雌激素受體及其與乳腺癌相關(guān)性研究進(jìn)展

高世勇，呂鳳，許東旭

（哈爾濱商業(yè)大學(xué)藥物工程技術(shù)研究中心，黑龍江 哈爾濱 150076）

雌激素信號在人類乳腺癌的發(fā)生發(fā)展中至關(guān)重要。在過去幾十年中，人們致力于研究雌激素信號通路在乳腺癌中的潛在作用機(jī)制，并發(fā)展了抗雌激素療法。研究發(fā)現(xiàn)，雌激素的多種活性由雌激素受體（estrogen receptor，ER）介導(dǎo)。雌激素能夠上調(diào)c-Myc 和cyclinD1 的表達(dá)和功能，激活細(xì)胞周期蛋白E-Cdk2 復(fù)合物，并加快乳腺上皮細(xì)胞從G1 期到S 期的細(xì)胞周期進(jìn)程[1]。因此普遍認(rèn)為ER 能夠促進(jìn)雌激素靶基因的表達(dá)，導(dǎo)致雌激素刺激的乳腺癌的發(fā)生發(fā)展。當(dāng)前有2 種已鑒定的ER——ERα 和ERβ，它們都是刺激靶基因轉(zhuǎn)錄的配體激活的轉(zhuǎn)錄因子[2]。但是，并不是所有由ER 介導(dǎo)的活性都是通過對基因轉(zhuǎn)錄的直接作用來實現(xiàn)的。研究發(fā)現(xiàn)，還存在另一種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，其涉及細(xì)胞質(zhì)信號蛋白、生長因子受體和其他膜啟動的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，被稱為非經(jīng)典信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。研究表明，G 蛋白偶聯(lián)ER（G protein-coupled estrogen receptor，GPER/GPR30）介導(dǎo)了對雌激素的快速、非基因組反應(yīng)[3]。乳腺癌細(xì)胞中非基因組雌激素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)也已被證實可促進(jìn)細(xì)胞增殖和存活?？焖俚姆腔蚪M雌激素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與乳腺癌細(xì)胞中雌激素誘導(dǎo)的增殖有關(guān)。因此，ER 與乳腺癌具有相關(guān)性。本文對ER 結(jié)構(gòu)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑及ER 與乳腺癌相關(guān)性研究進(jìn)展進(jìn)行重點介紹，以期為設(shè)計新穎的乳腺癌治療候選藥物提供思路。

1 雌激素簡介

雌激素是一類多效性類固醇，在多種組織生長和分化的過程中具有調(diào)節(jié)作用。雌激素家族包括雌酮（estrone，E1），雌二醇（17β-estradiol，E2）和雌三醇（estriol，E3）。E1 于1929 年首次從妊娠馬尿中以結(jié)晶狀態(tài)被提制出來[4]。E1 通常由特殊的腹部脂肪細(xì)胞產(chǎn)生，自然絕經(jīng)的女性體內(nèi)的雌激素主要為E1。在懷孕期間，女性體內(nèi)的E1 含量較高，此外，腎上腺皮質(zhì)中E1 含量也較高。E2 于1935 年從妊娠馬尿中首次被提取。有研究表明E2 主要產(chǎn)生于乳房、大腦和脂肪組織，由細(xì)胞色素P450 酶將睪丸激素和雄烯二酮轉(zhuǎn)化為E2。E3 主要在妊娠期間由硫酸16-羥基脫氫表雄酮、17β-E2 或睪丸激素芳香化形成的E2 產(chǎn)生，而E1 則由雄烯二酮芳香化產(chǎn)生[5]。雌激素周期性的生成與分泌對細(xì)胞生長和分化及人類第二特征的發(fā)育具有至關(guān)重要的作用。雌激素對女性的乳房、子宮內(nèi)膜的發(fā)育及月經(jīng)具有調(diào)節(jié)作用。E2 對女性生殖器官的形成以及骨骼、心血管和神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育均具有調(diào)控作用，且對胎兒大腦的形成與發(fā)育具有重要影響。同時，雌激素可促進(jìn)男性精子的成熟[6]。

