腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞與結(jié)直腸癌預(yù)后關(guān)系的研究進(jìn)展

龍美玲, 陳倩文, 劉璐, 謝菲嵐, 劉錦濤△

1廣東醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)院(廣東湛江 524000)； 2 廣東醫(yī)科大學(xué)深圳寶安臨床醫(yī)學(xué)院、深圳市寶安區(qū)人民醫(yī)院消化內(nèi)科(廣東深圳 518100)

結(jié)直腸癌(colorectal cancer, CRC)是世界范圍內(nèi)最常見的惡性腫瘤之一，2018年全國(guó)惡性腫瘤統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)其發(fā)病率居惡性腫瘤發(fā)病譜的第3位，僅次于肺癌和胃癌；病死率居第2位，居肺癌之后[1]。目前，TNM分期是臨床上制訂CRC治療方案的主要依據(jù)，按照指南，TNM分期Ⅰ期和低危Ⅱ期患者術(shù)后無(wú)需接受輔助治療就可以達(dá)到理論上的完全治愈，并長(zhǎng)期存活。然而，仍有約10%的Ⅰ期和20%的Ⅱ期患者術(shù)后會(huì)發(fā)生復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移[2]。臨床上亟需其他預(yù)測(cè)預(yù)后的輔助指標(biāo)來(lái)更精確分期，并為術(shù)后輔助治療提供更多的依據(jù)，因此尋找更準(zhǔn)確的CRC預(yù)后預(yù)測(cè)指標(biāo)已成為熱點(diǎn)問(wèn)題，其中腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞 (tumor infiltrating lymphocyte, TIL)是目前關(guān)注的重點(diǎn)。2006年Galon等[3]發(fā)表的文獻(xiàn)首次成功描述了TIL的不同亞群可預(yù)測(cè)CRC患者的預(yù)后，隨后越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)，TIL與CRC預(yù)后以及局部晚期直腸癌新輔助放療后腫瘤消退程度密切相關(guān)[4]?，F(xiàn)將TIL與CRC預(yù)后關(guān)系的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 TIL的組成及作用機(jī)制

TIL是一群存在于腫瘤及其間質(zhì)內(nèi)，以淋巴細(xì)胞為主的異質(zhì)性免疫細(xì)胞，包括T細(xì)胞、B細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞(DC)及自然殺傷細(xì)胞(NK)等。根據(jù)免疫細(xì)胞的浸潤(rùn)情況，腫瘤可分為“熱腫瘤(T淋巴細(xì)胞浸潤(rùn))”和“冷腫瘤(無(wú)T淋巴細(xì)胞浸潤(rùn))”。在“熱腫瘤”中，趨化因子促進(jìn)CD8+效應(yīng)T細(xì)胞進(jìn)入腫瘤內(nèi)，但它們的功能被程序性細(xì)胞死亡蛋白配體-1(PD-L1)、吲哚胺-2,3-雙加氧酶(IDO)和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells， Tregs)等負(fù)向調(diào)控。對(duì)于“冷腫瘤”，低炎癥環(huán)境、趨化因子匱乏、腫瘤間質(zhì)致密以及腫瘤新生血管異常等因素都會(huì)影響T細(xì)胞往腫瘤區(qū)域的遷移[5]。

免疫編輯理論認(rèn)為，免疫系統(tǒng)不僅具有清除腫瘤細(xì)胞的能力，也能促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)。在這個(gè)過(guò)程中，免疫細(xì)胞扮演了雙重角色，一方面NK細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞(cytotoxic T cell, CTL)直接識(shí)別和清除部分腫瘤細(xì)胞，從而抑制腫瘤生長(zhǎng)；另一方面，在腫瘤微環(huán)境(tumor microenvironment, TME)中，不斷富集的免疫抑制性細(xì)胞，如腫瘤相關(guān)的巨噬細(xì)胞(tumor-associated macrophage，TAM)、Tregs、髓源性抑制細(xì)胞和免疫抑制因子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)、前列腺素等不僅能抑制正常的抗腫瘤免疫反應(yīng)，而且能對(duì)腫瘤細(xì)胞的特性進(jìn)行“重塑”，使其惡性程度更高和抵抗免疫攻擊能力更強(qiáng)[6]。TIL位于瘤內(nèi)或其間質(zhì)，是腫瘤免疫反應(yīng)的主要參與者，其亞群種類繁多，且不同亞群在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用差異極大，對(duì)腫瘤預(yù)后的影響也不盡相同。

