肺癌自身抗體對肺結(jié)節(jié)良惡性鑒別的臨床價值

蔡學(xué)琴 王保龍

在全球所有癌癥中，肺癌的發(fā)病率和死亡率排名第一[1]。因為肺癌早期的臨床特征不明顯，70%～80%的肺癌患者在中晚期才能被診斷出來，5年總生存率較低[2]。因此，肺癌的早期診斷十分關(guān)鍵，這就需要一個相對完善的早期肺癌診斷方案來輔助臨床醫(yī)生診斷，從而及時進行干預(yù)和治療，改善肺癌患者預(yù)后。 LDCT技術(shù)是臨床上應(yīng)用最廣泛的肺癌早期篩查方法，但LDCT檢查對肺小結(jié)節(jié)的良惡性鑒別診斷能力較差，常常造成早期肺癌的漏診或誤診[3]。在腫瘤發(fā)展的早期階段，腫瘤細胞表面會表達一些異常抗原物質(zhì)，患者的免疫系統(tǒng)識別這些抗原并產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。經(jīng)體液免疫的擴大效應(yīng)影響后，可在患者血清中檢測到高表達的自身抗體[4]。本文重點介紹肺癌自身抗體在鑒別肺結(jié)節(jié)良惡性中的臨床意義。

資料與方法

1 一般資料 選取2018年10月～2019年2月住院的71例胸外科無癥狀肺結(jié)節(jié)患者，手術(shù)前采集外周血分離得到血清標(biāo)本，最終病理結(jié)果通過組織學(xué)方法確診，其中58例為肺惡性肺結(jié)節(jié)，13例肺良性肺結(jié)節(jié)。對照組選取同期健康人10例。所有患者在采集外周血標(biāo)本時未經(jīng)過任何治療（手術(shù)治療、放、化療和藥物治療），未診斷出其他組織或器官的癌癥。

2 方法 從無癥狀肺結(jié)節(jié)患者和健康受試者體內(nèi)采集4 mL空腹靜脈血，分離出血清后-80℃凍存。采用ELISA試劑盒（杭州凱保羅生物技術(shù)有限公司）對標(biāo)本進行集中檢測，讀取酶標(biāo)儀位于450 nm處的吸光度值。自身抗體正常參考范圍：P53：0～13.1 U/mL、PGP9.5：0～11.1 U/mL、SOX2：0～10.3 U/ mL、GAGE7：0～14.4 U/mL、GBU4-5：0～7.0 U/mL、MAGE：0～11.9 U/mL、CAGE：0～7.2 U/mL，任意一種自身抗體濃度超過其參考范圍即為陽性，七種自身抗體濃度均在參考值范圍內(nèi)即為陰性。

3 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 22.0軟件，因連續(xù)型變量呈非正態(tài)分布，使用中位數(shù)（四分間距）表示，Kruskal-Wallis檢驗用于組間比較，計數(shù)數(shù)據(jù)用例（%）表示，χ2檢驗用于率的比較。使用接受者操作曲線（ROC）分析七種自身抗體的診斷性能，檢驗水準(zhǔn)α=0.05，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

1 不同臨床特征的肺惡性結(jié)節(jié)患者自身抗體陽性率對比 不同臨床特征（年齡、性別、結(jié)節(jié)大小、結(jié)節(jié)數(shù)量、結(jié)節(jié)性質(zhì)）惡性肺結(jié)節(jié)患者血清自身抗體陽性率無差異（P＜0.05），見表1。

表1 不同臨床特征的肺癌患者血清自身抗體陽性率比較

2 血清自身抗體表達水平對比 肺惡性結(jié)節(jié)患者血清自身抗體的表達水平高于另外兩組，而非肺良性結(jié)節(jié)患者與健康人的自身抗體表達水平無差異（P＞0.05）見表2。

表2 肺癌組和對照組7項自身抗體表達水平[M(P25～P75)]

3 肺惡性結(jié)節(jié)與良性結(jié)節(jié)ROC曲線 七種自身抗體 P53、 PGP9.5、 SOX2、 GAGE7、 GBU4-5、MAGEA1、 CAGE的曲線下面積（AUC）分別為0.791、0.759、0.775、0.792、0.729、0.805、0.762，都大于0.5，且7種自身抗體聯(lián)合檢測的診斷效能增加（AUC=0.822，P＜0.05），具有一定的診斷意義，總體靈敏度和特異性分別為81.0%和76.9%，見圖1。

4 LDCT與聯(lián)合自身抗體檢測的陽性率對比 對于無癥狀肺結(jié)節(jié)患者，LDCT檢查對肺惡性結(jié)節(jié)的陽性檢出率為81.7%，聯(lián)合自身抗體檢測后，陽性檢出率增加至94.0%（P＜0.05），并且檢測的假陽性率降低，見圖2。