2 雌激素受體及其結(jié)構(gòu)特征

ER 是配體依賴的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，屬于核受體超家族成員[7]，雌激素可通過與ER 特異性結(jié)合發(fā)揮作用。ER 作為一種古老的蛋白質(zhì)，在所有脊椎動物及部分無脊椎動物體內(nèi)均有表達(dá)[8]。ER 位于細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核，根據(jù)ER 所在位置的不同可分為兩大類：一類是位于細(xì)胞核內(nèi)的ER，其被稱為經(jīng)典的核受體，包括ERα 和ERβ，它們可通過對特異性靶基因的轉(zhuǎn)錄的調(diào)控發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)；第二類為位于質(zhì)膜的膜性受體，包括經(jīng)典核受體的膜性成分及G 蛋白偶聯(lián)受體家族的GPR30（GPER-1）、Gαq-ER 和質(zhì)膜相關(guān)的ER（ER-X），它們可通過第二信使調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄，間接地發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。

2.1 ERα 和ERβ

1986 年，Greene 等[9]克隆出雌激素受體，這是第一個雌激素結(jié)合蛋白受體，現(xiàn)在被稱為ERα。1996 年，Kuiper 等[10]發(fā)現(xiàn)并克隆出一種新的ER，并將其命名為ERβ。ERα 和ERβ 基因位于不同的染色體上，分別位于6q25.1 和14q23.2 上。ERα 與ERβ 具有相同的結(jié)構(gòu)體系，兩者均由3 個獨立但相互作用的功能結(jié)構(gòu)域組成：NH2末端域（NTD）、DNA 結(jié)合域（DBD）和COOH 末端配體結(jié)合域（LBD）。除在NTD 外，這2 個受體具有高度的氨基酸序列同源性。NTD 包含一個與靶基因轉(zhuǎn)錄激活有關(guān)且不依賴配體的激活功能（AF1）域，NTD在ERα 和ERβ 之間只有16%的相似性。而DBD在ERα 與ERβ 之間的相似性極高，具有97%的氨基酸同一性LBD 在ERα 與ERβ 之間具有59%的氨基酸序列同一性，但兩個亞型的LBD 僅在結(jié)構(gòu)上有細(xì)微差別，而這微小的結(jié)構(gòu)差異使得其所結(jié)合配體有所不同。LBD 中含有激素依賴的激活功能區(qū)2（activation function 2，AF2），其對配體結(jié)合和受體二聚化具有重要意義。共激活因子NCOA1、NCOA2、NCOA3、CREBBP、PPARBP、P68 和SRA 等與共抑制因子NCOR1、NRIP 等的蛋白質(zhì)可以與配體結(jié)合的ERα 或ERβ 相互作用，影響ER 的激活或激活ER 抑制基因[11]。

ERα 與ERβ 通過募集不同的轉(zhuǎn)錄共調(diào)節(jié)因子（CoR）調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄，這些CoR 對基因的活化或抑制發(fā)揮著重要作用。但是這些CoR 中只有不到50%是ERα 與ERβ 所共有的，表明ERα 與ERβ 之間的差異可能有利于兩種受體亞型發(fā)揮不同作用[12]。對激動劑E2與拮抗劑他莫昔芬（Tam）、雷洛昔芬（Ral）、氟維司群（ICI 182780，ICI）分別與ERα 結(jié)合所形成的復(fù)合物進(jìn)行的比較分析表明，ER 配體之間存在顯著差異，這與它們的生物學(xué)活性有關(guān)。特別是具有E2 依賴性的核ERα 與E2 形成的復(fù)合物和Tam、Ral 或ICI 與E2 結(jié)合形成的復(fù)合物不同且更為復(fù)雜，Tam、Ral 或ICI 與E2 形成的復(fù)合物彼此之間又存在顯著差異[13]。