2 TIL與CRC預(yù)后的關(guān)系

2.1 腫瘤浸潤(rùn)T細(xì)胞與CRC預(yù)后的關(guān)系

2.1.1 CD4+輔助性T淋巴細(xì)胞 CD4+T細(xì)胞是適應(yīng)性免疫的主要組成成分，但在腫瘤免疫中的作用仍不明確，其可能的原因是CD4+T細(xì)胞具有不同的細(xì)胞亞群，且不同亞群之間功能差異極大。CD4+T細(xì)胞可分為輔助性T細(xì)胞(包括Th1、Th2、Th17和Tfh)和Tregs。Th1細(xì)胞分泌細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-2(IL-2)和γ干擾素(IFN-γ)協(xié)同刺激CTL的增殖和分化以及增強(qiáng)NK細(xì)胞的殺傷能力。Th2細(xì)胞分泌細(xì)胞因子如IL-4、IL-5、IL-6、IL-10及IL-13等促進(jìn)促進(jìn)B細(xì)胞增殖、分化和抗體形成，從而促進(jìn)體液免疫應(yīng)答，同時(shí)可抑制Th1增殖。正常機(jī)體環(huán)境下Th1細(xì)胞與Th2細(xì)胞保持著動(dòng)態(tài)平衡，當(dāng)在癌癥和其他疾病時(shí)兩者平衡將會(huì)打破，且癌癥患者血液和腫瘤組織中Th2細(xì)胞的數(shù)量往往會(huì)大于Th1細(xì)胞。王靜等[7]采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)40例不同分期CRC組織，發(fā)現(xiàn)CRC組織中Th1細(xì)胞因子(IL-2、IFN-γ)在癌組織中的表達(dá)量較周圍正常組織中的表達(dá)量低，而Th2細(xì)胞因子的表達(dá)量則相反，該發(fā)現(xiàn)表明，CRC改變了Th1和 Th2的平衡，使其往Th2方向發(fā)展。研究還發(fā)現(xiàn)Th2/Th1與CRC的Duke′s 分期相關(guān)，作者認(rèn)為Th2類的細(xì)胞因子能夠抑制腫瘤免疫，使腫瘤發(fā)生免疫逃逸。

