• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞保護(hù)作用的研究*

    2020-03-13 03:09:02郭銀雪胡茂蓉葛平玉
    關(guān)鍵詞:腎衰腎小管黃酮

    郭銀雪,胡茂蓉,葛平玉

    (貴州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院 貴陽(yáng) 550001)

    急性腎衰是常見的急危重癥,發(fā)生率占ICU 的3-16%,腎衰導(dǎo)致腎器官無(wú)法完成正?;顒?dòng)而影響機(jī)體功能正常進(jìn)行,病情嚴(yán)重但目前尚無(wú)有效的治療方法方法,且尚不能預(yù)防高危病人急性腎衰的發(fā)生[1],及早治療急性腎衰對(duì)于機(jī)體健康意義重大。治療急性腎衰中采取有效措施防止腎小球上皮細(xì)胞損害是救治的關(guān)鍵,可避免進(jìn)一步器官衰竭從而達(dá)到緩解疾病目的[2]。腎茶作為草藥,用于治療急、慢性腎炎等疾病,其提取物在腎炎利尿、排毒等方面具有功效[3]。腎茶黃酮作為腎茶提取物之一,可抑制氧化應(yīng)激從而緩解大鼠慢性細(xì)菌性前列腺炎[4]。另外研究發(fā)現(xiàn),急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞凋亡嚴(yán)重,從而加速疾病進(jìn)程[5],腎茶黃酮是否可緩解細(xì)胞凋亡從而實(shí)現(xiàn)對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞保護(hù),目前尚不明確。因此,本研究立項(xiàng)貴州省科學(xué)技術(shù)基金項(xiàng)目,建立急性腎衰模型,提取腎小管上皮細(xì)胞,腎茶黃酮處理,檢測(cè)腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞的影響,以期為臨床上急性腎衰的治療提供一定的理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 藥物、試劑及儀器

    腎茶(豪州市常福藥業(yè)銷售有限公司),黃酮本實(shí)驗(yàn)室自行提純,腎茶取25 mg,加乙醇后超聲處理溶解,準(zhǔn)確稱量本品,自“加水至6 mL”法測(cè)吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)品,參照《中國(guó)藥典》(2015年版一部)[6]收集“山楂葉”中總黃酮含量測(cè)定方法測(cè)定波長(zhǎng)500 nm 處光密度(optic density,OD)。

    甘油(麥克林,貨號(hào):56-81-5);CCK-8 試劑盒、Annexin V-PE 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活性檢測(cè)試劑盒、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)檢測(cè)試劑盒(碧云天生物科技有 限 公 司,貨 號(hào) 分 別 為:C0037、C1065L、S0116、S1031);一抗半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cysteinasparate protease,caspase)3、caspase9、B 淋巴細(xì)胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,BCL2)、Bcl-2 相關(guān)X 蛋白(Bcl-2 Associated X Protein,BAX)(抗兔)、TGF-β1、smad3(美國(guó)abcam,貨號(hào)分別為:ab13847、ab202068、ab182858、ab32503、ab92486、ab40854)。酶標(biāo)儀(美國(guó)Awareness,型號(hào)4700);流式細(xì)胞儀(美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司,型號(hào):CytoFLEX);蛋白凝膠成像儀(上海Tanon公司,型號(hào)4800)。

    1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型建立并驗(yàn)證

    1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    清潔級(jí)健康SD 大鼠購(gòu)自貴州醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,許可證號(hào):SCXK(黔)2015 0001,重量(220±20)g,60 日齡,所有大鼠均在溫度(22 ± 2)℃、濕度(55 ±2)%、12 h/12 h(光照/黑暗)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心常規(guī)飼養(yǎng)。標(biāo)準(zhǔn)大鼠顆粒飼料,購(gòu)自貴州醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。本實(shí)驗(yàn)經(jīng)本院倫理協(xié)會(huì)審核并通過(guò)。

    1.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物建立急性腎衰模型

    根據(jù)參考文獻(xiàn)[7]建立6 只大鼠急性腎衰模型,10 mL·kg-150%甘油生理鹽水注射大鼠兩后肢,24 h后急性腎衰組大鼠血清中BUN、Cr 水平升高;腎衰組腎間質(zhì)血管壞死、炎性細(xì)胞浸潤(rùn),模型建立成功。對(duì)照組大鼠用生理鹽水代替。

    1.3 分離急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞并經(jīng)腎茶黃酮處理

    1.3.1 腎小管上皮細(xì)胞的分離及鑒定

    1.2.2 模型組和對(duì)照組大鼠取部分腎組織,放入表面有膠原的培養(yǎng)瓶中,添加DMEM 培養(yǎng)基和F-12 培養(yǎng)基培養(yǎng),直至融合傳代培養(yǎng),參考文獻(xiàn)[8]觀察腎小管上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)。

    1.3.2 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞的處理

    急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞分為模型組、(100、200、300、400)μg·mL-1腎茶黃酮組。腎小管上皮細(xì)胞均勻接種于6 孔板和96 孔板中,待細(xì)胞密度達(dá)60%時(shí),(100、200、300、400)μg·mL-1腎茶黃酮組根據(jù)文獻(xiàn)[9]添加對(duì)應(yīng)劑量腎茶黃酮;對(duì)照組和模型組培養(yǎng)基正常培養(yǎng)。

