• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于響應(yīng)面法的山楂果核總黃酮閃式提取工藝

    2020-03-04 12:17:10楊燕新邱相坡于歡王文斌
    關(guān)鍵詞:山楂果閃式蘆丁

    楊燕新,邱相坡,于歡,王文斌*

    (1.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 文理學(xué)院,山西 太谷 030801;2.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院,山西 太谷 030801)

    山楂(CrataeguspinnatifidaBunge)為薔薇科植物,又名山里紅,在亞洲、歐洲、北美洲以及南美洲均有分布,在我國北方分布較廣[1]。山楂可藥食兩用,具有消積化滯、補脾健胃、行氣散瘀和抗氧化的功能,在臨床醫(yī)學(xué)上還可用以治療高血脂、高血壓、冠心病以及清除自由基、增強免疫力和抑制腫瘤等[2, 3]。

    黃酮類化合物在植物中廣泛存在,屬于植物的次級代謝產(chǎn)物,并具有很高的藥用價值,在心腦血管疾病方面具有較好的療效,通過其特有的抗氧化作用,從而可以阻止細胞的退化、衰老,甚至癌癥的發(fā)生[4~6]。山楂主要含有黃酮類、有機酸、三萜類、維生素C等化學(xué)成分。有研究表明,山楂的部分藥用功能與其所含的黃酮類化合物密切相關(guān)[7, 8]。當(dāng)前社會隨著生活節(jié)奏的加快和工作壓力的日益劇增,高血壓、高血脂等疾病的發(fā)病率明顯增加,并受到人們的普遍高度重視。為此,以黃酮類化合物為基礎(chǔ)研究出針對相關(guān)疾病的預(yù)防藥物已受到廣泛關(guān)注[9]。

    我國山楂資源充足,據(jù)統(tǒng)計,1995年至2017年我國山楂種植面積由原來500余萬畝增加到700余萬畝,占我國果樹種植總面積的10%左右,產(chǎn)量更是高達300萬t[5]。然而,山楂食用后以及工廠藥用山楂加工后殘余的果核利用率極低,提升山楂果核資源的利用價值具有重要的意義。前人已有研究通過索氏提取、CO2超臨界流體萃取法等對山楂果核總黃酮提取工藝進行優(yōu)化[10, 11],但未見應(yīng)用閃式提取的相關(guān)報道。閃式提取是近些年發(fā)展起來的一種新的提取方法,利用機械剪切刀對材料進行高速切割,并產(chǎn)生強大的真空負壓,使化學(xué)成分快速溶解于提取液。閃式提取器結(jié)合了粉碎、萃取、攪拌、振動、浸漬等技術(shù)于一身,不需要加熱,能夠避免有效成分破壞,且溶劑用量小,效率高,處理量大,使用安全可靠[12]。閃式提取適用范圍廣泛,可用于植物根、葉、花、果實等多個部位,在銀杏葉、野菊花、羅漢松、金錦香等多種植物總黃酮提取方面均有相關(guān)的研究報道[13~16]。本文旨在利用響應(yīng)面分析法對山楂果核總黃酮的閃式提取工藝進行優(yōu)化,為合理開發(fā)利用山楂果核資源及黃酮類化合物的工業(yè)化提取提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    山楂鮮果購于山西省晉中市榆次區(qū)農(nóng)貿(mào)市場,用刀片取出山楂果核,洗凈平鋪于濾紙上,放置于60 ℃干燥箱中烘干至恒重后用中藥粉碎機進行粉碎,過80目篩,制得山楂果核粉末并儲存于干燥的藍蓋瓶中,在4 ℃冰箱密封保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.2 試驗方法

    1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作方法

    精確稱取20.00 mg蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品于少量無水乙醇中溶解,然后將其完全轉(zhuǎn)移到100 mL的容量瓶中,用60%的乙醇稀釋定容,得到0.2 g·L-1的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 mL依次置于6個25 mL的容量瓶中,各加入0.3 mL 5% NaNO2溶液,搖勻后靜置6 min;再各加0.3 mL 10% Al(NO3)3溶液搖勻后靜置6 min;最后,分別加入4 mL 4%的NaOH溶液,用60%乙醇溶液稀釋定容,搖勻后靜置15 min,分別測量在波長510 nm處的吸光度A[13, 17]。并根據(jù)不同濃度下測定的吸光度值生成蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖1)。