Th17細(xì)胞通過(guò)分泌IL-17、TNF-α等細(xì)胞因子，參與固有免疫和某些炎癥的發(fā)生，目前研究雖然已發(fā)現(xiàn)Th17細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子與多種腫瘤的發(fā)生和發(fā)展存在密切關(guān)系，但在CRC中起抗瘤還是促瘤作用還沒確定，以及其作用機(jī)制尚未完全明確。在CRC初期，Th17細(xì)胞可能發(fā)揮促炎性反應(yīng)的作用，抑制腫瘤的生長(zhǎng)，但隨著癌癥的發(fā)展，機(jī)體免疫系統(tǒng)失衡，Th17細(xì)胞發(fā)揮促腫瘤或抑制抗腫瘤效應(yīng)的作用。Tosolini等[8]發(fā)現(xiàn)CRC中高表達(dá)Th17細(xì)胞特征性基因(RORC、IL-17A)的患者預(yù)后不良，而具有高表達(dá)Th1細(xì)胞特征基因(Tbet、IRF1、IL12Rb2、STAT4)的患者可延長(zhǎng)無(wú)病生存期(disease-free survival，DFS)，而Th2特征基因(IL-4、IL-5、IL-13)表達(dá)情況與預(yù)后無(wú)明顯相關(guān)性。此外，作者還發(fā)現(xiàn)聯(lián)合分析Th1和Th17特征基因表達(dá)水平，能夠預(yù)測(cè)患者復(fù)發(fā)情況。近年較多研究發(fā)現(xiàn)，IL-17在惡性腫瘤進(jìn)程中具有雙重作用，一方面，IL-17可以通過(guò)上調(diào)腫瘤細(xì)胞的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子促進(jìn)腫瘤內(nèi)部血管生成，表達(dá)MMP-2和MMP-7促進(jìn)腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移，另一方面可通過(guò)募集T淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)、增強(qiáng)NK細(xì)胞和CTL的活性，促進(jìn)中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)等抑制腫瘤的發(fā)展。Liu等[9]研究發(fā)現(xiàn)CRC患者的腫瘤區(qū)域中IL-17的水平較非腫瘤區(qū)域高，并且證實(shí)巨噬細(xì)胞和Th17細(xì)胞表達(dá)的IL-17與高微血管密度和較差存活率相關(guān)，單變量和多變量分析顯示IL-17是總生存期(overall survival，OS)的獨(dú)立預(yù)后因素，此外，該研究還發(fā)現(xiàn)IL-17誘導(dǎo)CRC中癌細(xì)胞產(chǎn)生血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)促進(jìn)形成腫瘤血管。Yoshida等[10]使用組織芯片研究199例CRC，發(fā)現(xiàn)Th17(RORγT/CD3)比率與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)；同時(shí)，多因素分析表明，Th17(RORγT/CD3)比率是患者OS的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素。

