山東省不同地區(qū)灰飛虱對(duì)溴氰蟲(chóng)酰胺的敏感性及亞致死劑量溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)灰飛虱解毒酶活性的影響

張凱倫，李忠芹，丁 杰，杜若詩(shī)，趙曉雨，夏曉明

(山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，泰安 271000)

灰飛虱Laodelphaxstriatellus(Fallén)屬半翅目飛虱科灰飛虱屬，是為害水稻、小麥、玉米和大麥等禾本科作物的重要農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)，主要分布在亞洲和歐洲的溫帶和亞熱帶地區(qū)，在我國(guó)長(zhǎng)江流域和黃淮地區(qū)為害嚴(yán)重(Xuetal., 2014; 毛旭連等，2016; Weietal., 2017; 徐鹿等，2018)。灰飛虱既可以直接為害作物，還可傳播水稻條紋葉枯病(rice stripe virus, RSV)、黑條矮縮病(rice black streaked dwarf virus, RBSDV)和玉米粗縮病(maize rough dwarf virus, MRDV)等病毒病害(Wuetal.，2001；林凌偉等，2001)，其傳毒為害造成的損失遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于直接刺吸為害(王彥華等，2010)。

灰飛虱的防治一直以化學(xué)防治為主，但是，由于化學(xué)殺蟲(chóng)劑的長(zhǎng)期不合理使用，導(dǎo)致灰飛虱對(duì)生產(chǎn)中常用的殺蟲(chóng)劑產(chǎn)生了不同程度的抗藥性(焦文娟等，2016)。目前，灰飛虱已對(duì)生產(chǎn)中常用的有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類、菊酯類、新煙堿類以及氟蟲(chóng)腈、吡蚜酮和噻嗪酮等殺蟲(chóng)劑都產(chǎn)生了不同程度的抗藥性(王利華等，2008；Xuetal., 2014; 班蘭鳳等，2015；毛旭連等，2016；徐鹿等，2018)。抗性問(wèn)題已成為導(dǎo)致蟲(chóng)害爆發(fā)并傳播流行性病毒的重要因素(Wangetal., 2010)。

溴氰蟲(chóng)酰胺(cyantraniliprole)是杜邦公司繼氯蟲(chóng)苯甲酰胺后成功開(kāi)發(fā)的一個(gè)新型鄰氨基苯甲酰胺類殺蟲(chóng)劑(余慧靈，2015)，可通過(guò)激活靶標(biāo)害蟲(chóng)的魚(yú)尼丁受體(ryanodine receptor，RyR)，釋放橫紋肌和平滑肌細(xì)胞內(nèi)的鈣，導(dǎo)致害蟲(chóng)麻痹死亡(潘飛等，2014；周操等，2016)。相比于氯蟲(chóng)苯甲酰胺，溴氰蟲(chóng)酰胺擁有更廣的殺蟲(chóng)范圍，除了可以直接殺害咀嚼式口器的鱗翅目和鞘翅目害蟲(chóng)，對(duì)于半翅目等類型害蟲(chóng)也具備一定殺傷作用(胡譯文等，2016)。在我國(guó)，溴氰蟲(chóng)酰胺單劑已登記在黃瓜、大蔥、番茄、棉花、水稻、西瓜、小白菜、豇豆上，用于防治二化螟、薊馬、甜菜夜蛾等多種害蟲(chóng)。溴氰蟲(chóng)酰胺與噻蟲(chóng)嗪復(fù)配登記在玉米上，用于防治玉米薊馬、蠐螬和小地老虎；與三氟苯嘧啶復(fù)配登記在水稻上，防治水稻稻飛虱、稻縱卷葉螟和二化螟。