    1.2.2 總黃酮的提取

    將山楂果核粉末精確稱量2.00 g于藍蓋瓶中,電壓為100 V,在不同的料液比、乙醇濃度、提取時間條件下進行閃式提取,提取完后的液體完全轉(zhuǎn)移至離心杯中,然后5 000 r·min-1離心15 min,取上清液作為山楂果核試液。

    1.2.3 總黃酮含量的測定

    本試驗采用硝酸鋁顯色法測定山楂果核總黃酮的含量[13, 17]。取山楂果核試液2.0 mL于25 mL容量瓶中,其余步驟同1.2.1,依次加入0.3 mL 5% NaNO2、0.3 mL 10% Al(NO3)3及4 mL 4% 的NaOH溶液,振蕩搖勻,用60%乙醇溶液定容后靜置15 min,測量該溶液在波長510 nm處的吸光度A。依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算山楂果核總黃酮的含量,利用以下公式求出其提取率E/%。

    E為總提取率/%;C為提取液中黃酮濃度/(g·mL-1);V為體積/mL;n為稀釋倍數(shù);m為稱取的山楂果核粉末的質(zhì)量/g。

    1.3 單因素試驗

    1.3.1 料液比試驗

    用電子天平分別精確稱量山楂果核粉末,按料液比為1∶5,1∶15,1∶25,1∶35 (g·mL-1)比例加入60%乙醇,設(shè)置電壓100 V,時間90 s完成閃式提取。然后將所得液體于5 000 r·min-1條件下離心15 min,并將上清液轉(zhuǎn)移至4個干凈的藍蓋瓶中,分別取不同料液比上清液2.0 mL,同1.2.3完成總黃酮含量的測定并計算不同料液比條件下的山楂果核總黃酮提取率。

    1.3.2 乙醇濃度試驗

    料液比和閃式提取時間分別設(shè)置為1∶25(g·mL-1)和90 s,乙醇濃度設(shè)置梯度為40%、50%、60%和70%,其余步驟同1.3.1。

    1.3.3 閃式提取時間試驗

    料液比和乙醇濃度分別設(shè)置為1∶25(g·mL-1)和50%,閃式提取時間梯度設(shè)置為70、80、90、100 s,其余步驟同1.3.1。

    1.4 響應(yīng)面試驗設(shè)計

    以單因素試驗結(jié)果為依據(jù),通過Design-Expert軟件中的Box-Behnken Design程序,分別用A、B、C表示乙醇濃度、提取時間、料液比,每個因素設(shè)置低、中、高3個水平,用-1、0、+1表示,設(shè)計結(jié)果見表1。

    表1 試驗因素水平設(shè)計Table 1 Design of of experimental factors and levels

    1.5 統(tǒng)計分析方法

    所有試驗至少重復(fù)3次,采用Microsoft Excel及SPSS 17.0進行標(biāo)準(zhǔn)差計算及顯著性差異分析。單因素實驗中總黃酮提取率結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線

    圖1顯示蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為y=8.731 3x-0.008 9(R2=0.999 4)。其中自變量x代表蘆丁濃度/(g·L-1),因變量y為吸光度A。

    圖1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 Standard curve of rutin

    2.2 單因素試驗結(jié)果分析

    2.2.1 料液比對山楂果核總黃酮提取率的影響

    在閃式提取電壓100 V條件下,設(shè)置乙醇濃度60%,提取時間90 s,得到山楂果核總黃酮的提取率與料液比關(guān)系曲線圖。由圖2可知,在液料比為1∶5~1∶25(g·mL-1)范圍內(nèi),閃式提取山楂果核總黃酮的提取率呈現(xiàn)升高趨勢,在1∶25~1∶35(g·mL-1)之間提取率下降,并且在料液比為1∶25(g·mL-1)時,山楂果核總黃酮的提取率最大。因此,初步選取1∶25(g·mL-1)為最適料液比。

    圖2 料液比與總黃酮提取率關(guān)系Fig.2 Relation between ratio of material to liquid and flavonoids extraction rate

    2.2.2 乙醇濃度對山楂果核總黃酮提取率的影響

    設(shè)置閃式提取電壓100 V,選取2.2.1中最適料液比1∶25(g·mL-1),提取時間90 s,然后得到山楂果核總黃酮的提取率與乙醇濃度關(guān)系的曲線圖。由圖3可知,在乙醇濃度為40%~70%之間,山楂果核總黃酮提取率呈現(xiàn)先升高后降低趨勢,并且在乙醇濃度為50%時,山楂果核總黃酮的提取率最大。因此,初步選取50%為最適乙醇濃度。

