中藥辣蓼的生物活性實驗研究進(jìn)展

蔡孟成，金永生

(1.海軍軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，上海 200433；2.海軍軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院有機(jī)化學(xué)教研室，上海 200433)

中藥辣蓼來源于蓼科蓼屬植物辣蓼(PolygonumflaccidumMeism)及水蓼(P.hydropiperL.)的全草，主要分布于我國廣東、廣西、四川等地。辣蓼氣溫、味辛，具有祛風(fēng)除濕、散瘀止痛的功效，民間主要用于治療胃腸炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)痛、功能性子宮出血等疾病。辣蓼的化學(xué)成分主要包括有機(jī)酸、黃酮和萜類等[1-2]。隨著現(xiàn)代藥學(xué)研究的深入，辣蓼生物活性及藥理作用的實驗研究也有了豐富的成果，本文對此進(jìn)行綜述，以期為辣蓼的進(jìn)一步開發(fā)提供理論依據(jù)。

1 抗菌作用

辣蓼不同極性有機(jī)溶劑萃取物中，乙酸乙酯部位對大腸桿菌O78(EscherichiacoliO78)有很強(qiáng)的抑制作用[最低抑菌濃度(MIC)為25 g/L]且具有量效關(guān)系[3]。辣蓼70%乙醇提取物對金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)有抗菌活性(MIC=0.782 mg/ml)[4]。辣蓼氯仿、乙酸乙酯、甲醇、皂苷提取物可以抑制奇異變形桿菌(Proteusmirabilis)[5]，MIC分別為30、32.25、40.50和25 μg/ml；辣蓼石油醚提取物對金黃色葡萄球菌的半數(shù)抑制濃度(IC50)為3.69 g/L，辣蓼乙酸乙酯提取物對金黃色葡萄球菌的IC50為0.45 g/L[6]。辣蓼水提物對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)的生長均有抑制作用[7]，其MIC分別為0.25、0.125 和0.062 5 g/ml，且經(jīng)過121 ℃高壓蒸汽滅菌處理后，辣蓼水提物對金黃色葡萄球菌的抑制作用明顯增強(qiáng)，對大腸桿菌與枯草芽孢桿菌的抑制作用略有增強(qiáng)，提示辣蓼中的抗菌物質(zhì)具有較好的熱穩(wěn)定性。此外，辣蓼提取物對耐藥菌有一定作用，辣蓼石油醚提取物對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin resistantStaphylococcusaureus)的IC50為0.84 g/L[6]。綜上，辣蓼提取物具有較好的抗菌活性。有研究表明，辣蓼總提取物中黃酮類、羧酸類化合物含量較高，發(fā)揮抗菌作用的主要活性成分可能是兒茶素、槲皮素和山奈酚[8]。

辣蓼提取物對真菌也有一定的抑制作用。李孫洋等[9]研究發(fā)現(xiàn)，辣蓼丙酮粗提物對水稻紋枯病菌(Rhizoctoniasolani)、茄鏈格孢菌(Alternariasolani)、腐皮鐮刀菌(Fusariumsolani)和香蕉炭疽菌(Colletotrichummusae)的菌絲生長具有抑制作用，在0.01 g/ml的濃度下，對4種真菌菌絲生長的抑制率分別為84.1%、50.3%、59.5%和43.2%。Duraipandiyan等[10]研究發(fā)現(xiàn)，辣蓼的柱層析出物對帚霉屬菌(Scopulariopsissp.)、月彎孢菌(Curvularialunata)、絮狀表皮藻(Epidermophytonfloccosum)、薄荷毛癬菌(Trichophytonmentagrophytes)、紅色毛癬菌(Trichophytonrubrum)、黑曲霉(Aspergillusniger)、灰霉菌(Botrytiscinerea)、稻瘟病菌(Magnaporthegrisea)和猴毛癬菌(Trichophytonsimii)均有抑制作用，其MIC分別為7.81、7.81、7.81、16.62、16.62、31.25、31.25、62.5和125 μg/ml。