2.2 GPR30

GPR30 是20 世紀(jì)90 年代發(fā)現(xiàn)的一種ER，但是直到2005 年才被確定為一種新的ER。最初，人們觀察到雌激素可刺激乳腺癌MCF-7 細(xì)胞（ERα 陽性）產(chǎn)生cAMP，于是將這種現(xiàn)象歸因于ERα 的活化。但雌激素的刺激并不能使MDA-MB-231 細(xì)胞（ERα陰性）產(chǎn)生cAMP，所以人們認(rèn)為GPR30 是與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)的非核ER 蛋白?，F(xiàn)已知產(chǎn)生這種現(xiàn)象的原因是MCF-7 細(xì)胞表達(dá)GPR30，而MDA-MB-231 細(xì)胞不表達(dá)。GPR30 既與ERα 和ERβ 有很大的不同，又與其有一定的相似性。例如GPR30 在分子結(jié)構(gòu)、配體特異性、作用方式以及介導(dǎo)效應(yīng)等方面與ERα 和ERβ均有較大的差異。但是，上述受體都能與E2結(jié)合，這可能是因為它們的配體結(jié)構(gòu)域相同。GPR30 是一種G 蛋白偶聯(lián)的七跨膜受體，位于7p22.3 染色體上，由3 個外顯子組成。不同物種間的GPR30 蛋白結(jié)構(gòu)具有差異性，其中人的GPR30 包含375 個氨基酸，理論相對分子質(zhì)量約為41 000。有報道稱，GPR30定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，并且存在于質(zhì)膜中[14-15]。與其他G 蛋白偶聯(lián)受體相同，GPR30 的N 末端位于細(xì)胞外，而羧基末端位于細(xì)胞內(nèi)。配體可能與N-末端結(jié)構(gòu)域締合以激活受體。GPR30 對E2 具有高親和力，GPR30 與E2 結(jié)合可迅速而短暫地激活許多細(xì)胞內(nèi)信號通路。雌激素激活該受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑導(dǎo)致cAMP 產(chǎn)生增加、細(xì)胞內(nèi)鈣和磷脂酰肌醇3，4，5-三磷酸酯的合成增加、表皮生長因子受體（EGFR）反式激活以及諸如胞內(nèi)磷脂酰肌醇激酶（PI3K）-蛋白激酶B（Akt）和細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2（ERK1/2）、絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）等信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的下游活化。E2 刺激細(xì)胞后，在快速非基因組信號傳遞中，GPR30 起主要作用。

2.3 ER-X 和Gαq-ER

ER-X 既不屬于經(jīng)典的核受體，也不是核受體的變異體，它與ERα 有相同的DBD 區(qū)域，但它不是ERα 的剪切體，可能是由一種新的基因轉(zhuǎn)錄而來。高表達(dá)的ER-X 見于野生型與ERα基因敲除鼠、出生1 ～ 7 d 后的轉(zhuǎn)基因阿爾茨海默病模型鼠的新皮質(zhì)、下丘腦及小腦，缺血性腦損傷或可誘導(dǎo)ER-X 的表達(dá)。ER-X 可能具有引導(dǎo)腦自分泌和旁分泌的功能，有保護(hù)神經(jīng)元的作用。在穩(wěn)態(tài)條件下，ER-X 主要存在于核內(nèi)，并且在功能域、結(jié)合親和力和配體特異性方面與ERα 和ERβ 存在差異。E2 作用于乳腺癌細(xì)胞產(chǎn)生的某些反應(yīng)，如雌激素對不含雌激素共有應(yīng)答元件（ERE）細(xì)胞的調(diào)節(jié)能力，以及雌激素的快速作用，可以通過ER-X 來解釋。雖然雌激素快速反應(yīng)似乎與經(jīng)由核內(nèi)受體的直接轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)不一致，但是ER-X 可能與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑偶聯(lián)，與生長因子的快速活化有關(guān)[16]。用全細(xì)胞記錄方法在GPR30敲除豚鼠的弓狀核實驗中發(fā)現(xiàn)了一種依賴Gαq 蛋白的膜性受體[17]，其不同于其他膜性受體而是一種調(diào)節(jié)B 型γ-氨基丁酸受體（GABAB受體）去敏感化的ER，主要通過Gαq 蛋白激活磷脂酶C 升高環(huán)磷酸腺苷（cAMP）、調(diào)控蛋白激酶A（PKA），并最終改變基因的轉(zhuǎn)錄活性[18]。這是2 種新的ER，目前對ER-X 和Gαq-ER 的研究并不多，有待進(jìn)一步探索。