    1.3.3 CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力

    1.3.2 中96 孔板各組細(xì)胞分別在處理(0、3、6、12、24、36)h 加CCK-8 試劑,培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)2 h,酶標(biāo)儀檢測(cè)450 nm處各孔細(xì)胞OD值。

    1.3.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡能力

    1.3.2中6孔板細(xì)胞處理24 h,每孔取2×105個(gè),按照Annexin V-FITC 試劑盒說(shuō)明書,使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。

    1.3.5 試劑盒檢測(cè)SOD、MDA水平

    1.3.2 中6 孔板細(xì)胞處理24 h,嚴(yán)格按照SOD 活性檢測(cè)試劑盒、MDA檢測(cè)試劑盒步驟酶標(biāo)儀檢測(cè)SOD活性、MDA水平。

    1.3.6 蛋白免疫印跡檢測(cè)細(xì)胞中caspase3、caspase9、BCL2、BAX、TGF-β1、Smad3蛋白水平

    1.3.2 中6 孔板細(xì)胞處理24h 提取細(xì)胞總蛋白,每孔上樣25 ng,分離膠分離蛋白質(zhì),轉(zhuǎn)膜后5%脫脂奶粉室溫封閉2 h;對(duì)應(yīng)加入一抗caspase3(1:500)、caspase9(1:2000)、BCL2(1:2000)、BAX(1:1000)、TGFβ1(1:500)、Smad3(1:1000)、GADPH(1:5000),4℃孵育過(guò)夜;對(duì)應(yīng)加入二抗,室溫孵育1 h。DAB 顯色試劑盒顯色,蛋白凝膠成像儀拍照和定量分析。

    1.4 統(tǒng)計(jì)分析

    統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 22.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)量數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)描述,組內(nèi)比較用單因素方差分析,組間兩兩比較采用SNK-q法。當(dāng)P<0.05時(shí),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞增殖的影響

    與對(duì)照組相比,在細(xì)胞培養(yǎng)(3、6、12、24、36)h,模型組OD450(0.92 ± 0.12 VS 0.36 ± 0.06、1.64 ± 0.11 VS 0.46 ± 0.11、1.86 ± 0.09 VS 0.58 ± 0.06、2.06 ± 0.12 VS 0.61 ± 0.06、2.42 ± 0.15 VS 0.64 ± 0.15)降 低(P <0.05)。與模型組相比,在細(xì)胞培養(yǎng)6h,(200、300、400)μg·mL-1腎茶黃酮組OD450(0.46± 0.11 VS 0.49 ± 0.01、0.53 ± 0.03、0.62 ± 0.01)升高(P < 0.05);在細(xì)胞培養(yǎng)(12、24、36)h,(300、400)μg·mL-1腎茶黃酮組OD450(0.58±0.06 VS1.36±0.16、1.43±0.01,0.61±0.06 VS 1.76 ± 0.06、1.81 ± 0.06,0.64 ± 0.15 VS 1.89 ± 0.06、2.13 ± 0.15)升高(P < 0.05)。隨腎茶黃酮?jiǎng)┝吭黾?,OD450水平隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸升高(P < 0.05),呈劑量依賴性。詳見圖1。

    2.2 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞凋亡的影響

    與對(duì)照組相比,模型組、(100、200、300)μg·mL-1腎茶黃酮組細(xì)胞凋亡率(5.11 ± 0.69 VS 31.26 ± 4.18、19.39±2.06、8.63±1.23、6.22±0.68)升高(P<0.05)。與模型組相比,(100、200、300、400)μg·mL-1腎茶黃酮組細(xì)胞凋亡率(31.26 ± 4.18 VS 19.39 ± 2.06、8.63 ±1.23、6.22 ± 0.68、5.69 ± 1.20)降低(P < 0.05),呈劑量依賴效應(yīng)。見圖2、表1。

    2.3 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞MDA、SOD活性的影響

    與對(duì)照組相比,模型組、(100、200、300、400)μg·mL-1腎茶黃酮組SOD 活性(669.61±81.02 VS 1659.52±395.16、1342.03 ± 286.51、1156.19 ± 199.65、923.51 ±52.06、747.62 ± 36.88)升高;模型組、(100、200)μg·mL-1腎茶黃酮組MDA活性(543.16±62.35 VS 225.51±43.41、394.13±54.69、456.47±69.87)降低(P<0.05)。與模型組相比,(100、200、300、400)μg·mL-1腎茶黃酮組細(xì)胞MDA 水平(225.51 ± 43.41 VS 394.13 ± 54.69、456.47 ± 69.87、498.68 ± 56.52、526.16 ± 48.77)升高(P < 0.05);(200、300、400)μg·mL-1腎茶黃酮組細(xì)胞SOD 水 平(1659.52 ± 395.16 VS 1156.19 ± 199.65、923.51 ± 52.06、747.62 ± 36.88)降低(P < 0.05),呈劑量依賴效應(yīng)。見表2。

    圖1 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞增殖的影響

    2.4 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞凋亡蛋白caspase3、caspase9、BCL2、BAX蛋白水平的影響

