中草藥在防治畜禽腹瀉及抑菌方面的研究進(jìn)展

◆作者：聶振昌 鄧敦 羅杰 唐香山

◆單位：湖南唐人神集團(tuán)股份有限公司

在現(xiàn)代養(yǎng)殖業(yè)高度規(guī)模化、產(chǎn)業(yè)化的養(yǎng)殖模式下，養(yǎng)殖密度增大，而養(yǎng)殖環(huán)境及管理水平與之不匹配，導(dǎo)致動(dòng)物患病風(fēng)險(xiǎn)增大，疾病也越來(lái)越復(fù)雜。如腹瀉就是其中的一種，引起腹瀉的原因有很多，發(fā)病率和死亡率都很高，損害了養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)利益。防治腹瀉目前只有在飼料中添加或者養(yǎng)殖戶直接注射一定量的抗生素。但引起腹瀉的原因復(fù)雜性導(dǎo)致了抗生素防治效果的不穩(wěn)定性，為了提高治療效果，抗生素的超量使用或者濫用越來(lái)越普遍，導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性越來(lái)越嚴(yán)重，動(dòng)物免疫力抗逐漸下降的消極副作用，使腹瀉性疾病成為困擾養(yǎng)殖者的難題。

隨著現(xiàn)代人們生活水平的提高，希望能夠獲得更高品質(zhì)的畜產(chǎn)品。而抗生素的濫用及殘留造成畜產(chǎn)品品質(zhì)下降，也間接影響了人們的健康。因此，農(nóng)村農(nóng)業(yè)部下發(fā)了在2020 年7 月1 號(hào)全面禁止抗生素在飼料中使用的公告，為無(wú)抗飼料邁開(kāi)了極其重要的一步。隨著無(wú)抗飼料時(shí)代的到來(lái)，研究開(kāi)發(fā)能夠代替抗生素，又能維持畜禽消化道微生物菌群平衡，增強(qiáng)其免疫機(jī)能的替代品具有重要意義。擁有幾千年歷史的防治疾病的中草藥得到了畜牧從業(yè)者的高度關(guān)注，中草藥所具有的來(lái)源廣、不易產(chǎn)生耐藥性、低毒、少殘留及無(wú)殘留等天然特征，并兼有藥物與營(yíng)養(yǎng)劑的雙重效果。依托中草藥的傳統(tǒng)理論，運(yùn)用現(xiàn)代藥學(xué)知識(shí)與技術(shù)研究新的復(fù)合方劑，對(duì)中草藥在維護(hù)腸道健康菌群平衡，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)外界環(huán)境的適應(yīng)能力，提高免疫力等方面進(jìn)行了一系列的研究，都表明了中草藥在防治畜禽腹瀉性疾病上有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。本文根據(jù)現(xiàn)代中草藥防止疾病的研發(fā)成果，從中醫(yī)角度分析畜禽腹瀉的類型、抑菌機(jī)理、單個(gè)中草藥及組方抑菌，中草藥體外抑菌評(píng)估方法等方面進(jìn)行系統(tǒng)概要總結(jié)。

1 腹瀉的原因、類型及防治

傳統(tǒng)中醫(yī)理論認(rèn)為，脾胃失調(diào)是引起機(jī)體腹瀉的根本原因，而胃與脾分別為表與里，胃喜濕而惡燥；脾喜燥而惡濕。幼齡動(dòng)物消化系統(tǒng)未能得到完全發(fā)育，比較差的機(jī)體調(diào)節(jié)能力，當(dāng)受到外面濕氣及邪氣侵犯，容易造成脾胃功能失常，濕熱互結(jié)，從而導(dǎo)致消化吸收紊亂，導(dǎo)致腹瀉。根據(jù)中醫(yī)的濕寒溫?zé)帷?、脾虛、腎虛等臨床癥狀，總結(jié)了常見(jiàn)腹瀉及防治原則主要有以下幾種：①由外感寒濕引起的虛寒腹瀉，防治以散寒化濕并健運(yùn)脾胃為本，止瀉為標(biāo)。②由外感暑濕引起濕熱腹瀉，防治以滲濕固澀，清熱解毒。③由飲食過(guò)量引起的傷食腹瀉，防治以消食導(dǎo)窒，行氣寬中為主。④由先天不足引起的脾虛腹瀉，防治需健脾消食為主。⑤因腎虛腹瀉，防治以溫補(bǔ)脾胃為主。