3 雌激素受體的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑

3.1 ERα 和ERβ 的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑

ER 介導(dǎo)2 種不同類型的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，通常稱為基因組途徑和非基因組途徑。ERα 和ERβ 是控制各種生理過程的核受體超家族的成員，而它們的調(diào)控作用通常被認(rèn)為是通過調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄來完成的[19]。ER 能夠利用多種機(jī)制激活或抑制其靶基因的轉(zhuǎn)錄。這些機(jī)制包括：1）配體同受體結(jié)合與DNA 在雌激素應(yīng)答元件上的直接相互作用，然后募集轉(zhuǎn)錄共調(diào)節(jié)因子或介體復(fù)合物[20]。2）與配體結(jié)合的ER 與其他轉(zhuǎn)錄因子如激活蛋白-1（AP-1）、特異性蛋白1（Sp1）或核因子κB（NF-κB）之間相互作用[21-22]。許多雌激素反應(yīng)性基因的啟動子可能只包含ERE 的一半位點序列，而不是完整的ERE，與配體結(jié)合的ERα 或ERβ 可以與AP-1、Sp1 或NF-κB 形成蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)復(fù)合物，然后與ERα 或ERβ 的反應(yīng)元件結(jié)合在調(diào)控基因的啟動子中。3）通過隔離常見轉(zhuǎn)錄成分間接調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄[23]。4）通過MAPK/ERK 途徑直接磷酸化和活化未結(jié)合的ER 受體[24]。此外，ER 通過這些機(jī)制調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄的能力似乎是細(xì)胞類型特異性的，這可能是由于每種細(xì)胞類型中可用的轉(zhuǎn)錄共調(diào)節(jié)因子的補(bǔ)體差異所致[25-26]。同樣，轉(zhuǎn)錄調(diào)控取決于配體的性質(zhì)，各種天然和合成的選擇性ER 調(diào)節(jié)劑（selective estrogen receptor modulator，SERM）通過這些機(jī)制充當(dāng)ER 的激動劑或拮抗劑。

3.2 GPR30 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑

GPR30 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑為非基因組信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)。非基因組信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，在雌激素刺激后幾分鐘之內(nèi)即可在細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜上啟動，又被稱為快速信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。快速信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑由與質(zhì)膜相關(guān)的雌激素結(jié)合蛋白介導(dǎo)，并通過各種細(xì)胞質(zhì)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白，如通過生長因子受體和G 蛋白偶聯(lián)受體信號通路轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白[27]。此外，在子宮和卵巢細(xì)胞以及骨、血管內(nèi)皮細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)了這種雌激素信號，表明快速、非基因組的雌激素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)參與了各種生理和病理活動[28]。目前已證實乳腺癌細(xì)胞中的非基因組信號轉(zhuǎn)導(dǎo)對乳腺癌細(xì)胞具有增殖促進(jìn)作用[29]。

E2 可與膜受體GPR30 結(jié)合，導(dǎo)致乳腺癌細(xì)胞系中三聚體G 蛋白活化，活化的三聚體G 蛋白中的α 亞基誘導(dǎo)腺苷酸環(huán)化酶活化，并使α5β1 整聯(lián)蛋白活化，從而釋放細(xì)胞內(nèi)金屬蛋白酶以及結(jié)合肝素的EGF 樣生長因子（HB-EGF）[30]。HB-EGF 可引起EGFR 的反式激活，激活ERK1/2 MAPK 和Akt 途徑。GPR30/EGFR 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)介導(dǎo)乳腺癌患者癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAF）中細(xì)胞周期調(diào)控基因的表達(dá)，表明乳腺癌細(xì)胞與CAF 之間存在功能性相互作用。此外，GPR30 信號級聯(lián)反應(yīng)的激活觸發(fā)了低氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）和依賴性血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）表達(dá)，表明GPR30 參與乳腺癌的血管生成和進(jìn)一步發(fā)展。另一方面，Broselid 等[31]認(rèn)為，GPR30 可以通過與膜相關(guān)鳥苷酸激酶和蛋白激酶A-錨定蛋白5形成膜復(fù)合物來抑制cAMP 的產(chǎn)生，同時，乳腺癌細(xì)胞內(nèi)的鈣離子水平也會發(fā)生改變，表明E2 可與膜受體GPR30 結(jié)合，激活相關(guān)通路，從而促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的增殖，同時，這些途徑的激活也可能激活與腫瘤細(xì)胞存活有關(guān)的基因，使腫瘤細(xì)胞的活性增強(qiáng)。在ERα 陰性且GPR30 陽性的SKBR-3 細(xì)胞中，E2 通過激活GPR30/EGFR/MAPK 信號級聯(lián)反應(yīng)誘導(dǎo)c-Fos（參與細(xì)胞增殖、分化的轉(zhuǎn)錄因子）的表達(dá)。MAPK 可激活轉(zhuǎn)錄因子，如血清反應(yīng)因子（SRF）。由GPR30 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)引起的cAMP 的增加，可能會激活環(huán)磷腺苷效應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB）。這些因子進(jìn)而激活轉(zhuǎn)錄因子（例如c-Fos、FosB、c-Jun、EGR1、ATF3、C/EBPd 和NR4A2）的表達(dá)[32]，進(jìn)而促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖。

