沉默OTUD1基因?qū)θ四懩野┘?xì)胞增殖及遷移的影響臨床研究

崔貴醫(yī) 龐志剛

【摘 要】 目的：探討沉默OTUD1基因?qū)θ四懩野┘?xì)胞增殖及遷移的影響。方法：選取2013年4月到2019年9月我院收治60例的采用慢病毒感染與siRNA干擾技術(shù)沉默人膽囊癌細(xì)胞GBC-SD中OTUD1基因患者作為siRNA組，同時選取60例空白對照組作為GBC-SD組，運用CCK-8法對上述兩組患者24h、48h、72h細(xì)胞吸光度值（A450）進(jìn)行檢測，并運用Transwell小室細(xì)胞遷移與侵襲實驗對穿膜細(xì)胞數(shù)進(jìn)行檢測，觀察兩組患者的A450、穿膜細(xì)胞數(shù)情況。結(jié)果：siRNA組24h、48h、72h的A450分明顯低于GBC-SD組，差異顯著（P<0.05）;在Transwell小室細(xì)胞遷移與侵襲實驗中，siRNA組24h的穿膜細(xì)胞數(shù)顯著較少，與GBC-SD組相比差異顯著（P<0.05）。結(jié)論：沉默OTUD1基因能夠有效的阻止人膽囊癌細(xì)胞增殖與遷移。

【關(guān)鍵詞】 沉默OTUD1基因;膽囊癌;細(xì)胞增殖;細(xì)胞遷移

【中圖分類號】R735.7?? 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A?? 【文章編號】1005-0019（2020）03-051-02

膽囊癌在臨床中較為常見，依據(jù)臨床研究顯示，該疾病的預(yù)后質(zhì)量多較差，主要與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移存在密切關(guān)聯(lián)，因此若能夠有效的控制癌細(xì)胞的侵襲與轉(zhuǎn)移，能夠有效的改善患者的預(yù)后質(zhì)量[1]。沉默OTUD1基因是一個含有OTU結(jié)構(gòu)域的去泛素化酶，通過臨床研究可知[2]，沉默OTUD1基因與膽囊癌的惡化、不良預(yù)后及生存期縮短具有密切關(guān)聯(lián)，因此需要有效的明確沉默OTUD1基因水平，明確其抑制膽囊癌細(xì)胞增殖與侵襲的機(jī)制，從而改善患者的預(yù)后[3]。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年4月到2019年9月我院收治60例的采用慢病毒感染與siRNA干擾技術(shù)沉默人膽囊癌細(xì)胞GBC-SD中OTUD1基因患者作為siRNA組，同時選取60例空白對照組作為GBC-SD組。siRNA組男女各37例與23例，年齡為41-61歲，平均年齡為（51.1±4.9）歲;GBC-SD組男女各39例與21例，年齡為42-61歲，平均年齡為（51.5±5.1）歲。兩組患者之間的線性資料差異具有可比性（P>0.05）。

1.2 方法

（1）提取患者的癌細(xì)胞組織，運用CCK-8法對上述兩組患者24h、48h、72h細(xì)胞吸光度值（A450）進(jìn)行檢測。

（2）Transwell小室細(xì)胞遷移實驗。將Transwell小室放置于24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，將小室內(nèi)作為上室，將培養(yǎng)板內(nèi)作為下室，之后將GBC-SD組的無血清培養(yǎng)液放置于上室內(nèi)，將含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液放置于下室內(nèi)，根據(jù)檢測穿膜細(xì)胞數(shù)對細(xì)胞遷移能力進(jìn)行判斷。

（3）Transwell小室細(xì)胞侵襲實驗。將Matrigel膠涂抹于上室，將FN膠涂抹于下室，根檢測穿膜細(xì)胞數(shù)對細(xì)胞的侵襲能力進(jìn)行判斷。

1.5 觀察指標(biāo)

①24h、48h、72h細(xì)胞吸光度值（A450）。

②Transwell小室細(xì)胞遷移與侵襲實驗中的穿膜細(xì)胞數(shù)情況。

1.6 統(tǒng)計學(xué)處理

使用SPSS18.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，A450、穿膜細(xì)胞數(shù)為計量資料，使用LSD-t檢驗，P<0.05提示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 24h、48h、72h細(xì)胞A450比較

siRNA組24h、48h、72h的A450明顯低于GBC-SD組，差異顯著（P<0.05），見表1。

2.2 Transwell小室細(xì)胞遷移與侵襲實驗中的穿膜細(xì)胞數(shù)比較

在Transwell小室細(xì)胞遷移與侵襲實驗中，siRNA組24h的穿膜細(xì)胞數(shù)顯著較少，與GBC-SD組相比差異顯著（P<0.05），見表2。

3 討論

膽囊癌在臨床中較為常見，較易對周圍臟器形成累及，并且將會向淋巴結(jié)等器官進(jìn)行轉(zhuǎn)移，從而產(chǎn)生更加嚴(yán)重的不良影響，因此需要采取有效的措施阻止癌細(xì)胞的增殖與遷移。隨著研究的不斷深入，臨床人員發(fā)現(xiàn)沉默OTUD1基因與膽囊癌的惡化、不良預(yù)后及生存期縮短具有密切關(guān)聯(lián)，即隨著OTUD1基因表達(dá)量的不斷提升，患者的病情將會隨之加重，并且預(yù)后質(zhì)量也將不斷變差[4]。在本研究中，通過使用siRNA干擾技術(shù)對OTUD1基因進(jìn)行沉默，能夠使其表達(dá)量不斷降低，從而能夠改善患者的預(yù)后質(zhì)量。依據(jù)結(jié)果顯示，通過對OTUD1基因進(jìn)行沉默，患者的A450、穿膜細(xì)胞數(shù)明顯降低，由此說明siRNA沉默OTUD1基因的表達(dá)后，能夠有效的抑制膽囊癌細(xì)胞的增殖與遷移，與國外相關(guān)學(xué)者的研究結(jié)果類似。

綜上所述，本研究認(rèn)為沉默OTUD1基因能夠有效的阻止人膽囊癌細(xì)胞增殖與遷移，能夠有效的對患者的預(yù)后情況進(jìn)行改善，具有良好的效果。但臨床相關(guān)人員仍然需要加強對OTUD1基因的研究，以獲得更進(jìn)一步的效果。

參考文獻(xiàn)

[1] 任立剛.Cx43基因修飾對人膽囊癌GBC-SD細(xì)胞增殖和遷移能力的影響[J].中國實驗診斷學(xué)，2015，19（11）：1826-1829.

[2] 蔡煒龍，余勝，汪偉民，許洪寶，樓能.siRNA沉默CD44表達(dá)對人膽囊癌細(xì)胞增殖、侵襲和遷移的影響[J].浙江醫(yī)學(xué)，2019，41（11）：1133-1137.

[3] 段巨濤，張琦.電轉(zhuǎn)法介導(dǎo)沉默ABCE1基因?qū)θ四懩野┘?xì)胞基因表達(dá)及增殖能力的抑制作用[J].中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志，2017，23（05）：523-527.

[4] 張生彬，曹翠霞，鄒曉明，云哲琳，石雪英.NDRG1基因過表達(dá)對膽囊癌GBS-SD細(xì)胞增殖及凋亡的影響[J].基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)，2018，37（12）：5640-5647.