半夏及其偽品的鑒定方法簡論

孟姍姍

作為傳統(tǒng)中藥材，半夏以干燥塊莖入藥，因其降逆止嘔、燥濕化痰、消痞散結等功效，在我國中醫(yī)藥兩千余年的歷史中，備受推崇[1]。近代以來，對半夏藥理藥性的研究更加深入，結果顯示，針對冠心病、高血脂、腫瘤、肝病等多種威脅現(xiàn)代人身體健康的疾病，其有重要的治療作用[2]。因此，我國半夏市場的需求量一直居高不下，同滯后的半夏栽培技術、減少的野生半夏資源等形成激烈矛盾，導致藥材市場中，大量半夏偽品混入其中，不僅影響了藥材市場的穩(wěn)定，而且對半夏的用藥安全也有負面影響[3]。有鑒于此，近十年來，相關從業(yè)人員針對此種情況，不斷進行半夏及其偽品的鑒定研究。本文對此展開綜述，總結不同的半夏及其偽品的鑒定方法，以期為準確、快速地進行半夏鑒定提供參考。

1 鑒定半夏及其偽品的傳統(tǒng)方法

1.1 原植物形態(tài)鑒別半夏及偽品在原植物形態(tài)上，無論是葉片形狀還是佛焰苞片上，都有所不同。具體來說，半夏的植物葉片呈現(xiàn)出“卵圓形”或“披針形”。半夏偽品中，水半夏的植物葉片呈現(xiàn)出“戟狀長圓形”；而虎掌南星不僅葉柄比其余兩者都要長，最主要的植物葉片呈現(xiàn)“掌狀”。在佛焰苞片的形態(tài)上，半夏呈現(xiàn)“鼠尾狀”；水半夏呈現(xiàn)“長鞭狀”；虎掌南星呈現(xiàn)“線狀”[4]。因此，如果單從原植物形態(tài)上，半夏及其偽品是可以做到直觀區(qū)分的。

1.2 性狀鑒別在完整藥材中鑒定半夏及其偽品相對還是比較困難的。具體來說，半夏藥材形狀為“類球形”，表面白色且密布點狀根痕，頂端中央淺黃色有凹痕；水半夏藥材形狀為“長橢圓形”，表面根痕不明顯，芽痕凹陷似菊核；虎掌南星藥材形狀為“扁球形”，主塊莖周圍有虎類腳掌的小塊莖；犁頭尖藥材形狀為“圓錐形”，個體較小，表面有圓點狀根痕，頂端芽痕較大；山珠半夏藥材為“扁橢圓形”，表面白色有皺紋，頂端莖痕凹陷，周圍有小側芽[5]?？傊?，通過外觀性狀上鑒定半夏及其偽品十分依賴鑒定者的個人經(jīng)驗，且鑒定結果只能作為初步參考，不能作為最終鑒定結果的主要依據(jù)。特別是現(xiàn)在市面上多為飲片，這就加深了半夏及其偽品鑒定的難度。

1.3 理化鑒定傳統(tǒng)半夏及其偽品的鑒定方法中，利用顯微鏡和色譜法的“理化鑒定”是相對較為科學的、具備標準的鑒定方法。楊俊寶等[6]論述了具體的物理鑒定方法，主要是通過顯微鏡觀察樣本的物理性質(zhì)，針對鑒定樣本的草酸鈣針晶束和木栓細胞兩方面。其中，擁有整齊無散亂的、較長的草酸鈣針晶束的可以鑒定為半夏；草酸鈣針晶束呈現(xiàn)一半整齊、一半散亂，且相對較短的可以鑒定為虎掌南星；擁有散亂疊放的草酸鈣針晶束，且相對較粗的可以鑒定為水半夏。此外，“木栓細胞”是水半夏外皮所獨有的，無論是半夏還是虎掌南星的外皮中，均不會有殘存。馬偉光等[7]認為利用薄層色譜法可以從化學性質(zhì)上區(qū)分半夏及其偽品。由于化學法所檢測的主要是樣本中的精氨酸，而在半夏與虎掌南星之間，精氨酸成分一致，無法區(qū)別。因此，僅能針對水半夏和山珠半夏?？偟膩碚f，盡管“理化鑒定”相對來說有明確的標準，減少了對鑒定者的個人經(jīng)驗的依賴。但是，“理化鑒定”依然存在不小的缺點，對于半夏中摻雜偽品的鑒定較為困難。