4 雌激素受體與乳腺癌的相關(guān)性

4.1 ERα 與乳腺癌的相關(guān)性

ERα 在正常乳腺上皮中的表達(dá)率不超過10%，但在乳腺腫瘤中約占50% ～ 80%[33]。ERα 敲除小鼠實驗已經(jīng)證明了ERα 在乳腺發(fā)育中具有促進(jìn)乳腺腫瘤形成的作用[34]。人類ERα基因的轉(zhuǎn)錄至少發(fā)生于2 個不同的啟動子，其中遠(yuǎn)端啟動子（啟動子B）位于近端啟動子（啟動子A）上游2 kb 處。來自2 個啟動子的所得轉(zhuǎn)錄僅在5'端的非編碼區(qū)不同，且2 種類型的ERαmRNA 均編碼相同的蛋白質(zhì)?？侲RαmRNA 的表達(dá)水平和啟動子B 的轉(zhuǎn)錄水平與人原發(fā)性乳腺癌中ERα 蛋白的含量密切相關(guān)。其中啟動子B 會導(dǎo)致ERα 蛋白的過度表達(dá)，表明啟動子B在調(diào)控人乳腺癌ERα基因表達(dá)中起著促進(jìn)作用[35]。研究人員還發(fā)現(xiàn)了一種新型的反式作用因子，即ER啟動子B 相關(guān)因子1（ERBF-1），ERBF-1 可降低ERα 陽性乳腺癌細(xì)胞系中啟動子B 的轉(zhuǎn)錄活性。盡管對乳腺癌發(fā)展的機(jī)制了解甚少，但ERα基因功能的喪失是抵抗激素的最重要步驟之一。最近的研究報道，在人類乳腺癌細(xì)胞系中，ERα基因啟動子A和外顯子1 的甲基化與ERα基因表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。體外實驗中ERα基因啟動子的特異性甲基化直接降低了ERα基因的轉(zhuǎn)錄水平[36]。因此促進(jìn)啟動子的甲基化，從而使ERα基因表達(dá)降低，可能是研制新型抗雌激素藥物的一個新方向。目前尚無對導(dǎo)致腫瘤組織中ERα蛋白過度表達(dá)的啟動子B區(qū)甲基化的研究。

4.2 ERβ 與乳腺癌的相關(guān)性

ERβ 的表達(dá)與人類乳腺腫瘤中細(xì)胞增殖標(biāo)志物Ki67 和細(xì)胞周期蛋白A 升高有關(guān)[37]。ERβ 的水平在正常乳腺組織中較高，并且隨著腫瘤從浸潤前腫瘤發(fā)展為腫瘤而降低。ERβ 的表達(dá)與孕激素受體表達(dá)升高和乳腺腫瘤細(xì)胞的增殖具有很強(qiáng)的關(guān)聯(lián)性。接受Tam 治療的女性中，ERβ 蛋白的表達(dá)升高使腫瘤細(xì)胞的增殖率明顯下降[38]。這些研究表明，ERβ可能起到抑癌作用，而ERβ 的丟失會促進(jìn)乳腺癌的發(fā)生。然而，由于乳腺腫瘤同時表達(dá)ERα 和ERβ，因此ERβ 在乳腺癌中的作用尚不清楚。目前僅在含有ERα 和ERβ 的MCF-7 細(xì)胞中研究了ERβ 對細(xì)胞增殖和腫瘤形成的影響。

