復合微生態(tài)制劑對生長豬生長性能、腹瀉率、血清生化和免疫指標的影響

屈圣富 楊加明 高鳳仙

（湖南農(nóng)業(yè)大學動物科學技術學院，湖南長沙410128）

近年隨著畜禽養(yǎng)殖業(yè)快速發(fā)展，抗生素因具有提高養(yǎng)殖場的經(jīng)濟效益，作為飼料添加劑被廣泛使用[1]。但是抗生素的大量使用誘發(fā)許多問題：加大畜禽糞便的回收利用的難度、加劇致病菌的耐藥性以及抗生素在畜產(chǎn)品中殘留等[2-3]。“減抗”、“替抗”已成為當今趨勢，尋找一款綠色、安全的新型添飼料加劑成為人們所追求的目標。益生菌是一種活菌制劑，因具有不易產(chǎn)生耐藥性、綠色、安全等特點受到人們廣泛關注。Qiao 等[4]研究發(fā)現(xiàn)，嗜酸乳桿菌可以取代抗生素提高斷奶仔豬豬的ADG，同時降低其料肉比。史自濤等[5]研究發(fā)現(xiàn)，與抗生素組和對照組相比，糞腸球菌組斷奶仔豬的免疫器官發(fā)育更好，腹瀉率更低。祝永才等[6]研究發(fā)現(xiàn)，復合微生態(tài)制劑（釀酒酵母菌和枯草芽孢桿菌）可以刺激斷奶仔豬腸道免疫球蛋白的分泌，增強機體的體液免疫能力。但是益生菌在豬方面研究主要集中在斷奶仔豬，在生長豬研究不多。因此，本試驗以生長豬為研究對象，探究在飼料中添加不同濃度復合微生態(tài)制劑（枯草芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、糞腸球菌）對生長豬生長性能、腹瀉率、血清生化和免疫指標影響。旨在為復合微生態(tài)制劑在生長豬上的應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

復合微生態(tài)制劑購自湖南某公司，含有質量比為1∶1∶1的糞腸球菌、枯草芽孢桿菌和嗜酸乳桿菌，且每種類型菌的活菌數(shù)≥1×109cfu/g。試驗飼糧參照NRC（2012），其營養(yǎng)水平見表1。

表1 飼料配方及營養(yǎng)水平（風干基礎）

1.2 試驗動物及飼養(yǎng)管理

選用健康的杜×長×大三元生長豬160 頭，體重（33.03±0.28）kg，隨機分成4 個組，每個組4 個重復，每個重復10 頭豬。Ⅰ組為對照組，飼喂基礎日糧；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別飼喂再添加100、200、300 mg/kg的復合微生態(tài)制劑的試驗日糧。

在湖南省衡陽市某豬場進行試驗，所有試驗豬在同一棟豬舍，欄舍條件一致，采光和通風良好，自由采食，飼養(yǎng)管理按照其豬場飼養(yǎng)管理制度進行。試驗預試期7 d，正式試驗期28 d。

1.3 指標測定

1.3.1 生長性能和腹瀉率

試驗期內，每天記錄采食量。于試驗期第1 d和28 d，對生長豬進行空腹稱重，并結合每天記錄采食量和試驗天數(shù)，計算平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）、料重比（F/G）。試驗期內每天8：00 觀察生長豬的糞便情況，并根據(jù)史自濤等[5]方法對糞便進行評分。當糞便評分在2 分或以上時，認定生長豬發(fā)生腹瀉，試驗結束后計算各組的腹瀉率：

腹瀉率（%）=腹瀉頭數(shù)/（每組豬頭數(shù)×試驗總天數(shù)）×100

1.3.2 血清生化和免疫指標

于試驗的第28 d，每個重復隨機選取1 頭豬前腔靜脈采血10 ml，傾斜采血管，靜置30 min 后，于3 000 r/min 離心10 min，吸取上清液1～1.5 ml，注入1.5 ml 離心管中，標記組別日期，置于-20 ℃冰箱保存。采用全自動生化儀邁瑞B(yǎng)S-420分析測定試驗豬血清中總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、堿性磷酸酶（ALP）、谷草轉氨酶（AST）的含量，試劑盒購自中生北控股份有限公司，按照說明操作；采用半自動生化分析儀A6 測定血清中免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）的含量，試劑盒均購自北京華英生物技術研究所，按照說明操作。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

