基于陰陽理論與生物信息學(xué)方法探討抗腦缺血再灌注損傷后炎癥反應(yīng)的思路與方法

楊小鈺，楊仁義，黃海紅，諶澤芳，傅馨瑩，張偉

(湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長(zhǎng)沙 410208)

中風(fēng)已經(jīng)成為世界范圍致死與致殘的重要原因之一[1],其中炎癥反應(yīng)對(duì)于腦血管損傷尤為嚴(yán)重。腦缺血再灌注屬于腦缺血性中風(fēng)，極大威脅人類的生活質(zhì)量以及生命安全?，F(xiàn)階段缺乏對(duì)腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)系統(tǒng)詳細(xì)的病理生理機(jī)制探索，因此無法有效全面治療此類疾病?；蜓芯筷J入人們的視野，有望提供進(jìn)一步的解決思路?！瓣庩枴必灤┲嗅t(yī)理論，合理運(yùn)用中醫(yī)理論解釋缺血性中風(fēng)病因病機(jī)，發(fā)揮中醫(yī)藥特色，為中西醫(yī)結(jié)合抗腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)提供治療依據(jù)。

1 腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)的病理生理研究

過度的炎癥反應(yīng)，是腦缺血再灌注損傷進(jìn)一步加重的主要原因[2]。小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和白細(xì)胞作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥反應(yīng)的細(xì)胞基礎(chǔ)[3]，在炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。腦缺血再灌注后，小膠質(zhì)細(xì)胞活化是炎癥反應(yīng)開始的標(biāo)志；星形膠質(zhì)細(xì)胞受損，與小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)各種炎癥相關(guān)因子如：白介素-1(IL-1)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、核轉(zhuǎn)錄因子、血小板活化因子等，靶細(xì)胞表面的細(xì)胞間黏附因子-1(ICAM-1)、血管細(xì)胞黏附因子-1(VCAM-1)等大量釋放，血管內(nèi)白細(xì)胞通過遷移、黏附、活化，附著在血管內(nèi)壁，釋放炎癥介質(zhì)，進(jìn)一步加劇了白細(xì)胞的聚集，造成周而復(fù)始的循環(huán)；血管發(fā)生堵塞，形成血栓并從而減少血流。白細(xì)胞也可透過血管壁，加重腦組織損傷。

其中炎癥細(xì)胞活化釋放大量的炎癥因子是炎癥反應(yīng)的中心環(huán)節(jié)。淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核-巨噬細(xì)胞的聚集，是炎癥反應(yīng)發(fā)生發(fā)展的重要步驟。最新研究表明，多種炎性細(xì)胞因子與炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)共同使炎性病變進(jìn)一步發(fā)展，導(dǎo)致腦組織中缺血性壞死，腦水腫和神經(jīng)元損傷加重[4]。早期研究已發(fā)現(xiàn)IL-1β中和抗體或其阻斷劑可有效減輕缺血性腦損傷[5]。通過肢體反復(fù)預(yù)處理，王小琴等[6]發(fā)現(xiàn)降低TNF-α和IL-6水平，腦缺血再灌注損傷得到有效緩解，細(xì)胞損傷程度減輕、腦梗死體積縮小。黃韜[7]等通過研究發(fā)現(xiàn)，高劑量梓醇可以降低腦缺血再灌注大鼠腦組織中的IL-1β、IL-6、TNF-α水平，取得一定的療效。因此，從炎癥細(xì)胞與炎癥細(xì)胞因子入手，抑制免疫損傷，為治療腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)提供靶點(diǎn)與方法。

