動(dòng)物藥材鑒別與質(zhì)量評價(jià)方法之進(jìn)展與策略

王紅麗

動(dòng)物藥材是指源于動(dòng)物機(jī)體、動(dòng)物器官或者動(dòng)物以常規(guī)生理活動(dòng)產(chǎn)出的藥材，自古以來，此類藥材就是中藥材中的重要構(gòu)成部分，如牡蠣、水蛭、甲魚等。在《黃帝內(nèi)經(jīng)》《神農(nóng)本草經(jīng)》中記載的動(dòng)物藥材更是逾百種，約占中藥材總數(shù)的20%。由此可見，動(dòng)物藥材的應(yīng)用有著較長一段時(shí)間的歷史，并且動(dòng)物藥材的應(yīng)有有著較為豐富的經(jīng)驗(yàn)。伴隨著動(dòng)物藥材應(yīng)用、研究的不斷深入，時(shí)至今日，臨床上經(jīng)常使用的動(dòng)物藥材多達(dá)300余種，有藥理、用藥方法記錄的動(dòng)物藥材更是近2000種。如此龐大的基數(shù)，動(dòng)物藥材的用法、藥理、質(zhì)量鑒別等內(nèi)容自然受到了人們的廣泛關(guān)注。動(dòng)物藥材中含有多種大分子物質(zhì)，其質(zhì)量鑒定、藥理分析和一般的植物藥材有著諸多不同之處，其鑒別方法復(fù)雜，鑒別難度相對較大。尤其是近幾年，動(dòng)物藥材成分含量鑒定、質(zhì)量評價(jià)鑒定等方面的可靠研究數(shù)據(jù)屈指可數(shù)，從業(yè)者對于動(dòng)物藥材的質(zhì)量鑒定多停留在經(jīng)驗(yàn)判定等層面上，鑒定方法的科學(xué)性、規(guī)范性都有待進(jìn)一步提升。

1 動(dòng)物藥材鑒別方法以及質(zhì)量評價(jià)方法

1.1 動(dòng)物藥材的性狀鑒別性狀鑒別主要是指從其表面特征或者結(jié)構(gòu)特征來判斷其質(zhì)量或真假，性狀鑒別是目前鑒別動(dòng)物藥材最直接也是最基本的方法，該方法對于經(jīng)驗(yàn)的依賴性相對較高，但使用方便，所以在業(yè)界得到了廣泛應(yīng)用。然而性狀鑒別法本身存在著諸多缺點(diǎn)，而且性狀鑒別的結(jié)果存在一定的主觀性，鑒別方法不夠規(guī)范，且只能夠鑒別性狀完整的動(dòng)物藥材，難以有針對性的區(qū)分同屬性動(dòng)物藥材，尤其是膠類、甲殼類或者非法炮制的動(dòng)物藥材[1-4]。

1.2 動(dòng)物藥材的顯微鑒別所謂顯微鑒別法就是指利用顯微技術(shù)，通過微觀層面的分析來鑒別動(dòng)物藥材的品質(zhì)、真假，目前常用的顯微鑒別方法主要為粉末鑒別方法和組織鑒別方法。因動(dòng)物藥材本身的組織構(gòu)成相對復(fù)雜，并且傳統(tǒng)顯微技術(shù)也存在一定的局限性，所以在業(yè)界，“掃描電鏡”得到了廣泛應(yīng)用。顯微鏡技術(shù)的發(fā)展有利于提高動(dòng)物藥材的鑒別水準(zhǔn)，比如對蜈蚣爪刺、頭殼進(jìn)行鑒別，就需要應(yīng)用電子目鏡才能夠起到良好效果。國內(nèi)學(xué)者在這方面有著諸多研究，計(jì)算機(jī)圖像處理技術(shù)、顯微攝影技術(shù)也得到了有效應(yīng)用，為動(dòng)物藥材的研究提供了可靠的參考依據(jù)。雖然傳統(tǒng)顯微鏡存在諸多局限性，但是由傳統(tǒng)顯微鏡得出的成果，在動(dòng)物藥材鑒別方面仍舊有著較高的應(yīng)用價(jià)值[5]。

