同期接受健康體檢的27例志愿者資料作為對照組，所有入選者均需接受CCL-18、IL-6、TNF-α檢查，分析外周血、組織mRNA中表達(dá)情況。

結(jié)果 觀察組患者外周血CCL-18、IL-6、TNF-α水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）;非小細(xì)胞肺癌患者外周血、組織mRNA中 CCL-18、IL-6、TNF-α的表達(dá)水平均高于小細(xì)胞肺癌患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或0.01）;Ⅲ～Ⅳ期患者外周血、組織mRNA中CCL-18、IL-6、TNF-α的表達(dá)水平均高于Ⅰ～Ⅱ期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。

結(jié)論 肺癌患者組織mRNA與外周血中CCL-18、IL-6、TNF-α均呈高水平表達(dá)狀態(tài)，臨床可依據(jù)上述指標(biāo)對患者病情與預(yù)后給予有效評估。

【關(guān)鍵詞】 肺癌;CCL-18;IL-6;TNF-α

中圖分類號：R734.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2020.02.008

【Abstract】 Objective To investigate the expression of CC family chemoattractant ligand-18（CCL-18），interleukin 6（IL-6） and tumor necrosis factor-α（TNF-α） mRNA in peripheral blood and tissues from patients with lung cancer and detect clinical value.

Methods The clinical data of 82 patients with lung cancer treated in our hospital from March 2015 to December 2018 were taken as the observation group.The 27 volunteers who received health examinations in our hospital were taken as the control group.mRNA expression level of CCL-18，IL-6 and TNF-α was examined in peripheral blood and tissue.

Results The levels of CCL-18，IL-6 and TNF-α in the peripheral blood from the observation group were higher than those in the control group，and the difference was statistically significant（P<0.001）.The mRNA expression of CCL- 18，IL-6，TNF-α level in peripheral blood and tissue from patients with non-small cell lung cancer was higher than that of small cell lung cancer patients，and the difference was statistically significant（P<0.05 or 0.01）;mRNA expression of CCL-18，IL-6，TNF-α in peripheral blood and tissue from patients at Ⅲ-Ⅳ stage was higher than that from patients at stage Ⅰ-Ⅱ，and the difference was statistically significant（P<0.01）.

Conclusion The expression of CCL-18，IL-6 and TNF-α in lung cancer patients are at a high level which could be an effective clinical and prognosis indicators.

【Key words】 lung cancer;CCL-18;IL-6;TNF-α

肺癌的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)歸均為多因素共同影響的結(jié)果，與自身機(jī)體免疫系統(tǒng)存在密切關(guān)聯(lián)，其包括多細(xì)胞因子以及多細(xì)胞間的相互調(diào)節(jié)與作用[1]。有文獻(xiàn)指出，外周血內(nèi)淋巴結(jié)細(xì)胞亞群為反映人體細(xì)胞免疫功能的有效指標(biāo)，白細(xì)胞介素-6（Interleukin 6，IL-6）、腫瘤壞死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）在機(jī)體炎癥反應(yīng)與免疫調(diào)節(jié)中具有明顯作用[2]。此外，CC家族趨化因子配體-18（CC Chemokine ligand-18，CCL-18）為腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞分泌的一種細(xì)胞因子，其可參與腫瘤病理過程[3]?；诖?，本研究進(jìn)一步探討CCL-18、IL-6、TNF-α在肺癌患者外周血、組織mRNA中的表達(dá)情況，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將2015年3月至2018年12月在我院治療的82例肺癌患者的臨床資料作為觀察組，同時將同期于我院接受健康體檢的27名志愿者資料作為對照組。觀察組中男49例，女33例;年齡49～72歲，平均（60.89±3.55）歲;臨床分期Ⅰ期10例，Ⅱ期16例，Ⅲ期24例，Ⅳ期32例。對照組中男16名，女11名;年齡48～72歲，平均（61.01±3.62）歲。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。觀察組患者依據(jù)疾病類型的不同，分為非小細(xì)胞肺癌組（47例）與小細(xì)胞肺癌組（35例），其中非小細(xì)胞肺癌組男28例，女19例，年齡49～71歲，平均（60.87±3.49）歲;小細(xì)胞肺癌男21例，女14例，年齡49～72歲，平均（60.91±3.58）歲。依據(jù)臨床分期的不同，分為Ⅰ～Ⅱ期組（26例）與Ⅲ～Ⅳ期組（56例），其中Ⅰ～Ⅱ期組男15例，女11例，年齡50～72歲，平均（60.91±3.57）歲;Ⅲ～Ⅳ期組男34例，女22例，年齡50～71歲，平均（60.87±3.55）歲。兩亞組間一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 入選和排除標(biāo)準(zhǔn)