近年來研究發(fā)現(xiàn)基因調(diào)控對(duì)于疾病的發(fā)生發(fā)展產(chǎn)生影響。miRNA是一種非編碼RNA，其參與調(diào)控細(xì)胞能量代謝、生長(zhǎng)分化、細(xì)胞凋亡等一些重要的細(xì)胞生理過程[8]。目前有大量研究探索了生理?xiàng)l件下和缺血性卒中后循環(huán)血和腦組織中miRNA的表達(dá)分布及作用[9]。miRNA與腦組織生理功能和病變等有著密切關(guān)系，它們和靶基因共同參與炎癥、動(dòng)脈粥樣硬化、神經(jīng)血管再生、細(xì)胞凋亡等多種與缺血性卒中相關(guān)的病理生理學(xué)過程，這充分表明miRNA可能成為缺血性卒中早期診斷的分子標(biāo)志物和有效的治療靶標(biāo)。而circRNA是一種新近研究的非編碼RNA。據(jù)報(bào)道，環(huán)狀RNA在多個(gè)器官中富集，在大腦中尤其豐富，這表明環(huán)狀RNA可能參與其中腦生理和病理過程[10]。circRNA已被證明與miRNA密切相關(guān)，circRNA-miRNA-基因通路對(duì)于調(diào)節(jié)基因表達(dá)起著重要作用。但現(xiàn)階段研究尚不清楚circRNA在腦缺血的發(fā)病機(jī)制中的具體作用。Liu[11]等發(fā)現(xiàn)腦缺血再灌注48 h后，有914個(gè)circRNA顯著上調(diào)，其余113個(gè)則顯著下調(diào)。隨后選擇三個(gè)circRNA，預(yù)測(cè)相關(guān)重要的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)途徑和功能，構(gòu)建出circRNA-miRNA-靶基因的相互作用網(wǎng)絡(luò)。隨著國(guó)內(nèi)外研究發(fā)展，發(fā)現(xiàn)競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源RNA(ceRNA)[12]也為腦血管疾病研究和治療提供新依據(jù)。

2 疾病-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)的建立

2.1 靶點(diǎn)蛋白PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

通過GeneCards(https://www.genecards.org/)數(shù)據(jù)庫，以“Cerebral ischemia-reperfusion inflammatory response”為檢索詞，收集抗腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)的作用靶點(diǎn)，以Score值≥30為限定條件進(jìn)行篩選，得到TNF、IL6、IL10、IFNG、TLR4、IL1B、TGFB1、CXCL8、TP53、ICAM1、APP、MPO、NOS2、PTGS2、CCL2共15個(gè)靶點(diǎn)；采用Srting數(shù)據(jù)庫及Cytoscape軟件Network analyzer功能構(gòu)建靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)(圖1)。按照“Degree”分析，結(jié)果表明通過多個(gè)作用靶點(diǎn)可實(shí)現(xiàn)抗腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)。

圖1 靶點(diǎn)蛋白PPI網(wǎng)絡(luò)圖

2.2 KEGG通路富集分析

利用DAVID(https://david.ncifcrf.gov/)數(shù)據(jù)庫及Cytoscape軟件，將15個(gè)靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG富集分析，得到圖2，并對(duì)P值取負(fù)對(duì)數(shù)，得出“-lgP”，-lgP值越大，富集程度越大，將數(shù)據(jù)導(dǎo)入Origin，繪制heatmap，得到圖3。KEGG富集分析結(jié)果顯示，TNF、IL6、IL10、IFNG等為重要靶點(diǎn)，可通過細(xì)胞因子與細(xì)胞因子受體的相互作用、沙門氏菌感染、NF-κB信號(hào)通路、TNF信號(hào)通路等多條通路實(shí)現(xiàn)對(duì)靶點(diǎn)的調(diào)控。

圖2 KEGG通路可視化網(wǎng)絡(luò)圖

圖3 熱圖

3 腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)的治療

通過對(duì)腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)病理生理機(jī)制的研究，發(fā)現(xiàn)炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)涉及環(huán)節(jié)靶點(diǎn)眾多，炎癥細(xì)胞與炎癥因子相互錯(cuò)雜且獨(dú)立，靶點(diǎn)之間相互溝通，阻礙治療進(jìn)程，以往研究多以溶栓為主，他汀類藥物經(jīng)臨床與試驗(yàn)研究證明有效；也有學(xué)者涉及單靶點(diǎn)受體抑制劑，如IL-1受體拮抗劑，從而人為降低IL-1水平，阻斷級(jí)聯(lián)反應(yīng)，減輕腦組織損害；亞低溫治療、干細(xì)胞療法也是研究的熱點(diǎn)。