    圖3 乙醇濃度與總黃酮提取率關(guān)系Fig.3 Relation between ethanol concentration and flavonoids extraction rate

    2.2.3 閃式提取時間對山楂果核總黃酮提取率的影響

    設(shè)置閃式提取電壓100 V、料液比1∶25(g·mL-1)、乙醇濃度50%,完成閃式提取,得到山楂果核總黃酮的提取率與閃式提取時間關(guān)系曲線圖(圖4)。在時間70~100 s范圍內(nèi),提取率隨提取時間的延長呈先升高后降低變化趨勢,并且在提取時間90 s條件下總黃酮提取率最大。因此,初步選取90 s為最適閃式提取時間。

    圖4 提取時間與黃酮提取率關(guān)系Fig.4 Relation between extraction time and flavonoids extraction rate

    2.3 響應(yīng)面結(jié)果分析

    依據(jù)響應(yīng)面設(shè)計完成不同因素及水平組合條件下的山楂果核總黃酮閃式提取及含量測定。通過Design Expert 8.0.5對表2所得數(shù)據(jù)進行回歸分析,山楂果核總黃酮提取率用響應(yīng)值Y來表示,二次回歸方程模型為下式:

    Y=0.64-0.013×A+2.000E-0.003×B+0.020×C-0.012×A×B+7.250E-0.03×B×C+4.250E-0.03×A×C-0.053×A2-0.024×B2-0.024×C2

    表2 響應(yīng)面試驗設(shè)計及測定結(jié)果

    由表3可知失擬項不顯著,說明該模型擬合良好;均方差P=0.02<0.05,說明此回歸模型顯著。CV=2.85%,說明此響應(yīng)面試驗精確度良好;信噪比8.368>3,表明此模型對山楂果核黃酮提取率的分析和預(yù)測結(jié)果準(zhǔn)確;R2=0.930 2表明模型擬合程度較高。對回歸模型進行顯著性分析,得到模型的一次項C顯著(P<0.05),A、B不顯著(P>0.05),二次項A2極顯著(P<0.01),B2、C2顯著(P<0.05),其余項均不顯著。各因素對山楂果核總黃酮提取率的影響大?。毫弦罕?乙醇濃度>提取時間。

    2.4 多因素間交互作用分析

    2.4.1 乙醇濃度和提取時間的交互作用

    圖5顯示在料液比為1∶25時乙醇濃度和閃式提取時間對山楂果核總黃酮提取率的交互作用的3D模型。由圖5可見,固定A或者B的任一值,提取率曲線都會隨著其中單個因素的增大而先升高后降低,并且提取時間坡度較為平緩,而乙醇濃度的坡度較陡,A與B交互作用較為顯著。

    圖5 乙醇濃度與提取時間對提取率交互影響的響應(yīng)面Fig.5 The response surface of interaction effect between the ethanol concentration and the extraction time

    2.4.2 乙醇濃度和料液比的交互作用

    在閃式提取時間90 s時,乙醇濃度與料液比對山楂果核總黃酮提取率的交互作用的3D模型如圖6所示。固定A或C中的任一值,提取率的曲線都是隨著其中一個因素的增大而先升高后降低,且乙醇濃度的坡度較陡,料液比坡度較為平坦,A與C交互作用較為顯著。

    圖6 乙醇濃度與料液比對提取率交互影響的響應(yīng)面Fig.6 The response surface of interaction effect between the ethanol concentration and the ratio of material to liquid

    2.4.3 提取時間和料液比的交互作用

    圖7表示當(dāng)乙醇濃度為50%時閃式提取時間及料液比對山楂果核總黃酮提取率的交互作用的3D模型。由圖7可見,固定B或者C的任一值,提取率曲線都是隨著其中一個因素的增大而先升高后降低,但是B與C在各自范圍內(nèi)的曲面均較為平坦,因此,B與C交互作用不顯著。

    圖7 提取時間與料液比對提取率交互影響的響應(yīng)面Fig.7 The response surface of interaction effect between the extraction time and the ratio of material to liquid