1.3 動(dòng)物藥材的理化鑒別因動(dòng)物藥材本身的成分復(fù)雜、組織構(gòu)成復(fù)雜，所以理化鑒別通常只能夠作為一種輔助參考方法。舉個(gè)例子，動(dòng)物藥材“熊膽”的鑒別，以“研磨粉末”的方式，將熊膽粉末在紫外燈(365nm)下觀察黃白色熒光，一般偽造品則不能夠發(fā)出黃白色熒光，呈現(xiàn)棕黃色熒光，但是該方法并不能作為可靠且權(quán)威的鑒定結(jié)果，具體還需要結(jié)合其他方法進(jìn)行完善。國內(nèi)學(xué)者成功以“茚三酮顯色法”測定了多種動(dòng)物藥材，并且在實(shí)踐中可直接對水蛭、鹿茸等成分復(fù)雜的藥材進(jìn)行有效鑒別，結(jié)果可靠，但理化鑒別方法的要求相對較高[6，7]。

1.4 動(dòng)物藥材的光譜鑒別光譜鑒別又可詳細(xì)分為紫外光譜鑒別、原子光譜鑒別、紅外光譜鑒別、核磁共振光譜鑒別等方法，光譜鑒別在實(shí)踐中呈現(xiàn)出取樣量少、效率高等等優(yōu)勢，并且可有效檢定出一種或者多種分子的含量，在動(dòng)物藥材的真假鑒別備以及質(zhì)量檢定中的應(yīng)用尤為廣泛[9-11]。目前，已經(jīng)實(shí)現(xiàn)應(yīng)用連續(xù)光源原子吸收光來實(shí)現(xiàn)對復(fù)雜動(dòng)物藥材微量元素含量的測定，同時(shí)通過不同紅外光譜鑒別方法、紫外光譜鑒別方法，可實(shí)現(xiàn)對不同蟾蜍藥材的鑒別。并且，紅外光譜和其他鑒別技術(shù)的聯(lián)用，也可實(shí)現(xiàn)對冬蟲夏草等珍貴藥材的鑒定。

1.5 動(dòng)物藥材的生物鑒別

1.5.1 電泳鑒別方法電泳鑒別方法可揭示在同一電場條件下，動(dòng)物藥材中各種不同成分的相對質(zhì)量。如今，電泳鑒別方法已經(jīng)在SDS-PAGE、HPCE等方面得到了延伸，實(shí)現(xiàn)了對水蛭、地龍、全蝎等動(dòng)物藥材的有效鑒別，并且可對其質(zhì)量的判斷、真假的判斷提供詳實(shí)的參考依據(jù)。如采用SDS-PAGE鑒別方法，可直接揭示出不同鹿茸的藥理差異以及質(zhì)量差異，還可揭示出人工牛黃、金錢白花蛇、定蝮蛇的蛋白含量，從而實(shí)現(xiàn)對其真?zhèn)蔚呐卸?；HPCE鑒別方法能夠結(jié)合動(dòng)物藥材藥效試驗(yàn)，檢定土鱉蟲的藥效以及藥理，并確定其中固定含有的化合物成分[11-13]。值得注意的是，HPCE通過分析藥理來揭示質(zhì)量的方法，開創(chuàng)了動(dòng)物藥材鑒別的先河，為動(dòng)物藥材的進(jìn)一步鑒別備提供了可靠的參考依據(jù)以及新的發(fā)展思路。

1.5.2 生物免疫印記鑒別生物免疫印記鑒別是一種以動(dòng)物藥材中的特異蛋白質(zhì)作為抗原的一種鑒別技術(shù)，它通過制備被檢動(dòng)物藥材的抗原特異性抗體，實(shí)現(xiàn)對動(dòng)物藥材真?zhèn)蔚呐卸?。生物免疫印記鑒別的應(yīng)用目前仍舊處于起步階段，僅能夠用作于對幾種豹骨的鑒別。

1.6 動(dòng)物藥材的條碼鑒別條碼鑒別主要指DNA條碼鑒別技術(shù)，隨著生物信息技術(shù)的發(fā)展，目前該項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用已經(jīng)日趨成熟，并為動(dòng)物藥材鑒別技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展提供一定參考依據(jù)。在2010版、2015版《中華人民共和國藥典》中，就收錄了DNA條碼鑒別方法。我國學(xué)者通過應(yīng)用DNA條碼鑒別，實(shí)現(xiàn)了對多種鹿茸樣本的區(qū)分以及測定，目前DNA條碼鑒別技術(shù)已經(jīng)廣泛用于鱉甲、穿山甲、紫河車、金錢白花蛇等動(dòng)物藥材的鑒別研究。

