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    原發(fā)性肝癌中血清PTN和GP73的表達及其在臨床診斷中的意義

    2020-02-18 04:05:00張黎楊榮趙云
    肝臟 2020年1期
    關鍵詞:男女比例肝硬化肝癌

    張黎 楊榮 趙云

    多效生長因子(Pleiotrophin, PTN)是一種對肝素具有高親和力的分泌生長因子[1]。經(jīng)實驗證實,PTN在腫瘤細胞中發(fā)揮了促血管生成和轉移等重要生物學作用[2]。高爾基體跨膜糖蛋白73(Golgi protein-73, GP73)是一種在人類上皮細胞中表達的跨膜糖蛋白[3]。有研究發(fā)現(xiàn)GP73在肝癌、肺腺癌等腫瘤疾病中表達上調[4]。本研究旨在檢測PHC中PTN和GP73的表達情況,進一步探討兩者聯(lián)合檢測診斷PHC的價值,為PHC的早期診療提供有效的生物學標志物。

    資料與方法

    一、一般資料

    2017年9月至2018年7月,蘇州大學附屬張家港醫(yī)院共招募PHC患者148例。另有100名健康志愿者和171名非健康志愿者,包括35例肝硬化患者、75例病毒性肝炎患者,30例轉移性肝癌患者和31例其他良性肝病患者作為對照。所有PHC病例通過臨床病理結果診斷,根據(jù)世界衛(wèi)生組織分級體系對腫瘤細胞分化程度進行評估,根據(jù)TNM分期體系判斷腫瘤分期;肝硬化由組織學檢查或門靜脈高壓癥的臨床表現(xiàn)診斷;病毒性肝炎包括乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)感染由病毒檢測結果診斷;轉移性肝癌的診斷是通過采用TNM分期系統(tǒng)對病史中有明確診斷的患者進行評估得出;良性肝病包括酒精或藥物引起的肝損傷、脂肪肝和肝血管瘤。本項研究方案內容已獲我院倫理委員會批準,所有受試者均已簽署書面知情同意。PHC患者(n=148)的男女比例為95/53,年齡(48.77±7.98)歲,健康志愿者(n=100)的男女比例為70/30,年齡(51.33±8.34)歲,肝硬化患者(n=35)的男女比例為24/11,年齡(51.27±9.14)歲,病毒性肝炎患者(n=75)的男女比例為47/28,年齡(49.86±9.31)歲,轉移性肝癌患者(n=30)的男女比例為21/9,年齡(50.16±9.02)歲,其他良性肝病患者(n=31)的男女比例為19/12,年齡(49.56±8.87)歲。各組受試者年齡、性別比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

    收集所有受試者臨床資料,并行輔助檢查:血常規(guī)、尿常規(guī)、血生化。抽取清晨空腹外周血3.5 mL,于4 ℃離心(3 000×g)20 min,分離血清,-80 ℃保存?zhèn)溆谩E懦龢藴剩?1)患者在1個月內接受華法林或維生素K治療;(2)血樣本受到污染或含有沉淀等不明物質;(3)樣本量不足以進行檢測。

    二、研究方法

    采用PTN酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒(eBioscience,美國)、GP73 ELISA試劑盒(上海研謹生物科技有限公司,中國)分別檢測血清PTN、GP73濃度,450 nm波長酶標儀測定OD值,根據(jù)標品吸光度值繪制線性回歸曲線,利用曲線方程帶入樣本吸光度值進行濃度計算。具體方法遵循制造商說明。

    三、統(tǒng)計方法

    結 果

    一、各組血清PTN表達水平比較

    PHC患者血清PTN水平為(547.28±79.31)ng/mL,健康志愿者為(291.15±90.53)ng/mL,肝硬化為(388.82±73.37)ng/mL,病毒性肝炎為(363.28±134.55)ng/mL,轉移性肝癌為(424.16±131.29)ng/mL,其他良性肝病為(293.45±98.22)ng/mL,PHC患者血清PTN水平顯著高于健康志愿者和非健康志愿者(P<0.05)。

    二、各組血清GP73表達水平比較

    PHC患者血清GP73水平顯著高于健康志愿者、病毒性肝炎患者和其他良性肝病患者(P<0.05),而明顯低于肝硬化患者和轉移性肝癌患者(P<0.05)。見表1。

    三、PTN、GP73的表達水平與PHC臨床病理特征相關

    在PHC患者中,有肝硬化的PTN水平顯著高于無肝硬化患者;腫瘤直徑>5 cm的PTN水平顯著高于直徑≤5 cm的患者;腫瘤低分化患者的血清PTN顯著高于中、低分化患者;甲胎蛋白(AFP)水平高的患者PTN水平更高;腫瘤轉移患者的血清PTN水平明顯高于無轉移患者;根據(jù)TNM分期,Ⅲ~Ⅳ期患者血清PTN水平顯著高于Ⅰ~Ⅱ期,以上結果的差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。腫瘤低分化PHC患者的GP73水平顯著高于中、低分化患者;AFP高水平患者的GP73水平顯著高于水平低的患者;腫瘤轉移患者的血清GP73水平明顯高于無腫瘤轉移患者;根據(jù)TNM分期,Ⅲ~Ⅳ期患者血清GP73水平顯著高于Ⅰ~Ⅱ期,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

    表1 各組血清GP73表達水平比較

    注:與PHC比較,aP<0.05

    四、PTN與GP73聯(lián)合檢測與PTN、GP73單獨檢測的靈敏度、特異度、準確度比較

    表3所示,PTN與GP73聯(lián)合檢測的靈敏度、特異度、準確度顯著高于PTN、GP73單獨檢測(P<0.05)。PTN、GP73單獨檢測的靈敏度、特異度、準確度相比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。PTN與GP73聯(lián)合檢測的AUC大于PTN或GP73單獨檢測。

    討 論

    目前PTN、GP73與PHC的發(fā)生、發(fā)展機制研究尚未明確。有報道發(fā)現(xiàn),PTN與多種人類癌癥相關,包括乳腺癌、胰腺癌和肺癌等[5]。Du等[6]發(fā)現(xiàn)PTN在癌癥患者血清中表達上調,敏感度為78.4%,特異度為66.7%。本研究發(fā)現(xiàn)與健康和非健康志愿者相比,PHC患者的PTN表達水平顯著升高,且與PHC患者的腫瘤低分化、轉移、大小,AFP水平及TNM分期相關。另外,PTN在診斷PHC中的靈敏度為78.2%,特異度為86.7%,準確度為80.1%,與之前的研究結果類似。

    Yong等[7]通過實驗證實,肝癌組織中的GP73水平高于癌旁組織,且GP73與血管浸潤、TNM分期等病理特征相關。本研究同樣發(fā)現(xiàn),GP73在PHC患者血清中表達升高,且與腫瘤低分化、TNM分期及轉移有關。另外,PTN與GP73聯(lián)合檢測的特異度、敏感度及準確度較高,有可能應用于PHC的早期診斷,并對轉移性肝癌等肝臟疾病發(fā)揮輔助診斷作用。

    表2 PHC患者血清PTN、GP73表達水平比較(±s,ng/mL)

    表3 PTN與GP73聯(lián)合檢測與PTN、GP73單獨檢測的診斷價值比較

    注:表示與PTN和GP73聯(lián)合檢測比較,bP<0.05

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