    表3 回歸模型的方差分析Table 3 Analysis of variance for regression equation

    2.5 驗證試驗

    通過分析回歸擬合方程和回歸模型,依據(jù)響應(yīng)面分析法對山楂果核總黃酮提取率選擇maximize模式進行優(yōu)化,進而得到山楂果核總黃酮最優(yōu)的閃式提取工藝參數(shù)為:料液比1∶29.36(g·mL-1)、乙醇濃度為48.78%、閃式提取時間為91.41 s,山楂果核總黃酮提取率的理論值為0.648%。根據(jù)實際操作情況,設(shè)置料液比、乙醇濃度、閃式提取時間依次為1∶29(g·mL-1)、49%、91 s進行驗證,最終得到山楂果核總黃酮提取率為0.644%。此結(jié)果與響應(yīng)面的理論預(yù)測值基本一致,說明采用響應(yīng)面法優(yōu)化設(shè)計的回歸方程能夠較好地顯示出其各個因素對總黃酮提取率的影響。

    3 討論

    前人對山楂果核總黃酮已通過索氏提取、CO2超臨界萃取、超聲提取等方法進行相關(guān)研究[10, 11, 18],但未見利用閃式提取法的相關(guān)報道。本試驗基于響應(yīng)面法對山楂果核總黃酮的閃式提取工藝進行優(yōu)化,提取參數(shù)料液比、乙醇濃度、閃式提取時間依次為1∶29(g·mL-1)、49%、91 s。而通過索氏提取法提取山楂果核總黃酮需長時間回流至無色[10],CO2超臨界萃取需50 ℃、20 MPa、2 h的提取條件[11],超聲波提取參數(shù)為60 ℃、50%乙醇、也需40 min超聲破碎[18]。相對而言,閃式提取在室溫下即可進行,提取時間更短,乙醇用量較少,提取能耗及提取成本更低,通過閃式提取法的山楂果核總黃酮提取率也優(yōu)于索氏提取法(0.51%),本試驗結(jié)果具有更好的實際應(yīng)用價值。但與CO2超臨界萃取及超聲提取相比,閃式提取的提取率仍較低,推測可能與山楂來源有關(guān),溶劑及提取參數(shù)也有待進一步優(yōu)化。當(dāng)前山楂利用的現(xiàn)狀是山楂食用后以及工廠藥用山楂加工后殘余的果核棄之不用,從而造成資源浪費。而近年來植物總黃酮成分的提取利用受到廣泛關(guān)注,已有研究表明,山楂果肉、果核及葉片總黃酮含量依次降低[10]。因此,本試驗結(jié)果將對山楂廢棄果核總黃酮的資源利用具有重要的參考價值。

    4 結(jié)論

    本研究對山楂果核中的總黃酮進行了閃式提取,并通過單因素試驗和響應(yīng)面分析法對各提取參數(shù)進行了優(yōu)化。試驗結(jié)果表明,各單因素對山楂果核總黃酮的提取率的影響大小為料液比>乙醇濃度>閃式提取時間,所得最優(yōu)提取工藝參數(shù)分別是料液比1∶29(g·mL-1)、乙醇濃度為49%、閃式提取時間為91 s,山楂果核總黃酮提取率為0.644%。本試驗結(jié)果將為山楂果核資源的開發(fā)利用提供重要的理論參考。