    與對(duì)照組相比,模型組caspase3、caspase9、BAX(0.12 ± 0.06 VS 0.86 ± 0.21,0.21 ± 0.03 VS 0.94 ±0.19,0.31 ± 0.01 VS 1.02 ± 0.21),(100、200、300)μg·mL-1腎茶黃酮組caspase3、BAX 水平(0.12 ± 0.06 VS 0.87 ± 0.17、0.34 ± 0.09、0.38 ± 0.04,0.31 ± 0.01 VS 1.05 ± 0.17、0.46 ± 0.06、0.42 ± 0.09)升高(P < 0.05),模型組、(100、200、300、400)μg·mL-1腎茶黃酮組BCL2水平(1.02 ± 0.11 VS 0.06 ± 0.03、0.05 ± 0.02、0.15 ±0.06、0.21±0.02、0.33±0.04)降低(P<0.05)。與模型組相比,(200、300、400)μg·mL-1腎茶黃酮組caspase3、caspase9、BAX(0.86±0.21 VS 0.34±0.09、0.38±0.04、0.11 ± 0.03,0.94 ± 0.19 VS 0.15 ± 0.04、0.05 ± 0.01、0.06 ± 0.02,1.02 ± 0.21 VS 0.46 ± 0.06、0.42 ± 0.09、0.20 ± 0.04),BCL2 水平(0.06 ± 0.03 VS 0.15 ± 0.06、0.21 ± 0.02、0.33 ± 0.04)升高(P < 0.05),100 μg·mL-1腎茶黃酮組caspase9 水平(0.94±0.19 VS 0.13±0.03)降低(P<0.05),呈劑量依賴效應(yīng)。詳見圖3、表3。

    2.5 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞TGF-β 1/Smad3通路的影響

    與對(duì)照組相比,模型組、(100、200)μg·mL-1腎茶黃酮組TGF-β1、Smad3(0.23 ± 0.03 VS 0.76 ± 0.13、0.62 ± 0.06、0.31 ± 0.02,0.06 ± 0.01 VS 0.48 ± 0.05、0.32 ± 0.06、0.24 ± 0.01),300 μg·mL-1腎 茶 黃 酮 組Smad3(0.06±0.01 VS 0.11±0.03)水平升高(P<0.05)。與模型組相比,(0、100、200、300、400)μg·mL-1腎茶黃酮組TGF-β1、Smad3 水平(0.76±0.13 VS 0.62±0.06、0.31 ± 0.02、0.21 ± 0.02、0.11 ± 0.01,0.48 ± 0.05 VS 0.32 ± 0.06、0.24 ± 0.01、0.11 ± 0.03、0.06 ± 0.02)降低(P<0.05),呈劑量依賴效應(yīng)。詳見圖4、表4。

    圖2 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞凋亡的影響

    表1 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞凋亡率的影響(n = 6,± s)

    表1 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞凋亡率的影響(n = 6,± s)

    注:與對(duì)照組相比,aP < 0.05;與模型組相比,bP < 0.05;與100 μg·mL-1腎茶黃酮組相比,cP<0.05;與200μg·mL-1腎茶黃酮組相比,dP<0.05。

    組別對(duì)照組模型組100μg·mL-1腎茶黃酮組200μg·mL-1腎茶黃酮組300μg·mL-1腎茶黃酮組400μg·mL-1腎茶黃酮組凋亡率/%5.11±0.69 31.26±4.18a 19.39±2.06ab 8.63±1.23abc 6.22±0.68abcd 5.69±1.20bcd

    3 討論

    急性腎衰是導(dǎo)致死亡的主要原因之一,腎小球?yàn)V過(guò)能力下降,使BUN、Cr等在體內(nèi)積累誘發(fā)酸堿、電解質(zhì)平衡破壞,研究表明BUN、Cr 水平越高則機(jī)體越紊亂[10];與中醫(yī)祖國(guó)醫(yī)學(xué)稱“關(guān)格”、“癮畢”、“溺毒”、“腎勞”、“水腫”、“消咳”之證候相吻合[11],是中醫(yī)內(nèi)科急癥之一,溫補(bǔ)心腎、化瘀利水可使病機(jī)扭轉(zhuǎn),病情緩解。腎茶又稱“貓須草”或“貓須公”,其成分黃酮有利尿、抗氧化之功效[12],毒性小且安全性高。腎茶在治療慢性腎衰竭時(shí)可緩解BUN、Cr 等水平,對(duì)慢性腎衰有一定治療作用[13],但腎茶中黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞是否發(fā)揮作用尚不明確。急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞細(xì)胞損傷嚴(yán)重、出現(xiàn)凋亡癥狀,炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激嚴(yán)重造成機(jī)體損害[14-15]。腎茶黃酮處理急性腎衰腎小管上皮細(xì)胞是否可緩解的細(xì)胞損傷狀態(tài),對(duì)急性腎衰腎小管上皮細(xì)胞保護(hù)作用。

    表2 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞MDA、SOD活性的影響(n = 6,±s)

    表2 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞MDA、SOD活性的影響(n = 6,±s)