2.1.2 調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞 Tregs是T淋巴細(xì)胞一個(gè)亞型，起免疫抑制調(diào)節(jié)作用。根據(jù) Tregs的起源、抗原特異性的不同，將其分為自然調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞(naturally occurring regulatory T cells，nTregs)和誘導(dǎo)產(chǎn)生的適應(yīng)性調(diào)節(jié)(induced regulatory T cells, iTregs)，nTregs 細(xì)胞來(lái)源于胸腺，表型為CD4+CD25+，是Tregs細(xì)胞的主要成分，CD4+CD25highFOXP3+自然(n)Tregs通常負(fù)責(zé)維持外周血耐受以控制癌癥相關(guān)的炎癥[11]。FOXP3 (forkhead box p3)是一種轉(zhuǎn)錄因子，是Tregs最特異的標(biāo)志，并參與Tregs的分化和功能。Tregs通過(guò)直接接觸抑制靶細(xì)胞活化負(fù)調(diào)控免疫應(yīng)答或分泌TGF-β、IL-10等細(xì)胞因子抑制免疫應(yīng)答。在大多數(shù)人類癌癥中如卵巢癌、胰腺癌、肝細(xì)胞癌，F(xiàn)OXP3+Tregs的高密度浸潤(rùn)與腫瘤生長(zhǎng)和預(yù)后不良有關(guān)[12]。但是在CRC的一些研究發(fā)現(xiàn)腫瘤中Tregs的浸潤(rùn)與良好的預(yù)后相關(guān)[13-14]，可能是由于Tregs在CRC的早期階段抑制炎癥反應(yīng)而限制腫瘤發(fā)生。然而，一些研究表明，CRC組織中的Tregs可能通過(guò)抑制抗腫瘤免疫反應(yīng)而有助于疾病進(jìn)展[15]。這些看似矛盾的結(jié)果表明存在功能不同的具有不同免疫抑制水平的Tregs亞群[16]。Gai等[17]研究發(fā)現(xiàn)，高密度的Tregs與CRC患者TNM分期以及不良預(yù)后相關(guān)，但是Tregs浸潤(rùn)在患者年齡、腫瘤大小、組織學(xué)、侵襲深度和腫瘤分化等方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Vald等[18]通過(guò)免疫組化評(píng)估42例CRC組織中CD3+T細(xì)胞和FOXP3+Tregs密度，發(fā)現(xiàn)兩者密度與存活率呈正相關(guān)，但是只有FOXP3+Tregs是一個(gè)獨(dú)立預(yù)后因素。Hanke等[19]分析Ⅱ期結(jié)直腸癌標(biāo)本，結(jié)果顯示腫瘤內(nèi)CD8+T和CD3+T的密度與腫瘤周圍淋巴細(xì)胞的存在顯著相關(guān)，F(xiàn)OXP3+Tregs密度與患者性別、年齡、腫瘤分級(jí)、腫瘤分期、腫瘤定位、腫瘤組織學(xué)類型、腫瘤邊緣浸潤(rùn)類型、腫瘤周圍淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)或淋巴血管侵犯發(fā)生之間無(wú)相關(guān)性，多因素分析顯示在腫瘤內(nèi)高密度FOXP3+Tregs、低腫瘤分期和無(wú)淋巴血管侵犯是Ⅱ期淋巴結(jié)陰性的CRC的獨(dú)立良好預(yù)后因子，并認(rèn)為FOXP3+Tregs免疫標(biāo)記、腫瘤分期評(píng)估和淋巴血管侵犯可能有助于確定具有潛在攻擊行為的Ⅱ期癌癥和可能受益于輔助治療的CRC患者，研究還發(fā)現(xiàn)右側(cè)CRC內(nèi)的CD8+和FOXP3+Tregs密度比左側(cè)CRC更高。然而Loddenkemper等[20]研究在40例CRC患者中原位分析FOXP3+Tregs浸潤(rùn)，發(fā)現(xiàn)腫瘤中的Tregs浸潤(rùn)明顯高于健康結(jié)直腸，CRC基質(zhì)中的Tregs浸潤(rùn)顯著高于上皮中的Tregs浸潤(rùn)，并發(fā)現(xiàn)具有Tregs高浸潤(rùn)的患者與具有Tregs低浸潤(rùn)的患者在存活率上沒有差異,沒有差異的原因可能是評(píng)估Tregs浸潤(rùn)和存活之間的相互作用需要階段校正分析。

2.1.3 記憶T淋巴細(xì)胞 記憶T細(xì)胞通常被分為中央記憶細(xì)胞(central memory T lymphocyte，TCM)和效應(yīng)記憶細(xì)胞(effector memory T lymphocyte，TEM)，TCM在血液和次級(jí)淋巴器官如淋巴結(jié)之間循環(huán)，維持記憶反應(yīng)，不執(zhí)行快速效應(yīng)功能；TEM可以從血液遷移到非淋巴組織如腫瘤組織，可執(zhí)行快速效應(yīng)功能[21]。除了部分CD8+TEM表達(dá)CD45RA+，其他的TNM幾乎都表達(dá)CD45RO+，因此CD45RO+是TNM最好的標(biāo)志物[22]。在目前的研究，CD45RO+T淋巴細(xì)胞在CRC癌巢和癌旁的高度浸潤(rùn)都與患者預(yù)后良好及減少潛在轉(zhuǎn)移相關(guān)。有研究認(rèn)為，CRC組織CD45RO+的浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞密度與CRC患者的更長(zhǎng)存活期相關(guān)，可以作為CRC預(yù)后的獨(dú)立指標(biāo)[23-24]。Galon等[3]和Pagès等[25]通過(guò)使用大規(guī)模實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)和組織微陣列方法，使用數(shù)字化高分辨圖像分析系統(tǒng)客觀和定量評(píng)估CD45RO+細(xì)胞以限制觀察者偏倚，證實(shí)了CRC中CD45RO+T細(xì)胞高密度浸潤(rùn)可提高DFS，證明了CD45RO+T細(xì)胞的持久抗腫瘤能力在控制疾病復(fù)發(fā)中發(fā)揮重要作用。但是Pagès等[25]研究表明將CD8+T細(xì)胞和CD45RO+T細(xì)胞結(jié)合起來(lái)預(yù)測(cè)CRC患者預(yù)后時(shí)，因兩者會(huì)有重疊，可能會(huì)誘發(fā)選擇性偏倚。Pagès等[26]進(jìn)行深入研究發(fā)現(xiàn)CD45RO+T細(xì)胞高密度浸潤(rùn)與CRC早期轉(zhuǎn)移性侵襲如血管栓塞、淋巴管侵犯和神經(jīng)周圍侵襲的缺乏有關(guān)。Lee等[27]研究證實(shí)了FOXP3+Tregs和CD45RO+T細(xì)胞對(duì)生存具有獨(dú)立的預(yù)后意義，可能有助于改善早期結(jié)腸癌的預(yù)后。Nosho等[23]研究與Lee的研究一致，并且證明CRC患者中CD45RO+T細(xì)胞密度的預(yù)后能力大于CD3+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、FOXP3+Tregs。