    猜你喜歡
    山楂果閃式蘆丁
    閃式提取山茱萸黃酮研究
    蘆丁雞觀察日記
    煙臺小金星山楂果總黃酮含量與其感官及理化指標(biāo)相關(guān)性分析
    閃式提取法在中藥制劑工藝中的應(yīng)用
    腌制山楂果胡梓盈媽媽
    山楂果(修改稿)
    遼河(2017年4期)2017-05-25 20:21:03
    響應(yīng)面法優(yōu)化辣木中多糖和蘆丁的超聲提取工藝
    中成藥(2017年3期)2017-05-17 06:09:13
    蘆丁-二甲基-β-環(huán)糊精包合物的制備、物理化學(xué)表征及體外溶出研究
    不同采收期倒地鈴總黃酮及蘆丁的含量變化
    閃式提取香菇柄中麥角甾醇工藝研究
    av超薄肉色丝袜交足视频| 亚洲av片天天在线观看| 18禁观看日本| 日本精品一区二区三区蜜桃| 亚洲精品自拍成人| 国产精品免费大片| 日韩 亚洲 欧美在线| 午夜免费成人在线视频| 国产av精品麻豆| 中文欧美无线码| www.精华液| 咕卡用的链子| videos熟女内射| 岛国毛片在线播放| 亚洲伊人久久精品综合| 欧美乱码精品一区二区三区| av在线app专区| 成人亚洲精品一区在线观看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 久久99热这里只频精品6学生| 久热爱精品视频在线9| 亚洲第一av免费看| 亚洲国产精品一区二区三区在线| av网站在线播放免费| 国产在视频线精品| 国产日韩欧美亚洲二区| 欧美激情高清一区二区三区| 久久久久视频综合| 咕卡用的链子| 美女午夜性视频免费| 久久中文字幕一级| 大码成人一级视频| 水蜜桃什么品种好| 国产欧美日韩一区二区三 | 欧美另类亚洲清纯唯美| 黄色视频在线播放观看不卡| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 久久女婷五月综合色啪小说| 桃花免费在线播放| 欧美国产精品va在线观看不卡| 极品少妇高潮喷水抽搐| 久久99一区二区三区| 国产成人免费观看mmmm| 欧美性长视频在线观看| 精品人妻在线不人妻| 男女之事视频高清在线观看| 高清av免费在线| av不卡在线播放| 久久久国产欧美日韩av| 伊人亚洲综合成人网| 一级片'在线观看视频| 国产精品熟女久久久久浪| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 精品福利永久在线观看| 亚洲avbb在线观看| 国产亚洲av高清不卡| 另类亚洲欧美激情| 成人手机av| 国产高清videossex| 欧美精品亚洲一区二区| 亚洲av美国av| 这个男人来自地球电影免费观看| 三级毛片av免费| 在线av久久热| 亚洲 欧美一区二区三区| 天堂俺去俺来也www色官网| 久久天堂一区二区三区四区| 男人操女人黄网站| 丝袜美足系列| 国产日韩欧美在线精品| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 午夜两性在线视频| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 黄色a级毛片大全视频| 老司机靠b影院| 捣出白浆h1v1| e午夜精品久久久久久久| 在线观看舔阴道视频| 日本五十路高清| 免费高清在线观看日韩| 中文字幕色久视频| 国产精品熟女久久久久浪| 美女中出高潮动态图| 69av精品久久久久久 | 五月天丁香电影| 日本欧美视频一区| 母亲3免费完整高清在线观看| 黑人猛操日本美女一级片| 欧美成人午夜精品| 精品少妇黑人巨大在线播放| 99久久国产精品久久久| 欧美国产精品va在线观看不卡| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 麻豆av在线久日| 国产高清videossex| 久久久精品区二区三区| 亚洲中文av在线| 一区二区av电影网| 又黄又粗又硬又大视频| 国产不卡av网站在线观看| 亚洲五月婷婷丁香| av国产精品久久久久影院| 飞空精品影院首页| 视频区欧美日本亚洲| 精品久久久久久电影网| av不卡在线播放| 十八禁高潮呻吟视频| 日韩精品免费视频一区二区三区| 人妻一区二区av| 99国产综合亚洲精品| 操美女的视频在线观看| 国产精品久久久久成人av| 青春草视频在线免费观看| 电影成人av| 久久久久精品国产欧美久久久 | 亚洲国产欧美一区二区综合| 波多野结衣一区麻豆| 精品少妇久久久久久888优播| 欧美日韩亚洲高清精品| 在线看a的网站| 多毛熟女@视频| 久久久久久免费高清国产稀缺| 欧美日本中文国产一区发布| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲精品第二区| 男女床上黄色一级片免费看| 两人在一起打扑克的视频| 色老头精品视频在线观看| 午夜福利一区二区在线看| 91国产中文字幕| 国产99久久九九免费精品| 丝瓜视频免费看黄片| 免费观看人在逋| 一级毛片电影观看| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 日韩视频一区二区在线观看| 日韩中文字幕视频在线看片| 妹子高潮喷水视频| 精品国产乱码久久久久久男人| 色综合欧美亚洲国产小说| 少妇 在线观看| 精品少妇黑人巨大在线播放| 777米奇影视久久| 国产精品免费视频内射| 国产免费现黄频在线看| 免费av中文字幕在线| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 十八禁网站网址无遮挡| 成人三级做爰电影| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 亚洲黑人精品在线| 精品少妇久久久久久888优播| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 