雛雞黃曲霉毒素中毒的病理學(xué)觀察

李天元

（景泰縣畜牧獸醫(yī)技術(shù)服務(wù)中心，甘肅 景泰 730400）

黃曲霉毒素（Aflatoxins）主要是黃曲霉和寄生曲霉的代謝產(chǎn)物，黑曲霉、赤曲霉、棒狀曲霉及其他一些曲霉也可以產(chǎn)生，但含量極微。黃曲霉毒素是一組化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的化合物，目前已分離鑒定出12種，包括B1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、Q、H1、GM、B2a和毒醇，它們的基本結(jié)構(gòu)為二呋喃環(huán)和香豆素。B1是二氫呋喃氧雜萘鄰?fù)难苌?，含有一個雙呋喃環(huán)和一個氧雜萘鄰?fù)ㄏ愣顾兀?，前者為基本毒性結(jié)構(gòu)，后者與致癌有關(guān)。在目前發(fā)現(xiàn)的黃曲霉毒素中以B1的毒性及致癌性最強。該毒素所引起的中毒病是畜禽常見的一種中毒病，是由于食入被黃曲霉污染的飼料后引起，幼齡動物較為敏感，2～6周齡的雛雞和幼鴨敏感性最高。由于黃曲霉毒素不僅可引起中毒，而且還具有致癌作用，對動物半數(shù)致死量為10 mg/kg，它的毒性比氰化鉀大10倍，比砒霜大68倍。因此，在1993年被世界衛(wèi)生組織（WHO）的癌癥研究機構(gòu)劃定為Ⅰ類致癌物。國內(nèi)目前有關(guān)黃曲霉菌毒素中毒的詳細的病理學(xué)資料較為缺乏。本試驗以黃曲霉毒素中毒的敏感動物雛雞作為研究對象，從病理學(xué)角度去探討黃曲霉毒素中毒的機理，為臨床診治本病提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

選用一周齡的商品肉雞300只，雌雄均有，隨機分為3組，A組（對照組）100只，B組100只，C組100只，分別在相同情況下網(wǎng)養(yǎng)。

1.2 飼料及飼料處理

1.2.1 飼料 希望肉仔雞全價配合飼料。

1.2.2 飼料霉變處理 在試驗開始前5 d到市場購買希望肉仔雞全價配合飼料3袋（40 kg/袋），并給3袋飼料編號，分別為1號料，2號料和3號料，待用。

按要求將3袋飼料分別進行處理：將1號料置于溫度為20～30℃，濕度為80%左右的環(huán)境下，每隔24 h查看1次，并及時加水，以保持合適的濕度，至霉變完全后，置于一般環(huán)境中待用。2號料處理方法同上，但霉變程度較之1號輕微，故相對濕度應(yīng)控制在50%左右，待出現(xiàn)輕微霉變即可結(jié)束霉變過程。3號料不做任何處理，于常溫正常保存，待用。

1.2.3 飼喂 將一周齡雛雞先用正常飼料飼喂一周左右，保持正常環(huán)境溫度和濕度，24 h給予光照，且要通風(fēng)良好，觀察并淘汰不健康雞。

A組雞飼喂3號飼料，B組雞飼喂2號飼料，C組雞飼喂以1號飼料，每一組雞都給予相同量的飼料和飲水，適當(dāng)?shù)恼{(diào)節(jié)雞舍內(nèi)的溫度、濕度和光照，并且保證通風(fēng)良好。