隨著國(guó)內(nèi)外研究水平的提高，氫氣對(duì)于多種疾病的治療均具有一定療效。富氫水是氫氣給藥方式之一，明顯縮小腦梗死面積、減輕腦水腫癥狀，張威[13]等研究證明其可下調(diào)TNF-α、IL-1β水平，減弱炎癥反應(yīng)，抑制線粒體凋亡途徑。氫氣醫(yī)學(xué)尚屬于萌芽階段，仍需進(jìn)一步探索；常壓高濃度氧治療[14]直接改善缺血腦組織氧合狀態(tài)，恢復(fù)腦組織氧分壓。核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB參與多種炎性因子轉(zhuǎn)錄及表達(dá)，師文娟等[15]發(fā)現(xiàn)常壓高濃度氧治療通過抑制其過度活化，從而防止炎癥反應(yīng)發(fā)生；另外，一定劑量的雷公藤紅素可以抗炎、抗腫瘤、免疫抑制，對(duì)腦缺血再灌注后腦血管神經(jīng)具有保護(hù)作用，楊雪蓮[16]等用不同劑量的雷公藤紅素治療腦缺血再灌注后的大鼠，研究其神經(jīng)保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)隨濃度增加，炎癥因子釋放減少。苯海索[17]與丙磺舒[18]經(jīng)研究表明均可抑制炎癥反應(yīng)，減輕腦組織缺血再灌注后損傷。

4 陰陽學(xué)說理論對(duì)腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)的認(rèn)識(shí)

4.1 陰陽學(xué)說是中醫(yī)理論基礎(chǔ)

陰陽學(xué)說是研究世間萬物發(fā)生發(fā)展及其運(yùn)動(dòng)變化規(guī)律的學(xué)說，屬中國(guó)古代哲學(xué)范疇[19]，是傳統(tǒng)文化的核心思想?！耙滓缘狸庩枴?，陰陽學(xué)說是中醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)理論，《素問·陰陽應(yīng)象大論篇》道:“陰陽者，天地之道也，萬物之綱紀(jì)，變化之父母，生殺之本始，神明之府也，治病必于本”。陰陽交感、對(duì)立、互根，消長(zhǎng)以及轉(zhuǎn)化，是人體生理活動(dòng)及病理變化的規(guī)律和基本法則。如精、氣、血、津液是構(gòu)成人體和維持生命活動(dòng)的基本物質(zhì)，其中氣屬陽，精、血、津液屬陰，“陰在內(nèi)，陽之守也；陽在外，陰之使也”，陰陽保持動(dòng)態(tài)平衡，“形神相得”；陰陽任何一方偏盛偏衰及變化導(dǎo)致陰陽失調(diào)，“邪氣盛則實(shí)”“精氣奪則虛”則“陰陽離絕，精氣乃絕”?！毒霸廊珪髦忆洝酚性疲骸胺苍\脈施治，必先審陰陽，乃為醫(yī)道之綱領(lǐng)”，陰陽學(xué)說對(duì)于疾病的認(rèn)識(shí)、診斷、治療意義重大。

4.2 缺血性中風(fēng)與陰陽失調(diào)

歷代醫(yī)家研究表明，氣血逆亂導(dǎo)致缺血性中風(fēng)。虛、瘀、痰、毒致使腦脈失榮，閉塞不通，出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，甚至死亡。其中以陰陽失調(diào)所致的“氣虛”為根本。陽氣為人體生命活動(dòng)的原動(dòng)力，張介賓道：“天之大寶，只此一丸紅日；人之大寶，只此一息真陽。”古人早在《上古天真論》中論述女子“五七陽明脈衰”“七七任脈虛”而“形壞”，男六七“陽氣衰竭于上”。《千金方》亦云：“人年五十以上，陽氣日衰，損與日至，心力漸退，忘前失后，興居怠惰，計(jì)授皆不稱心?！倍邦^為諸陽之會(huì)”，為人之神靈所居，伴隨年齡的增長(zhǎng)，陰陽失于調(diào)和，陰陽消長(zhǎng)轉(zhuǎn)化失去平衡?！瓣栔鳉?，故氣全而神旺；陰主血，故血盛而形強(qiáng)。人生所賴，唯斯而已。”氣為血之帥，“營(yíng)氣者，泌其津液，注之于脈，化以為血?！薄拔迮K六腑之精，皆上屬于腦”，因此氣虛則血虛，腦脈失榮；又因“運(yùn)血者，即是氣”，《醫(yī)林改錯(cuò)》云：“血管無氣”故“必停留而瘀”;李東垣有“氣虛致中”學(xué)說；張景岳結(jié)合自身臨床實(shí)踐，提出“元?dú)馓潛p”是缺血性中風(fēng)的主要原因；王清任道:“中風(fēng)諸癥皆為氣虛所致”。陰陽失衡，氣虛血虛及瘀，出現(xiàn)肢體活動(dòng)欠佳，言語不利等神經(jīng)功能障礙。陰陽失調(diào)導(dǎo)致氣虛，《血證論·陰陽水火氣血論》中有云：“水化于氣”“氣行水亦行”。津液的生成、輸布和排泄與氣密切相關(guān)。氣虛津傷水停，由此形成水濕、痰飲。痰瘀互結(jié)于腦脈，《素問·本病論》曰:“久而化郁，……民病卒中偏痹,手足不仁”[20]，痰瘀毒邪久而化熱，瘀熱毒邪互結(jié)呈現(xiàn)，使神明蒙蔽，腦絡(luò)失養(yǎng)，“瘟毒在內(nèi)燒煉其血,血受燒煉,其血必凝”[21]，血瘀之證益甚。

