HBP及PCT聯(lián)合檢測在小兒呼吸道細菌感染診斷中的價值

杜春梅 林杰

小兒呼吸道感染分為細菌性、病毒性、真菌性及支原體感染，如何及時地進行鑒別診斷、早期進行對癥干預(yù)治療，是提高治療成功率和縮短住院時間的關(guān)鍵之一。痰培養(yǎng)檢查作為診斷金標(biāo)準(zhǔn)檢測耗時較長且陽性率低，因此尋找一種快捷、有效的方法進行呼吸道細菌感染診斷及鑒別診斷非常有意義。Linder等[1]認(rèn)為肝素結(jié)合蛋白（heparin-binding protein，HBP）可以作為局部細菌感染乃至嚴(yán)重感染一種早期診斷的標(biāo)志物。陳霆等[2]認(rèn)為降鈣素原（PCT）在小兒感染性疾病患兒血清中會異常表達。本研究旨在探討HBP及PCT在小兒呼吸道細菌感染診斷及鑒別診斷中的價值，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

資料與方法

1 一般資料 選取2016年1月～2018年6月我院收治的小兒呼吸道感染患者作為研究對象，分組依據(jù)2013年出版的《呼吸疾病診療指南》第3版[3]進行篩選。細菌感染病例45例，其中男29例，女16例，年齡1～13歲，平均年齡6.4歲。痰細菌培養(yǎng)顯示：肺炎鏈球菌13株，流感嗜血桿菌9株，肺炎克雷伯菌10株，金黃色葡萄球菌8株，產(chǎn)氣腸桿菌2株，大腸埃希菌2株，銅綠假單胞菌1株。呼吸道非細菌感染患兒39例，其中男22例，女17例，年齡1～12歲，平均年齡7.2歲，該組患兒痰細菌培養(yǎng)均為陰性，其中24例為病毒感染，15例為支原體感染。選取同期入院的非感染性疾病患兒40例為對照組，其中男18例，女22例，年齡1～13歲，平均年齡6.9歲，入院常規(guī)胸片、血常規(guī)、肺部聽診無異常。三組患兒在性別、年齡分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性。

2 方法 所有采血操作均于患兒入院24 h內(nèi)完成，每位患兒采集空腹靜脈血5 mL并分作兩份，自然抗凝后以3 500 r/min離心5 min，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定血清中PCT 水平，檢測試劑盒購自上海撫生實業(yè)有限公司；另一份取血漿采用雙位點夾心酶聯(lián)免疫吸附法測定樣品中的HBP水平，試劑盒購自杭州中翰盛泰生物技術(shù)股份有限公司，具體檢測步驟均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進行。

3 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 16.0軟件進行分析。計數(shù)資料采用χ2檢驗，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗；檢驗水準(zhǔn)α=0.05。采用受試者工作特征曲線（ROC）判斷各指標(biāo)診斷呼吸道細菌感染的靈敏度和特異度。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

1 3組患兒HBP及PCT水平比較 呼吸道細菌感染組患兒HBP及PCT水平明顯高于非細菌感染組和非感染組（P＜0.05，表1）。非細菌感染組患兒HBP及PCT水平明顯高于非感染組（P＜0.05，表1）。

表1 3組患兒HBP及PCT水平的比較

2 HBP和PCT在診斷小兒呼吸道細菌感染的價值 將呼吸道細菌感染組設(shè)為正類，非細菌感染組及非感染組分別設(shè)為負(fù)類，建立ROC曲線分析HBP及PCT診斷呼吸道細菌感染的效能，計算曲線下面積(area under the curve，AUC）。結(jié)果顯示HBP和PCT診斷小兒呼吸道細菌感染疾病ROC曲線下面積分別為0.884和0.706（P＜0.05）；HBP截斷值為13.78 ng/mL 時，其診斷靈敏度和特異度分別為87.46% 和94.42%； PCT截斷值為0.13 ng/mL 時，其診斷靈敏度和特異度分別為71.23% 和85.69% ；HBP和PCT聯(lián)合診斷小兒呼吸道細菌感染的靈敏度和特異度分別為92.67%和94.42%。