2.1.4 CD8+細(xì)胞毒性T細(xì)胞 CD8表達(dá)于30%～35%T淋巴細(xì)胞表面，通常所稱的CD8+T淋巴細(xì)胞指的是CTL，它們特異性識(shí)別內(nèi)源性抗原肽-組織相容性復(fù)合體(MHC)Ⅰ類分子復(fù)合物，進(jìn)而連續(xù)殺傷多個(gè)靶細(xì)胞(腫瘤細(xì)胞或細(xì)胞內(nèi)被感染的細(xì)胞)，而不影響正常細(xì)胞，且殺傷靶細(xì)胞過(guò)程中自身不受傷害。CD8+T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用是機(jī)體抗腫瘤免疫的重要機(jī)制，目前大量研究顯示CD8+T細(xì)胞與CRC[3, 25]、肺癌[28]、食管癌[29]、卵巢癌[30]、腎細(xì)胞癌[31]、胰腺癌[32]的良性預(yù)后相關(guān)。Ling等[33]研究發(fā)現(xiàn)CRC腫瘤上皮中的CD8+T細(xì)胞的浸潤(rùn)提供了最強(qiáng)的預(yù)后信息，而在腫瘤邊緣和腫瘤中心，F(xiàn)OXP3的表達(dá)與預(yù)后的關(guān)聯(lián)最強(qiáng)。有研究建立了“免疫分?jǐn)?shù)”的評(píng)估方法，分析TIL細(xì)胞類型、密度以及位置與臨床結(jié)果之間關(guān)系，發(fā)現(xiàn)無(wú)論局部腫瘤的進(jìn)展或淋巴結(jié)受累程度，CD3+T細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞和記憶性CD45RO+T細(xì)胞與良好預(yù)后相關(guān)[3, 25, 34-35]。他們認(rèn)為“免疫分?jǐn)?shù)”方法比常規(guī)的TNM分期更能精確預(yù)測(cè)患者的預(yù)后[36]。Hu等[37]為進(jìn)一步評(píng)估CD8+T在CRC中的預(yù)后意義，對(duì)CD103和CD8進(jìn)行雙重染色來(lái)代表CRC組織中的CD8+T細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)CD8+T細(xì)胞高密度浸潤(rùn)或CD103+CD8+T細(xì)胞高密度浸潤(rùn)的OS較高，并且CD8+T細(xì)胞高密度浸潤(rùn)與晚期TNM分期呈顯著負(fù)相關(guān)，CD103+CD8+T細(xì)胞高密度浸潤(rùn)與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移呈顯著負(fù)相關(guān)。然而以上的研究較少研究TIL與新輔助治療后得的CRC的預(yù)后關(guān)系。Anitei等[38]用免疫分?jǐn)?shù)方法評(píng)估術(shù)前放化療直腸癌患者中免疫浸潤(rùn)總T細(xì)胞(CD3+)和CTL(CD8+)的密度對(duì)患者預(yù)后的影響，結(jié)果顯示兩者均與腫瘤復(fù)發(fā)、患者生存期相關(guān)，并且腫瘤組織中的CD3+和CD8+淋巴細(xì)胞的高度浸潤(rùn)與放化療后的腫瘤分期降低相關(guān)，進(jìn)而認(rèn)為治療前確定組織中的免疫浸潤(rùn)細(xì)胞可能為預(yù)測(cè)對(duì)術(shù)前放化療反應(yīng)提供有價(jià)值的信息。近期的一篇Meta分析[4]總結(jié)腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞在原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性CRC中的研究，納入了新輔助治療的CRC和轉(zhuǎn)移性CRC研究共25項(xiàng)，研究發(fā)現(xiàn)CD3+、CD8+、FOXP3+和CD45RO+的高密度浸潤(rùn)與原發(fā)性CRC的總體存活率有關(guān)，并且發(fā)現(xiàn)在局部的晚期直腸癌中，CD8+細(xì)胞水平是放療后腫瘤消退程度良好的重要預(yù)測(cè)因子。因此治療前確定TIL可有助于預(yù)測(cè)CRC患者生存期及放化療后的效果。

