溫補(bǔ)腎陽(yáng)方藥治療腎陽(yáng)虛證作用機(jī)制分子生物學(xué)研究進(jìn)展

張巍嵐，譚從娥

(陜西中醫(yī)藥大學(xué)，陜西 咸陽(yáng) 712046)

腎陽(yáng)乃人體元陽(yáng)，對(duì)生命活動(dòng)發(fā)揮著至關(guān)重要作用。腎陽(yáng)衰，諸病生，表現(xiàn)則如：腰膝酸軟，困乏無(wú)力，小便頻數(shù)，男子遺精、陽(yáng)痿、不育；女子月經(jīng)量少、閉經(jīng)、不育，以及其他由于腎陽(yáng)虛證導(dǎo)致的疾病。中醫(yī)以腎藏元陽(yáng)為先天之本、腎主藏精、腎主生殖為理論基礎(chǔ)，在臟腑學(xué)說(shuō)的指導(dǎo)下，通過(guò)對(duì)溫腎方藥合理的配伍以及具體藥性的研究對(duì)腎陽(yáng)虛患者的治療取得了理想療效。21 世紀(jì)初，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展成熟，更多的分子學(xué)技術(shù)被應(yīng)用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，而以分子生物學(xué)為媒介的研究也被應(yīng)用于中醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，更多的學(xué)者開(kāi)始關(guān)注中藥、方劑功效發(fā)揮的現(xiàn)代分子生物學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)。現(xiàn)從神經(jīng)遞質(zhì)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、免疫學(xué)相關(guān)、生殖系統(tǒng)四個(gè)方面就溫補(bǔ)腎陽(yáng)方藥對(duì)腎陽(yáng)虛證作用機(jī)制的分子生物學(xué)研究進(jìn)展做以詳細(xì)綜述。

1 溫補(bǔ)腎陽(yáng)方藥與腎陽(yáng)虛患者神經(jīng)遞質(zhì)關(guān)系

1.1 單胺、核苷酸類(lèi) 吳勇等[1]利用“腎氣丸”及其拆方對(duì)腎陽(yáng)虛大鼠灌胃，并測(cè)定DA、5-HT 的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)灌胃后的模型組大鼠體內(nèi)DA、5-HT 含量明顯降低，間接說(shuō)明此類(lèi)溫腎中藥對(duì)腎陽(yáng)虛證患者體內(nèi)的單胺物質(zhì)有一定調(diào)節(jié)作用。雒曉燕等[2]研究發(fā)現(xiàn)腎陽(yáng)虛患者腎上腺素、去甲腎上腺素、促腎上腺素激素水平與健康人相比均存在較大差異，并提出溫腎中藥對(duì)腎陽(yáng)虛患者體內(nèi)單胺類(lèi)物質(zhì)產(chǎn)生影響。陳津巖等[3]通過(guò)建模跟蹤觀察脾腎兩虛大鼠體內(nèi)環(huán)核苷酸水平的動(dòng)態(tài)變化，發(fā)現(xiàn)“右歸丸”能夠調(diào)整大鼠體內(nèi)CAMP與OGMP 比值，使其回歸正常水平，從而為臨床該類(lèi)疾病治療提供科學(xué)依據(jù)。

