p38 MAPK信號通路與肝臟疾病關(guān)系的研究進(jìn)展

鄧志華，黃桂柳，覃小珊，黃贊松

(右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，廣西 百色 533000)

p38促分裂原活化的蛋白激酶(mitogen activated protein kinase，MAPK)是一種重要的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，是哺乳動物體內(nèi)廣泛存在的信號通路，其能將細(xì)胞外刺激信號轉(zhuǎn)導(dǎo)至細(xì)胞核內(nèi)，誘導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄并引起一系列病理生理變化。p38 MAPK信號通路對壓力、缺氧、炎癥等刺激敏感，參與炎癥，細(xì)胞生長、分化，細(xì)胞周期以及細(xì)胞凋亡等的進(jìn)程[1]，被認(rèn)為是細(xì)胞信息傳遞的共同通路，在多種疾病中發(fā)揮重要作用。肝臟疾病眾多，常見的有肝炎、肝纖維化、肝硬化、肝癌等，目前尚未找到經(jīng)濟(jì)有效的治療方法，如何預(yù)防及治療這些慢性肝病成為日益嚴(yán)峻的公共衛(wèi)生問題，因此尋找新的肝臟疾病治療靶點具有重要意義。研究發(fā)現(xiàn)，p38 MAPK信號通路的異常表達(dá)與肝炎[2-4]、肝纖維化[5-6]、肝癌[7]等肝臟常見疾病關(guān)系密切，肝炎-肝纖維化-肝硬化-肝癌進(jìn)程中伴隨著p38 MAPK信號通路的改變，且可能是各種抗肝炎、抗肝纖維化及抗肝癌藥物作用的靶點?，F(xiàn)就p38 MAPK信號通路與肝炎、肝纖維化、肝癌發(fā)生發(fā)展及其與抗肝病藥物之間的關(guān)系進(jìn)行綜述。

1 p38 MAPK信號通路

1.1p38 MAPK信號通路組成 MAPK是一組絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，該信號通路在真核生物的進(jìn)化中相對保守，在許多生物過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用，包括細(xì)胞生長、分化、凋亡、炎癥以及對環(huán)境壓力的反應(yīng)等[8-9]。胞外信號調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulated kinase，ERK)、c-Jun氨基端激酶(c-Jun N-terminal kinase，JNK)和p38 MAPK是該信號通路的主要成員，可在各種疾病過程中被激活[10]。p38 MAPK是MAPK家族的關(guān)鍵成員之一，由MAPK、促分裂原活化的蛋白激酶激酶(mitogen-activated protein kinase kinase，MAPKK)和促分裂原活化的蛋白激酶激酶激酶(mitogen-activated protein kinase kinase kinase，MAPKKK)組成[11]。p38 MAPK信號通路轉(zhuǎn)導(dǎo)過程如下：MAPKKK磷酸化激活MAPKK，MAPKK激活后激活MAPK，MAPK雙位點磷酸化，最后激活p38 MAPK，p38 MAPK激活后進(jìn)一步作用于下游因子(如重組人活化轉(zhuǎn)錄因子2、p38調(diào)節(jié)活化蛋白激酶)，從而引起一系列病理生理變化。迄今為止，4種不同基因編碼的p38 MAPK亞型已經(jīng)被識別，p38α(p38)和p38β是研究最多的亞型，兩者有75%的同源性，且在大部分組織中表達(dá)，p38α在肝臟中表達(dá)水平較高，提示p38 MAPK的異?；罨赡芘c肝臟疾病有關(guān)[12]。p38γ和p38δ亞型有70%的同源性，與p38α有60%的同源性，也被認(rèn)為是p38 MAPK的替代品[13]。