研究表明，溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)白背飛虱3齡若蟲(chóng)和成蟲(chóng)均具有較好的室內(nèi)毒力，且對(duì)灰飛虱具有較好的速效性(劉磊磊等，2015；郭晨亮等，2016)。但尚未見(jiàn)田間灰飛虱對(duì)溴氰蟲(chóng)酰胺敏感性的相關(guān)報(bào)道。此外，殺蟲(chóng)劑施用于田間后，隨著時(shí)間的推移和個(gè)體接觸藥劑的差異，除了對(duì)靶標(biāo)害蟲(chóng)有直接的殺傷作用外，還對(duì)非靶標(biāo)害蟲(chóng)和部分抗藥性靶標(biāo)害蟲(chóng)存在著亞致死效應(yīng)。亞致死劑量的殺蟲(chóng)劑會(huì)給害蟲(chóng)的解毒酶系提供持續(xù)的選擇壓力誘導(dǎo)抗性的演化，加速昆蟲(chóng)抗藥性的發(fā)展(Guedesetal., 2014; 陳羿渠等，2017)。當(dāng)溴氰蟲(chóng)酰胺被施于田間防治水稻和玉米害蟲(chóng)時(shí)，不可避免地會(huì)對(duì)灰飛虱產(chǎn)生致死和亞致死效應(yīng)。

本研究采用稻苗浸漬法和點(diǎn)滴法分別測(cè)定山東地區(qū)的6個(gè)灰飛虱種群對(duì)溴氰蟲(chóng)酰胺的敏感性，并分析比較了兩個(gè)亞致死劑量溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)灰飛虱成蟲(chóng)體內(nèi)解毒代謝酶活性的影響，旨在明確山東省田間灰飛虱對(duì)溴氰蟲(chóng)酰胺的敏感性現(xiàn)狀，以及灰飛虱體內(nèi)代謝溴氰蟲(chóng)酰胺的主要解毒酶，為后期在田間科學(xué)、合理使用溴氰蟲(chóng)酰胺防治灰飛虱提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試蟲(chóng)源及飼養(yǎng)

泰安種群：2016年8月采自泰安玉米田；萊蕪種群：2016年8月采自萊蕪小楊莊玉米田；濟(jì)陽(yáng)種群：2016年10月采自濟(jì)陽(yáng)小麥田；魚(yú)臺(tái)水稻種群：2016年10月采自魚(yú)臺(tái)縣水稻田；濟(jì)南種群：2017年4月采自山東省濟(jì)南郊區(qū)水稻田；魚(yú)臺(tái)小麥種群：2017年5月采自魚(yú)臺(tái)縣小麥田。

采集的灰飛虱以未接觸農(nóng)藥的武育粳3號(hào)水稻飼養(yǎng)繁殖，試蟲(chóng)飼養(yǎng)采用無(wú)土水稻育苗法。將水稻種子進(jìn)行漂洗后以清水浸泡催芽3 d，每天換水2次。將一層吸水紙鋪在飼養(yǎng)盒(35 cm×25 cm×15 cm)中，之后將出芽后的種子均勻撒在吸水紙上。用保鮮膜密封，保鮮膜扎孔，等待水稻出苗。水稻苗長(zhǎng)至3 ～5 cm時(shí)，將灰飛虱轉(zhuǎn)移至盒內(nèi)飼養(yǎng)，并用紗布覆蓋封口。每?jī)芍茏笥业臅r(shí)間更換水稻苗以保證灰飛虱的營(yíng)養(yǎng)供給。灰飛虱飼養(yǎng)條件為：溫度25±1℃，相對(duì)濕度70%±5%，光照L ∶D=16 h ∶8 h。