久久久久久久精品精品| 97在线人人人人妻| 久久精品亚洲av国产电影网| 一本综合久久免费| 人妻一区二区av| 亚洲国产av新网站| 老司机影院成人| 国产不卡av网站在线观看| 在线观看免费午夜福利视频| 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 国产精品免费大片| 国产在线一区二区三区精| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲精品国产色婷婷电影| 午夜精品国产一区二区电影| 精品福利永久在线观看| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国产一卡二卡三卡精品| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 激情视频va一区二区三区| 90打野战视频偷拍视频| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产日韩欧美在线精品| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 水蜜桃什么品种好| 久久国产精品大桥未久av| 午夜成年电影在线免费观看| 丝瓜视频免费看黄片| 啪啪无遮挡十八禁网站| 99国产精品99久久久久| 免费在线观看完整版高清| 性少妇av在线| 在线观看www视频免费| 国产成人精品在线电影| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 啦啦啦免费观看视频1| 黄片大片在线免费观看| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 他把我摸到了高潮在线观看 | 91精品国产国语对白视频| 亚洲成人免费av在线播放| 免费看十八禁软件| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 国产xxxxx性猛交| 永久免费av网站大全| 大码成人一级视频| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 成年美女黄网站色视频大全免费| 国产国语露脸激情在线看| 久久午夜综合久久蜜桃| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 久久人人97超碰香蕉20202| kizo精华| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲avbb在线观看| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲视频免费观看视频| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 美女扒开内裤让男人捅视频| 12—13女人毛片做爰片一| 久久人妻熟女aⅴ| 久久综合国产亚洲精品| 丝袜喷水一区| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 国产成人啪精品午夜网站| 国产高清视频在线播放一区 | 悠悠久久av| 大型av网站在线播放| 亚洲 欧美一区二区三区| 成年动漫av网址| 一区二区av电影网| 亚洲国产欧美日韩在线播放| av网站免费在线观看视频| 久久国产亚洲av麻豆专区| 午夜福利乱码中文字幕| 少妇的丰满在线观看| 不卡一级毛片| 欧美在线一区亚洲| av电影中文网址| 精品少妇黑人巨大在线播放| 国产精品一区二区在线不卡| 在线观看一区二区三区激情| 亚洲人成电影观看| 亚洲国产精品成人久久小说| 久久中文字幕一级| 脱女人内裤的视频| av视频免费观看在线观看| 免费不卡黄色视频| 久久久久久免费高清国产稀缺| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 色播在线永久视频| 亚洲国产日韩一区二区| 久久久久久久久免费视频了| 精品人妻在线不人妻| 国产成人免费观看mmmm| 丝袜在线中文字幕| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 成年人午夜在线观看视频| 五月开心婷婷网| 男女国产视频网站| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 精品国产乱码久久久久久小说| 久久国产精品影院| 狠狠狠狠99中文字幕| 男男h啪啪无遮挡| 国产精品国产av在线观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 欧美变态另类bdsm刘玥| 十分钟在线观看高清视频www| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 国产免费福利视频在线观看| 精品久久久精品久久久| 久久精品人人爽人人爽视色| 国产成人啪精品午夜网站| 精品亚洲成a人片在线观看| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲熟女毛片儿| 精品免费久久久久久久清纯 | 欧美另类一区| 美女午夜性视频免费| 日韩制服骚丝袜av| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 欧美日本中文国产一区发布| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 青春草视频在线免费观看| 99久久精品国产亚洲精品| 妹子高潮喷水视频| 国产精品成人在线| 韩国高清视频一区二区三区| 亚洲av国产av综合av卡| 久久久久国产精品人妻一区二区| 天天操日日干夜夜撸| 欧美乱码精品一区二区三区| 天天添夜夜摸| 日日爽夜夜爽网站| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 