（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①觀察組經(jīng)腫塊穿刺病理學(xué)檢查或者纖維支氣管鏡檢查確診者;②臨床資料以及影像學(xué)資料均完整者;③無凝血功能障礙者。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重感染性疾病者;②表達(dá)障礙或精神疾病者;③接受分子靶向治療、化療者;④嚴(yán)重器官功能衰竭者。

1.3 方法

①清晨空腹抽取8 mL靜脈血，于3000 r/min速度離心10 min，吸取血清，于-80℃環(huán)境下保存待用。而后經(jīng)上?？道噬锟萍加邢薰咎峁┑脑噭┖校捎妹嘎?lián)免疫吸附法測定CCL-18、IL-6、TNF-α水平。②術(shù)中切除標(biāo)本，用生理鹽水將血液沖洗干凈后，放置在液氮內(nèi)冷凍，而后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱內(nèi)保存，經(jīng)Applied Biosystems實(shí)時熒光定量PCR儀行半定量檢測。③臨床分期為4期，Ⅰ期：無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移;Ⅱ期：腫瘤侵犯至內(nèi)臟胸膜，非全肺性肺不張或同側(cè)肺門和（或）同側(cè)支氣管旁淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移;Ⅲ期：腫瘤侵犯至機(jī)體胸壁、隔膜、心包、縱隔胸膜，全肺性肺不張，腫瘤侵犯至同側(cè)縱隔和（或）氣管叉隆凸下淋巴轉(zhuǎn)移;Ⅳ期：腫瘤侵犯至機(jī)體心臟、縱隔、氣管、大血管、食道等，心包腔或惡性胸腔積液，原發(fā)腫瘤處肺葉存在其他腫瘤結(jié)節(jié)，或肺門淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或?qū)?cè)縱隔轉(zhuǎn)移，或鎖骨或同側(cè)角肌上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

1.4 評價指標(biāo)

分別記錄肺癌患者、健康志愿者、非小細(xì)胞肺癌患者、小細(xì)胞肺癌患者、Ⅰ～Ⅱ期患者、Ⅲ～Ⅳ期患者外周血及組織mRNA中CCL-18、IL-6、TNF-α的表達(dá)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 24.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料符合正態(tài)分布，以（±s）表示，采用成組t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)：α=0.05，雙側(cè)檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 外周血CCL-18、IL-6、TNF-α水平

觀察組外周血CCL-18、IL-6、TNF-α水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）。見表1。

2.2 不同疾病類型CCL-18、IL-6、TNF-α水平

非小細(xì)胞肺癌患者外周血、組織mRNA中CCL-18、IL-6、TNF-α表達(dá)水平均高于小細(xì)胞肺癌患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或0.01）。見表2。

2.3 不同臨床分期CCL-18、IL-6、TNF-α水平

Ⅲ～Ⅳ期患者外周血、組織mRNA中CCL-18、IL-6、TNF-α表達(dá)水平均高于Ⅰ～Ⅱ期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。見表3。

3 討論

現(xiàn)階段，隨著臨床對人體免疫機(jī)制研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)機(jī)體免疫功能情況與肺癌的發(fā)生、發(fā)展等存在一定關(guān)聯(lián)，細(xì)胞因子與機(jī)體免疫反應(yīng)中具有重要調(diào)節(jié)作用，且可對腫瘤的轉(zhuǎn)移以及生長產(chǎn)生明顯影響[4]。