1.2 供試藥劑與儀器

94%溴氰蟲(chóng)酰胺原藥(上海杜邦農(nóng)化有限公司)、α-乙酸萘酯(α-NA)(上海麥克林生化科技有限公司)、固藍(lán)RR鹽(上海麥克林生化科技有限公司)、對(duì)硝基苯甲醚(上海麥克林生化科技有限公司)、1-氯-2, 4-二硝基苯(CDNB)(上海麥克林生化科技有限公司)、還原型谷胱甘肽(北京索萊寶科技有限公司)、NADPH(北京索萊寶科技有限公司)、NaH2PO4(天津市凱通化學(xué)試劑有限公司)、Na2HPO4(天津市凱通化學(xué)試劑有限公司)、NaOH(天津市凱通化學(xué)試劑有限公司)、37%鹽酸(天津市凱通化學(xué)試劑有限公司)、BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(上海碧云天生物技術(shù)有限公司)全自動(dòng)酶標(biāo)儀680型(Bio-Rad公司)、Neofuge 13 R高速冷凍離心機(jī)(上海力申科學(xué)儀器有限公司)、手動(dòng)微量點(diǎn)滴儀(Hamilton)。

1.3 生物測(cè)定

1.3.1稻苗浸漬法

參照王利華等(2008)和班蘭鳳等(2012)報(bào)道的稻苗浸漬法，并略作改進(jìn)。在電子天平上稱取一定量溴氰蟲(chóng)酰胺原藥，用少量丙酮溶解，然后用0.1%吐溫80依次稀釋成40 mg/L、20 mg/L、10 mg/L、5.0 mg/L、2.5 mg/L一系列濃度。將6日齡武育粳3號(hào)稻苗連根一起在系列濃度的藥液中浸10 s，每個(gè)濃度重復(fù)3次，以不含藥劑的處理做空白對(duì)照，取出瀝至無(wú)液體滴下，晾干后以濕脫脂棉包住根部放入透明的試管中。用吸蟲(chóng)器將試蟲(chóng)移入試管(2 cm×20 cm)中，每管15頭，3個(gè)重復(fù)，共45頭，然后用紗布封口，以防濕度過(guò)大增加死亡率和飛虱逃逸。待試蟲(chóng)全部爬上稻苗或試管壁后，剔除機(jī)械損傷的個(gè)體，并補(bǔ)足15頭。接蟲(chóng)后把試管放入溫度25±1℃,光周期為16 h ∶8 h(光照 ∶黑暗)的培養(yǎng)箱中飼養(yǎng)。處理3天后，檢查死蟲(chóng)數(shù)。

1.3.2點(diǎn)滴法

參照Endo等(2000)方法，并略作改進(jìn)。在電子天平上稱取一定量溴氰蟲(chóng)酰胺原藥，用丙酮溶解，配制成一定濃度的母液，然后用丙酮將其稀釋成一系列濃度20 mg/L、10 mg/L、5.0 mg/L、2.5 mg/L、1.25 mg/L。CO2輕度麻醉(50 ～60 s)試蟲(chóng)后，用手動(dòng)微量點(diǎn)滴儀(0.2 μL)將藥液點(diǎn)滴于飛虱胸部背板，每濃度15頭試蟲(chóng)，重復(fù)3次，每處理共45頭，以丙酮為對(duì)照。處理后的試蟲(chóng)轉(zhuǎn)入裝有新鮮無(wú)毒稻苗的試管(2 cm×20 cm)內(nèi)，飼養(yǎng)條件為溫度25±1℃，光周期16 h ∶8 h(光照 ∶黑暗)，處理24 h后檢查結(jié)果。

1.4 亞致死劑量溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)灰飛虱解毒酶活性的影響

1.4.1試蟲(chóng)處理

選擇魚(yú)臺(tái)小麥種群作為供試試蟲(chóng)。根據(jù)前面點(diǎn)滴法測(cè)定結(jié)果，溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)魚(yú)臺(tái)小麥種群成蟲(chóng)的LD10和LD30分別為0.2431 μg/頭和0.5891 μg/頭。參照1.3.2部分描述的點(diǎn)滴法，用這兩個(gè)濃度的溴氰蟲(chóng)酰胺分別處理魚(yú)臺(tái)小麥灰飛虱種群成蟲(chóng)，每個(gè)濃度處理300頭，重復(fù)3次，以丙酮處理為對(duì)照。分別在處理6 h、12 h、24 h和48 h后，從不同處理的灰飛虱成蟲(chóng)中取生長(zhǎng)發(fā)育一致的存活成蟲(chóng)，用液氮速凍后放入-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.2酶液制備