1.2p38 MAPK信號通路功能 p38 MAPK是p38信號通路的樞紐，位于細(xì)胞質(zhì)中，被激活后迅速轉(zhuǎn)運到細(xì)胞核內(nèi)，作用于相應(yīng)靶位。當(dāng)受紫外線、氧化應(yīng)激、DNA損傷劑以及生長因子、細(xì)胞因子等刺激時，蘇氨酸和酪氨酸雙重磷酸化后p38 MAPK被激活，作用于下游靶基因，引起相應(yīng)的生物學(xué)改變[14-15]。p38 MAPK與炎癥、氧化應(yīng)激、纖維化、腫瘤等多種疾病有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，p38 MAPK在肝臟疾病中存在差異表達(dá)，在正常肝組織、慢性乙型肝炎組織、肝硬化組織、癌周肝硬化以及肝癌組織中的表達(dá)水平逐漸升高，且其表達(dá)部位也不一樣，在慢性乙型肝炎及肝硬化組織中表達(dá)于細(xì)胞核，在癌周肝硬化組織及肝癌組織中表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)[16]，提示p38 MAPK與肝炎-肝硬化-肝癌發(fā)展進(jìn)程密切相關(guān)。

2 p38 MAPK信號通路與肝炎

2.1p38 MAPK與乙型病毒性肝炎 肝炎是以肝實質(zhì)變性、壞死為主要特征的肝臟疾病，常見病因有病毒感染、酒精、自身免疫、藥物等，我國以病毒感染為首要原因，其中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染最為常見。HBV感染是肝炎、肝硬化、肝癌的重要原因，全世界有20億HBV感染者，約有2.4億發(fā)展為慢性乙型病毒性肝炎，每年約65萬人死于肝硬化或肝癌[17]。研究發(fā)現(xiàn)，p38 MAPK信號通路在肝臟損傷和肝臟炎癥中起重要作用[2]。在正常肝組織、慢性乙型病毒性肝炎、乙型病毒性肝炎后肝硬化患者中，p38 MAPK的磷酸化逐漸增加[3]。HBV感染可激活p38 MAPK信號通路[18-20]，乙肝表面抗原誘導(dǎo)肝炎的過程可被p38 MAPK信號通路抑制劑SB203580所阻斷[18]。但有研究發(fā)現(xiàn)，在HBV感染早期，HBV誘導(dǎo)p38 MAPK發(fā)生磷酸化，促進(jìn)HBV復(fù)制，而在感染晚期則通過抑制p38 MAPK/信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3信號通路抑制病毒復(fù)制[21]。乙肝核心抗原是HBV重要的核心蛋白，具有較強的免疫原性，與肝臟炎癥程度呈正相關(guān)，其可通過激活p38 MAPK信號通路促進(jìn)肝細(xì)胞及肝癌細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞介素-6，進(jìn)而導(dǎo)致肝炎發(fā)生[22]。重組HBV C抗原通過激活p38 MAPK、蛋白激酶B及ERK信號通路上調(diào)單核-樹突狀細(xì)胞中B7-H1的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)肝臟炎癥的發(fā)生[23]。由此可見，p38 MAPK信號通路與HBV肝炎的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切，其活化可能與肝炎活動呈正相關(guān)。

2.2p38 MAPK與非酒精性脂肪性肝炎 非酒精性脂肪性肝病是指除酒精及其他明確的肝損傷因素外所致的肝代謝異常性疾病，是我國僅次于病毒性肝炎的第二大慢性肝病，主要包括非酒精性肝炎、單純性脂肪肝及脂肪性肝硬化。隨著疾病進(jìn)展，非酒精性脂肪性肝炎患者會出現(xiàn)肝纖維化、肝硬化、肝癌，在肝炎階段盡早干預(yù)對改善患者預(yù)后有一定幫助。多項研究發(fā)現(xiàn)，p38 MAPK信號通路與非酒精性脂肪性肝炎密切相關(guān)，其可能成為非酒精性脂肪性肝炎的治療靶點[4-5,24-25]。1,25-二羥維生素D3通過抑制p38 MAPK信號通路對非酒精性脂肪性肝炎小鼠發(fā)揮保護(hù)作用[4]。胰島素樣生長因子-1通過抑制p38 MAPK信號通路改善肝細(xì)胞脂肪變[5]，在非酒精性脂肪性肝病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。另有研究發(fā)現(xiàn)，激活p38 MAPK信號通路可能具有抗非酒精性脂肪性肝炎的作用[24]。在谷氨酸鈉誘導(dǎo)的非酒精性脂肪性肝炎中，成纖維細(xì)胞生長因子21通過激活Toll受體4/p38 MAPK信號通路抑制下游腫瘤壞死因子-α及白細(xì)胞介素-6的表達(dá)而抑制肝臟炎癥，進(jìn)而發(fā)揮抗非酒精性脂肪性肝病的作用[24]。在高脂飲食誘導(dǎo)小鼠中發(fā)現(xiàn)，激活p38 MAPK信號通路可使胰島素受體底物2表達(dá)減少，進(jìn)而導(dǎo)致脂代謝以及肝胰島素抵抗紊亂[25]。