多種細(xì)胞因子與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸及預(yù)后等均存在一定關(guān)聯(lián)，同時細(xì)胞因子在機(jī)體免疫防御反應(yīng)中具有重要調(diào)節(jié)中心作用。在大部分炎癥疾病中，IL-6含量均處于較高水平，且IL-6與機(jī)體腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，其可促使腫瘤血管進(jìn)一步生成，且可為癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移以及生長創(chuàng)造有利條件。有研究指出，與正常人群相較而言，肺癌患者IL-6水平明顯較高，認(rèn)為該現(xiàn)象可能與癌組織浸潤刺激該指標(biāo)釋放與分泌有關(guān)[5]。TNF-α是通過單核細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞分泌的一種促炎癥細(xì)胞因子，具有抗感染與抗腫瘤作用，同時也可在病理情況下參與休克、發(fā)熱以及炎癥等反應(yīng)[6]。在患者發(fā)病過程中，該指標(biāo)的大量釋放可直接損傷相關(guān)細(xì)胞，并可刺激其他相關(guān)促炎癥介質(zhì)釋放，以進(jìn)一步促使炎癥級聯(lián)反應(yīng)擴(kuò)大[7]。有研究指出，腫瘤細(xì)胞所處的微環(huán)境為機(jī)體內(nèi)腫瘤轉(zhuǎn)移、侵襲、發(fā)展等物質(zhì)基礎(chǔ)，而在腫瘤微環(huán)境中部分細(xì)胞可經(jīng)過分泌趨化因子，以對腫瘤細(xì)胞生物學(xué)特性產(chǎn)生不同程度的影響[8]。趨化因子屬于可溶性蛋白，分子量較小，可通過與相關(guān)受體結(jié)合，誘導(dǎo)嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等炎性細(xì)胞逐漸趨化至人體炎癥部位，并釋放大量細(xì)胞因子，其中CCL-18多通過巨噬細(xì)胞以及樹突狀細(xì)胞分泌，可吸引皮質(zhì)層B淋巴細(xì)胞與初始T細(xì)胞參與初次機(jī)體免疫應(yīng)答，并在結(jié)直腸癌、皮膚T淋巴細(xì)胞瘤、胃癌、卵巢癌、肺癌以及乳腺癌等組織內(nèi)處于高表達(dá)狀態(tài)。此外，該指標(biāo)可對腫瘤生長產(chǎn)生誘導(dǎo)效果，利于提高機(jī)體內(nèi)腫瘤轉(zhuǎn)移以及遷移能力。本研究結(jié)果顯示，觀察組外周血、組織mRNA中CCL-18、IL-6、TNF-α的表達(dá)水平均高于對照組，非小細(xì)胞肺癌患者外周血、組織mRNA中CCL-18、IL-6、TNF-α的表達(dá)水平均高于小細(xì)胞肺癌患者，Ⅲ～Ⅳ期患者外周血、組織mRNA中CCL-18、IL-6、TNF-α的表達(dá)水平均高于Ⅰ～Ⅱ期患者，提示CCL-18、IL-6、TNF-α均在肺癌的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用，且其水平變化情況可反映患者預(yù)后效果。究其原因，上述指標(biāo)在誘導(dǎo)免疫反應(yīng)，觸發(fā)炎癥、免疫、血管生成等方面具有重要作用，其與腫瘤發(fā)展及生長存在一定關(guān)聯(lián)，可作為臨床判斷患者預(yù)后的重要指標(biāo)，且與組織mRNA表達(dá)一致，具有一定臨床應(yīng)用與推廣價值，利于患者接受。

綜上所述，肺癌患者外周血、組織mRNA中CCL-18、IL-6、TNF-α均處于高表達(dá)狀態(tài)，臨床可依據(jù)檢測結(jié)果對患者病情與預(yù)后給予有效評估。

參 考 文 獻(xiàn)

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（收稿日期：2019-04-30 修回日期：2019-07-15）

（編輯：潘明志）