取不同處理中的試蟲(chóng)各20頭，用1 mL磷酸緩沖液(0.1 mol/L，pH7.6)勻漿，然后在10 000 r/min、4℃離心15 min，取上清液作酶液備用。

1.4.3酯酶(esterases, ESTs)活力測(cè)定

參照Han等(1998)的方法。在10 mL 0.2 M pH 6.0磷酸緩沖液中加入20 mg固藍(lán)RR鹽和0.2 mL 100 mM α-乙酸萘酯乙醇溶液，振蕩混勻后過(guò)濾得黃色澄清的底物和顯色劑混合液(需現(xiàn)用現(xiàn)配)。在96孔酶標(biāo)板中每孔加入20 μL稀釋酶液(事先用0.1 M pH 7.6的磷酸緩沖液稀釋10倍)和205 μL上述底物和顯色劑混液。用酶標(biāo)儀在波長(zhǎng)450 nm下記錄光密度值，酶促反應(yīng)在27℃下進(jìn)行，每隔30 s記錄一次，反應(yīng)15 min。

1.4.4谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(glutathione-S-transferases, GSTs)活力測(cè)定

參照Kao等(1989)的方法。在酶標(biāo)板中加入0.6 mmol/L 1-氯-2,4-二硝基苯(CDNB)50 μL 和6 mmol/L還原型谷胱甘肽(GSH)100 μL，再加入100 μL酶液。利用酶標(biāo)儀測(cè)定D340值，記錄10 min內(nèi)D340變化值，隔20 s記錄一次，共記錄31次。酶促反應(yīng)溫度為27℃。

1.4.5多功能氧化酶(mixed-function oxidase, MFO)活力測(cè)定

參考Shang等(1984)的方法。在酶標(biāo)板中加入1.0 mmol/L對(duì)硝基苯甲醚50 μL和1.0 mmol/L還原型輔酶Ⅱ(NADPH)50 μL，再加入100 μL酶液。利用酶標(biāo)儀測(cè)定D405值，記錄15 min內(nèi)D405變化值，隔20 s記錄一次，共記錄46次。酶促反應(yīng)溫度為27℃。

1.4.6蛋白質(zhì)含量的測(cè)定

使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和使用的樣品體積計(jì)算出樣品的蛋白濃度。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析方法

采用DPS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算出溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)每個(gè)地區(qū)灰飛虱的毒力回歸方程式、LC50(LD50)值及其 95%置信限、b值及其標(biāo)準(zhǔn)誤，并采用Duncan氏新復(fù)極差法分析解毒酶活性的差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 山東省不同地區(qū)灰飛虱對(duì)溴氰蟲(chóng)酰胺的敏感性