    注:與對(duì)照組相比,aP < 0.05;與模型組相比,bP < 0.05;與100 μg·mL-1腎茶黃酮組相比,cP<0.05;與200μg·mL-1腎茶黃酮組相比,dP<0.05;與300μg·mL-1腎茶黃酮組相比,eP<0.05。

    組別對(duì)照組模型組100μg·mL-1腎茶黃酮組200μg·mL-1腎茶黃酮組300μg·mL-1腎茶黃酮組400μg·mL-1腎茶黃酮組MDA(nmol·g-1蛋白)543.16±62.35 225.51±43.41a 394.13±54.69ab 456.47±69.87ab 498.68±56.52bc 526.16±48.77bc SOD(U·g-1蛋白)669.61±81.02 1659.52±395.16a 1342.03±286.51a 1156.19±199.65ab 923.51±52.06abc 747.62±36.88abcde

    表3 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞凋亡蛋白caspase3、caspase9、BCL2、BAX的影響(n = 6,±s)

    表3 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞凋亡蛋白caspase3、caspase9、BCL2、BAX的影響(n = 6,±s)

    注:與對(duì)照組相比,aP<0.05;與模型組相比,bP<0.05;與100μg·mL-1腎茶黃酮組相比,cP<0.05;與200μg·mL-1腎茶黃酮組相比,dP<0.05;與300μg·mL-1腎茶黃酮組相比,eP<0.05。

    組別對(duì)照組模型組100μg·mL-1腎茶黃酮組200μg·mL-1腎茶黃酮組300μg·mL-1腎茶黃酮組400μg·mL-1腎茶黃酮組caspase3 0.12±0.06 0.86±0.21a 0.87±0.17a 0.34±0.09abc 0.38±0.04abc 0.11±0.03bcde caspase9 0.21±0.03 0.94±0.19a 0.13±0.03b 0.15±0.04b 0.05±0.01bcd 0.06±0.02bcd BCL2 1.02±0.11 0.06±0.03a 0.05±0.02a 0.15±0.06abc 0.21±0.02abcd 0.33±0.04abcde BAX 0.31±0.01 1.02±0.21a 1.05±0.17a 0.46±0.06abc 0.42±0.09abc 0.20±0.04bcde

    本研究發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,模型組OD450降低,凋亡率增加,SOD 活性升高,MDA 水平降低;提示急性腎衰導(dǎo)致腎小管上皮細(xì)胞增殖降低、細(xì)胞凋亡現(xiàn)象明顯,氧化應(yīng)激加重。與模型組相比,細(xì)胞培養(yǎng)(6、12、24、36)h(300、400)μg·mL-1腎茶黃酮組OD450升高,(100、200、300、400)μg·mL-1腎茶黃酮組細(xì)胞凋亡率降低,SOD 活性降低,MDA 水平升高;提示腎茶黃酮可緩解急性腎衰導(dǎo)致腎小管上皮細(xì)胞增殖降低、凋亡現(xiàn)象明顯,氧化應(yīng)激加重現(xiàn)象,且隨著劑量的增加,該緩解效果越明顯。推測(cè)可能是腎茶黃酮具有促進(jìn)細(xì)胞增殖、抗凋亡、抑制氧化應(yīng)激從而減緩細(xì)胞損傷狀態(tài),從而恢復(fù)腎小球?yàn)V過(guò)功能,實(shí)現(xiàn)對(duì)急性腎衰腎小管上皮細(xì)胞保護(hù)。

    BAX與BCL2都為BCL2家族成員,其中BAX作為促凋亡基因、BCL2 作為抗凋亡基因,二者相互作用影響細(xì)胞凋亡[16-17]。在腎小管上皮細(xì)胞損傷中,凋亡蛋白caspase-3[18]、caspase-9[19]水平升高可促進(jìn)細(xì)胞凋亡;caspase3、caspase9、BCL2、BAX 作為凋亡蛋白,水平均可反映腎小管上皮細(xì)胞凋亡狀態(tài)[20]。TGF-β1/Smad3通路TGF-β1 可以活化下游Smad3 誘導(dǎo)細(xì)胞死亡,同時(shí)可介導(dǎo)凋亡相關(guān)蛋白誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡影響疾病,在高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞中表達(dá)升高可加重疾病進(jìn)程[21];可抑制氧化應(yīng)激保護(hù)大鼠糖尿病心臟組織從而實(shí)現(xiàn)對(duì)糖尿病的緩解作用[22]。本研究發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,模型組caspase3、caspase9、BAX、TGF-β1、Smad3水平升高,BCL2 水平降低;提示腎衰竭中腎小管上皮細(xì)胞中促凋亡蛋白水平升高、抗凋亡蛋白水平升高,TGF-β1/Smad3 通路蛋白水平升高從而加速腎小管上皮細(xì)胞凋亡,加重病情。與模型組相比,腎茶黃酮各劑量組隨著劑量的增加,caspase3、caspase9、BAX、TGF-β1、Smad3 水平降低,BCL2 水平升高,可能腎茶黃酮通過(guò)抑制TGF-β1 表達(dá)從而抑制Smad3 活化從而抑制凋亡蛋白表達(dá)、促進(jìn)抗凋亡蛋白表達(dá),實(shí)現(xiàn)抑制細(xì)胞凋亡、降低細(xì)胞氧化應(yīng)激,同時(shí)促進(jìn)細(xì)胞增殖可能從而緩解BUN、Cr水平、使電解質(zhì)平衡逐漸恢復(fù),實(shí)現(xiàn)對(duì)急性腎衰腎小管上皮細(xì)胞的保護(hù)。