應用SPSS 21 軟件進行單因素方差分析，然后通過Duncan's法進行組間多重比較，用P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01 表示差異極顯著。試驗結果采用“平均值±標準差（Mean±SE）”。

2 結果

2.1 復合微生態(tài)制劑對生長豬生長性能的影響

表2 復合微生態(tài)制劑對生長豬生長性能的影響

由表2可知，與Ⅰ組相比，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的ADFI均有所升高，但是差異不顯著（P＞0.05）；與Ⅰ組相比，Ⅲ組的末重和ADG顯著增加（P＜0.05），Ⅱ組和Ⅳ組的末重和ADG有增加的趨勢（P＞0.05）；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組和Ⅳ組的料重比之間差異不顯著（P＞0.05）；與Ⅰ組相比，Ⅱ組和Ⅲ組的腹瀉率有一定程度降低（P＞0.05）；與Ⅱ組和Ⅲ組相比，Ⅳ組的腹瀉率顯著增加（P＜0.05）。

2.2 復合微生態(tài)制劑對生長豬血清免疫指標的影響

表3 復合微生態(tài)制劑對生長豬血清生化和免疫指標的影響

由表3 可知，與Ⅰ組相比，Ⅱ、Ⅳ組TP 濃度顯著增加（P＜0.05），Ⅲ組TP 濃度極顯著增加（P＜0.01）；與Ⅰ組相比，Ⅲ組GLB 濃度顯著增加（P＜0.05）,Ⅱ和Ⅳ組GLB 濃度有增加趨勢（P＞0.05）；在ALB 和IgM 方面，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組和Ⅳ組無顯著差異（P＞0.05）；與Ⅰ組相比，Ⅲ組和Ⅳ組的ALP 濃度有增加趨勢（P＞0.05），Ⅲ組的ALP 濃度顯著高于Ⅱ組（P＜0.05）；與Ⅰ組相比，Ⅲ組GLU 濃度顯著增加（P＜0.05），Ⅱ組和Ⅲ組AST 濃度顯著減少（P＜0.05）；與Ⅰ組相比，Ⅲ組IgG濃度顯著增加（P＜0.05），Ⅲ組IgA 濃度有增加的趨勢（P＞0.05）。

3 討論

3.1 復合微生態(tài)制劑對生長豬生長性能和腹瀉率的影響

益生菌由活菌制作而成，自身可以分泌各種消化酶和有機酸，促進機體對營養(yǎng)物質的消化利用率，繼而改善其生長性能[7-8]。劉輝等[9]研究發(fā)現(xiàn)，復合益生菌可以顯著提高生長豬的末重和ADG，同時顯著降低其F/G，但是生長豬的ADFI 有所增加。毛倩等[10]研究發(fā)現(xiàn)，復合益生菌（乳酸菌、酵母菌）可以顯著提高生長豬ADFI 和ADG，但是其F/G 有降低趨勢。本試驗中，Ⅲ組的生長豬ADFI 有所增加（P＞0.05），末重和ADG 顯著增加（P＜0.05），這與劉輝等[9]和毛倩等[10]結果相似，可能是復合微生態(tài)制劑中嗜酸桿菌和芽孢桿菌可以分泌各種消化酶和有機酸，促進機體對營養(yǎng)物質的消化利用率，繼而改善其生長性能[11]。