采用稻苗浸漬法和點(diǎn)滴法分別測(cè)定了溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)山東省6個(gè)灰飛虱種群的室內(nèi)毒力。稻苗浸漬法測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1和表2，溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)6個(gè)灰飛虱種群3齡若蟲(chóng)的毒力(LC50)分別為8.5193 mg/L、9.3058 mg/L、9.5712 mg/L、9.8591 mg/L、10.9706 mg/L、11.0524 mg/L，對(duì)6個(gè)灰飛虱種群成蟲(chóng)的毒力(LC50)分別為10.4245 mg/L、10.7849 mg/L、11.3864 mg/L、11.8968 mg/L、12.2561 mg/L、12.4904 mg/L。溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)6個(gè)灰飛虱種群3齡若蟲(chóng)和成蟲(chóng)的毒力均是魚(yú)臺(tái)小麥種群最高，對(duì)3齡若蟲(chóng)毒力最低的是濟(jì)南種群，對(duì)成蟲(chóng)毒力最低的是魚(yú)臺(tái)水稻種群；對(duì)同一個(gè)種群成蟲(chóng)的毒力略低于對(duì)3齡若蟲(chóng)的毒力。點(diǎn)滴法測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表3和表4，溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)6個(gè)灰飛虱種群3齡若蟲(chóng)的毒力(LD50)分別為0.9239×10-3、0.9272×10-3、0.9526×10-3、0.9832×10-3、1.0859×10-3、1.1318×10-3μg/頭，對(duì)6個(gè)灰飛虱種群成蟲(chóng)的毒力(LD50)分別為1.0933×10-3、1.1498×10-3、1.1666×10-3、1.1685×10-3、1.2087×10-3、1.2619×10-3μg/頭。溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)6個(gè)灰飛虱種群3齡若蟲(chóng)和成蟲(chóng)的毒力也均是魚(yú)臺(tái)小麥種群最高，魚(yú)臺(tái)水稻種群最低；對(duì)同一個(gè)種群成蟲(chóng)的毒力也略低于對(duì)3齡若蟲(chóng)的毒力。

表1 溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)灰飛虱3齡若蟲(chóng)的毒力(稻苗浸漬法)

表2 溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)灰飛虱成蟲(chóng)的毒力(稻苗浸漬法)

表3 溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)灰飛虱3齡若蟲(chóng)的毒力(點(diǎn)滴法)

表4 溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)灰飛虱成蟲(chóng)的毒力(點(diǎn)滴法)

檢測(cè)結(jié)果表明，溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)山東省6個(gè)灰飛虱種群的毒力差異不大。若以LC50(或LD50)值的95%置信區(qū)間是否重疊作為判斷不同藥劑之間毒力是否顯著的標(biāo)準(zhǔn)(Zhaoetal., 2006；馬崇勇等，2007)，山東省6個(gè)田間灰飛虱種群對(duì)溴氰蟲(chóng)酰胺的敏感性差異不顯著，同一地區(qū)灰飛虱種群的不同蟲(chóng)態(tài)對(duì)溴氰蟲(chóng)酰胺的敏感性也無(wú)明顯差異。

2.2 亞致死劑量溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)灰飛虱體內(nèi)主要代謝解毒酶活性的影響

采用LD10和LD30濃度的溴氰蟲(chóng)酰胺分別處理魚(yú)臺(tái)小麥灰飛虱種群成蟲(chóng)6 h、12 h、24 h和48 h后，其ESTs比活力分別增加至對(duì)照組的1.20倍、1.23倍、1.14倍、1.04倍和1.34倍、1.40倍、1.31倍、1.07倍(圖1)；其GSTs比活力分別增加至對(duì)照組的2.37倍、1.89倍、1.17倍、1.21倍和3.81倍、2.10倍、1.31倍、1.36倍(圖2)；其MFO比活力分別增加至對(duì)照組的1.50倍、1.74倍、1.46倍、1.38倍和1.75倍、2.05倍、1.57倍、1.48倍(圖3)。

結(jié)果表明， 采用亞致死劑量的溴氰蟲(chóng)酰胺處理后6～48 h，灰飛虱成蟲(chóng)體內(nèi)3種解毒酶的比活力變化基本趨于一致，均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)；ESTs和MFO的比活力在處理12 h后達(dá)到試驗(yàn)期間最大值，GSTs的比活力在處理6 h后達(dá)到試驗(yàn)期間最大值，且增長(zhǎng)倍數(shù)最高；在相同的處理時(shí)間下，LD30處理后的3種解毒酶的比活力始終要高于LD10處理組。

圖1 溴氰蟲(chóng)酰胺亞致死劑量處理后灰飛虱體內(nèi)ESTs的比活力Fig.1 The specific activity of ESTs in Laodelphax striatellus treated with sublethal doses of cyantraniliprole