目前尚未找到有效的抗非酒精性脂肪性肝炎的藥物，研究發(fā)現(xiàn)，p38 MAPK信號通路可能是抗非酒精性脂肪性肝炎藥物作用的靶點[26-28]。疏肝健脾方藥對非酒精性脂肪性肝炎有一定作用，其可能通過下調(diào)肝組織中p38 MAPK信使RNA及蛋白水平改善血脂代謝，減輕脂肪蓄積，抑制炎癥因子，減輕肝細(xì)胞炎癥反應(yīng)[29-30]。高脂飲食刺激腸道p38 MAPK信號通路激活，而副干酪乳桿菌N115及低聚果糖則抑制腸道p38 MAPK磷酸化，降低腸道黏膜損害，減少腸源性脂多糖進(jìn)入機體，減輕肝臟炎癥反應(yīng)，減少肝細(xì)胞脂肪變性和肝臟脂肪沉積，起到防治非酒精性脂肪性肝炎的作用[31]。

2.3p38 MAPK與其他原因?qū)е碌募毙愿螕p傷 急性肝損傷指肝細(xì)胞在較短時間內(nèi)發(fā)生損傷，功能迅速降低或喪失，伴有凝血功能障礙、黃疸等癥狀，是一種可以發(fā)展為肝性腦病的臨床綜合征，患者常無慢性肝病史，可進(jìn)展為急性肝功能衰竭，臨床病死率較高且無特異性治療方案，多由病毒感染、用藥、飲食不當(dāng)、乙醇攝入過量以及放射性元素?fù)p傷等引起。肝細(xì)胞損傷后產(chǎn)生并釋放大量炎癥因子，導(dǎo)致肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)損傷、壞死甚至纖維化[32-34]。p38 MAPK與急性肝損傷有關(guān)。趙文璽[35]構(gòu)建小鼠肝損傷模型發(fā)現(xiàn)，模型組p38 MAPK及其磷酸化形式表達(dá)水平升高。在誘導(dǎo)急性肝衰竭小鼠的過程中，隨著誘導(dǎo)時間的延長及病程進(jìn)展，p38 MAPK磷酸化水平逐漸升高[3]。膿毒癥大鼠肝損傷模型中炎癥因子白細(xì)胞介素-1β、腫瘤壞死因子-α及肝功能損害標(biāo)志物丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶的表達(dá)水平均升高，而使用p38 MAPK抑制劑SB203580抑制p38 MAPK信號通路后，以上因子的表達(dá)水平均降低[36]。王策[37]也發(fā)現(xiàn)，慢性間歇性缺氧在導(dǎo)致肝損傷的同時也可活化p38 MAPK信號通路，阻滯p38 MAPK信號通路后，肝損傷程度減輕。沉默自噬相關(guān)蛋白7后，p38 MAPK和核因子κB(nuclear factor-kappa B，NF-κB)信號通路激活，進(jìn)而增強了刀豆蛋白誘導(dǎo)的急性肝炎反應(yīng)[38]。以上研究提示，p38 MAPK與急性肝損傷的發(fā)生有關(guān)，其可能促進(jìn)急性肝損傷的發(fā)生發(fā)展。也有研究認(rèn)為，p38 MAPK在急性肝損傷中發(fā)揮保護(hù)作用，花青素通過激活p38 MAPK信號通路減輕脂肪肝的缺血再灌注損傷[39]。p38α缺陷的肝細(xì)胞中，JNK過度活化不足以介導(dǎo)腫瘤壞死因子誘導(dǎo)的肝損傷，然而，肝細(xì)胞中p38α和IκB 激酶2聯(lián)合下調(diào)可導(dǎo)致脂多糖注射后肝功能衰竭，表明p38α與核因子κB通路協(xié)同作用，通過拮抗JNK的激活保護(hù)肝細(xì)胞免受細(xì)胞因子誘導(dǎo)的損傷[40]。