1.2.4 取材 在飼喂霉變飼料后，每隔一周剖殺、采樣，每組每次剖殺10只。剖殺后迅速取肝、心、脾等內(nèi)臟器官，于10%中性福爾馬林溶液固定。

1.3 染色與制作切片

樣品經(jīng)10%中性福爾馬林溶液固定后，制作石蠟切片，進行蘇木精-伊紅染色，觀察各器官組織病理變化。

2 結(jié)果

2.1 臨床觀察

2.1.1 A組 從適應(yīng)飼養(yǎng)到實驗結(jié)束，對照組雛雞均生長良好，無死亡，臨床無異常表現(xiàn)。

2.1.2 B組 在飼喂飼料14日（28日齡）開始發(fā)病，表現(xiàn)為食欲不減退、精神沉郁、兩肢厥冷、羽毛松亂和縮頭閉目等，35日齡之后慢慢表現(xiàn)排血色稀糞、消瘦、衰弱，但無死亡現(xiàn)象。

2.1.3 C組 在飼喂霉變飼料7 d（21日齡）時開始發(fā)病，癥狀除上述B組所見外還有眼瞼腫脹、眼鼻流淚、食欲廢絕、后期下痢，最后呼吸困難，衰竭而死。死亡前出現(xiàn)共濟失調(diào)、角弓反張等癥狀。

2.2 剖檢變化

2.2.1 A組 每次剖檢10只，4次共剖檢雛雞80只，除后期有一例雛雞的腸道有輕微的出血點外，其他各組織器官均正常，無明顯病理變化。

2.2.2 B組 14日齡至21日齡變化不明顯。21日齡后可見肝臟顏色變?yōu)橥咙S色或暗紅色，而且有變性壞死、充血出血等變化，肝臟表面還可見灰白色針尖大小的結(jié)節(jié)狀病灶。腎臟有出血、腫大。心包腔和腹腔有少量黃色積液。小腸尤其十二指腸出血、壞死，后期十二指腸黏膜面彌漫性出血。胸部皮下肌肉蒼白，有時可見少量出血點。

2.2.3 C組 17日齡之后可見肝臟腫大，色澤變淡或呈暗紅色，有出血斑點。腸道出血明顯，其中十二指腸黏膜面有大量出血斑點，盲腸腫大，偶見少量出血。腎臟腫大、充血，質(zhì)地變脆。心包腔和腹腔有積液，胰腺也可見灰白色針尖大小的病灶。大腿皮下和肌肉常見出血。后期脾臟充血腫大。

2.3 病理組織學(xué)變化

2.3.1 A組 心臟、肝臟、脾臟、腸道、腎臟和肺臟未見任何病理變化。

2.3.2 B組 肝細胞脂肪變性，有明顯的肝竇擴張、淤血，肝細胞彌漫性壞死。有些在肝小葉中央靜脈周圍有大片的壞死病灶，并伴有明顯的膽管增生。小腸絨毛變性、壞死、脫落。心肌纖維變性、腫脹、壞死，并有炎性細胞浸潤。脾臟淋巴濾泡增生。肺和氣囊，呈彌漫性或局限性病理組織學(xué)變化。

2.3.3 C組 肝細胞廣泛脂肪變性，在變性細胞胞漿內(nèi)可見大小不等的圓形脂肪空泡，胞核被擠壓在細胞的一側(cè)。變性肝細胞腫大、胞漿渾濁。膽管變性、增生。肝小葉中央的肝細胞出現(xiàn)局灶性壞死，門管區(qū)小葉間靜脈周圍有大量異嗜細胞和單核細胞浸潤。心肌細胞變性腫脹，心外膜下有局灶性炎性細胞浸潤。脾臟淋巴濾泡增生。部分腸道充血出血，黏膜上皮脫落，固有層下可見大量的紅細胞。胰臟有炎性細胞浸潤，有的纖維化。

3 討論

模型復(fù)制過程是試驗的關(guān)鍵點，在臨床上主要是因食入霉變的飼料而發(fā)病，而霉變飼料中可能含有多種霉菌或霉菌毒素，但有致病作用和含量較多的還是黃曲霉毒素。本試驗盡可能模仿飼料的自然霉變過程，由于溫度和濕度的差異，處理后的飼料中可能會有多種致病因素引起雛雞發(fā)病，但在飼料的處理過程中都參照黃曲霉的最佳生長環(huán)境，因此在該試驗中基本都歸結(jié)為黃曲霉毒素引起的致病作用。

黃曲霉毒素的靶器官為肝臟，一旦發(fā)生中毒，其病變常表現(xiàn)在肝臟的損傷上，影響肝功能，導(dǎo)致肝細胞變性、壞死、出血、膽管和肝細胞增生，引起腹水、脾腫大、體質(zhì)衰竭等病癥。其他器官雖不同程度的發(fā)生病理變化，但均非該病的特征變化。

黃曲霉毒素中毒常引起雛雞造血機能及免疫系統(tǒng)的破壞，導(dǎo)致貧血，免疫力下降，極易誘發(fā)細菌及病毒的繼發(fā)感染。試驗中病理組雛雞到后期個別表現(xiàn)其他一些病癥，如雞白痢，尿酸鹽結(jié)晶在泄殖腔沉著等并發(fā)癥。

黃曲霉菌廣泛分布于自然界，常寄生于玉米、小麥、花生、稻米、豆類、棉籽、魚粉、麩皮、米糠等飼料中，禽類很容易因采食被黃曲霉菌污染的變質(zhì)飼料而發(fā)生中毒。因此，在養(yǎng)殖中應(yīng)高度重視黃曲霉毒素的危害，做到預(yù)防為主，尤其對飼料應(yīng)加強保存與檢測。本試驗主要研究雛雞中毒后的病理學(xué)變化，取得了關(guān)于雛雞中毒后病理解剖和病理組織學(xué)變化的第一手資料，為進一步研究黃曲霉毒素中毒機理和提出禽類毒素中毒的防治措施提供參考。