2 中草藥抑菌殺毒的作用物質(zhì)

多年來(lái)，用傳統(tǒng)方法對(duì)中草藥進(jìn)行了抑菌試驗(yàn)，分析純化了中草藥中的有效成分，實(shí)驗(yàn)表明中草藥對(duì)細(xì)菌有不同程度的抑制作用。對(duì)具有抑菌作用的中草藥提取物進(jìn)一步的成分分析，發(fā)現(xiàn)了如生物堿類、黃酮類、萜類、苷類、皂苷、香豆素、木脂素、芪類、醌類、甾類、酯類、酚類、醛類、醇類、胺類、有機(jī)酸及精油類等多種化合物，這些活性成分能參與細(xì)菌的生化過(guò)程，改變其酶和細(xì)胞膜等功能，從而抑制細(xì)菌繁殖和病毒的復(fù)制，進(jìn)而直接殺滅細(xì)菌和病毒。

3 中草藥體外抑菌研究

中草藥獨(dú)特的天然活性成分所具有的抑菌作用，使人們對(duì)中草藥的研究熱潮一直未減。目前對(duì)中草藥的體外抑菌研究，主要是通過(guò)水蒸煮法和醇提取法來(lái)提取有效成分，然后進(jìn)行體外抑菌試驗(yàn)。如夏美玲（2009）研究黃芩、黃柏、黃連、大黃、秦皮的水蒸煮液對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、鏈球菌、傷寒沙門菌均有不同程度的抑制作用；劉先敏（2015）對(duì)五味子、金銀花、貫眾進(jìn)行水蒸煮后進(jìn)行體外抑菌研究，發(fā)現(xiàn)五味子對(duì)雞源性大腸桿菌、雞源性沙門氏菌、金黃色葡萄球菌具有較強(qiáng)的抑菌作用；向雙云（2016）等研究表明黃連、魚(yú)腥草、五味子、艾草的水蒸液對(duì)大腸桿菌具有較強(qiáng)的抑菌效果；郭?。?017）研究了魚(yú)腥草、白頭翁、五倍子等8 種中草藥對(duì)大腸桿菌的抑菌作用，發(fā)現(xiàn)五倍子和魚(yú)腥草對(duì)大腸桿菌高度敏感，具有很好的抑菌效果。

不同中草藥所表現(xiàn)出抑菌性能的差異性，在于中草藥的成分比較復(fù)雜，不同的提取方法所提取到的抑菌成分不同，而中草藥某些成分對(duì)熱比較敏感或者容易揮發(fā)，有些成分不溶于或者微溶于水，有些成分易溶于有機(jī)溶劑，如酒精，導(dǎo)致了不同的提取方法所產(chǎn)生的抑菌效果存在差異，因此在中草藥體外抑菌試驗(yàn)過(guò)程中，需采取適宜的提取方法方才能獲得較好的抑菌效果。陳光明等（2014）對(duì)蒲公英草、馬齒莧、紫花地丁等4 種中草藥的水煎提取液和75%乙醇提取液對(duì)豬大腸桿菌進(jìn)行抑菌性試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)乙醇提取液的抑菌效果和抗菌活性均比水煎提取液好；司春燦等（2018）研究了石榴皮、赤芍、大蒜、大青葉、黃芩、黃連、丹參的對(duì)大腸桿菌的抑菌作用發(fā)現(xiàn)，石榴皮水煎提取液比75%的乙醇提取液的抑菌效果好，黃芩、赤芍、大蒜的75%乙醇提取液的抑菌效果比水煎提取液好，其他兩者差異不大。