抗肝炎藥物的作用靶點與p38 MAPK信號通路有關(guān)。在D-氨基半乳糖聯(lián)合Pam3CSK4誘導(dǎo)的大鼠急性肝損傷模型中，二甲雙胍起保護(hù)作用，其作用后p-ERK1/2、p-應(yīng)激活化激酶/JNK、p-p38 MAPK表達(dá)水平均降低，提示二甲雙胍減輕肝炎癥反應(yīng)與p38 MAPK信號通路有關(guān)[41]。大黃素作用于暴發(fā)型肝炎小鼠后丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶降低，肝壞死減少，促炎因子及趨化因子表達(dá)水平降低，抑制肝中CD4+及F4/80+細(xì)胞浸潤，p38 MAPK及核因子κB被激活，提示大黃素可預(yù)防急性肝損傷，其可能是通過抑制CD4+和F4/80+浸潤以及激活CD4+T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中p38 MAPK-核因子κB通路發(fā)揮作用[42]。

3 p38 MAPK信號通路與肝纖維化

3.1p38 MAPK信號通路與肝纖維化的關(guān)系 肝纖維化是各種致病因子作用后導(dǎo)致慢性肝損傷及肝臟修復(fù)和愈合的結(jié)果。引起肝纖維化的常見病因有非酒精性脂肪性肝病(40%)、HBV感染(30%)、丙型肝炎病毒感染(15%)以及酒精(11%)[43]。肝纖維化是一種病理狀態(tài)，可進(jìn)展為肝硬化甚至肝癌。肝纖維化不是一個單向進(jìn)行性過程，從原則上來說是可逆的，故若能阻滯肝纖維化階段，則有可能阻斷肝硬化或肝癌的發(fā)生。因此，研究肝纖維化的形成過程并針對其關(guān)鍵過程進(jìn)行干預(yù)有重要意義。p38 MAPK在肝纖維化過程中發(fā)揮重要作用。肝纖維化過程中，p38 MAPK磷酸化水平升高，而在恢復(fù)期逐漸下降[44-45]，抑制p38 MAPK信號通路可改善肝脂質(zhì)沉積、逆轉(zhuǎn)肝纖維化[46-47]。

3.2p38 MAPK信號通路參與肝纖維化的機制 肝纖維化是肝內(nèi)實質(zhì)及非實質(zhì)細(xì)胞在各種致病因素的作用下被激活，從而促進(jìn)基質(zhì)降解、誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生炎癥反應(yīng)、促進(jìn)纖維化發(fā)生，進(jìn)而引發(fā)肝纖維化的發(fā)生發(fā)展，目前肝纖維主要由肝星狀細(xì)胞合成，故認(rèn)為肝星狀細(xì)胞的活化與增殖在肝纖維化中起關(guān)鍵作用，抑制肝星狀細(xì)胞活化與增殖或促進(jìn)其凋亡則是阻止肝纖維化發(fā)生發(fā)展的一個重要策略。Parsons等[48]發(fā)現(xiàn)，在肝纖維化進(jìn)程中ERK、JNK及p38 MAPK可調(diào)節(jié)肝星狀細(xì)胞的活化。吳凌康等[49]也發(fā)現(xiàn)，肝星狀細(xì)胞活化程度越高，p38 MAPK磷酸化程度越高，而阻斷p38 MAPK信號通路后肝星形細(xì)胞活化程度降低。轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)激活肝星狀細(xì)胞是肝纖維化的關(guān)鍵步驟，而TGF-β1激活肝星狀細(xì)胞與p38 MAPK及ERK MAPK通路有關(guān)[50]。以上研究提示，p38 MAPK信號通路可促進(jìn)肝纖維化進(jìn)程，可能通過促進(jìn)肝星狀細(xì)胞激活實現(xiàn)，故抑制p38 MAPK信號通路是治療肝纖維化的一個方向。