圖2 溴氰蟲(chóng)酰胺亞致死劑量處理后灰飛虱體內(nèi)GSTs的比活力Fig.2 The specific activity of GSTs in Laodelphax striatellus treated with sublethal doses of cyantraniliprole

圖3 溴氰蟲(chóng)酰胺亞致死劑量處理后灰飛虱體內(nèi)MFO的比活力Fig.3 The specific activity of MFO in Laodelphax striatellus treated with sublethal doses of cyantraniliprole

3 結(jié)論與討論

由于化學(xué)防治是當(dāng)前控制灰飛虱的重要手段，而且灰飛虱對(duì)多種藥劑產(chǎn)生了不同程度的抗性，可以長(zhǎng)期用于防治灰飛虱的高效藥劑越來(lái)越少，生產(chǎn)中迫切需要補(bǔ)充新的高效藥劑來(lái)防治灰飛虱(班蘭鳳等，2015)。溴氰蟲(chóng)酰胺除了對(duì)鱗翅目害蟲(chóng)具有很好的活性，對(duì)蚜蟲(chóng)、粉虱和飛虱等半翅目害蟲(chóng)也具有優(yōu)異的活性(楊桂秋等，2012)。目前，有關(guān)溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)灰飛虱的室內(nèi)活性或田間敏感性檢測(cè)尚無(wú)報(bào)道。本研究測(cè)定了溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)山東省6個(gè)灰飛虱種群3齡若蟲(chóng)和成蟲(chóng)的毒力。結(jié)果表明，溴氰蟲(chóng)酰胺無(wú)論是對(duì)灰飛虱3齡若蟲(chóng)還是成蟲(chóng)都表現(xiàn)較好的室內(nèi)活性，且若蟲(chóng)和成蟲(chóng)的敏感性差異不大。不同田間灰飛虱種群對(duì)溴氰蟲(chóng)酰胺的敏感性差異也不顯著。

殺蟲(chóng)劑對(duì)害蟲(chóng)的毒力測(cè)定和敏感性現(xiàn)狀調(diào)查是害蟲(chóng)綜合防治中殺蟲(chóng)劑選用的重要依據(jù)(王利華等，2008)。目前，灰飛虱毒力測(cè)定方法主要有點(diǎn)滴法(馬崇勇等，2007)、稻莖浸漬法(周操等，2016)和稻苗浸漬法(王利華等，2008)3種。點(diǎn)滴法是害蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑抗性檢測(cè)的主要方法之一，測(cè)得的結(jié)果僅表示藥劑的觸殺活性(馬崇勇等，2007)。稻莖浸漬法和稻苗浸漬法可以模擬田間施藥后害蟲(chóng)取食或活動(dòng)過(guò)程中受藥中毒的情形，主要體現(xiàn)的是藥劑的內(nèi)吸性能，也可體現(xiàn)出一定的觸殺作用，能夠真實(shí)反映藥劑對(duì)灰飛虱的殺蟲(chóng)活性(劉磊磊等，2015)。而稻苗浸漬法更貼近田間實(shí)際用藥情況，可以為田間防治提供更準(zhǔn)確的信息(王利華等，2008)。本研究表明，無(wú)論采用稻苗浸漬法還是點(diǎn)滴法，溴氰蟲(chóng)酰胺均對(duì)灰飛虱表現(xiàn)出較好的室內(nèi)活性，這進(jìn)一步說(shuō)明，溴氰蟲(chóng)酰胺具有很好的觸殺效果和胃毒效果，并具有很好的內(nèi)吸活性(楊桂秋等，2012；王榮燕等，2017)。此外，由于溴氰蟲(chóng)酰胺具有極強(qiáng)的內(nèi)吸和雙向傳導(dǎo)作用，田間除了噴霧使用外還可以用于灌根或種衣劑處理(王海娜等，2014)。因此，在未來(lái)灰飛虱的防治中，溴氰蟲(chóng)酰胺將會(huì)成為一種重要的高效殺蟲(chóng)劑。