1.7 鑒別技術(shù)聯(lián)用鑒于動(dòng)物藥材本身的復(fù)雜性，業(yè)界通過多種鑒別技術(shù)聯(lián)用的方式也取得了一定的進(jìn)展，這些方法在2015版《中華人民共和國藥典》中有著較為詳細(xì)的記錄，如HPLC-MS、SC-MS技術(shù)的聯(lián)用，可實(shí)現(xiàn)對多種來源的蜂蠟進(jìn)行有效分析，并可構(gòu)建出簡單、直觀的質(zhì)量評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。又如SRM、HPLC方法的聯(lián)用，可實(shí)現(xiàn)對林蛙油、金錢白花蛇、僵蠶、鱉甲等動(dòng)物藥材中的特質(zhì)含有元素進(jìn)行測定，并為相關(guān)動(dòng)物藥材的鑒別提供可靠參考標(biāo)準(zhǔn)。

2 動(dòng)物藥材鑒別面對的問題以及對策

2.1 動(dòng)物藥材鑒別現(xiàn)存問題首先，動(dòng)物藥材本身的主要成分多為多糖或者蛋白質(zhì)，其中含有的特異物質(zhì)分離難度、純化難度較大，國內(nèi)這方面的研究薄弱，直接導(dǎo)致動(dòng)物藥材的成分和其藥理無法直接對應(yīng)；其次，針對各種動(dòng)物藥材，目前缺少對各種成分的專屬測定方法，無法實(shí)現(xiàn)高質(zhì)量、高效率的測定，同時(shí)也導(dǎo)致動(dòng)物藥材鑒別無法構(gòu)建一個(gè)通用且實(shí)用的測定標(biāo)準(zhǔn)。

2.2 動(dòng)物藥材鑒別發(fā)展對策鑒于動(dòng)物藥材本身的特質(zhì)，未來需要構(gòu)建起一種以“單一成分”為主要指標(biāo)，同時(shí)指向多種成分的測定方法，并以此為基礎(chǔ)來構(gòu)建動(dòng)物藥材鑒別標(biāo)準(zhǔn)體系。多數(shù)主治功能明確以及藥理明確的動(dòng)物藥材，其主要成分多為核苷、蛋白質(zhì)、多糖、多肽，此類成分在對各種疾病的治療中，呈現(xiàn)出多元化的藥效以及特殊功能。如蟾蜍糖蛋白能夠應(yīng)對腎臟疾病、心臟疾??；蛇毒蛋白酶可應(yīng)對多種血栓類疾??；蝮蛇精氨酸酯酶能夠應(yīng)對多種血管疾病。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，為動(dòng)物藥材的鑒別提供了可靠的技術(shù)支持以及研究支持，動(dòng)物藥材鑒別技術(shù)的發(fā)展需要考慮到多種指標(biāo)、多種技術(shù)、多種層次的內(nèi)容，制定出可行性、實(shí)用性、科學(xué)性較高的技術(shù)，并通過多種技術(shù)的聯(lián)用來應(yīng)對各種技術(shù)方法存在的不足之處。另外，亟需構(gòu)建起標(biāo)準(zhǔn)化評價(jià)體系，摒棄傳統(tǒng)依靠經(jīng)驗(yàn)的判斷方法，找到不同特異性特征的關(guān)聯(lián)性，以動(dòng)物藥材的藥理來指導(dǎo)鑒別工作[14，15]。

3 結(jié)語

綜上所述，動(dòng)物藥材是我國醫(yī)療事業(yè)中的重要構(gòu)成部分，在臨床醫(yī)學(xué)、醫(yī)療研究等方面有著卓著的應(yīng)用價(jià)值，且在實(shí)踐中也體現(xiàn)出活性強(qiáng)、療效強(qiáng)、應(yīng)對范圍廣等優(yōu)勢，如今已經(jīng)得到了國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注以及廣泛重視。所以，需要進(jìn)一步確保動(dòng)物藥材的科學(xué)性、安全性，合理區(qū)分不同藥材的藥理、質(zhì)量，以技術(shù)來打擊市面上的違法炮制動(dòng)物藥材，改善如今中藥研究落后的局面。質(zhì)量評價(jià)體系、鑒別技術(shù)規(guī)范的構(gòu)建對于動(dòng)物藥材鑒別發(fā)展有著至關(guān)重要的意義，廣大從業(yè)者在探尋不同技術(shù)方法的同時(shí)，還要分析以動(dòng)物藥材中活性成分或者特異成分的專屬性檢驗(yàn)方法，以不斷推動(dòng)動(dòng)物藥材鑒別技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化、現(xiàn)代化發(fā)展，為動(dòng)物藥材市場的產(chǎn)業(yè)化轉(zhuǎn)型奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。相信在技術(shù)不斷發(fā)展的背景下，動(dòng)物藥材鑒別領(lǐng)域能夠得到有效延伸，且該領(lǐng)域也必然會(huì)得到更多的關(guān)注以及支持。