1.2 氨基酸、肽類(lèi)物質(zhì) 王曉彤等[4]通過(guò)構(gòu)建腎陽(yáng)虛大鼠模型，以具有補(bǔ)火助陽(yáng)功效的桂皮醛對(duì)大鼠灌胃，通過(guò)PCR 法測(cè)定γ 氨基丁酸受體mRNA 的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)桂皮醛對(duì)腎陽(yáng)虛大鼠體內(nèi)GABAa 有影響，并發(fā)現(xiàn)通過(guò)該mRNA 的表達(dá)可以對(duì)腎陽(yáng)虛小鼠發(fā)揮鎮(zhèn)靜作用。劉明平等[5]采用“養(yǎng)壽丹”干預(yù)阿爾茨海默病腎陽(yáng)虛大鼠模型，發(fā)現(xiàn)該方藥可以對(duì)腎陽(yáng)虛大鼠有關(guān)基因啟動(dòng)因子AchE 含量進(jìn)行調(diào)控，使異常增高的AchE含量降低，從而推斷“養(yǎng)壽丹”的溫腎陽(yáng)、壯筋骨作用與調(diào)控體蛋白基因啟動(dòng)因子IL-Ip、AchE 有關(guān)。研究還發(fā)現(xiàn)溫腎類(lèi)方藥制劑可增強(qiáng)腎陽(yáng)虛型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)甘氨酸受體mRNA 的表達(dá)，林海雄等[6]通過(guò)腺嘌呤皮下注射構(gòu)建腎陽(yáng)虛大鼠模型后發(fā)現(xiàn)可以增強(qiáng) Glyc RmRNA 的表達(dá)。岳珍珍等[7]發(fā)現(xiàn)神經(jīng)肽CGRP與（脾）腎陽(yáng)虛導(dǎo)致的腸易激有關(guān)，并發(fā)現(xiàn)以“四神丸”為基礎(chǔ)加減方的溫腎中藥通過(guò)降低內(nèi)臟高敏感性對(duì)腎陽(yáng)虛患者的IBS 有干預(yù)作用。韓麗等[8]通過(guò)酶聯(lián)免疫法研究（脾）腎陽(yáng)虛患者體內(nèi)P 物質(zhì)水平，通過(guò)對(duì)比治療后發(fā)現(xiàn)研究組P 物質(zhì)、血管活性腸肽明顯較高（P＜0.05），說(shuō)明“固本潤(rùn)腸膏”對(duì)該型患者的便秘具有良好效果。還有學(xué)者實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)（脾）腎陽(yáng)虛型泄瀉大鼠體內(nèi)膽囊收縮素（CCK）含量較低，以“四神丸”為基礎(chǔ)方的溫腎中藥可提高該證型大鼠血清CCK 的含量，并證明溫腎中藥對(duì)脾腎兩虛型腹瀉大鼠體內(nèi)CCK 有正向調(diào)節(jié)作用。

2 溫補(bǔ)腎陽(yáng)方藥與腎陽(yáng)虛患者內(nèi)分泌系統(tǒng)關(guān)系

2.1 甲狀腺激素 腎陽(yáng)虛患者由于體內(nèi)游離T4較低，TSH 較高，機(jī)體多表現(xiàn)為代謝減慢、功能低下。通過(guò)溫腎方藥對(duì)其調(diào)節(jié)，在臨床上多獲良效。李海洋等[9]運(yùn)用溫補(bǔ)（脾）腎法，對(duì)（脾）腎陽(yáng)虛型甲減患者的臨床表現(xiàn)進(jìn)行對(duì)比治療，發(fā)現(xiàn)治療組TSH、FT3、FT4、TT3、TT4、TPOAb、TGAb 等指標(biāo)明顯優(yōu)于對(duì)照組，表明溫補(bǔ)（脾）腎法在治療（脾）腎陽(yáng)虛型甲減患者療效顯著。也有研究者通過(guò)以氫化可的松構(gòu)建腎陽(yáng)虛大鼠模型，探究了“右歸丸”作用下腎陽(yáng)虛大鼠下丘腦—垂體—甲狀腺軸的作用機(jī)制，發(fā)現(xiàn)“右歸丸”通過(guò)調(diào)節(jié)大鼠體內(nèi)TBH、TSH、T3、T4 的水平，可使垂體—甲狀腺激素升高，進(jìn)而說(shuō)明“右歸丸”可以改善腎陽(yáng)虛甲減大鼠的癥狀。