2 保護(hù)消化道作用

肖祝華等[11]研究發(fā)現(xiàn)，灌胃給予5 g/kg辣蓼水提物可通過改善腸道黏膜屏障，減輕大腸桿菌腹瀉模型小鼠十二指腸黏膜的損傷。也有報道以8.1 g/kg的辣蓼提取物灌胃可顯著增加胃黏膜損傷模型大鼠胃組織中核因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)的含量，從而減輕胃黏膜損傷[12]。Ayaz等[13]利用幽門結(jié)扎大鼠模型并以阿司匹林誘導(dǎo)胃部潰瘍生成，發(fā)現(xiàn)100 mg/kg的辣蓼甲醇提取物具有保護(hù)胃黏膜和抗?jié)兊淖饔谩？梢?，辣蓼提取物具有減輕胃黏膜損傷的作用，作者推測其機(jī)制可能與其可減少腸道損傷因子、改善腸道菌群、加快損傷細(xì)胞修復(fù)等有關(guān)，起到“驅(qū)邪扶正”的作用。此外，辣蓼對于消化系統(tǒng)疾病也有一定的預(yù)防作用，如牛耳楓與辣蓼在中醫(yī)臨床上常相須為用，現(xiàn)代研究表明，在乙醇引發(fā)大鼠胃黏膜急性損傷前應(yīng)用楓蓼制劑可以減輕黏膜細(xì)胞的損傷，起到一定的保護(hù)作用[14-15]。作者推測，楓蓼合劑可能是通過改善胃部微環(huán)境，加強(qiáng)鹽酸-碳酸氫鹽屏障，起到“扶正抵邪”的作用。

3 抗炎作用

以脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)刺激建立內(nèi)毒素血癥小鼠模型，以200 mg/kg劑量灌胃給予辣蓼正丁醇提取物，可升高小鼠肝組織中溶菌酶的水平，減少腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、干擾素-α、干擾素-γ、白介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-8的釋放和IL-2 mRNA的表達(dá)，從而降低內(nèi)毒素血癥導(dǎo)致的多器官炎性損傷[16-17]。有研究報道以LPS刺激誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞體外炎癥模型，發(fā)現(xiàn)用辣蓼乙酸乙酯提取物與正丁醇提取物進(jìn)行干預(yù)均可改善炎癥反應(yīng)，減少促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8的釋放；辣蓼乙酸乙酯提取物還能促進(jìn)抗炎因子IL-10的生成[18]。綜上，辣蓼提取物在體內(nèi)、體外均具有一定的抗炎作用，不少學(xué)者也對辣蓼提取物促進(jìn)抗炎介質(zhì)釋放與抑制促炎介質(zhì)釋放的機(jī)制進(jìn)行了研究。灌胃給予5 g/kg的辣蓼水提物可降低小鼠腸道組織中TNF-α、IL-1β的含量與轉(zhuǎn)化生長因子-1β、表皮生長因子受體、Smad3及Smad7 mRNA的表達(dá)，推測其抗炎與黏膜修復(fù)機(jī)制可能與干預(yù)TGF-β/Smads信號轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)[11]。500 mg/kg辣蓼水提物可明顯抑制2,4,6-三硝基苯磺酸誘導(dǎo)的大鼠腸道炎癥模型中誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)與環(huán)氧合酶2(COX-2)的表達(dá)，其抗炎作用與核因子-κB(NF-κB)通路密切相關(guān)[19]。另有研究發(fā)現(xiàn)，灌胃給予200 mg/kg的辣蓼正丁醇提取物可改善脂多糖誘導(dǎo)的小鼠炎癥模型中促炎因子的釋放，其機(jī)制與抑制絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPKs)信號通路中JNK、ERK和c-JUN的磷酸化有關(guān)[20]。TGF-β/Smads信號通路是TGF-β發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)的主要通路，TGF-β可經(jīng)由TRAF6-TAK1-JNK/p38或RTK/Ras/ERK激活MAPKs信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，NF-κB為MAPKs通路下游部分。作者推測辣蓼的抗炎作用主要是通過調(diào)控MAPKs通路實現(xiàn)的。