4.3 缺血性中風(fēng)與炎癥反應(yīng)

不同于西醫(yī)，通過辨證論治，瘀熱型為炎癥重要類型?！端貑枴の逍写笳摗酚性疲骸捌渥冄谞q。”這里的“炎”即熱?！秲?nèi)經(jīng)》中所述“營(yíng)衛(wèi)稽留于經(jīng)脈之中，則血泣而不行；不行則衛(wèi)氣從之而不通，壅遏不得行，故熱，大熱不止，熱盛則肉腐，肉腐則為膿。”通過現(xiàn)代醫(yī)學(xué)同樣發(fā)現(xiàn)，血瘀證與炎癥、炎癥因子、微循環(huán)等方面密切相關(guān)。以中醫(yī)傳統(tǒng)理論為核心，結(jié)合現(xiàn)代微觀研究，探究血瘀證與炎癥反應(yīng)發(fā)生的內(nèi)在聯(lián)系。馬曉娟[22]等發(fā)現(xiàn)血瘀證與C反應(yīng)蛋白、IL-6、TNF、ICAM等存在密切相關(guān)性；活血化瘀法在臨床諸多炎癥的治療中發(fā)揮著重要的作用；同樣，以中醫(yī)角度來看，缺血性中風(fēng)所產(chǎn)生的炎癥因子相當(dāng)于內(nèi)生毒邪，通過建立熱毒血瘀證模型，發(fā)現(xiàn)炎癥因子水平明顯升高。因此，基于以往研究表明缺血性中風(fēng)以“瘀”為代表，產(chǎn)生炎癥反應(yīng)。

中老年陽氣虛弱，陰陽失調(diào)，氣虛血虛，腦脈失養(yǎng)；又因氣虛導(dǎo)致血瘀，津液生成輸布障礙，形成痰濕，痰瘀互結(jié)，郁而化熱，痰、瘀、熱、毒使血瘀證日益嚴(yán)重，從內(nèi)部推動(dòng)炎癥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展?？v觀從陰陽失調(diào)到炎癥反應(yīng)，環(huán)環(huán)相扣，在每一個(gè)環(huán)節(jié)均可發(fā)揮中醫(yī)藥優(yōu)勢(shì)，益氣活血、活血化瘀、清熱解毒化濕等方法，為治療腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)提供有效選擇。

5 中醫(yī)藥防治

通過對(duì)于缺血性腦卒中病因病機(jī)的分析，中醫(yī)藥運(yùn)用益氣活血、活血化瘀、清熱解毒等方法對(duì)于治療此類疾病具有優(yōu)勢(shì)，其具有多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)、雙向調(diào)節(jié)的特點(diǎn)，近年來各類實(shí)驗(yàn)研究表明，中醫(yī)藥存在明顯的療效。

除治療缺血性中風(fēng)經(jīng)典方劑補(bǔ)陽還五湯外，諸多復(fù)方均有療效。芪蛭通絡(luò)膠囊對(duì)腦缺血性中風(fēng)中多種病理因素治療有效，武曉偉[23]等對(duì)其進(jìn)行拆方研究，分為含有水蛭、川芎、土鱉蟲、丹參、郁金、紅花、雞血藤、姜黃、澤蘭9味藥的活血化瘀組，與不含以上九味藥的缺活血化瘀藥味組?；钛鏊幬督M對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷具有緩解作用，較缺活血化瘀藥味組腦梗死率、TNF-α、IL-1β均明顯降低。腦心清膠囊同樣也是腦血管疾病的常用藥，閔冬雨[24]等學(xué)者對(duì)其進(jìn)行了研究，柿葉為腦心清膠囊的主要成分，柿葉提取物中黃酮、有機(jī)酸和香豆素等具有抗炎、抗氧化、改善平滑肌功能的作用，通過實(shí)驗(yàn)研究表明，其有效抑制海馬神經(jīng)元的損傷，抑制組織氧化應(yīng)激損傷，降低炎癥因子水平，對(duì)于腦血管具有明顯的保護(hù)作用。滌痰湯出自《奇效良方》卷一，具有豁痰清熱,利氣補(bǔ)虛之功效，主治中風(fēng),痰迷心竅,舌強(qiáng)不能言，是臨床治療中風(fēng)急性期的常用方劑。相關(guān)研究表明[25]其可以抑制體內(nèi)炎癥反應(yīng)。加味滌痰湯可以通過干預(yù)腦缺血再灌注損傷后的細(xì)胞自噬，改善腦缺血再灌注過程中腦組織損傷，降低炎癥因子水平，起到缺血再灌注后神經(jīng)保護(hù)的作用。