    圖3 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞凋亡蛋白caspase3、caspase9、BCL2、BAX的影響

    圖4 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞TGF-β1/Smad3通路的影響

    表4 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞TGF-β1、Smad3的影響(n = 6,±s)

    表4 腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞TGF-β1、Smad3的影響(n = 6,±s)

    注:與對(duì)照組相比,aP < 0.05;與模型組相比,bP < 0.05;與100 μg·mL-1腎茶黃酮組相比,cP<0.05;與200μg·mL-1腎茶黃酮組相比,dP<0.05;與300μg·mL-1腎茶黃酮組相比,eP<0.05。

    組別對(duì)照組模型組100μg·mL-1腎茶黃酮組200μg·mL-1腎茶黃酮組300μg·mL-1腎茶黃酮組400μg·mL-1L腎茶黃酮組TGF-β1 0.23±0.03 0.76±0.13a 0.62±0.06ab 0.31±0.02abc 0.21±0.02bcd 0.11±0.01bcde Smad3 0.06±0.01 0.48±0.05a 0.32±0.06ab 0.24±0.01abc 0.11±0.03abcd 0.06±0.02bcde

    綜上所述,腎茶黃酮可實(shí)現(xiàn)對(duì)急性腎衰腎小球上皮細(xì)胞的保護(hù)作用,可能是通過(guò)抑制TGF-β1/Smad3通路促進(jìn)腎小管上皮細(xì)胞增殖、抑制凋亡,抑制氧化應(yīng)激實(shí)現(xiàn)的。但具體對(duì)細(xì)胞增殖、凋亡的影響卻不清楚。本文只初步探討了腎茶黃酮對(duì)急性腎衰中腎小管上皮細(xì)胞的研究,且體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果尚需在體內(nèi)試驗(yàn)加以驗(yàn)證。