1.4 光譜鑒定隨著“電化學指紋圖譜”的問世，一種更加直觀、簡便的半夏及其偽品的鑒定方法被研究出來。具體來說，王朋展等[8]認為可以通過“電子鼻”，以“氣味指紋”來進行半夏及其偽品的鑒定分析。這一研究為快速鑒別半夏及其偽品提供了一條新的途徑，甚至可以應用在不同產(chǎn)地的半夏藥材鑒定上。孟祥松[9]論述了另外一種半夏及其偽品的鑒定方法——“高效液相色譜法”。通過對半夏及其偽品中多類核苷類成分含量的檢測，可以有效鑒別半夏及其偽品。結果顯示，由于對比吸收峰的不同，通過高效液相色譜，能夠直觀看出是否摻偽。

2 鑒定半夏及其偽品的現(xiàn)代方法

2.1 蛋白質(zhì)技術鑒定吳成麗[10]采用高效毛細管電泳 (HPCE) 鑒別半夏及水半夏，其中性提取液和堿性提取液蛋白的 HPCE 吸收峰有明顯的差異，且重復性良好，可有效鑒別兩者。對不同產(chǎn)地半夏進行蛋白質(zhì)圓盤 IEF 電泳和薄層等電聚焦(IEF) 電泳比較，發(fā)現(xiàn)可將半夏與幾種近緣植物明顯區(qū)別開。

2.2 DNA 分子鑒定盧道會[11]認為DNA 條形碼ITS、rps16 序列可用于半夏及其易混品的 DNA 條形碼鑒別，mat K、trm L-trn F 序列可作為天南星科不同屬間 DNA 條形碼條形碼組合候選序列鑒別半夏及其鄰近屬植物，rpl32-trn L 序列可作為鑒別半夏及其易混品的DNA 條形碼候選序列。張雅琴[12]針對半夏與其偽品掌葉半夏RAPD 鑒別，發(fā)現(xiàn)利用引物 S10 和 S17 進行 RAPD-PCR 能將二者有效鑒別; 且進一步將 RAPD 分子標記片段 T350 轉化為 SCAR分子標記，亦可對二者進行快速有效鑒定。陳永蘭[3]詳細論述了其所設計的引物能夠特異性地擴增出半夏的目的 DNA，且適用于全國 9 個主要不同產(chǎn)地的半夏藥材的檢測及真?zhèn)舞b別。構建了 5 種半夏的 DNA 指紋圖譜，可獨自將 5 種材料分開，從而實現(xiàn)對半夏種質(zhì)資源分子水平的鑒定。

3 小結

盧道會[14]認為，現(xiàn)代分子技術誕生以前，對半夏及其偽品的鑒定方法，主要采取了性狀鑒定、理化鑒定與光譜色相鑒定。為了加強鑒定效果，提升鑒定準確率，通常會采用聯(lián)合鑒定的方式。但是，這些傳統(tǒng)鑒定方法或多或少都存在一些弊端。例如，在性狀鑒定中，對鑒定樣本的完整性要求較高，且鑒定標準依賴鑒定者的個人經(jīng)驗，鑒定結果受鑒定者主觀能動性影響，因此，“人為因素”對鑒定結果的干擾較大，鑒定結果準確率較低；在理化鑒定中，需要鑒定者能夠熟練操作顯微鏡，或者樣品的預處理過程相對復雜，費時費力。于此同時，化學檢測方法對一些半夏偽品并不適用，因此，理化鑒定范圍較小，同時檢測不夠便捷；光譜色相鑒定在傳統(tǒng)鑒定方法中探索出了一條新的路徑，但是光譜色相在鑒定過程中，樣品前處理、展開劑等都有可能干擾最終的鑒定結果。敬勇[15]認為，相比傳統(tǒng)鑒定方法，現(xiàn)代分子技術對于半夏及其偽品的鑒定具有獨特優(yōu)勢。其中，蛋白質(zhì)鑒定技術是現(xiàn)代半夏鑒定的重要指標之一；DNA分子鑒定應用DNA 條形碼技術，不僅效果好、準確率高，而且操作簡便、通用性高，可重復鑒定，在半夏及其偽品的鑒定中，發(fā)揮出積極的作用。

綜上所述，現(xiàn)代分子鑒定具有受干擾較小、有明確統(tǒng)一的鑒定標準、可實現(xiàn)鑒定結果的數(shù)據(jù)化等優(yōu)點，且操作簡便，對摻偽品及摻偽量的量化研究有重要作用，值得進一步的推廣和研究。