月季組培快繁技術(shù)研究

鄭萍 徐厚剛 凌飛東 鄭坤

（1 安徽農(nóng)之源生態(tài)農(nóng)業(yè)有限公司；安徽 阜陽(yáng) 2 360002；阜陽(yáng)市花卉工程技術(shù)研究中心；3 江蘇新境界農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司）

月季，學(xué)名Rosa chinensisJacq，原產(chǎn)于中國(guó)，它是一種常綠、半常綠低矮灌木，四季開花，花色主要有紅色和粉色，白色和黃色較少，既可作為觀賞植物，也可作為藥用植物。主要種類有切花月季、食用玫瑰、藤本月季、地被月季等，花型較大，花開妍麗大氣，具有濃郁香氣，可廣泛應(yīng)用于園藝栽培和切花，其觀賞性極強(qiáng)[1]。此外，月季花還具有較好的抗真菌及協(xié)同抗耐藥真菌活性。其生長(zhǎng)適應(yīng)性較強(qiáng)，耐寒耐旱，對(duì)土壤沒有過(guò)高的要求，但以富含有機(jī)質(zhì)和排水良好的微帶酸性的沙壤土為最佳。喜陽(yáng)光，但過(guò)于強(qiáng)烈的陽(yáng)光照射不利于花蕾的發(fā)育，容易導(dǎo)致花瓣焦枯，因此，喜陽(yáng)光但要避免長(zhǎng)時(shí)間的強(qiáng)光直射。喜溫暖，一般最佳生長(zhǎng)溫度在22～25℃之間，過(guò)高的溫度會(huì)影響開花，因此，在夏季高溫時(shí)節(jié)，月季開花狀態(tài)不佳，花開品質(zhì)降低。在培植過(guò)程中，空氣相對(duì)濕度最好維持在80%，要保持空氣流通無(wú)污染，若通氣不良容易形成白粉病。目前，主要栽培方法有扦插繁殖法、嫁接繁育技術(shù)等，但由于我國(guó)月季組織培養(yǎng)技術(shù)起步較晚，盡管發(fā)展至今其技術(shù)已經(jīng)和國(guó)外差距不明顯，但在繁殖培育上還有所欠缺，通過(guò)相關(guān)研究，組織培養(yǎng)和快速繁育技術(shù)廣泛應(yīng)用于月季的培植中，可以提升經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益[2]。通過(guò)對(duì)月季組培快繁技術(shù)進(jìn)行研究，試圖找出最優(yōu)的培育方法，以期為后期月季大規(guī)模的繁育提供技術(shù)支撐。

1 材料和方法

1.1 材料

選取阜陽(yáng)月季種質(zhì)資源圃的月季作為此次研究對(duì)象。

1.2 方法

從選取的月季盆栽植株上，選擇當(dāng)年生的月季枝條，用飽滿而未萌發(fā)的腋芽莖段作為外植體，腋芽莖段要以當(dāng)年生枝條中段最佳。將選取的枝條去葉，并且將附在莖上的葉柄及皮刺剝離，再將其切成2～3cm 的小段，每個(gè)小段上都保留一個(gè)側(cè)芽，在洗衣粉溶液中浸泡1min，之后使用清水將其洗凈并用濾紙將水漬吸干。然后，在無(wú)菌環(huán)境中，用75%的酒精對(duì)其進(jìn)行30s 的消毒處理，再用無(wú)菌水進(jìn)行沖洗，之后再在1%次氯酸鈉溶液中浸泡6min，然后在使用0.10%升汞溶液浸泡5min，最后再次使用無(wú)菌水進(jìn)行沖洗，用解剖刀切去莖段的毒害部分，將其接種在不同的芽分化培養(yǎng)土中。

一般在接種5d，莖段中部就會(huì)產(chǎn)生萌芽，而在12d，基部和梢部的萌芽才會(huì)產(chǎn)生，從萌芽到芽生長(zhǎng)到1cm 這個(gè)階段需要持續(xù)2～3 周。以MS 作為基本培養(yǎng)基，其蔗糖成分在3%～5%，瓊脂在0.10%，外加不同的激素，每瓶接種莖段5 個(gè)。在光照培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度維持在22～25℃，光照時(shí)間調(diào)節(jié)至12～15h/d，光照強(qiáng)度則維持在1500～1800Lx 之間，pH 值保持在5.8～6.0 最佳。在誘導(dǎo)芽分化后，繼續(xù)進(jìn)行繼代培養(yǎng)，使其不斷增殖，當(dāng)增殖倍數(shù)達(dá)到一定程度后，將“叢生芽”切下轉(zhuǎn)入到MS+BA0.30 mg/L+NAA0.30 mg/L 的培養(yǎng)基上，讓小芽繼續(xù)生長(zhǎng)，待芽生長(zhǎng)至3cm，將小苗切下，之后移植到生根培養(yǎng)基中。

2 結(jié)果與分析

2.1 影響月季誘導(dǎo)叢生芽的因素分析

腋芽在莖段上的位置對(duì)誘導(dǎo)叢生芽的影響。經(jīng)過(guò)研究，通過(guò)對(duì)位于不同位置的腋芽莖段在無(wú)激素的MS 基本培養(yǎng)基上的培植情況觀察，在培育15d，枝條頂端和基部的芽發(fā)育最緩慢，中間段的芽發(fā)育則較快，由此可見，中間部位的莖段誘導(dǎo)芽是最佳培植選擇。