2.2 糖皮質(zhì)激素、促腎上腺皮質(zhì)激素 王粉俠等[10]以糖皮質(zhì)激素缺乏作為腎陽(yáng)虛大鼠模型，并予以“首烏補(bǔ)腎膠囊”治療，觀察胸腺、睪丸和附睪指數(shù)后發(fā)現(xiàn)該藥對(duì)由于GC 缺乏導(dǎo)致的腎陽(yáng)虛小鼠有補(bǔ)腎壯陽(yáng)作用。鐘瑜等[11]通過(guò)反相-聚合酶鏈反應(yīng)和蛋白免疫法研究了淫羊藿對(duì)腎陽(yáng)虛GR 的受體表達(dá)，發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷不同劑量的使用，對(duì)干預(yù)后GR 的mRNA 和蛋白表達(dá)增加，證明該中藥可通過(guò)GR 的調(diào)節(jié)達(dá)到對(duì)腎陽(yáng)虛證的治療目的。鄭小偉等[12]運(yùn)用基因表達(dá)技術(shù)，采用RT-PCR 方法檢測(cè)不同劑量組“腎氣丸”對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠垂體ACTH 的基因表達(dá)影響，結(jié)果顯示各組垂體ACTH均升高，說(shuō)明“腎氣丸”可以上調(diào)大鼠ACTH 的基因表達(dá)。鄭小偉等[13]研究了“二仙湯”對(duì)腎陽(yáng)虛大鼠ACTH 的影響，發(fā)現(xiàn)隨著時(shí)間延長(zhǎng)，“二仙湯”組大鼠體內(nèi)ACTH 的含量逐漸上升，說(shuō)明了該補(bǔ)腎方可以促進(jìn)腎陽(yáng)虛證ACTH 的表達(dá)。其他還有一些內(nèi)分泌激素如胰島素、抗利尿激素通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)溫腎類(lèi)方藥對(duì)腎陽(yáng)虛證的疾病有臨床治療作用。

3 溫補(bǔ)腎陽(yáng)方藥與腎陽(yáng)虛患者免疫系統(tǒng)關(guān)系

3.1 白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子 殷銀霞等[14]通過(guò)對(duì)（脾）腎陽(yáng)虛型結(jié)腸炎大鼠血清的實(shí)驗(yàn)研究，發(fā)現(xiàn)炎癥因子IL-1 在該型結(jié)腸炎大鼠的發(fā)病機(jī)制占有重要影響，并通過(guò)補(bǔ)腎健脾法來(lái)調(diào)節(jié)大鼠體內(nèi)IL-1 的水平。姬培震等[15]通過(guò)正常、對(duì)照、模型組不同劑量的對(duì)比，發(fā)現(xiàn)“附子理中湯”可以降低（脾）腎陽(yáng)虛型黏膜炎癥大鼠血清中的IL-1β 含量，改善和修復(fù)大鼠黏膜受損狀況。李榮榮等[16]采用酶聯(lián)免疫吸附法，觀察不同劑量“麻黃附子細(xì)辛湯”對(duì)腎陽(yáng)虛小鼠的影響，發(fā)現(xiàn)該方總體可降低小鼠血清TNF-α 水平，從而達(dá)到減輕腎陽(yáng)虛證小鼠免疫炎性反應(yīng)的作用。朱小區(qū)等[17]通過(guò)臨床研究發(fā)現(xiàn)，溫腎升陽(yáng)藥可以降低腎陽(yáng)虛型肝病患者體內(nèi)的TNF-α 的表達(dá)水平，從而改善酒精性脂肪肝患者的臨床癥狀。