豬在生長發(fā)育時，易受到惡劣的飼養(yǎng)環(huán)境、不衛(wèi)生的飼料、不健康的心理等因素刺激，繼而引起腸道菌群的失調，有害菌大量增殖，導致腹瀉率上升。其中有害菌大腸桿菌的增殖是誘導豬腹瀉的主要原因[12]。Huang 等[8]研究發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加乳酸桿菌可以顯著降低斷奶仔豬腸道大腸桿菌的數(shù)量，降低斷奶仔豬82.95%腹瀉率。同樣何佳等[14]研究發(fā)現(xiàn)，復合益生菌（地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、丁酸梭菌）可以降低斷奶仔豬65.98%的腹瀉率，同時顯著降低糞便中大腸桿菌的數(shù)量。本試驗中，Ⅱ和Ⅲ組的腹瀉率分別降低0.61%、1.24%（P＞0.05），這與Huang 等[8]和何佳等[14]研究相似，可能是益生菌與有害菌競爭腸道的黏附位點，減少有害菌在腸道的黏附，此外益生菌分泌的細菌素和有機酸可以抑制有害菌的增殖，繼而降低腹瀉率[15]。而隨著添加濃度提高，與Ⅲ組相比，Ⅳ組的腹瀉率顯著增加（P＜0.05），ADFI 和ADG 有減少的趨勢（P＞0.05）。這可能是過量的外源微生物進入腸道，與腸道優(yōu)勢菌群爭奪優(yōu)勢位點和營養(yǎng)成分，破壞腸道菌落平衡，引起腹瀉率增加，降低生長性能[16]。上述結果說明復合微生態(tài)制劑可以降低生長豬的腹瀉率，但是并非在飼料中添加濃度越高，腹瀉率就越低，存在適宜添加濃度。

3.2 復合微生態(tài)制劑對生長豬血清生化和免疫的影響

血清生化指標可以反映機體綜合代謝能力。在一定范圍內，GLU 濃度升高，機體代謝能力隨之加強。葡萄糖是機體能量物質，為機體合成蛋白質提高能量，以及調控機體蛋白質的合成[17]。在動物體生長階段，ALP 濃度適當升高，可以促進機體骨骼的生長以及對營養(yǎng)物質的代謝效率[18]。本試驗中，與Ⅰ組相比，Ⅲ組GLU 濃度顯著增加（P＜0.05），Ⅲ組的ALP 濃度有增加趨勢（P＞0.05），這與金三俊等[19]試驗結果相似，進一步說明復合微生態(tài)制劑通過促進營養(yǎng)物質代謝效率，提高生長性能。AST 主要分布在心肌附近，其活性增加，可以反映心肌細胞受損。本試驗中，與Ⅰ組相比，Ⅱ和Ⅲ組AST 濃度顯著減少（P＜0.05），這與王曉丹等[20]結果相似。上述試驗結果說明復合微生態(tài)制劑對心肌組織有一定的保護作用。

血清中TP 是主要由ALB 和GLB 組成，可以反映機體對飼料中蛋白質的吸收情況和體液免疫情況。其中ALB 含量升高可以反映機體合成蛋白質能力提高，GLB 含量升高可以反映機體免疫力提高。劉輝等[9]、金三俊等[19]分別給斷奶仔豬和生長豬飼喂益生菌，發(fā)現(xiàn)豬只血清中TP、ALB和GLB出現(xiàn)不同程度提高。本試驗中，與Ⅰ組相比，Ⅲ組TP濃度極顯著增加（P＜0.01），Ⅲ組GLB濃度顯著增加（P＜0.05），Ⅲ組ALB濃度有增加趨勢（P＞0.05），其結果與前人相似[21-22]，說明復合微生態(tài)制劑可以提高生長豬蛋白質的合成能力，以及改善機體免疫能力。

血清中免疫球蛋白包括IgA、IgG、IgM 均由b 淋巴細胞產(chǎn)生。它們是體液免疫預防和抵抗感染的主要影響因素。血清免疫球蛋白濃度是體液免疫的重要指標。Liu 等[23]發(fā)現(xiàn)飼喂乳酸桿菌的哺乳仔豬IgA 和IgG 濃度顯著升高，但是IgM 濃度差異不顯著。魏清甜等[24]發(fā)現(xiàn)糞腸球菌可以顯著提高斷奶仔豬IgA 濃度。本試驗中，與Ⅰ組相比，Ⅲ組IgG 濃度顯著升高（P＜0.05），Ⅲ組IgA 和IgM 濃度有增加的趨勢（P＞0.05），與前人結果相似，可能是益生菌可以刺激腸上皮細胞分泌免疫球蛋白導致機體免疫球蛋白升高，提高機體免疫力[25-27]結果說明復合微生態(tài)制劑通過升高免疫球蛋白的濃度，增強生長豬的免疫力。

4 結論

綜上所述，在飼料中添加200 mg/kg 復合微生態(tài)制劑可以改善生長豬的生長性能和免疫性能，同時可以降低生長豬的腹瀉率。