莖段長(zhǎng)度對(duì)形成多芽苗的影響。通過(guò)對(duì)不同長(zhǎng)度的莖段在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中的培植效果觀察，莖段長(zhǎng)度在1～8cm 時(shí)，其形成多芽苗的效果最佳。這樣的切割長(zhǎng)度能夠使每個(gè)莖段的側(cè)指數(shù)減少。若莖段切割過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短都會(huì)對(duì)芽的誘導(dǎo)產(chǎn)生不利影響，都不利于多芽苗的形成。

2.2 影響月季芽的分化和生長(zhǎng)的因素分析

2.2.1 側(cè)芽誘導(dǎo)的分化結(jié)果。將月季的莖段接種在不同激素的培養(yǎng)基上時(shí)，通常1 周后側(cè)芽就會(huì)發(fā)生膨大現(xiàn)象，在10d就可逐漸分化形成幼苗，從本次誘導(dǎo)分化試驗(yàn)的結(jié)果分析得知，在MS+6-BA3.00mg/L+NAA0.30mg/L 培養(yǎng)基上的分化率最高，這說(shuō)明了在6-BA 濃度較高時(shí)比較容易誘導(dǎo)側(cè)芽的分化，從6-BA3.00mg/L 的濃度水平下芽的分化率和質(zhì)量來(lái)看，這種濃度被認(rèn)為最適宜腋芽誘導(dǎo)。增加一定濃度的NAA 有利于離體側(cè)芽的分化，但濃度不宜過(guò)高，否則抑制側(cè)芽的分化符合生長(zhǎng)。由此可知，最適宜月季側(cè)芽分化的培養(yǎng)基是MS+6-BA3.00mg/L+NAA0.10～1.00mg/L。（詳情見表1）

表1 側(cè)芽誘導(dǎo)的分化結(jié)果

表2 6-BA 濃度及BA 與IAA、NAA 和IBA 配合對(duì)芽長(zhǎng)勢(shì)的影響

2.2.2 6-BA 濃度及BA 與IAA、NAA 和IBA 配合對(duì)芽長(zhǎng)勢(shì)的影響。通過(guò)試驗(yàn)分析，芽的生長(zhǎng)會(huì)隨著6-BA 濃度的增加而不斷下降，芽的玻璃化現(xiàn)象也會(huì)逐漸加重，通過(guò)這個(gè)生芽試驗(yàn)證明了，具有細(xì)胞分裂素活性的6-BA 能夠有效地促進(jìn)誘導(dǎo)芽萌發(fā)，而生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的適當(dāng)配比可以對(duì)月季的分化增殖產(chǎn)生很大的影響，由試驗(yàn)結(jié)果可知，培養(yǎng)基配方是MS+6-BA3.00mg/L+NAA 0.20mg/L 時(shí)最適宜芽的生長(zhǎng)，（詳情見表2）。

2.3 影響月季生根的因素分析

2.3.1 MS 無(wú)機(jī)鹽和不同濃度培養(yǎng)基對(duì)月季生根培養(yǎng)的影響。當(dāng)月季嫩芽生長(zhǎng)到一定長(zhǎng)度時(shí)，接種到1/2MS+IBA 和1/2MS+NAA 2 種培養(yǎng)基上，經(jīng)過(guò)20d 的培養(yǎng)后，1/2MS+IBA培養(yǎng)基的生根率在75%，每株發(fā)根1～3 根，1/2MS+NAA 培養(yǎng)基附加NAA0.20-1.00 可誘導(dǎo)不定根的產(chǎn)生，生根率可達(dá)83.30%～93.30%，且在附加NAA 濃度為0.50mg/L 的生根效果最佳，根系生長(zhǎng)最良好，由試驗(yàn)結(jié)果可知，低濃度的生長(zhǎng)素比較有助于根的生長(zhǎng)，適當(dāng)濃度的IBA 和IAA 可以對(duì)生根率產(chǎn)生明顯的影響，但濃度過(guò)高會(huì)抑制生根，最佳生長(zhǎng)素濃度應(yīng)在0.20～1.00mg/L 之間，只有在這樣的濃度配比下才能促進(jìn)生根，加速苗生長(zhǎng)。（詳情見表3）

表3 MS 無(wú)機(jī)鹽和不同濃度培養(yǎng)基對(duì)月季生根培養(yǎng)的影響

2.3.2 活性炭對(duì)月季生根的影響。通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，在月季組培過(guò)程中，在生根培養(yǎng)期間，加入適量的活性炭有利于增強(qiáng)生根效果，活性炭的使用可以有效吸附酶類物質(zhì)[3]，可以在生根培育中減少褐變情況的發(fā)生。

3 結(jié)論

綜上所述，通過(guò)側(cè)芽誘導(dǎo)的分化結(jié)果顯示，最適宜月季側(cè)芽分化的培養(yǎng)基是MS+6-BA3.00mg/L+NAA0.10～1.00mg/L，培養(yǎng)基配方是MS+6-BA3.00mg/L+NAA 0.20mg/L 時(shí)最適宜芽的生長(zhǎng)；通過(guò)對(duì)MS 無(wú)機(jī)鹽和不同濃度培養(yǎng)基對(duì)月季生根培養(yǎng)的影響試驗(yàn)分析，生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA0.50mg/L 和1/2MS+NAA0.05mg/L 最佳，最佳生長(zhǎng)素濃度應(yīng)在0.20～1.00mg/L 之間，只有在這樣的濃度配比下才能促進(jìn)生根，加速苗生長(zhǎng)。