4 中草藥組方臨床防治腹瀉應(yīng)用研究

根據(jù)中醫(yī)相關(guān)理論，中醫(yī)講究的是通過(guò)不同中草藥組成的方劑來(lái)綜合調(diào)理機(jī)體的功能，改善胃腸道微生物菌群，改善胃腸道功能等手段來(lái)直接或者間接殺滅病原菌，而中草藥配伍需遵循一些原則，如君臣佐使、七情配伍、十八反十九畏等，學(xué)者們根據(jù)這些原則，研究出很多具有抑菌抗菌、抗病毒等防治疾病的中草藥方劑。如葛洪偉等（2018）以黃精、制首烏、雞血藤等為主要成分搭配研制了2 種中草藥方劑，其提取液均對(duì)雞大腸桿菌、沙門氏菌、巴氏桿菌、副嗜血桿菌具有明顯的抑菌作用；張業(yè)懷等（2018）在基礎(chǔ)日糧分別添加了0.3%、0.6%、0.9%的由多味中草藥制成的復(fù)方白術(shù)中草藥超微粉添加劑，其中添加0.6%的抗腹瀉效果與抗菌藥物組接近，其原因是中草藥添加劑中的多糖、黃酮類、生物堿、氨基酸等活性物質(zhì)提高了消化系統(tǒng)的機(jī)能，維護(hù)了腸道菌群的穩(wěn)定，起到防腹瀉，促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育的作用；賴寶色等（2015）以黃芪、馬齒莧、神曲等為主自擬組方添加到基礎(chǔ)日糧中，結(jié)果顯示對(duì)斷奶仔豬腹瀉具有很好的防治作用，其原因?yàn)槟苡行Т龠M(jìn)消化，改善腸道微生物群落，從而達(dá)到防治斷奶仔豬腹瀉的目的；周芝佳等（2014）在斷奶仔豬日糧中添加1%以黃芪、黃岑、甘草為主的中草藥添加劑，結(jié)果表明能有效減低腹瀉率，相對(duì)于不添加組，減低了62.8%。

相對(duì)于抗生素, 中草藥的抑菌機(jī)理還不是很明確，經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)體外抑菌與體內(nèi)抑菌的效果不一致，中草藥抗菌作用的大小取決于組成方劑的單味藥的性質(zhì)和配伍時(shí)不同藥材之間的協(xié)同作用及拮抗關(guān)系，中草藥在體內(nèi)作用機(jī)制比體外還要復(fù)雜。

5 中草藥體外抑菌評(píng)估方法及優(yōu)缺點(diǎn)

在中草藥抑菌研究中，體外抑菌方法是一個(gè)重要的研究途徑，它是能夠快速而直接評(píng)價(jià)抑菌物質(zhì)作用的常規(guī)方法。目前中草藥體外抑菌方法主要有定性鑒別方法和定量測(cè)定，二者構(gòu)成完整的體外評(píng)價(jià)。定性鑒別方法一般采用瓊脂擴(kuò)散法的抑菌環(huán)試驗(yàn)，該方法的優(yōu)點(diǎn)為比較簡(jiǎn)便，易掌握，但缺點(diǎn)是精確度不高，一般用于定性或初步判斷其作用的強(qiáng)弱。定量方法為稀釋法，分為固體培養(yǎng)基稀釋法和液體稀釋法，稀釋法可定量測(cè)定中藥對(duì)細(xì)菌、真菌的最小抑菌濃度（MIC）、最小殺菌濃度（MBC），測(cè)出抗菌中藥的最基本的藥效學(xué)數(shù)據(jù)，用以評(píng)價(jià)該藥的抑菌性能。由于中草藥是通過(guò)多種復(fù)雜有效成分來(lái)調(diào)節(jié)機(jī)體平衡、提高機(jī)體免疫力，而不是所有成分直接作用于病原菌達(dá)到治愈疾病的目的，因此，往往會(huì)導(dǎo)致一些中藥的抗菌有效成分在體外抑菌試驗(yàn)中無(wú)法表現(xiàn)理想的抑菌效果，但在體內(nèi)卻有較好的抑菌效果。