亞致死劑量的殺蟲(chóng)劑會(huì)對(duì)昆蟲(chóng)體內(nèi)的多種酶系產(chǎn)生誘導(dǎo)或抑制作用(Suetal., 2012)，改變昆蟲(chóng)對(duì)殺蟲(chóng)劑的代謝，從而影響害蟲(chóng)防治措施的有效性。酯酶(ESTs)、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GSTs)及多功能氧化酶(MFO)是昆蟲(chóng)體內(nèi)重要的解毒酶系，通過(guò)測(cè)定其活性變化來(lái)研究殺蟲(chóng)劑的亞致死效應(yīng)，已經(jīng)成為毒理學(xué)研究的重要內(nèi)容(Karuppaiahetal., 2015)。Liu等(2014)研究表明，溴氰蟲(chóng)酰胺亞致死劑量LC20和LC50處理小菜蛾3齡幼蟲(chóng)24 h和48 h后，顯著提高供試?yán)ハx(chóng)體內(nèi)羧酸酯酶、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶和多功能氧化酶的活性。余慧靈等(2015)研究發(fā)現(xiàn)，溴氰蟲(chóng)酰胺亞致死劑量(LC10和LC25)處理甜菜夜蛾幼蟲(chóng)24～96 h后，可誘導(dǎo)試蟲(chóng)體內(nèi)羧酸酯酶活性和谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶活性呈先激活升高、后抑制降低的趨勢(shì)，具有明顯的劑量效應(yīng)和時(shí)間效應(yīng)。曾賢義(2017)研究也發(fā)現(xiàn)，溴氰蟲(chóng)酰胺亞致死劑量LC30處理煙蚜8～48 h后，煙蚜體內(nèi)的GSTs和MFO比活力均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，分別在16 h和36 h時(shí)達(dá)到最大值，并顯著高于對(duì)照處理。本研究發(fā)現(xiàn)，使用LD10和LD30劑量的溴氰蟲(chóng)酰胺處理灰飛虱成蟲(chóng)6～48 h后，灰飛虱體內(nèi)的3種解毒酶的比活力均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，表現(xiàn)出明顯的時(shí)間和劑量效應(yīng)；ESTs和MFO的比活力在處理12 h后達(dá)到最大值，GSTs的比活力在處理6 h后達(dá)到最大值，均顯著高于對(duì)照處理。但溴氰蟲(chóng)酰胺亞致死劑量(LC10和LC25)處理甜菜夜蛾幼蟲(chóng)24～96 h后，與對(duì)照相比，MFO活性受到明顯的抑制作用，且抑制程度與藥劑劑量成正比(余慧靈等，2015)。這種差異很可能是由于同一種殺蟲(chóng)劑的亞致死劑量對(duì)不同種類害蟲(chóng)體內(nèi)的解毒酶活性影響有差別造成的(邢靜等，2011)。

本研究采用稻苗浸漬法和點(diǎn)滴法，檢測(cè)了山東省6個(gè)灰飛虱種群3齡若蟲(chóng)和成蟲(chóng)對(duì)溴氰蟲(chóng)酰胺的敏感性，并測(cè)定了亞致死劑量(LD10和LD30)溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)灰飛虱成蟲(chóng)體內(nèi)3種解毒代謝酶活性的影響。研究結(jié)果可為田間科學(xué)、合理使用溴氰蟲(chóng)酰胺防治灰飛虱提供理論依據(jù)。但殺蟲(chóng)劑的亞致死劑量除了影響昆蟲(chóng)體內(nèi)解毒酶活性，還可能影響昆蟲(chóng)的繁殖力、生長(zhǎng)發(fā)育、生態(tài)行為和抗藥性等一系列亞致死效應(yīng)，且這種效應(yīng)也會(huì)受昆蟲(chóng)性別和處理濃度的影響。因此，溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)灰飛虱的亞致死效應(yīng)還需要深入系統(tǒng)研究。