4 抗氧化作用

辣蓼提取物具有抗氧化作用，其活性成分可能是山柰酚-3-O-β-D-半乳糖苷、槲皮素-3-O-β-半乳糖苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素、沒食子酸和鞣花酸等。 其中槲皮素、沒食子酸和鞣花酸的抗氧化能力較強(qiáng)， 烯醇式結(jié)構(gòu)越多的化合物表現(xiàn)出的抗氧化作用越強(qiáng)[21-22]。 辣蓼不同部位提取物抗氧化活性亦不同。 辣蓼乙醇提取物可清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH)自由基， 清除能力大小分別為辣蓼花(IC50=0.075 1 mg/ml)>辣蓼葉(IC50=0.112 5 mg/ml)>辣蓼莖(IC50=0.140 3 mg/ml)>辣蓼根(IC50=0.203 4 mg/ml)；清除羥自由基的能力大小分別為辣蓼葉(IC50=0.001 7 mg/ml)>辣蓼莖(IC50=0.001 8 mg/ml)>辣蓼根(IC50=0.002 7 mg/ml)>辣蓼花(IC50=0.003 7 mg/ml)[23]。辣蓼中提取的β-谷甾醇對DPPH、2,2′-聯(lián)氮-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸[diammonium 2,2′-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate)，ABTS]和過氧化氫(H2O2)導(dǎo)致氧化應(yīng)激反應(yīng)抗氧化作用的IC50值分別為140、120、280 μg/ml[24]。分別將辣蓼葉中的精油和辣蓼花中的精油與DPPH、ABTS、H2O2進(jìn)行體外自由基清除實驗，辣蓼葉中精油的IC50值分別為20、180和60 μg/ml，辣蓼花中精油的IC50值分別為200、45和50 μg/ml[25]。辣蓼提取物也具有內(nèi)源性抗氧化作用。灌胃給予200 mg/kg辣蓼提取物正丁醇部分可以提高小鼠肝臟的抗氧化防御酶促體系的活性[16-17]，表現(xiàn)為超氧化物歧化酶總活力、谷胱甘肽過氧化物酶、谷胱甘肽水平的增加與丙二醛、髓過氧化物酶、活性氧含量的降低。綜上所述，辣蓼提取物對外源性氧化與內(nèi)源性氧化均有抑制作用。

5 其他作用

辣蓼葉與辣蓼花的精油及分離出的β-谷甾醇具有抗膽堿酯酶活性，經(jīng)其處理的轉(zhuǎn)基因動物在記憶力、自發(fā)交替行為和運(yùn)動協(xié)調(diào)方面表現(xiàn)出逐漸改善的趨勢[24]。辣蓼葉中的精油、皂苷類成分、氯仿提取物可抑制尿素酶[5]。辣蓼的氯仿、乙酸乙酯、甲醇及皂苷提取物具有抗血管新生及抗腫瘤活性，但同時辣蓼的氯仿、乙酸乙酯、皂苷提取物具有細(xì)胞毒作用[13]。辣蓼醇提物具有細(xì)胞免疫作用，其對HepG2.2.15細(xì)胞具有明顯毒性作用，且對乙型肝炎表面抗原與乙型肝炎e抗原的分泌有抑制作用[26-27]。Miyazawa等[28]研究發(fā)現(xiàn)，從辣蓼中分離出的化合物(2R,3R)-(+)-taxifolin為酪氨酸酶抑制劑。有研究表明，辣蓼對噬菌體f2的抑制作用明顯，且24 h內(nèi)抑制率達(dá)100%[29]。 此外，辣蓼具有抗乙酰膽堿酯酶活性，牛耳楓與辣蓼提取物對氯化鋇引起的離體豚鼠回腸痙攣具有顯著抑制作用[14]，提示其具有鈣離子拮抗作用。

6 小 結(jié)

隨著中藥現(xiàn)代化進(jìn)程的推進(jìn)，許多療效確切的名優(yōu)中藥的二次開發(fā)研究進(jìn)展迅速。我國辣蓼分布廣泛，資源豐富，臨床上也有所應(yīng)用，效果比較顯著，但對其藥理機(jī)制方面的研究很少。而且辣蓼化學(xué)成分復(fù)雜，目前已報道了其含有60多種化學(xué)成分[1-2]，但總體上對其化學(xué)成分的研究還較少，而且?guī)缀鯖]有化學(xué)成分與活性之間關(guān)系的研究。因此應(yīng)當(dāng)進(jìn)一步加強(qiáng)辣蓼化學(xué)成分及有效成分的研究，進(jìn)一步闡明藥物活性物質(zhì)基礎(chǔ)，并依據(jù)復(fù)方的組方、拆方理論，研制效果確切、不良反應(yīng)小、能廣泛應(yīng)用于臨床的新藥。