3.3p38 MAPK是抗肝纖維化藥物作用的靶點 目前尚未找到能有效逆轉(zhuǎn)肝纖維化的藥物。多種藥物有逆轉(zhuǎn)肝纖維化進(jìn)程的作用，且作用機制與p38 MAPK信號通路相關(guān)。大黃酸作用于四氯化碳誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化模型后，大黃酸組丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、層粘連蛋白、Ⅲ型前膠原氨端肽、TGF-β1及p38 MAPK的水平降低，提示大黃酸的抗肝纖維化作用可能通過抑制p38 MAPK信號通路實現(xiàn)[51]。槲皮素有護(hù)肝、抗炎及抗纖維化作用。研究發(fā)現(xiàn)，p38 MAPK和p-p38 MAPK在四氯化碳誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠的肝組織中表達(dá)增加，而槲皮素作用后p38 MAPK及p-p38 MAPK的表達(dá)均減少[2]。Gu等[52]研究發(fā)現(xiàn)，肝纖維化組大鼠p-p38 MAPK的表達(dá)水平升高，而薯蕷皂苷可抑制肝星狀細(xì)胞活化，并減輕大鼠肝纖維化程度，同時抑制p38 MAPK磷酸化，使用p38 MAPK抑制劑SB203580抑制p38 MAPK信號通路后發(fā)現(xiàn)，肝纖維化相關(guān)指標(biāo)表達(dá)水平降低，提示p38 MAPK信號通路與肝纖維化發(fā)生有關(guān)，且薯蕷皂苷的抗肝纖維化作用可能通過p38 MAPK信號通路實現(xiàn)。?；撬峥赡苁峭ㄟ^上調(diào)TGF-β1表達(dá)，激活p38 MAPK-JNK-胱天蛋白酶9/8/3信號通路促進(jìn)肝星狀細(xì)胞凋亡[53]。以上研究提示，p38 MAPK信號通路不僅與肝纖維化的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，可能還是抗肝纖維化藥物作用的靶點，在抗肝纖維化藥物研究中有良好的前景。

4 p38 MAPK信號通路與肝癌

肝細(xì)胞癌是肝癌的主要類型，世界范圍內(nèi)每年約有100萬患者死于肝癌，其中約一半發(fā)生在中國，目前尚不完全了解肝癌發(fā)生的細(xì)胞及分子機制，也未找到高效的藥物[54-56]。研究顯示，p38 MAPK參與了腫瘤的進(jìn)展過程，包括細(xì)胞增殖和遷移[57]、凋亡[58]、生存和血管生成[59]等。此外，p38 MAPK也與肝癌密切相關(guān)，參與了肝癌細(xì)胞增殖、遷移、侵襲、轉(zhuǎn)移、自噬、凋亡、耐藥等。