針對(duì)傳統(tǒng)的定性定量方法的一些優(yōu)缺點(diǎn)，也產(chǎn)生了一些準(zhǔn)確性高、重復(fù)性較高、科技程度高、自動(dòng)化的一些新技術(shù)，流式細(xì)胞術(shù)（FCM）作為一種新的藥敏監(jiān)測(cè)方法，采用流式細(xì)胞儀對(duì)單個(gè)細(xì)胞或其他生物微粒進(jìn)行快速定性、定量分析與分選的一門技術(shù)，自動(dòng)化程度高、方法簡(jiǎn)單、結(jié)果客觀，避免了人為因素的誤差。自動(dòng)藥敏法目前有Biomerieux Vitek 系統(tǒng)、MicroScan系統(tǒng)、BDPhoenix 等，儀器自動(dòng)化程度高，工作流程簡(jiǎn)便，維護(hù)簡(jiǎn)單，主要應(yīng)用于大型醫(yī)院的臨床檢測(cè)。

隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，使研究者可以利用其最新醫(yī)學(xué)檢測(cè)試驗(yàn)技術(shù)來(lái)研究中草藥的抑菌機(jī)理及性能，但中醫(yī)及中草藥具有獨(dú)特的傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)及藥理理論，因此，在對(duì)中草藥進(jìn)行體內(nèi)外抑菌研究篩選時(shí)候，需要充分了解中草藥特點(diǎn)，深刻認(rèn)識(shí)中草藥不同于西藥所呈現(xiàn)出的抑菌方式，采用傳統(tǒng)的中醫(yī)理論與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)相結(jié)合，對(duì)所存在的問(wèn)題進(jìn)行不斷修正和改善，在綜合考慮以上因素基礎(chǔ)上合理挑選合適的抑菌方法，這樣才能更加全面準(zhǔn)確地篩選出具有抑菌作用的中草藥。

6 中草藥防治腹瀉研究存在的問(wèn)題及展望

近幾年來(lái)，中草藥在防治仔豬腹瀉上的研究取得了一定的進(jìn)展，并取得了一些功效，證明了中草藥具有一定的防治仔豬腹瀉的作用。根據(jù)目前的研究來(lái)看，還存在著很多亟待解決的問(wèn)題：如對(duì)中草藥的基礎(chǔ)研究不足，不能對(duì)中草藥的藥理、毒理以及對(duì)動(dòng)物機(jī)體的作用機(jī)理有更加全面系統(tǒng)的認(rèn)識(shí)；創(chuàng)新制劑的研究不夠，大多組合都停留在傳統(tǒng)中藥組方上做加減，中草藥組合制劑工藝創(chuàng)新不足；中草藥缺少科學(xué)的評(píng)判質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，缺乏西醫(yī)那樣的規(guī)范性和標(biāo)準(zhǔn)性，對(duì)藥效的評(píng)定也比較模糊；在飼料利用方面，由于中草藥的藥效遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于抗生素，因此導(dǎo)致其添加到飼料的比例相對(duì)較高，而中草藥的價(jià)格相對(duì)較高，不可避免地造成了飼料成本上升，難以達(dá)到抗生素微量高效的效果。針對(duì)中草藥研究及應(yīng)用上所具有的不足，為了更好地適應(yīng)時(shí)代的需要，中草藥的研究應(yīng)該往“技術(shù)高新化、劑型合理化、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化、高效多能化、添加微量化、產(chǎn)品系列化”等方面深入探討與開(kāi)發(fā)，同時(shí)適應(yīng)無(wú)抗飼料的需要，中草藥防治畜禽腹瀉的研究具有強(qiáng)大的生命力和應(yīng)用前景。