4.3 GPR30 與乳腺癌的相關(guān)性

有研究認(rèn)為，GPR30 可能通過誘導(dǎo)ER 陰性乳腺癌細(xì)胞停滯于G2/M 期，G2 檢查點調(diào)節(jié)細(xì)胞周期蛋白B 的下調(diào)以及誘導(dǎo)線粒體相關(guān)凋亡來抑制癌細(xì)胞的生長。此外，GPR30 激動劑G1 可誘導(dǎo)由GPR30/EGFR 信號介導(dǎo)的ERK1/2 的持續(xù)激活和核易位[39]。而三陰性乳腺癌常常過度表達(dá)EGFR 和GPR30，提示可能是E2 通過刺激GPR30 引起乳腺癌細(xì)胞的增殖。有研究認(rèn)為，可通過降低GPR30 的表達(dá)來抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖[40]。Marjon 等[41]采用GPR30基因敲除小鼠和正常小鼠構(gòu)建了乳腺癌模型，發(fā)現(xiàn)在第12 ～ 13 周時，敲除GPR30基因的小鼠乳腺癌腫塊顯著小于對照組小鼠，且其乳腺癌細(xì)胞增殖率及轉(zhuǎn)移率亦顯著低于對照組小鼠。

5 雌激素受體調(diào)節(jié)劑

SERM 是一類新的治療劑，可用于預(yù)防和治療子宮癌和乳腺癌。其對ER 具有高親和力，但對任何其他類固醇激素受體沒有特異性親和力。目前，常用的SERM 有Tam、Ral、巴多昔芬（BZA）等。SERM 會刺激骨骼、肝臟和心血管系統(tǒng)等產(chǎn)生雌激素作用，但會阻斷乳房和子宮等其他組織器官的雌激素作用。SERM 具有下調(diào)ER 的能力，ER 在乳房和子宮中均具有重要意義[42-43]。Tam 是一種非甾體三苯乙烯衍生物，對不同的DNA 調(diào)控元件（例如特定的雌激素反應(yīng)元件、Sp1 位點和AP-1 位點）起部分或全部激動劑的作用。NH2末端AF1 可影響Tam 的激動劑活性。另一方面，AF1 和AF2 兩者的協(xié)同作用對于雌激素誘導(dǎo)的受體活性具有較大影響。但是，目前Tam 的作用機(jī)制尚未完全明確。Tam 能夠使乳腺癌患者復(fù)發(fā)率降低50%，但同時其具有顯著的不良反應(yīng)，其中包括造成患者死亡率上升。因此，研究人員開發(fā)了基于Tam 非甾體三苯乙烯結(jié)構(gòu)的托瑞米芬、屈洛昔芬和伊多昔芬之類的藥物，但其療效不及Tam。Ral 為一種具有苯并噻吩核心的多羥基化非甾體化合物，是一種抗雌激素藥。該藥可顯著降低患ER 陽性乳腺癌的風(fēng)險，用于預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松癥和乳腺癌。基于非甾體吲哚的雌激素激動劑/拮抗劑BZA，對ERα 和ERβ 均顯示出親和力，而對ERα 的親和力稍高，且在任一受體上均是E2 的競爭性抑制劑。BZA 不會促進(jìn)乳腺細(xì)胞的增殖，在E2 的存在下也不會促進(jìn)乳腺細(xì)胞的增殖，并可抑制乳腺癌細(xì)胞對E2 劑量依賴性的增殖。因此，與Ral 相似，BZA 在乳腺組織中可能是拮抗劑[44]。

Tam 可延長乳腺癌患者生存期，降低復(fù)發(fā)率，但其具有較大毒副作用，且患者易對Tam 產(chǎn)生耐藥性。因此，研究人員開發(fā)了基于Tam 的非甾體三苯乙烯結(jié)構(gòu)的托瑞米芬（Tor）、屈洛昔芬（Drl）等藥物[45]。然而，這些藥物對一般患者與耐藥患者的療效與Tam 相比均無明顯優(yōu)勢[46-47]，與Tam 相比，Tor 具有相似功效，但激動劑的活性較低。此后，研究人員還開發(fā)了具有獨特結(jié)構(gòu)的第2 代和第3 代SERM[“固定環(huán)”苯并噻吩衍生物，如Ral、阿佐昔芬（Arz）和ERA-923]。Ral 能夠顯著降低患ER陽性乳腺癌的風(fēng)險，該藥的不良反應(yīng)包括引起潮熱和腿抽筋等[48]。EM-800 為第4 代SERM，對乳腺癌和子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖具有極強(qiáng)的抑制作用[49]。