多毛熟女@视频| 午夜影院在线不卡| 亚洲伊人久久精品综合| 国产精品影院久久| 精品久久久久久电影网| 久久精品国产a三级三级三级| 波多野结衣一区麻豆| 欧美成人午夜精品| 十八禁人妻一区二区| a 毛片基地| 国产亚洲精品久久久久5区| 男男h啪啪无遮挡| 老汉色av国产亚洲站长工具| 精品少妇久久久久久888优播| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 亚洲国产日韩一区二区| av国产精品久久久久影院| 亚洲国产精品999| 欧美中文综合在线视频| 日韩电影二区| 色综合欧美亚洲国产小说| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 日本一区二区免费在线视频| 纯流量卡能插随身wifi吗| 中文欧美无线码| 一边摸一边做爽爽视频免费| av超薄肉色丝袜交足视频| 岛国在线观看网站| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 国产免费一区二区三区四区乱码| 国产精品一区二区在线观看99| 国产成人av激情在线播放| 久久亚洲精品不卡| www.精华液| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 亚洲成国产人片在线观看| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 极品人妻少妇av视频| 好男人电影高清在线观看| 99精品久久久久人妻精品| 不卡一级毛片| 最黄视频免费看| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 欧美日韩一级在线毛片| 成人国产一区最新在线观看| 极品人妻少妇av视频| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 老司机午夜十八禁免费视频| 精品亚洲成国产av| 桃花免费在线播放| 在线观看一区二区三区激情| 一级片'在线观看视频| av在线老鸭窝| 777米奇影视久久| 欧美av亚洲av综合av国产av| 国产男人的电影天堂91| 国产精品久久久av美女十八| 婷婷丁香在线五月| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 精品久久蜜臀av无| 在线观看免费视频网站a站| 精品欧美一区二区三区在线| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 欧美少妇被猛烈插入视频| av欧美777| 久久久久国产一级毛片高清牌| 极品少妇高潮喷水抽搐| 中文字幕色久视频| 成年动漫av网址| 亚洲国产中文字幕在线视频| 国产不卡av网站在线观看| 久久ye,这里只有精品| 热99久久久久精品小说推荐| 国产高清videossex| 国产又色又爽无遮挡免| 精品第一国产精品| 国产91精品成人一区二区三区 | 亚洲精品成人av观看孕妇| 午夜福利在线观看吧| 色老头精品视频在线观看| 大型av网站在线播放| 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 国产亚洲精品一区二区www | 男女无遮挡免费网站观看| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国产一区有黄有色的免费视频| av又黄又爽大尺度在线免费看| 午夜影院在线不卡| 2018国产大陆天天弄谢| 国产xxxxx性猛交| 欧美一级毛片孕妇| av视频免费观看在线观看| svipshipincom国产片| 一区二区日韩欧美中文字幕| 久久久久精品国产欧美久久久 | 日本vs欧美在线观看视频| 丁香六月天网| 国产男人的电影天堂91| 在线永久观看黄色视频| 欧美少妇被猛烈插入视频| 国产av一区二区精品久久| 久久久久精品国产欧美久久久 | 久久久国产一区二区| 国产淫语在线视频| 制服人妻中文乱码| 亚洲精品美女久久av网站| 国产1区2区3区精品| 午夜福利免费观看在线| 美国免费a级毛片| 中文字幕人妻丝袜制服| 精品福利观看| 成年人黄色毛片网站| 12—13女人毛片做爰片一| 国产国语露脸激情在线看| 午夜免费成人在线视频| 成人三级做爰电影| 1024香蕉在线观看| 丁香六月欧美| 99精国产麻豆久久婷婷| 国产老妇伦熟女老妇高清| 欧美精品一区二区大全| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 新久久久久国产一级毛片| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 在线精品无人区一区二区三| 精品少妇内射三级| 亚洲欧美精品自产自拍| 日韩 亚洲 欧美在线| 久久性视频一级片| 久久久国产精品麻豆| 我的亚洲天堂| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 色视频在线一区二区三区| 男人添女人高潮全过程视频| 精品久久蜜臀av无| 午夜两性在线视频| 欧美激情极品国产一区二区三区| www.