4.1p38 MAPK與肝癌發(fā)生有關(guān) p38α MAPK可作為腫瘤啟動子或抑制因子發(fā)揮作用。有學(xué)者認(rèn)為p38α MAPK是作為腫瘤啟動子發(fā)揮作用的，因為p38α MAPK的表達(dá)及活性在肝癌細(xì)胞中明顯增強[60]。在二乙基亞硝胺食用水法誘發(fā)Wistar大鼠肝癌的過程中，p38 MAPK磷酸化水平在0～9周時升高，至14、16周時降低，18周時升高，20周時又下降[6]。趙軍艷等[7]研究發(fā)現(xiàn)，肝癌組織中p38 MAPK的表達(dá)水平高于肝硬化組織，其在肝癌組織中的表達(dá)與患者性別、年齡、腫瘤直徑、有無轉(zhuǎn)移及分化程度無明顯關(guān)系。魏小勇和饒榮生[61]也發(fā)現(xiàn)，肝癌組織中p38 MAPK的表達(dá)水平高于非癌組織，其與年齡、性別、病理分型、腫瘤大小等臨床病理特征無相關(guān)性，但與甲胎蛋白值、有無癌栓等相關(guān)，與分化程度呈負(fù)相關(guān)，與血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)呈正相關(guān)，梁佳等[62]的研究也支持此結(jié)論。但有研究發(fā)現(xiàn)，活化的p38 MAPK誘導(dǎo)p16和p14/p19表達(dá)，其與p53-p21級聯(lián)反應(yīng)共同引起生長停滯和衰老，起到腫瘤抑制作用[63]。小鼠肝細(xì)胞中p38α的缺失促進(jìn)N-亞硝基二乙胺誘導(dǎo)的肝細(xì)胞癌，促進(jìn)JNK/c-Jun途徑的激活，增強肝癌細(xì)胞增殖[64-65]。在人肝癌組織中，p38 MAPK的活性明顯低于鄰近肝組織，且與腫瘤大小呈負(fù)相關(guān)，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，p38 MAPK活性的降低可能是細(xì)胞凋亡阻抗的原因，從而導(dǎo)致肝癌細(xì)胞無限制生長[1]。此外，p38α MAPK通路的靶點熱激蛋白27的磷酸化與人肝癌大小、侵襲、腫瘤分期呈負(fù)相關(guān)[66]。與此相反，另一研究顯示，p38 MAPK磷酸化與腫瘤大小及低存活率呈正相關(guān)[67]。以上研究表明，p38 MAPK在肝癌的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，但其作為啟動子還是抑制因子起作用尚未明確，不同的研究結(jié)果不同，造成這種矛盾的原因考慮與組織和腫瘤的發(fā)生階段有關(guān)，但可以肯定的是p38 MAPK與肝癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，且與肝癌患者預(yù)后相關(guān)，未來還需要更大的肝癌樣本以分析p38 MAPK信號通路在肝癌進(jìn)展中的作用。

4.2p38 MAPK參與肝癌多種病理生理過程 細(xì)胞增殖是腫瘤細(xì)胞的重要惡性生物學(xué)行為，不受控制的肝細(xì)胞增殖對肝癌的發(fā)展很重要。MAPK信號通路是調(diào)節(jié)細(xì)胞存活、增殖及應(yīng)激反應(yīng)的因子，與多種腫瘤的凋亡級聯(lián)反應(yīng)有關(guān)。有研究認(rèn)為，p38 MAPK可增強細(xì)胞增殖，而另有研究認(rèn)為p38 MAPK可抑制腫瘤增殖[68-71]。Zhao等[72]報道，甲基CPG結(jié)合蛋白2通過活化ERK1/2及抑制p38 MAPK的表達(dá)促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖，提示激活p38 MAPK可抑制肝癌細(xì)胞的增殖。葛根素能抑制肝癌SMMC7721細(xì)胞的增殖，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，激活MAPK信號通路(p38、JNK、ERK1/2發(fā)生磷酸化)，提示葛根素抗肝癌作用機制與p38 MAPK信號通路的激活有關(guān)[73]。芳樟醇通過誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞周期阻滯，抑制細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，促進(jìn)ERK、JNK及p38 MAPK磷酸化，提示芳樟醇的抗肝癌作用與MAPK活化相關(guān)[74]。由以上研究發(fā)現(xiàn)，p38 MAPK信號通路與肝癌細(xì)胞增殖、凋亡等關(guān)系密切，該信號通路的激活可能抑制肝癌細(xì)胞增殖、促進(jìn)凋亡，激活p38 MAPK信號通路可能是治療肝癌的有效途徑。但也有研究發(fā)現(xiàn)p38 MAPK激活可促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖。熊志勇等[75]通過構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)長鏈非編碼RNA張力蛋白同源缺失性基因假基因1的肝癌細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，肝癌細(xì)胞增殖和細(xì)胞遷移能力降低，p38 MAPK蛋白表達(dá)減少，提示張力蛋白及同源缺失基因假基因1可能通過抑制p38 MAPK通路抑制肝癌細(xì)胞增殖、遷移，同時也說明p38 MAPK的激活可能促進(jìn)了肝癌細(xì)胞的增殖遷移。綜上所述，p38 MAPK信號通路在肝癌細(xì)胞增殖中的作用尚未明確，其激活后對肝癌細(xì)胞增殖的作用亦不明確，需進(jìn)一步研究。