香豆素類SERM 可產(chǎn)生與一般SERM 類似的作用。香豆素廣泛存在于植物體內(nèi)，數(shù)十年來，研究人員已通過合成技術(shù)合成了許多香豆素衍生物，如呋喃香豆素、吡喃香豆素和香豆素磺酸鹽等，它們具有廣泛的生物活性，如抗腫瘤和抗HIV 作用，以及興奮神經(jīng)中樞、抗菌、抗炎、抗凝等作用[50]。香豆素類SERM 與一般的SERM（如Tam）的結(jié)構(gòu)特征有所不同，可能誘導(dǎo)ER 發(fā)生不同的構(gòu)象變化，導(dǎo)致不同的輔因子募集；此外，香豆素類SERM 不通過ERE 激活基因，而通過以高親和力結(jié)合ERα達(dá)到有效拮抗雌激素的作用。香豆素類SERM 通過抑制白細(xì)胞介素（IL）-6 和粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）基因的表達(dá)，在ERα 陽性的乳腺癌細(xì)胞中發(fā)揮有效的抗雌激素作用[51]。

6 雌激素受體拮抗劑

在臨床研究中，防止雌激素合成和發(fā)揮作用是治療乳腺癌的有效手段。ER 拮抗劑即具有防止雌激素合成和發(fā)揮作用的功效。ER 拮抗劑是治療絕經(jīng)后婦女激素依賴性乳腺腫瘤的有效途徑[52]。原位合成導(dǎo)致的高水平雌激素與內(nèi)分泌依賴性組織中腫瘤的生長有關(guān)。雌激素僅在周圍組織中形成，在此類組織中與雌激素合成有關(guān)的途徑有2 種，即芳香化酶（AR）途徑和E1 硫酸酯酶途徑（E1-STS）。AR途徑是通過AR 復(fù)合物將雄激素前體、雄烯二酮（主要由腎上腺皮質(zhì)分泌）轉(zhuǎn)化為E1，而E1-STS 是通過硫基轉(zhuǎn)移酶將E1（通過AR 途徑形成）轉(zhuǎn)化為硫酸E1（E1S）[53]。在乳腺腫瘤中，硫酸酯酶的活性高于AR，導(dǎo)致預(yù)后不良。E1-STS 通路被認(rèn)為是雌激素形成的主要來源，導(dǎo)致ER 表達(dá)陽性的乳腺腫瘤患者對高效AR 抑制劑的應(yīng)答率低。此外，研究表明，抑制類固醇生物合成級聯(lián)酶的內(nèi)分泌治療可能是治療該疾病的一種可能途徑[54]。

7 結(jié)語

雌激素通過ER 在各種生理過程中發(fā)揮重要作用，例如雌激素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)異常會促使癌癥及一些代謝性疾病的發(fā)生。通常，在癌癥早期ERα 及GPR30的表達(dá)會增加，并充當(dāng)腫瘤啟動子。相反，ERβ 的存在可抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖，因此，ERβ 是潛在的癌癥治療靶標(biāo)。但是，目前已報道了一些關(guān)于ERβ 在癌癥中的表達(dá)與功能相矛盾的發(fā)現(xiàn)，這種差異可能反映了患者群體的異質(zhì)性。因此，需要進(jìn)一步探索ERα、GPR30 和ERβ 在癌癥中的作用機(jī)制。同時，ER-X 和Gαq-ER 的作用機(jī)制尚不明確，有待進(jìn)一步研究，以期為進(jìn)一步研制乳腺癌治療藥物提供新的思路和方向。雖然目前已有多種乳腺癌治療藥物，但耐藥性的產(chǎn)生是臨床上面臨的另一個巨大挑戰(zhàn)，設(shè)計與發(fā)現(xiàn)新穎的具有選擇性抗雌激素潛能的候選藥物仍是該領(lǐng)域的研究熱點。