2.2 腫瘤浸潤(rùn)B細(xì)胞與CRC預(yù)后的關(guān)系 B細(xì)胞是來(lái)源于造血干細(xì)胞的主要體液免疫細(xì)胞，目前腫瘤免疫的關(guān)注集中在T細(xì)胞，而忽略了B細(xì)胞在此領(lǐng)域的重要性。腫瘤浸潤(rùn)淋巴B細(xì)胞(tumor-infiltrating B cells，TIBs)和其亞型的分化受到TME調(diào)節(jié)，TIB具有對(duì)腫瘤雙重作用：一是TIB不僅可以通過(guò)分泌細(xì)胞因子、提呈抗原和分泌抗體來(lái)抑制腫瘤的發(fā)展；二是還可以通過(guò)分化為調(diào)節(jié)性B細(xì)胞(regulatory B cells，Bregs)作用于腫瘤細(xì)胞或抑制NK細(xì)胞和T細(xì)胞的功能并促進(jìn)Tregs的轉(zhuǎn)化來(lái)促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展[39]。免疫球蛋白Gκ鏈(IGKC)是B細(xì)胞基因的代表性標(biāo)志，Schmidt等[40]分析1 810例乳腺癌、1 056例非小細(xì)胞肺癌、513例CRC和426例卵巢癌患者的基因芯片數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)IGKC與乳腺癌、CRC和非小細(xì)胞肺癌患者DFS顯著相關(guān)，而與OS無(wú)顯著相關(guān)性，認(rèn)為IGKC有望成為癌癥治療反應(yīng)的首選免疫標(biāo)志物。Berntsson等[41]研究TIBs與漿細(xì)胞與CRC預(yù)后關(guān)系，分析CD20、CD138和IGKC在CRC中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)免疫細(xì)胞特異性CD20、CD138和IGKC表達(dá)與較低的T期顯著相關(guān)，CD20的高密度浸潤(rùn)與OS改善顯著相關(guān)，CD138是不良預(yù)后的獨(dú)立因素。布力布等[42]研究CRC組織中B細(xì)胞轉(zhuǎn)位基因3(BTG3)蛋白的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)CRC組織中BTG3蛋白表達(dá)陽(yáng)性率低于癌旁組織， TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、未侵及漿膜、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和肝轉(zhuǎn)移患者CRC中 BTG3蛋白表達(dá)陽(yáng)性率高于TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、腫瘤侵及漿膜、伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和肝轉(zhuǎn)移患者，該結(jié)果提示，B細(xì)胞數(shù)量與CRC的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。Lv等[43]研究結(jié)果與上述研究一致，BTG3蛋白低表達(dá)與患者的病理學(xué)分型、浸潤(rùn)深度、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期、DFS和OS呈正相關(guān)，因此敲低BTG3可能會(huì)增強(qiáng)CRC的侵襲能力。