討 論

隨著全球大氣污染加重和吸煙人數(shù)增加，每年肺癌的新發(fā)病例不斷增加，同時由于肺癌缺乏早期診斷方法，其總體預(yù)后較差，顯著增加了全球醫(yī)療負擔(dān)。因此，肺癌早期診斷的重要性顯而易見，而目前臨床普遍使用的LDCT檢查有明顯的局限性。LDCT檢查對肺結(jié)節(jié)的鑒別診斷尤為困難，存在假陽性率過高的問題。美國一項研究報道，LDCT檢查肺癌陽性率不足40%，檢出肺結(jié)節(jié)的部分患者在進行非手術(shù)有創(chuàng)檢查后有76%為良性結(jié)節(jié)[5，6]。此外，臨床常用的血清腫瘤標(biāo)志物，如NSE、CYFRA21-1、SCC、CEA、ProGRP等，在晚期肺癌的陽性表達率較高，但用于診斷早期肺癌的特異性和敏感性較低[7]。文獻報道[8]，肺癌患者血清中的腫瘤抗原激活機體免疫系統(tǒng)，促使?jié){細胞釋放大量自身抗體，在臨床尚未診斷的腫瘤發(fā)生早期被檢測到。周彩存等牽頭的多中心臨床驗證試驗結(jié)果表明肺癌患者的自身抗體濃度顯著高于良性肺結(jié)節(jié)患者?？傮w的敏感性為61%，特異性為90%，早期肺癌患者自身抗體的敏感性高達60%[9]。由此可見，肺癌自身抗體是一種較為理想的肺癌早期檢測手段。

本研究中，肺惡性結(jié)節(jié)組的7種自身抗體的表達水平高于肺良性肺結(jié)節(jié)和對照組，與先前的研究[10，11]一致，提示自身抗體對良性和惡性肺結(jié)節(jié)的鑒別診斷具有一定的臨床意義。在不同性別、年齡、結(jié)節(jié)大小、結(jié)節(jié)數(shù)量和結(jié)節(jié)性質(zhì)的肺惡性結(jié)節(jié)患者中，自身抗體表達的陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義，表明自身抗體可廣泛應(yīng)用于肺惡性結(jié)節(jié)的輔助診斷，不受各種臨床特征的影響。本研究ROC曲線分析結(jié)果顯示，7種自身抗體聯(lián)合檢測具有比單一檢測更高的診斷效率，AUC為0.822，表明肺癌自身抗體可用于肺惡性結(jié)節(jié)輔助診斷。此外，LDCT檢查聯(lián)合自身抗體檢測后，可顯著減低LDCT檢查的假陽性率（18.3%降至6.0%），提高肺惡性結(jié)節(jié)的陽性檢出率，提示LDCT聯(lián)合肺癌自身抗體檢測考慮作為一種早期肺癌篩查方案，對于無癥狀肺小結(jié)節(jié)患者，可進行肺癌自身抗體檢測，若結(jié)果陽性則再進一步行有創(chuàng)確診檢查，若結(jié)果陰性則定期隨訪，從而降低LDCT檢查的假陽性率和避免過度檢查問題。

時廣利等[12]研究表明在非小細胞肺癌中，P53、PGP、GBU 4-5和CAGE 在Ⅲ期和Ⅳ期的表達水平顯著高于I期和Ⅱ期。本研究收集的病例為無癥狀肺結(jié)節(jié)患者，均為早期肺癌患者，因此無法確定肺癌自身抗體在不同的TNM分期方面是否有差異。Chapman等[13]發(fā)現(xiàn)P53、CAGE、GBU4-5在非小細胞肺癌和SOX2在小細胞肺癌中的靈敏度和特異度均較高。而由于本研究的標(biāo)本量較少，收集的肺癌病理類型均為腺癌，后期需進一步加大樣本量，以研究肺癌自身抗體與不同病理類型之間的聯(lián)系。既往研究[14]認為直徑大于20 mm的肺結(jié)節(jié)惡性概率為64%～82%，而本研究結(jié)果提示肺癌自身抗體與肺結(jié)節(jié)大小無顯著相關(guān)性，一方面可以說明肺癌自身抗體的臨床應(yīng)用不受結(jié)節(jié)大小的影響，另一方面原因可能是本研究的研究對象是入住我院胸外科、擬行手術(shù)切除的無癥狀肺結(jié)節(jié)患者，實際上是臨床醫(yī)生根據(jù)LDCT影像結(jié)果初篩可能是惡性結(jié)節(jié)的患者，研究對象的范圍相對縮小，后期需擴大研究對象的范圍來進行進一步研究。

總之，本研究結(jié)果表明，聯(lián)合檢測七種肺癌自身抗體在肺結(jié)節(jié)良惡性鑒別診斷具有一定的臨床意義，并具有高特異性和高靈敏度，可以彌補 LDCT檢查高假陽性率的不足之處。因此，本研究提出，肺癌自身抗體檢測和LDCT檢查相結(jié)合可考慮作為一種早期肺癌篩查方案，廣泛應(yīng)用于肺癌高危人群，以提高早期肺癌的檢出率。