    猜你喜歡
    腎衰腎小管黃酮
    核桃低聚肽對(duì)亞急性腎衰老大鼠腎損傷的改善作用
    Wnt/β-catenin通路在腎衰康灌腸液抑制HK-2細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷的作用
    中成藥(2018年5期)2018-06-06 03:11:46
    HPLC法同時(shí)測(cè)定固本補(bǔ)腎口服液中3種黃酮
    中成藥(2017年8期)2017-11-22 03:19:40
    MIPs-HPLC法同時(shí)測(cè)定覆盆子中4種黃酮
    中成藥(2017年10期)2017-11-16 00:50:13
    DAD-HPLC法同時(shí)測(cè)定龍須藤總黃酮中5種多甲氧基黃酮
    中成藥(2017年4期)2017-05-17 06:09:50
    腎衰合劑對(duì)大鼠腎盂高灌注壓損傷的保護(hù)作用
    中成藥(2017年3期)2017-05-17 06:09:10
    腎衰合并心血管病血液透析治療40例臨床護(hù)理
    依帕司他對(duì)早期糖尿病腎病腎小管功能的影響初探
    IgA腎病患者血清胱抑素C對(duì)早期腎小管間質(zhì)損害的預(yù)測(cè)作用
    細(xì)胞因子在慢性腎缺血與腎小管-間質(zhì)纖維化過(guò)程中的作用
    99视频精品全部免费 在线| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 婷婷色av中文字幕| 尾随美女入室| 国产精品偷伦视频观看了| 777米奇影视久久| 咕卡用的链子| 秋霞在线观看毛片| 久久久久久久国产电影| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 国产黄色免费在线视频| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 日韩欧美精品免费久久| 老女人水多毛片| 久久精品人人爽人人爽视色| 日本wwww免费看| 最近中文字幕高清免费大全6| 一边摸一边做爽爽视频免费| 亚洲性久久影院| 免费观看av网站的网址| 久久久久久伊人网av| 夫妻午夜视频| 9热在线视频观看99| 国产高清三级在线| 国产福利在线免费观看视频| 色吧在线观看| 热99国产精品久久久久久7| 国产深夜福利视频在线观看| 亚洲成色77777| 亚洲天堂av无毛| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 国产成人aa在线观看| 一个人免费看片子| 全区人妻精品视频| 亚洲成国产人片在线观看| 精品第一国产精品| 日韩 亚洲 欧美在线| tube8黄色片| 亚洲av电影在线进入| 看非洲黑人一级黄片| 黄片播放在线免费| 晚上一个人看的免费电影| 免费在线观看完整版高清| 日本与韩国留学比较| 欧美国产精品一级二级三级| 国产乱来视频区| 人妻 亚洲 视频| 天天操日日干夜夜撸| 在线观看三级黄色| 最近2019中文字幕mv第一页| 成年女人在线观看亚洲视频| 亚洲精品自拍成人| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 在线免费观看不下载黄p国产| h视频一区二区三区| 日本黄大片高清| 各种免费的搞黄视频| 久久精品国产综合久久久 | 寂寞人妻少妇视频99o| 亚洲国产av影院在线观看| 好男人视频免费观看在线| 国产爽快片一区二区三区| 久久鲁丝午夜福利片| 国产 一区精品| 日韩成人av中文字幕在线观看| 性色av一级| 亚洲国产精品999| 国产极品天堂在线| 久久青草综合色| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 久久av网站| 国产黄频视频在线观看| 免费观看无遮挡的男女| 日本91视频免费播放| 插逼视频在线观看| 亚洲国产欧美在线一区| 欧美精品亚洲一区二区| 亚洲,欧美精品.| 只有这里有精品99| 久久国产亚洲av麻豆专区| 熟妇人妻不卡中文字幕| 日本黄大片高清| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 蜜桃国产av成人99| videosex国产| 亚洲美女视频黄频| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 国产乱人偷精品视频| 久久久久久久久久人人人人人人| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 女性被躁到高潮视频| 成年动漫av网址| av网站免费在线观看视频| 亚洲内射少妇av| 国产成人aa在线观看| 18禁国产床啪视频网站| 亚洲av成人精品一二三区| 一区二区三区乱码不卡18| 精品亚洲成国产av| 男的添女的下面高潮视频| 国产精品三级大全| 亚洲精品第二区| 宅男免费午夜| 亚洲熟女精品中文字幕| 9191精品国产免费久久| 男女无遮挡免费网站观看| 中文天堂在线官网| av天堂久久9| 激情视频va一区二区三区| 高清视频免费观看一区二区| 精品国产一区二区久久| 五月天丁香电影| 免费少妇av软件| 成人毛片60女人毛片免费| 在线观看三级黄色| 亚洲av综合色区一区| 久久久久精品人妻al黑| 日韩中字成人| videossex国产| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 热re99久久精品国产66热6| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 亚洲av在线观看美女高潮| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲精品乱久久久久久| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 成年人免费黄色播放视频| 日韩精品有码人妻一区| 99久久综合免费| 久久久国产欧美日韩av| 午夜日本视频在线| 午夜福利视频精品| 精品视频人人做人人爽| 国产精品一国产av| 日本欧美国产在线视频| 人妻一区二区av| 日韩精品有码人妻一区| 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 午夜av观看不卡| 亚洲,一卡二卡三卡| 久久精品国产a三级三级三级| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 中国国产av一级| 黄色 视频免费看| 老司机影院毛片| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 成年人午夜在线观看视频| 国产成人午夜福利电影在线观看| 亚洲伊人久久精品综合| 丝袜脚勾引网站| 午夜视频国产福利| 欧美bdsm另类| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产色爽女视频免费观看| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 美女福利国产在线| 秋霞伦理黄片| 视频区图区小说| 亚洲四区av| 日韩欧美一区视频在线观看| 制服诱惑二区| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 色94色欧美一区二区| 欧美精品国产亚洲| 亚洲av综合色区一区| 尾随美女入室| 午夜激情久久久久久久| 内地一区二区视频在线| 母亲3免费完整高清在线观看 | 一区二区三区乱码不卡18| 久久久精品免费免费高清| 欧美精品一区二区免费开放| 99久久精品国产国产毛片| 色94色欧美一区二区| 日韩一本色道免费dvd| 久久久久久久精品精品| 免费黄频网站在线观看国产| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 最后的刺客免费高清国语| 考比视频在线观看| 女人精品久久久久毛片| 成人二区视频| 日韩av不卡免费在线播放| 黄色怎么调成土黄色| 亚洲少妇的诱惑av| 久久99精品国语久久久| 99久国产av精品国产电影| 18+在线观看网站| 