3.2 干擾素及補(bǔ)體

吳勇等[18]通過(guò)腎氣丸對(duì)腎陽(yáng)虛大鼠灌胃，運(yùn)用ELESA 法測(cè)定大鼠相關(guān)細(xì)胞因子，通過(guò)對(duì)照正常組，發(fā)現(xiàn)“腎氣丸”組大鼠IFN-γ含量有所增加，說(shuō)明以“腎氣丸”為主的溫腎方藥可提高大鼠血漿中IFN-γ 的含量。黃玉婷[19]通過(guò)對(duì)（肺）腎陽(yáng)虛型鼻鼽患者臨床跟蹤調(diào)查，發(fā)現(xiàn)該類(lèi)患者體內(nèi)IFN-γ 水平較低，并設(shè)置不同對(duì)照組觀察后發(fā)現(xiàn)，具有補(bǔ)腎溫陽(yáng)療效的“攝涕止鼽方”可以提高患者體內(nèi)IFN-γ 水平，改善患者鼻鼽癥狀。唐百冬等[20]運(yùn)用補(bǔ)腎宣肺方治療腎陽(yáng)虛型哮喘，發(fā)現(xiàn)該方對(duì)腎陽(yáng)虛證導(dǎo)致的下降補(bǔ)體細(xì)胞CD4+、CD8+有顯著上升作用，同時(shí)可使IgE 細(xì)胞下降，提高腎陽(yáng)虛患者免疫力而發(fā)揮治療作用。

4 溫補(bǔ)腎陽(yáng)方藥與腎陽(yáng)虛患者生殖系統(tǒng)關(guān)系

4.1 雄、雌性激素 宋麗晶等[21]通過(guò)對(duì)補(bǔ)腎丸的相關(guān)藥理研究發(fā)現(xiàn)，該方對(duì)氫化可的松誘導(dǎo)的腎陽(yáng)虛大鼠生殖系統(tǒng)有明顯改善?？娠@著增加大鼠體內(nèi)血清睪酮含量，發(fā)揮該方補(bǔ)腎壯陽(yáng)的作用。包宇等[22]運(yùn)用RTPCR 以及免疫組化方法，通過(guò)對(duì)不同組別的腎陽(yáng)虛大鼠使用不同劑量淫羊藿后雄激素受體基因中mRNA 和蛋白質(zhì)的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷可調(diào)節(jié)該證型大鼠體內(nèi)睪酮及相關(guān)雄性激素的下降，從而調(diào)節(jié)腎陽(yáng)虛證。葛旻垚[23]運(yùn)用“右歸丸”對(duì)腎陽(yáng)虛證更年期男性進(jìn)行對(duì)比治療，結(jié)果顯示，“右歸丸”組患者服用該藥后體內(nèi)雄激素水平明顯上升，提示“右歸丸”可以提升男性體內(nèi)雄激素水平。張啟龍[24]研究發(fā)現(xiàn)腎陽(yáng)虛陽(yáng)痿患者的血清TT、FT、TSI 值均低于健康對(duì)照組，而經(jīng)過(guò)溫補(bǔ)腎陽(yáng)方藥治療后，其血清TT、FT、TSI 水平得以明顯提升。呂圭源等[25]觀察不同組分下雌二醇（E2）致腎陽(yáng)虛小鼠的臨床表現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)溫腎方藥組小鼠體內(nèi)ALT、AST 水平降低，而腎、睪丸、精囊腺與臟器指數(shù)增加，說(shuō)明溫腎方藥對(duì)小鼠體內(nèi)雌激素的影響作用。夏陽(yáng)等[26]通過(guò)SP 免疫組化檢測(cè)技術(shù)，對(duì)30 例腎陽(yáng)虛型患者的子宮內(nèi)膜激素進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)運(yùn)用“補(bǔ)沖丸”可明顯上調(diào)腎陽(yáng)虛型黃體功能障礙患者的雌、孕激素，改善子宮內(nèi)膜狀況，增加懷孕概率。張帆等[27]復(fù)制了圍絕經(jīng)期的腎陽(yáng)虛大鼠模型，探討氫化可的松誘導(dǎo)絕經(jīng)期間大鼠下丘腦—垂體—性腺軸激素水平，通過(guò)年齡分組對(duì)照，發(fā)現(xiàn)腎陽(yáng)虛型大鼠下丘腦—性腺軸水平呈下降趨勢(shì)，而運(yùn)用溫腎中藥則能在很大程度上改善這一激素分泌水平。

