科學家破解優(yōu)質蛋白玉米育成之謎

2020-01-07，《自然-通訊》（Nature Communications）在線發(fā)表了中國科學院分子植物科學卓越創(chuàng)新中心巫永睿研究組和上海交通大學農業(yè)與生物學院王文琴研究組合作的題為Long-read sequencing reveals genomic structural variations that underlie creation of quality protein maize 的研究論文。他們通過PacBio 三代基因組測序、BSA-seq 遺傳定位和RNA-seq 轉錄組分析相結合的手段，深入解析了優(yōu)質蛋白玉米（Quality Protein Maize,QPM）選育的基因組結構變異基礎，全面挖掘了潛在的硬質胚乳修飾因子。

玉米是世界第一大糧食和飼料作物，但蛋白營養(yǎng)品質很差，這是由于胚乳中主要儲藏蛋白是不含必需氨基酸的醇溶蛋白。o2 是高賴氨酸突變體，其醇溶蛋白含量下降了60%，而其它富含賴氨酸的優(yōu)質蛋白互補性地上升，這樣不僅使籽?？偟鞍姿交静蛔?，而且賴氨酸總含量也隨之大幅度增加，然而o2籽粒有很多其它農藝性狀上的缺陷，比如軟質胚乳、千粒重下降、容易感病等，所以很難直接產業(yè)化。從上世紀60 年代開始，國際玉米小麥改良中心從o2群體中不斷篩選積累o2的修飾因子（o2 modifiers,Mo2s）把軟質胚乳恢復成硬質胚乳，同時保持o2 的高賴氨酸性狀，這種硬質高賴氨酸版本的o2玉米就稱作優(yōu)質蛋白玉米（Quality Protein Maize,QPM）。優(yōu)質蛋白玉米是高賴氨酸玉米，營養(yǎng)價值堪與牛奶媲美，其產業(yè)化大大改善了南美、非洲和亞洲等一些以玉米為主食的發(fā)展中國家人群因缺乏賴氨酸、色氨酸引起的營養(yǎng)不良癥。在中國，如果生豬用優(yōu)質蛋白玉米飼養(yǎng)，料肉比顯著下降，即用同樣量的飼料能使豬增重37%。同時，以優(yōu)質蛋白玉米作為飼料的另一優(yōu)勢是生豬可以充分吸收并同化玉米蛋白質氨基酸，減少糞便中氮的排放，減少環(huán)境污染的壓力。

優(yōu)質蛋白玉米以熱帶玉米種質為基礎育成，當它被引進到溫帶氣候國家，如中國，它面臨的主要問題是如何把存在于熱帶種質中的修飾因子轉到溫帶種質的骨干自交系中。然而，修飾基因和與其相互作用的因子還不知道，導致這個轉化過程很漫長，而且最后得到的很多轉化系還不是全硬質胚乳，而是半硬質胚乳。這樣的品種品相不好，農藝表現不如全硬質胚乳；我國地域和氣候差別很大，經過千辛萬苦育成的優(yōu)質蛋白玉米品種的適宜區(qū)域非常有限，很難大范圍推廣，大大制約了優(yōu)質蛋白玉米的發(fā)展。如果優(yōu)質蛋白玉米具有參考基因組序列并開發(fā)胚乳修飾因子的分子標記，這必將大大加快其育種進程,為社會帶來巨大的經濟效益。

巫永睿研究組長期致力于玉米蛋白品質研究，收集了豐富的優(yōu)質蛋白玉米材料，而上海交通大學王文琴研究組的研究興趣是通過計算生物學及與分子生物學相結合的手段研究玉米復雜農藝性狀。為挖掘優(yōu)質蛋白玉米所有胚乳修飾因子，他們合作對來自南非的優(yōu)質蛋白玉米自交系K0326Y基因組進行了三代測序，最終組裝出的基因組大小為2148 Mb，contig N50 達到了7.77 Mb。當K0326Y與冷泉港Doreen Ware 團隊拼裝的B73和中國農業(yè)大學賴錦盛團隊的Mo17進行比較基因組學分析，他們發(fā)現K0326Y與其它兩個玉米基因組之間有豐富的序列多樣性及結構變異，這構成了玉米品種間多樣性的主要原因。他們構建了K0326Y 與來源于美國的普通o2 自交系W64Ao2 的F2 群體，并對群體中完全硬質和粉質的極端分離個體進行混池測序，鑒定到了多個修飾因子的QTL 位點；同時，通過對兩組優(yōu)質蛋白玉米和o2 突變體（K0326Y vs W64Ao2 和CM105Mo2 vs CM105o2）進行RNA-seq分析，共鑒定到了1791個共同差異表達基因。結合以上數據，他們發(fā)現了一些與多個胚乳修飾因子遺傳位點緊密相連的候選基因，這些基因具有結構變異和表達水平改變等遺傳特征。據此并結合近期其他研究成果，他們提出了解釋優(yōu)質蛋白玉米硬質胚乳形成的分子機制模型（如圖）。他們構建的高質量優(yōu)質蛋白玉米基因組以及鑒定出的具有結構變異和表達差異的候選基因將會促進優(yōu)質蛋白玉米胚乳修飾因子分子標記開發(fā)及分子育種。

上海交通大學農業(yè)與生物學院博士后李長生和中科院分子植物卓越中心博士后向小利為該論文共同第一作者。分子植物卓越中心博士生黃永財、博士后周勇、助研王瓊，上海交通大學博士后安冬等人參與了該工作。華大基因趙辰曦、山東農業(yè)大學教授劉紅軍、青島農業(yè)大學教授李玉斌、美國新澤西州蒙克萊爾州立大學教授杜春光、長期致力于優(yōu)質蛋白玉米研究的美國亞利桑那大學Brian A.Larkins 院士，美國羅格斯大學Joachim Messing院士及其博士后董家強也參與了合作。王文琴和巫永睿為論文共同通訊作者。這項研究得到科技部、國家基金委和中科院的大力支持。