對(duì)于單味藥及其有效組分的研究，為抑制腦缺血再灌注后炎癥反應(yīng)開拓了視野。敗醬草，最早出現(xiàn)于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有清熱解毒、止血、活血等功效，其入藥部位是黃花敗醬和白花敗醬的全草。研究[26]指出，敗醬草具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤等作用。敗醬總黃酮是敗醬草的有效成分，敗醬總黃酮能夠降低腦缺血再灌注模型大鼠腦組織中TNF-α、IL-1β等炎癥因子水平，起到減輕炎癥反應(yīng)對(duì)腦組織損傷的作用。白藜蘆醇作為多酚類活性物質(zhì)，主要存在于藜蘆、決明等植物中。研究[27]表明，給予白藜蘆醇后，腦缺血再灌注模型大鼠腦組織中的Caspase-1含量、NLRP3炎癥小體明顯下降，而ZO-1含量明顯增加，這證明白藜蘆醇能夠通過改變NLRP3、Caspase-1、ZO-1水平，從而降低炎癥反應(yīng)，減輕腦缺血再灌注損傷；另一方面，白藜蘆醇能保護(hù)血腦屏障，抑制炎性細(xì)胞侵襲腦組織，從而抑制大腦炎癥因子的釋放。另外白芍具有養(yǎng)血斂陰,柔肝止痛,平抑肝陽的功效。芍藥苷是中藥白芍的有效成分，具有抗炎、抗氧化等藥理作用。有研究[28]表明，芍藥苷能夠調(diào)控Ca2+/CaMKⅡ/CREB信號(hào)通路、抑制神經(jīng)元凋亡，從而發(fā)揮對(duì)腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。芍藥苷能顯著降低大鼠IL-6、IL-1β、TNF-α等炎癥因子的水平，從而發(fā)揮對(duì)腦缺血再灌注的抗炎作用。

通過益氣活血、清熱解毒等方法為抗腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)提供有效選擇;同時(shí)參與多種炎癥因子的調(diào)控。且中醫(yī)藥在腦血管疾病中雙向調(diào)節(jié)的優(yōu)勢(shì)不斷突顯，中醫(yī)治療注重“亢者承之，弱者彰之”，在治療中強(qiáng)調(diào)“調(diào)”字，調(diào)節(jié)機(jī)體寒與熱、虛與實(shí)、表與里、陰與陽的矛盾對(duì)立面的“證”，這在一定范圍內(nèi)可使機(jī)體內(nèi)穩(wěn)態(tài)失卻平衡得到改善，使中醫(yī)治療腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)取得一定進(jìn)展。

6 中西醫(yī)結(jié)合防治思路

6.1 注重腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)的中醫(yī)病因病機(jī)

氣虛血瘀、瘀毒互結(jié)是缺血性中風(fēng)的基本病機(jī)，六淫邪氣、情志因素、飲食因素等皆可導(dǎo)致炎癥反應(yīng)的發(fā)生。諸多因素常常相兼為病。缺血性中風(fēng)中，以濕熱、瘀熱辨證較多，以陰虛火旺為主要病機(jī)。人體差異性較大，素來肝陽上亢者，上實(shí)下虛，腦脈受損，產(chǎn)生炎癥反應(yīng)；血虛者，脈道失于濡養(yǎng)，難以維持內(nèi)環(huán)境平衡，產(chǎn)生炎癥反應(yīng)；自身正氣不足，容易感受六淫邪氣者，正邪相搏，炎癥反應(yīng)隨之而來。炎癥反應(yīng)類型與缺血性中風(fēng)的病因病機(jī)相交叉，則產(chǎn)生諸多新的影響因素，對(duì)中醫(yī)藥診治帶來極大困難。因此，要征集大數(shù)據(jù)的樣本資料，兼顧多種致病因素與個(gè)體差異性，闡明病因病機(jī)，發(fā)揮中醫(yī)藥治療腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)的優(yōu)勢(shì)。