p38 MAPK信號通路與肝癌侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)，在肝癌的侵襲轉(zhuǎn)移中起促進(jìn)作用。干擾素誘導(dǎo)的跨膜蛋白3通過激活p38 MAPK途徑促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶9表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)肝癌侵襲轉(zhuǎn)移[76]。丙型肝炎病毒感染會導(dǎo)致急性及慢性肝炎、肝硬化及肝癌。丙型肝炎病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白3具有丙型肝炎病毒加工所必需的絲氨酸蛋白酶活性及病毒復(fù)制所需的解螺旋酶活性，還具有調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖的作用，提示其可能與丙型肝炎病毒誘導(dǎo)肝癌有關(guān)[77]。有研究顯示，丙型肝炎病毒感染者血清中基質(zhì)金屬蛋白酶9的表達(dá)增加，非結(jié)構(gòu)蛋白3可促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶9的表達(dá)，增強肝癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移，這種促進(jìn)作用可被ERK1/2抑制劑、p38抑制劑阻斷，提示ERK1/2、p38 MAPK與丙型肝炎病毒感染導(dǎo)致的肝癌以及侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)[78]。但在小鼠肝癌模型中發(fā)現(xiàn)，p38α可抑制體內(nèi)肺和肝腫瘤的形成[64,79]。

p38 MAPK也與肝癌化療耐藥有關(guān)。在建立順鉑耐藥細(xì)胞株HepG2/CDDP的過程中，隨著耐藥表型的增加，p38 MAPK磷酸化逐漸增強，同時p38 MAPK抑制劑SB203580可降低HepG2/CDDP細(xì)胞對順鉑的耐藥性、G0/G1期細(xì)胞比例、Bcl-2/Bcl-2相關(guān)X蛋白比值以及減少P-糖蛋白的表達(dá)[80]。而在肝癌組織中，p38 MAPK蛋白表達(dá)水平高于癌旁組織，且其在肝癌組織中的表達(dá)與P-糖蛋白呈正相關(guān)[81]，P-糖蛋白是腫瘤耐藥的關(guān)鍵蛋白，其高表達(dá)提示細(xì)胞耐藥性高。以上研究提示p38 MAPK與肝癌耐藥呈正相關(guān)，抑制其表達(dá)可作為逆轉(zhuǎn)肝癌耐藥性的一種治療方式。

4.3p38 MAPK是中藥抗肝癌的靶點 天然產(chǎn)物是藥物和先導(dǎo)化合物的重要源泉，以天然產(chǎn)物為基礎(chǔ)的新藥研究是世界各國新藥研究的有效途徑之一，在抗肝癌藥物研究中有良好的前景。目前藥物種類繁多，其機制及效果均需進(jìn)一步研究。多項研究證實，中藥抗肝癌作用機制與p38 MAPK信號通路有關(guān)[82-87]。在不同的肝癌細(xì)胞中，p38 MAPK所起的作用不同，大部分文獻(xiàn)報道p38 MAPK通過誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡起作用，但也有報道顯示p38 MAPK起抑制細(xì)胞凋亡的作用，導(dǎo)致研究結(jié)果不一致的原因可能與細(xì)胞種類、細(xì)胞增殖分化狀態(tài)以及應(yīng)激刺激不同有關(guān)。