4.2 FSH、LH、PCOS 性激素 秦奇瑞等[28]對(duì)子宮發(fā)育不良的腎陽(yáng)虛大鼠進(jìn)行不同分組，通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究其血清中FSH、LH 含量后發(fā)現(xiàn)育宮湯對(duì)于子宮發(fā)育不良的該型大鼠FSH、LH 影響水平較對(duì)照組明顯。說(shuō)明育宮湯可明顯改善大鼠血清FSH、LH 水平。李瀟[29]通過(guò)對(duì)脾腎陽(yáng)虛致卵巢早衰患者，觀察發(fā)現(xiàn)其體內(nèi)FSH、LH 水平較正常人低。通過(guò)對(duì)80 例該型患者分組研究后發(fā)現(xiàn)“二仙湯”組患者體內(nèi)FSH、LH 水平上調(diào)。仇華[30]通過(guò)使用放射免疫法對(duì)30 例PCOS 患者治療前后體內(nèi)FSH、LH 水平測(cè)定后發(fā)現(xiàn)，運(yùn)用“溫腎調(diào)經(jīng)湯”合氯米芬治療PCOS 患者的排卵率、妊娠率有所提高，說(shuō)明溫腎方對(duì)腎陽(yáng)虛型PCOS 患者的臨床作用顯著。朱黎明[31]運(yùn)用調(diào)精種玉湯對(duì)腎陽(yáng)虛型PCOS 患者治療后的排卵率、性激素等指標(biāo)進(jìn)行觀察后發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，治療組排卵率明顯提高，說(shuō)明“調(diào)經(jīng)種玉湯”可以改善腎陽(yáng)虛患者PCOS排卵障礙。蔣軍等[32]通過(guò)臨床實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)“加味巴仙湯”對(duì)腎陽(yáng)虛證PCOS 的RAS 有影響，并通過(guò)對(duì)比評(píng)估不同治療組治療前后性激素六項(xiàng)的水平，發(fā)現(xiàn)“加味巴仙湯”可以有效促進(jìn)腎陽(yáng)虛P(yáng)COS 患者周期排卵，大大提高了妊娠成功率。馬世玉等[33]運(yùn)用“調(diào)經(jīng)毓麟通管湯”治療腎陽(yáng)虛型PCOS 患者，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，治療組相比于對(duì)照組其血清生殖激素水平及子宮內(nèi)膜厚度恢復(fù)均基本正常，PCOS 患者妊娠率同比提高。

5 結(jié)語(yǔ)

通過(guò)對(duì)溫補(bǔ)腎陽(yáng)方藥作用機(jī)制研究的綜合分析，發(fā)現(xiàn)其作用機(jī)制廣泛，涉及神經(jīng)遞質(zhì)、激素、介質(zhì)、細(xì)胞因子、基因表達(dá)等多個(gè)方面。中醫(yī)講究整體調(diào)控，腎陽(yáng)虛證由于臨床表現(xiàn)的多樣性，必然會(huì)存在機(jī)體多種相關(guān)因子的異常表達(dá)。隨著現(xiàn)代組織學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，特別是細(xì)胞、組織、基因技術(shù)在中醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用以及中醫(yī)、藥理學(xué)研究的進(jìn)一步提高，方藥對(duì)腎陽(yáng)虛的分子生物學(xué)研究會(huì)更加全面。中醫(yī)證候、方藥與分子生物學(xué)的結(jié)合將會(huì)為現(xiàn)代中醫(yī)藥研究提供新的方向，引領(lǐng)更多臨床研究者廣泛涉獵，必將為臨床診療提供更加廣闊的思路。