6.2 注重腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)的病理生理機(jī)制

腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)通過多種炎癥細(xì)胞、炎癥因子以及相關(guān)通路對(duì)機(jī)體產(chǎn)生損害。針對(duì)于目前研究階段，基因研究產(chǎn)生重大突破，但是難以完全闡明其發(fā)病機(jī)制。而中醫(yī)藥具有多環(huán)節(jié)、多靶點(diǎn)的整體調(diào)節(jié)作用，與腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)的病理生理特點(diǎn)相符合，通過整體調(diào)控，達(dá)到療效。結(jié)合生物信息學(xué)，基于GeneCards數(shù)據(jù)庫，篩選靶點(diǎn)，結(jié)合String及Cytoscape軟件算法分析對(duì)功能靶點(diǎn)進(jìn)行蛋白互作PPI分析，從微觀角度推測(cè)抗腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)的靶點(diǎn)與作用機(jī)制，同時(shí)利用DAVID數(shù)據(jù)庫，將靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG富集分析，說明TNF、IL-6、IL-10、IFNG等為重要靶點(diǎn)，可通過細(xì)胞因子與細(xì)胞因子受體的相互作用、沙門氏菌感染、NF-κB信號(hào)通路、TNF信號(hào)通路等多條通路實(shí)現(xiàn)對(duì)靶點(diǎn)的調(diào)控。有望成為重要治療靶點(diǎn)，為治療腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)提供新的理論依據(jù)，有助于中醫(yī)藥針對(duì)更多的致病因子甚至基因進(jìn)行同時(shí)調(diào)控，對(duì)于研究中西醫(yī)結(jié)合防治腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)損傷具有重要意義。

6.3 加強(qiáng)對(duì)中醫(yī)藥治療腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)的有效物質(zhì)及機(jī)理研究

中醫(yī)注重“調(diào)”字，通過多途徑，多靶點(diǎn)進(jìn)行調(diào)控，在眾多慢性病中發(fā)揮優(yōu)勢(shì)。經(jīng)驗(yàn)醫(yī)學(xué)發(fā)現(xiàn)諸多中藥具有一定療效，但是對(duì)于藥效物質(zhì)、組方用藥的配伍原理、治病原理并不十分清楚。單味藥中有效成分是什么，含量占比是多少，是作用于發(fā)病的哪一環(huán)節(jié)，是對(duì)于哪一類細(xì)胞進(jìn)行調(diào)控，組方用藥藥物配伍的原理是什么，為什么形成最佳配伍比例。諸多問題等待去解決，使中醫(yī)藥治療更加具有科學(xué)性、準(zhǔn)確性、針對(duì)性。

6.4 提高治療方案腦靶向性

血腦屏障的存在一定程度上降低藥物療效。通過注射納米激動(dòng)劑，細(xì)胞表面的腺苷A2A受體被激活，使毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密性降低，從而提高血腦屏障通透性，提高大分子藥物入腦效率，藥物在腦內(nèi)分布顯著增加，納米激動(dòng)劑延長(zhǎng)了血腦屏障開啟的時(shí)間窗口，增加血腦屏障通透性[29]；外泌體也有望成為腦缺血再灌注診斷新的生物標(biāo)志物，具備良好的治療潛能。劉辰庚[30]研究表明，外泌體通過跨越血腦屏障將miR-135a這一生物信息傳達(dá)至腦細(xì)胞內(nèi)，并發(fā)揮其生物學(xué)作用。將其與中醫(yī)藥相結(jié)合，展現(xiàn)中醫(yī)藥的強(qiáng)大生命力。

7 總結(jié)

腦缺血再灌注損傷的炎癥反應(yīng)機(jī)制復(fù)雜，影響因素眾多?；陉庩枌W(xué)說理論，合理運(yùn)用中醫(yī)藥的雙向調(diào)節(jié)作用，通過單味中藥的有效組分或多味中藥配伍，闡明病理生理機(jī)制，并且結(jié)合現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，促進(jìn)藥物透過血腦屏障，加強(qiáng)療效。始終堅(jiān)持在中醫(yī)理論的指導(dǎo)下，運(yùn)用現(xiàn)代高新技術(shù)，勤于研究，為中醫(yī)藥的精準(zhǔn)醫(yī)療提供新思路，為中西醫(yī)防治腦血管疾病提供新參考。