特勒內(nèi)酯是從天然植物金挖耳中提取的一種桉烷內(nèi)酯類化合物，可誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期阻滯，抑制p38 MAPK信號通路后，特勒內(nèi)酯誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡與細(xì)胞周期阻滯作用減弱，證實其可能通過激活p38 MAPK信號通路起作用[82]。Lin等[83]的研究也發(fā)現(xiàn)，大黃素可抑制細(xì)胞增殖及侵襲，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，可能通過激活p38 MAPK信號通路、抑制ERK/MAPK及蛋白激酶B信號通路起作用。扶正清解方可抑制腫瘤生長，故可作為多種腫瘤的輔助治療用藥。Chen等[84]研究證實，扶正清解方可通過活化p38 MAPK和線粒體依賴性凋亡途徑誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡。從蘆筍中提取的甾體皂苷小百部苷B是一種活性細(xì)胞毒性成分，能抑制癌細(xì)胞的生長和增殖，誘導(dǎo)癌細(xì)胞周期阻滯和凋亡，并伴隨ERK和p38 MAPK的磷酸化，ERK抑制劑PD98059和p38 MAPK抑制劑B203580可消除小百部苷B誘導(dǎo)的細(xì)胞周期阻滯和細(xì)胞凋亡，逆轉(zhuǎn)細(xì)胞周期和凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)，提示小百部苷B可能通過激活ERK和p38 MAPK，導(dǎo)致細(xì)胞周期阻滯和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[85]。烏頭多糖可抑制H22細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，同時還可抑制裸鼠抑制瘤的增殖，促進(jìn)p38 MAPK磷酸化，而總p38表達(dá)無變化，表明烏頭多糖在體內(nèi)外均可抑制腫瘤細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，其機制與p38 MAPK信號通路有關(guān)[86]。以上研究均證實p38 MAPK激活后細(xì)胞凋亡增加，但也有研究認(rèn)為抑制p38信號通路后可增加細(xì)胞凋亡。Lin等[87]研究發(fā)現(xiàn)，非洲防己堿作用于肝癌SMMC7721、HepG2及Hep3B細(xì)胞后可抑制癌細(xì)胞增殖，也可抑制裸鼠移植瘤的增殖，同時發(fā)現(xiàn)細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)因子上皮鈣黏素表達(dá)增加，神經(jīng)鈣黏素、基質(zhì)金屬蛋白酶2、基質(zhì)金屬蛋白酶9表達(dá)下調(diào)，細(xì)胞凋亡相關(guān)因子胱天蛋白酶3、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶蛋白發(fā)生斷裂，Bcl-2相關(guān)死亡啟動子表達(dá)增加，Bcl-2表達(dá)下調(diào)，總ERK1/2及p38 MAPK表達(dá)無變化，但p-ERK1/2及p-p38 MAPK表達(dá)下調(diào)，提示非洲防己堿可通過ERK及p38 MAPK通路影響肝癌的增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移。

5 小 結(jié)

p38 MAPK信號通路是細(xì)胞內(nèi)重要的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑之一，與肝炎、肝纖維化、肝癌發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，但其在不同疾病研究中的作用不一致，在同種疾病中不同研究中的作用也不一致，如p38 MAPK與乙型肝炎的活動呈正相關(guān)，但在非酒精性脂肪性肝炎中，抑制p38 MAPK有保護(hù)作用，也有研究顯示該通路激活后有抗非酒精性脂肪性肝炎的作用[24]；在肝癌中，肝癌組織中p38 MAPK蛋白表達(dá)水平升高，可作為腫瘤啟動子起作用，但也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)其在肝癌中表達(dá)減少，作為腫瘤抑制因子起作用，這可能與細(xì)胞狀態(tài)、疾病類型、刺激類型等多種因素相關(guān)[63]。因此，p38 MAPK與肝臟疾病密切相關(guān)，進(jìn)一步研究其在肝臟疾病中的作用機制以及作用于p38 MAPK信號通路的藥物對肝臟疾病的治療有重要意義。