搡女人真爽免费视频火全软件| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 午夜福利,免费看| 最近最新中文字幕免费大全7| 一二三四在线观看免费中文在 | 国产高清国产精品国产三级| 在线观看人妻少妇| 日韩中字成人| 久久久久精品性色| 欧美激情国产日韩精品一区| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 另类精品久久| 免费观看在线日韩| 综合色丁香网| 久久久a久久爽久久v久久| 国产黄色免费在线视频| av国产久精品久网站免费入址| 午夜免费观看性视频| 久久久久精品久久久久真实原创| 青春草国产在线视频| 成人亚洲精品一区在线观看| 亚洲综合色网址| 国产69精品久久久久777片| 免费av不卡在线播放| 777米奇影视久久| 国产精品久久久久久久久免| 亚洲一区二区三区欧美精品| 日本欧美国产在线视频| 亚洲成色77777| 一级毛片电影观看| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 亚洲美女黄色视频免费看| av不卡在线播放| 国产伦理片在线播放av一区| 大码成人一级视频| 成年av动漫网址| 美女大奶头黄色视频| 免费大片18禁| 日韩一区二区视频免费看| 欧美日韩精品成人综合77777| 大香蕉97超碰在线| 少妇高潮的动态图| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 晚上一个人看的免费电影| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 色视频在线一区二区三区| 久久久a久久爽久久v久久| 欧美精品一区二区免费开放| 久久精品夜色国产| 日本免费在线观看一区| 久久久精品94久久精品| 丝袜喷水一区| 精品国产乱码久久久久久小说| 久久久久网色| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 99re6热这里在线精品视频| 精品午夜福利在线看| 中文字幕制服av| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 一二三四中文在线观看免费高清| 亚洲成av片中文字幕在线观看 | 亚洲情色 制服丝袜| 亚洲伊人色综图| 日韩av不卡免费在线播放| 一二三四中文在线观看免费高清| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 在线观看三级黄色| 新久久久久国产一级毛片| freevideosex欧美| av女优亚洲男人天堂| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 国产成人一区二区在线| 日韩三级伦理在线观看| 国产乱人偷精品视频| 黄片无遮挡物在线观看| 一区二区三区乱码不卡18| 国产精品人妻久久久久久| 国产成人91sexporn| 欧美xxxx性猛交bbbb| 亚洲av电影在线进入| 激情五月婷婷亚洲| 男的添女的下面高潮视频| 欧美精品av麻豆av| 老熟女久久久| 婷婷色综合大香蕉| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 久久人妻熟女aⅴ| 在线观看免费高清a一片| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产成人91sexporn| 美女视频免费永久观看网站| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 9热在线视频观看99| 午夜影院在线不卡| 又大又黄又爽视频免费| 国产亚洲一区二区精品| 母亲3免费完整高清在线观看 | 亚洲精品成人av观看孕妇| 熟女电影av网| 好男人视频免费观看在线| 欧美激情国产日韩精品一区| 亚洲情色 制服丝袜| 日韩一区二区视频免费看| 色吧在线观看| 涩涩av久久男人的天堂| 极品人妻少妇av视频| 飞空精品影院首页| 日本与韩国留学比较| 国产黄色视频一区二区在线观看| 久久99一区二区三区| 最后的刺客免费高清国语| www.av在线官网国产| 欧美精品av麻豆av| 18+在线观看网站| 国产国拍精品亚洲av在线观看| av黄色大香蕉| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产精品久久久久久久久免| 亚洲天堂av无毛| 国产乱来视频区| 22中文网久久字幕| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 人体艺术视频欧美日本| 成人无遮挡网站| 成年人免费黄色播放视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 日韩视频在线欧美| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 亚洲伊人色综图| 26uuu在线亚洲综合色| 亚洲av综合色区一区| 国产精品国产三级专区第一集| 成年人午夜在线观看视频| 国产av码专区亚洲av| 黄色毛片三级朝国网站| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 久久久久久久精品精品| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 丰满迷人的少妇在线观看| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产精品三级大全| 男人添女人高潮全过程视频| 国产男女内射视频| 午夜福利乱码中文字幕| 九色成人免费人妻av| 少妇精品久久久久久久| 国产精品人妻久久久影院| 伊人久久国产一区二区| 我的女老师完整版在线观看| 久久久a久久爽久久v久久| 色婷婷av一区二区三区视频| 伊人久久国产一区二区| 色吧在线观看| 男女午夜视频在线观看 | 青春草视频在线免费观看| 爱豆传媒免费全集在线观看| av在线老鸭窝| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| av黄色大香蕉| 久久久久视频综合| 久久久久久久亚洲中文字幕| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产一区有黄有色的免费视频| 日本vs欧美在线观看视频| 欧美成人午夜免费资源| 搡女人真爽免费视频火全软件| 狠狠精品人妻久久久久久综合| av播播在线观看一区| 少妇熟女欧美另类| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 久久精品久久久久久久性| 亚洲av中文av极速乱| 欧美日韩av久久| 日本黄大片高清| 热99国产精品久久久久久7| 国产精品久久久久久久电影| 久久影院123| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | av不卡在线播放| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 97超碰精品成人国产| 五月伊人婷婷丁香| 久久精品久久精品一区二区三区| 日韩电影二区| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| www日本在线高清视频| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 久久久国产一区二区| 免费看av在线观看网站| 国产av码专区亚洲av| 国产精品一区二区在线不卡| 免费黄频网站在线观看国产| 香蕉国产在线看| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 亚洲av国产av综合av卡| 天美传媒精品一区二区| av黄色大香蕉| 欧美日韩成人在线一区二区| 春色校园在线视频观看| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 在现免费观看毛片| 亚洲,欧美,日韩| av免费在线看不卡| 麻豆乱淫一区二区| 五月开心婷婷网| 色哟哟·www| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 