雞血藤對(duì)小鼠缺氧耐受的影響研究▲

胡世鳳 連 芳 鄧桂祥 陳美蓮 楊曉瑩 龐詩(shī)金

(1 廣西醫(yī)科大學(xué)生理教研室，廣西南寧市 530021；2 廣西醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西南寧市 530021)

雞血藤屬植物是我國(guó)傳統(tǒng)的藥用植物，雞血藤為豆科植物密花豆的干燥藤莖，別名血風(fēng)、血藤等，味苦且微甘，性溫，歸肝、腎經(jīng)。雞血藤分布于廣東、廣西、云南等地，野生，可生用或者熬膏用，全年可采，或者9～10月采收。常用的有效部位是雞血藤的干燥藤莖，具有清除自由基、降血壓、補(bǔ)血活血、舒筋活絡(luò)，以及抗腫瘤等功效[1-2]。雞血藤有效部位的作用可能是通過(guò)促進(jìn)機(jī)體分泌IL-3、調(diào)節(jié)促紅細(xì)胞生成素水平進(jìn)而促進(jìn)紅系造血來(lái)達(dá)到抗貧血的目的。有研究[3-4]發(fā)現(xiàn)雞血藤總黃酮能夠促進(jìn)MiR-451表達(dá)升高；敲除MiR-451后，小鼠紅細(xì)胞脫核被抑制，導(dǎo)致紅細(xì)胞生成障礙性貧血。其作用機(jī)制可能與調(diào)控Racl的表達(dá)有關(guān)。雞血藤還可通過(guò)調(diào)控鐵調(diào)素抗菌肽(HAMP)基因，抑制鐵調(diào)素過(guò)表達(dá)進(jìn)而改善鐵代謝，從而起到抗缺鐵性貧血的作用[5]。血紅蛋白(hemoglobin，HGB)是紅細(xì)胞內(nèi)的主要成分，具有運(yùn)輸氧的功能，紅細(xì)胞(red blood cell，RBC)、HGB含量的變化，會(huì)影響機(jī)體缺氧耐受[6]。本實(shí)驗(yàn)在前期研究的基礎(chǔ)上進(jìn)一步探討雞血藤對(duì)小鼠缺氧耐受能力的影響?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料 雞血藤干燥藤莖(黃岡金貴中藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：D9050401)，紅景天干燥藤莖(湖北金貴中藥飲片有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：A190201)。檢測(cè)血液儀器、缺氧耐受裝置由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)生理科學(xué)實(shí)驗(yàn)中心提供。動(dòng)物為昆明種小鼠，體重(20±5)g，雌雄各半，由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供(批號(hào)：SPF201907038)。檢測(cè)儀器：Hemaray 83全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀(深圳市雷杜生命科學(xué)股份有限公司，型號(hào)JY-S-FXY-002)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 利用隨機(jī)數(shù)將60只小鼠分為3組，雞血藤組、紅景天組和生理鹽水組各20只。將50 g雞血藤干燥藤莖加500 mL蒸餾水熬成100 mL湯劑，將50 g紅景天干燥藤莖加500 mL蒸餾水熬成100 mL湯劑。雞血藤組小鼠予制備好的雞血藤湯劑灌胃，每只0.5 mL；紅景天組小鼠予制備好的紅景天湯劑灌胃，每只0.5 mL；生理鹽水組每天以等量生理鹽水灌胃。灌胃后，所有小鼠均飼養(yǎng)10 d，第11天常壓缺氧耐受實(shí)驗(yàn)在室溫(空調(diào))25 ℃條件下嚴(yán)格按實(shí)驗(yàn)要求操作，每組抽取10只小鼠裝入底部盛有10 g鈉石灰、容量250 mL的缺氧裝置瓶中，旋緊瓶塞開始計(jì)時(shí)。觀察并記錄各小鼠在缺氧瓶中的存活時(shí)間，同時(shí)測(cè)量氧氣消耗量，最后計(jì)算耗氧率。將各組剩余的小鼠采取眼球肝素抗凝取血約1 mL，檢測(cè)RBC數(shù)、蛋白HGB、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin，MCH)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，多組間比較用方差分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 耗氧率比較 雞血藤組、紅景天組小鼠耗氧率均明顯低于生理鹽水組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；但雞血藤組與紅景天組小鼠耗氧率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 各組小鼠耗氧率比較 (x±s)

2.2 RBC、HGB、MCH比較 雞血藤組RBC、HGB、MCH水平高于生理鹽水組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)；雞血藤組與紅景天組RBC、HGB、MCH水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。見表2。

表2 各組小鼠RBC、HGB、MCH比較 (x±s)

3 討 論

缺氧可造成機(jī)體產(chǎn)生各種應(yīng)激反應(yīng)，影響機(jī)體各種代謝和氧化供能。正常情況下，機(jī)體三磷酸腺苷的供給主要來(lái)自葡萄糖的有氧氧化，而在缺氧或無(wú)氧條件下，可由無(wú)氧酵解提供。缺氧狀態(tài)下機(jī)體通過(guò)促進(jìn)糖酵解、底物水平磷酸化、穩(wěn)定溶酶體和線粒體膜及減少機(jī)體耗氧率等途徑來(lái)增強(qiáng)耐缺氧能力。在低氧適應(yīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中觀察到小鼠在持續(xù)性嚴(yán)重低氧和無(wú)氧條件下可進(jìn)入低代謝狀態(tài)，通過(guò)降低組織的代謝來(lái)維持組織三磷酸腺苷水平，防止組織損傷[6]。慢性缺氧時(shí)，缺氧信號(hào)與血紅素蛋白氧感受器結(jié)合，并通過(guò)缺氧信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，調(diào)整機(jī)體代謝過(guò)程，使細(xì)胞適應(yīng)缺氧環(huán)境[7]。HGB是RBC內(nèi)的主要成分，具有運(yùn)輸氧的功能，各種原因引起的RBC數(shù)減少，血氧濃度降低，都會(huì)改變?nèi)毖跄褪艿哪芰?。缺氧的耐受取決于血液中HGB的含量，HGB含量與缺氧耐受時(shí)間成正比，慢性缺氧時(shí)反而有一定的缺氧耐受代償能力[8]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在常壓缺氧耐受實(shí)驗(yàn)中，雞血藤組小鼠耗氧率明顯低于生理鹽水組(P<0.05)，與紅景天組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，表明雞血藤能顯著降低機(jī)體耗氧率，提高機(jī)體缺氧耐受能力，藥物效果與紅景天相仿。雞血藤的抗缺氧作用可能通過(guò)如下作用實(shí)現(xiàn)：(1)通過(guò)提高機(jī)體組織氧的利用率，增加有氧氧化酶的活性，提高機(jī)體的攜氧和供氧能力；(2)通過(guò)降低耗氧量、耗氧速度，清除自由基或減少自由基對(duì)血管內(nèi)皮的損傷來(lái)實(shí)現(xiàn)抗缺氧作用；(3)提高小鼠血液中RBC數(shù)及含量，增加血液攜氧能力，提高缺氧耐受能力。

總之，雞血藤通過(guò)調(diào)節(jié)體內(nèi)各種代謝酶的活性，降低耗氧量，清除自由基，增加抗氧化酶活性，抑制或降低脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)等來(lái)實(shí)現(xiàn)其抗缺氧作用，增加血液RBC數(shù)及提高HBG含量。慢性缺氧條件下HBG含量有一定的代償作用，但其詳細(xì)作用機(jī)制仍有待深入研究。