2.3 腫瘤浸潤(rùn)NK細(xì)胞與CRC預(yù)后的關(guān)系 NK細(xì)胞在不事先識(shí)別抗原的情況下識(shí)別和殺死腫瘤細(xì)胞，同時(shí)還釋放趨化因子和細(xì)胞因子，包括CCL5、XCL-1/XCL-2和FLT3配體以及募集其他免疫細(xì)胞(如樹突狀細(xì)胞)[44-45]。在實(shí)體腫瘤中，外周血中的腫瘤相關(guān)NK細(xì)胞(tumor-associated NK cells, TANK cells)和腫瘤浸潤(rùn)NK細(xì)胞(tumor-infiltrating NK cells, TINK)會(huì)受到 TME衍生的多種因子如TGF-β、前列腺素E2、可溶性HLA-G、腺苷等的影響，顯示雙重功能。一方面，這些因子可以抑制NK細(xì)胞介導(dǎo)的活性，但另一方面，它們可以誘導(dǎo)NK細(xì)胞促進(jìn)腫瘤血管生成[46]。NK細(xì)胞的常見標(biāo)記是CD57和CD56。在目前關(guān)于NK細(xì)胞與CRC預(yù)后的研究開展較少。Liska等[47]團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)CRC組織中的CD57+細(xì)胞是OS的重要獨(dú)立陽(yáng)性預(yù)后因素，CD57+細(xì)胞在腫瘤浸潤(rùn)低的患者發(fā)生短OS的風(fēng)險(xiǎn)高2.5倍。Vycital等[48]的研究結(jié)果與上述結(jié)果相似，他們分析152例Ⅱ/Ⅲ期CRC手術(shù)的患者，證實(shí)了CD57+細(xì)胞、顆粒酶B和CD8+T細(xì)胞是OS的陽(yáng)性預(yù)后因素，而CD57+細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞是復(fù)發(fā)的陽(yáng)性預(yù)后因素。Jobin等[49]團(tuán)隊(duì)以結(jié)腸鏡為標(biāo)志，對(duì)全血中的NK細(xì)胞活性的測(cè)試以87%的敏感度、60.8%的特異度、5.7%的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和99.4%的陰性預(yù)測(cè)值鑒定出患有CRC患者，該測(cè)試可在臨床實(shí)踐中用于評(píng)估患者患CRC的風(fēng)險(xiǎn)。還有研究證實(shí)了NK細(xì)胞可以在CRC中分辨出正常細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞[50]，且NK細(xì)胞可作為轉(zhuǎn)移性CRC的有效免疫治療方法[44]。

3 展望

隨著不斷深入研究TIL在腫瘤免疫中的作用，將會(huì)了解更多不同的淋巴細(xì)胞亞群，不同亞群對(duì)腫瘤發(fā)生發(fā)展的作用不同。為改善患者預(yù)后，可望對(duì)TIL浸潤(rùn)密度較低的患者，通過(guò)增加TIL數(shù)量，特別是增加CD8+T細(xì)胞和記憶性CD45RO+T細(xì)胞數(shù)量；對(duì)Th2或Tregs比例較高患者，通過(guò)清除或抑制兩者功能，提高CRC患者抗腫瘤免疫能力。“免疫分?jǐn)?shù)”的方法有望用于CRC患者預(yù)后的評(píng)估，指導(dǎo)臨床工作但還需進(jìn)一步完善其方法的標(biāo)準(zhǔn)化。