精华液| 日本五十路高清| 91国产中文字幕| 老司机亚洲免费影院| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 青春草亚洲视频在线观看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 欧美激情极品国产一区二区三区| 久久综合国产亚洲精品| 国产av一区二区精品久久| 人妻久久中文字幕网| 国产在线一区二区三区精| av又黄又爽大尺度在线免费看| avwww免费| 欧美久久黑人一区二区| 一个人免费在线观看的高清视频 | 日本五十路高清| 亚洲综合色网址| kizo精华| 丝袜美足系列| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 欧美日韩精品网址| 欧美成狂野欧美在线观看| 丝瓜视频免费看黄片| 亚洲成国产人片在线观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 我的亚洲天堂| 精品国产乱码久久久久久男人| 国产精品99久久99久久久不卡| 成年人黄色毛片网站| 乱人伦中国视频| 2018国产大陆天天弄谢| www.999成人在线观看| 黑人操中国人逼视频| 在线看a的网站| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲三区欧美一区| 91av网站免费观看| 久久久久久久久久久久大奶| 亚洲av成人一区二区三| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 制服人妻中文乱码| 国产欧美日韩一区二区三 | 久久ye,这里只有精品| 国产真人三级小视频在线观看| 中文字幕色久视频| 在线观看人妻少妇| 成人国产av品久久久| 亚洲国产精品成人久久小说| 久久精品国产亚洲av高清一级| 精品国产国语对白av| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 亚洲 欧美一区二区三区| 国产91精品成人一区二区三区 | 精品高清国产在线一区| 在线精品无人区一区二区三| 正在播放国产对白刺激| 另类亚洲欧美激情| 国产激情久久老熟女| 在线观看人妻少妇| 国产区一区二久久| 亚洲伊人色综图| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 国产欧美日韩一区二区三区在线| tocl精华| 国产成人欧美| 最黄视频免费看| 在线观看一区二区三区激情| 天堂8中文在线网| 91av网站免费观看| 性色av一级| 老司机午夜十八禁免费视频| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产免费视频播放在线视频| 永久免费av网站大全| 丝袜在线中文字幕| 老司机福利观看| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 一本综合久久免费| 成人手机av| 在线观看人妻少妇| 国产精品一区二区在线不卡| 亚洲性夜色夜夜综合| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 极品人妻少妇av视频| 一区福利在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 51午夜福利影视在线观看| 天堂俺去俺来也www色官网| 国产一区二区在线观看av| 日本欧美视频一区| 国产99久久九九免费精品| 满18在线观看网站| 老熟妇仑乱视频hdxx| 欧美另类亚洲清纯唯美| 女人久久www免费人成看片| 成年人午夜在线观看视频| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 搡老岳熟女国产| 中国国产av一级| 叶爱在线成人免费视频播放| 丰满饥渴人妻一区二区三| 亚洲av男天堂| 黄片小视频在线播放| 久久精品国产综合久久久| 日韩大码丰满熟妇| 日本91视频免费播放| 午夜成年电影在线免费观看| 亚洲,欧美精品.| 免费在线观看日本一区| 国产成人系列免费观看| 国产成人av教育| 人妻一区二区av| 波多野结衣一区麻豆| 十八禁高潮呻吟视频| 成年女人毛片免费观看观看9 | 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 国产99久久九九免费精品| 日本黄色日本黄色录像| 中文字幕av电影在线播放| 国产亚洲欧美在线一区二区| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产野战对白在线观看| 黄色怎么调成土黄色| 男女下面插进去视频免费观看| 亚洲专区中文字幕在线| 夫妻午夜视频| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 国产精品一二三区在线看| 亚洲精品乱久久久久久| 99国产精品免费福利视频| 女性被躁到高潮视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 看免费av毛片| cao死你这个sao货| www.自偷自拍.com| 久久国产精品人妻蜜桃| 亚洲av日韩在线播放| 老熟妇仑乱视频hdxx| 男女高潮啪啪啪动态图| 亚洲性夜色夜夜综合| 999久久久精品免费观看国产| 老司机福利观看| 久久久国产精品麻豆| 午夜两性在线视频| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 国产成人精品久久二区二区91| 亚洲专区中文字幕在线| 搡老乐熟女国产| 日本a在线网址| 久久人人97超碰香蕉20202| 国产高清国产精品国产三级| 香蕉丝袜av| 国产一级毛片在线| svipshipincom国产片| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 999精品在线视频| 女人精品久久久久毛片| 午夜福利一区二区在线看| 国产av国产精品国产| 黄频高清免费视频| 亚洲精品成人av观看孕妇| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 日韩欧美国产一区二区入口| 老司机午夜十八禁免费视频| 国产又爽黄色视频| 丰满迷人的少妇在线观看| 90打野战视频偷拍视频| 色婷婷久久久亚洲欧美| 一区二区三区精品91| 久久精品国产a三级三级三级| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 国产高清国产精品国产三级| 国产在线免费精品| 欧美性长视频在线观看| 桃红色精品国产亚洲av| 91字幕亚洲|