討 論

小兒作為特殊的群體其免疫系統(tǒng)發(fā)育尚不完善，細菌是小兒呼吸系統(tǒng)感染的主要病原體，感染后病情變化快、惡化度高，若無法及時針對性治療易導(dǎo)致哮喘、心肌炎、感染性休克甚至危及生命可能[4]。痰培養(yǎng)雖然臨床檢驗特異性高但標(biāo)本的取樣合格率及檢測陽性率較低且檢測周期長，無法及時指導(dǎo)臨床藥物使用[5]；因此如何進行早期診斷及鑒別診斷對改善呼吸道細菌感染的愈后尤其重要，臨床亟需早期的感染指標(biāo)來檢測患兒是否有細菌感染指征以指導(dǎo)抗生素的使用。

肝素結(jié)合蛋白（HBP）又被稱為azurocidin 或者CAP37，其作為胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶家族的成員存儲在嗜中性粒細胞中[6]。機體炎癥反應(yīng)時中性粒細胞被激活并釋放HBP入血，通過誘導(dǎo)血管滲漏、趨化及活化單核細胞來參與炎癥反應(yīng)[7]。Soehnlein等[8]認(rèn)為肝素結(jié)合蛋白具有廣泛的抗微生物活性可以通過參與直接調(diào)理作用來協(xié)助機體清除細菌。吳苑等[9]認(rèn)為肝素結(jié)合蛋白在感染初期就會出現(xiàn)，繼而參與整個炎癥反應(yīng)的發(fā)展及維持過程，可應(yīng)用于細菌性感染疾病的早期診斷。

降鈣素原（PCT）是一種由116個氨基酸組成、相對分子質(zhì)量為12.7×103的糖蛋白，是降鈣素I基因的表達產(chǎn)物[10，11]。正常人血液內(nèi)PCT含量＜0.1 ng/mL，機體感染病原微生物后能夠誘導(dǎo)I基因表達上調(diào)增加血清PCT 水平，能夠反映機體病情程，是機體嚴(yán)重細菌性炎癥、真菌感染的可靠指標(biāo)[4，12]。喬維洲等[13]認(rèn)為PCT在細菌感染性疾病中明顯升高，其特異性和敏感性均高于WBC、CRP等，是診斷及鑒別細菌感染的可靠指標(biāo)。

本研究數(shù)據(jù)顯示呼吸道細菌感染患兒血液中HBP及PCT的表達明顯高于非細菌感染及非感染組。這與吳苑等[9]的研究結(jié)果相類似，提示HBP及PCT在小兒呼吸道細菌感染診斷中具有較好的敏感性及特異性，能區(qū)別于呼吸道病毒或支原體感染。另外我們通過對ROC曲線下面積進行分析，結(jié)果顯示采用HBP閾值＞13.78 ng/mL 時，其診斷靈敏度和特異度分別為87.46% 和94.42%，靈敏度及特異度均高于血清PCT。而聯(lián)合HBP及PCT診斷小兒呼吸道細菌感染疾病時診斷的靈敏度由87.46%提高到92.67%，提示我們聯(lián)合HBP及PCT診斷呼吸道細菌感染右更好的靈敏度及準(zhǔn)確率。

綜上所述，結(jié)合HBP及PCT能夠快速有效地輔助診斷呼吸道細菌感染[14,15]，其綜合診斷價值優(yōu)于單獨使用HBP及PCT等常用手段，可作為抗生素選擇以及鑒別診斷的檢驗指標(biāo)[16]。但本研究未排除患兒發(fā)病時間、病程及病情對結(jié)果造成的影響，仍需通過擴大樣本量進行多中心臨床試驗來驗證其對呼吸道細菌感染的診斷效率。