交换朋友夫妻互换小说| 一区二区三区四区激情视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲高清免费不卡视频| 日韩欧美一区视频在线观看| 18在线观看网站| 久久99热这里只频精品6学生| 亚洲第一av免费看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产1区2区3区精品| 国产成人精品一,二区| 婷婷色麻豆天堂久久| 日日爽夜夜爽网站| 成人综合一区亚洲| 国产精品一国产av| 大香蕉97超碰在线| 亚洲精品一二三| av片东京热男人的天堂| 下体分泌物呈黄色| 久久久久精品人妻al黑| 爱豆传媒免费全集在线观看| 韩国高清视频一区二区三区| 色网站视频免费| 中国国产av一级| 男人舔女人的私密视频| 免费观看av网站的网址| 天美传媒精品一区二区| 久久久久久人人人人人| 大话2 男鬼变身卡| 免费大片18禁| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 老司机影院毛片| 成人影院久久| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 大话2 男鬼变身卡| 在线观看美女被高潮喷水网站| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 成年美女黄网站色视频大全免费| 国产精品三级大全| 在线免费观看不下载黄p国产| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 在线看a的网站| 亚洲精品色激情综合| 中文字幕亚洲精品专区| 美女主播在线视频| 曰老女人黄片| 久久久久精品人妻al黑| 日本vs欧美在线观看视频| 亚洲成人一二三区av| 99视频精品全部免费 在线| 国产精品女同一区二区软件| 精品一区二区三卡| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 久久久久久久大尺度免费视频| 满18在线观看网站| 热re99久久国产66热| 考比视频在线观看| 亚洲av男天堂| 国产精品久久久久久精品古装| 精品人妻偷拍中文字幕| 久久久精品区二区三区| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲成人av在线免费| 午夜91福利影院| 看免费成人av毛片| 国国产精品蜜臀av免费| 精品一品国产午夜福利视频| 成人国产av品久久久| 欧美+日韩+精品| 国产男女内射视频| 国产爽快片一区二区三区| 18在线观看网站| 国产老妇伦熟女老妇高清| 成年人免费黄色播放视频| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲精品国产av蜜桃| 亚洲一区二区三区欧美精品| 在线 av 中文字幕| 人体艺术视频欧美日本| 久久久久久久精品精品| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产精品人妻久久久影院| 午夜精品国产一区二区电影| 超色免费av| 国产 精品1| 插逼视频在线观看| 国产av国产精品国产| 成年动漫av网址| 亚洲av男天堂| 午夜精品国产一区二区电影| 久久精品国产自在天天线| 午夜福利影视在线免费观看| 日韩在线高清观看一区二区三区| 国产精品免费大片| 巨乳人妻的诱惑在线观看| av免费在线看不卡| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 大片免费播放器 马上看| 少妇人妻精品综合一区二区| 国产探花极品一区二区| 欧美国产精品一级二级三级| 欧美97在线视频| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 免费黄网站久久成人精品| 亚洲美女黄色视频免费看| 亚洲五月色婷婷综合| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 男女边吃奶边做爰视频| 亚洲欧美色中文字幕在线| 七月丁香在线播放| 亚洲图色成人| 欧美日韩成人在线一区二区| 亚洲精品日本国产第一区| 你懂的网址亚洲精品在线观看| av国产久精品久网站免费入址| 久久精品人人爽人人爽视色| 亚洲精品久久午夜乱码| 日本91视频免费播放| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 秋霞在线观看毛片| 一级片免费观看大全| 老司机亚洲免费影院| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 久久 成人 亚洲| 精品酒店卫生间| 日日爽夜夜爽网站| 国产午夜精品一二区理论片| 午夜久久久在线观看| 日韩视频在线欧美| 日韩制服骚丝袜av| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 这个男人来自地球电影免费观看 | 成人毛片60女人毛片免费| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 黄色一级大片看看| 久久综合国产亚洲精品| 人妻 亚洲 视频| 我的女老师完整版在线观看| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 2022亚洲国产成人精品| 婷婷色综合www| 欧美最新免费一区二区三区| 好男人视频免费观看在线| 在线天堂中文资源库| 天堂8中文在线网| 久久毛片免费看一区二区三区| www.熟女人妻精品国产 | 亚洲欧洲国产日韩| 妹子高潮喷水视频| 18在线观看网站| 在线 av 中文字幕| 99国产综合亚洲精品| 精品少妇内射三级| 性高湖久久久久久久久免费观看| 日日摸夜夜添夜夜爱| 在线天堂中文资源库| 久久99热这里只频精品6学生| 亚洲,欧美,日韩| 天美传媒精品一区二区| 久久久久久久亚洲中文字幕| 在线观看三级黄色| 国产xxxxx性猛交| 大片电影免费在线观看免费| 亚洲三级黄色毛片| 欧美精品国产亚洲| 精品一品国产午夜福利视频| 精品久久国产蜜桃| 国产成人精品一,二区| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 久久狼人影院| 一级a做视频免费观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 男女高潮啪啪啪动态图| 18+在线观看网站| 人人澡人人妻人| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 免费观看无遮挡的男女| 亚洲成色77777| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 欧美人与性动交α欧美软件 | 亚洲四区av| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲国产精品成人久久小说| 一级,二级,三级黄色视频| 在线免费观看不下载黄p国产| 亚洲美女黄色视频免费看| 亚洲国产成人一精品久久久| 精品国产一区二区久久| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 黄色怎么调成土黄色| 亚洲性久久影院| 亚洲,一卡二卡三卡| 久久久久久久久久人人人人人人| 亚洲综合精品二区| 亚洲av日韩在线播放| 97人妻天天添夜夜摸| 亚洲精品自拍成人| 性色av一级| 99香蕉大伊视频| 免费黄网站久久成人精品| 视频区图区小说| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 我的女老师完整版在线观看| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 伦理电影免费视频| 亚洲精品一二三| 亚洲情色 制服丝袜| 国产在线免费精品| 嫩草影院入口| 亚洲第一区二区三区不卡| 我要看黄色一级片免费的| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲av综合色区一区| 精品国产一区二区久久| 欧美精品高潮呻吟av久久|