丹參水提液對鵪鶉育雛期生長性能和血清生化指標(biāo)的影響

文 敏 張 芬 舒 剛* 徐 丹 唐子婷 黃遠(yuǎn)玲 孫弟芬 楊志勤

（1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，四川成都611130；2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，四川成都611130）

鵪鶉產(chǎn)業(yè)是僅次于雞、鴨的第三大養(yǎng)禽業(yè)[1]，但我國養(yǎng)殖鵪鶉的時(shí)間并不長，直到20 世紀(jì)70 年代后才得到較快的發(fā)展，在此期間引進(jìn)一些新的蛋用、肉用型家鶉，建立專門的種鶉生產(chǎn)基地[2]。鵪鶉作為一種大規(guī)模飼養(yǎng)的禽類具有許多優(yōu)點(diǎn)，如繁殖能力強(qiáng)、生長速度快、飼養(yǎng)周期短、產(chǎn)蛋量高。鵪鶉蛋、肉的營養(yǎng)豐富，膽固醇含量低，蛋白質(zhì)含量高；鵪鶉肉質(zhì)細(xì)嫩，含有多種人體必需的氨基酸，具有較高的藥用價(jià)值。此外，相較于雞蛋和雞肉，鵪鶉蛋和鵪鶉肉中的B 族維生素、膽固醇和卵磷脂含量更高[3]，在我國素有“動物人參”的美譽(yù)[4]。集約化養(yǎng)殖下，受到商業(yè)利益的驅(qū)使，不少養(yǎng)殖戶都長期使用抗生素來預(yù)防疾病和促進(jìn)生長，但使用抗生素會導(dǎo)致農(nóng)副產(chǎn)品藥物殘留和細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)。為消除抗生素帶來的不利影響，研發(fā)新的抗生素替代品以保證動物的健康生長是目前各國研究者研究的熱點(diǎn)方向之一，現(xiàn)有不少研究人員將目光投到了我國傳統(tǒng)的治療藥物中草藥上來，使用中草藥代替抗生素，是未來研究的重要方向。丹參為唇形科植物，以干燥根及根莖入藥，具有活血化瘀、通經(jīng)止痛、涼血消癰的作用[5]，丹參的活性成分及代謝產(chǎn)物豐富，因具有降血脂、抗氧化、抗腫瘤活性、抗炎和保護(hù)肝臟的藥理學(xué)作用而受到國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注[6-10]。

本文通過在鵪鶉飲用水中添加不同水平的丹參水提液，研究丹參水提液對鵪鶉育雛期生長性能、免疫器官和血清生化指標(biāo)的影響，為丹參作為中草藥添加劑提供理論依據(jù)，減少抗生素使用造成的農(nóng)副產(chǎn)品藥物殘留和細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)等亟待解決的問題。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物

120只1日齡健康無病的日本雛期鵪鶉購自嘉祥縣友民鵪鶉養(yǎng)殖場。

1.2 藥品與試劑

1.2.1 藥品

丹參（Salvia miltiorrhiza）干燥根莖（購自四川省成都市金牛區(qū)荷花池中藥材專業(yè)市場，經(jīng)四川農(nóng)業(yè)大學(xué)藥學(xué)系鑒定為正品參）。丹參水提液的制備：將丹參1 000 g 按煎煮法提取水提液，先用冷水浸沒藥材并超過藥材2～3 cm，浸泡50 min 左右。浸泡后開始第一次煎煮，遵循先“武”后“文”的原則，開始用大火，煮沸后改用小火，保持微沸狀態(tài)，為防止藥物被煎糊，煎煮過程中應(yīng)不斷用玻璃棒進(jìn)行攪拌。第一次煮沸20 min后用脫脂紗布過濾，收集頭煎濾液約2 500 ml。第二次煎煮以剛好浸沒藥材，煮沸15 min后收集濾液約2 000 ml，然后將頭煎和二煎得到的濾液合并、濃縮。制成生藥濃度為1 g/ml的丹參水提液。

1.2.2 試劑

谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）試劑盒（南京建成生物工程研究所，貨號C009-1，批號201811）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）試劑盒（南京建成生物工程研究所，貨號C010-1，批號201811）、血尿素氮（BUN）試劑盒（南京建成生物工程研究所，貨號C013-2，批號201811）、血清總蛋白（TP）試劑盒（南京建成生物工程研究所，貨號A045-4，批號201811）。

1.3 主要儀器

AG 135電子天平(賽多利斯公司)、高速冷凍離心機(jī)（Thermo Fisher 貨號75004380）、多功能酶標(biāo)儀（varioskan flash ,美國）、移液槍（TopPette 單道移液槍）、恒溫培養(yǎng)箱（北京中興偉業(yè)儀器有限公司）。

1.4 試驗(yàn)動物和分組

試驗(yàn)選取120 只狀態(tài)良好、體重均勻的1 日齡日本雛期鵪鶉，隨機(jī)分為4 個組，每組3 個重復(fù)，每個重復(fù)10 只。Ⅰ組為空白對照組，不對其飲用水做處理；Ⅱ組為低劑量組，在飲用水中按照2%添加丹參水提液；Ⅲ組為中劑量組，在飲用水中按照4%添加丹參水提液；Ⅳ組為高劑量組，在飲用水中按照8%添加丹參水提液。試驗(yàn)從雛雞1 日齡開始，試驗(yàn)期35 d。

1.5 飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)方式采用3 層疊層式籠養(yǎng)，自由飲水，自由采食粉料。育雛期的鵪鶉對溫度敏感，因此要做好保溫工作，試驗(yàn)按照1～3 日齡35～38 ℃，4～7 日齡33～35 ℃，8～14 日齡30～33 ℃。室內(nèi)恒溫保持在28～30 ℃為宜。育雛舍內(nèi)及育雛設(shè)備的消毒和防疫是保證鵪鶉生長健康的重要因素之一，保證鵪鶉舍內(nèi)保溫隔熱性能好，濕度合理，空氣好采光好通風(fēng)好。育雛期從1 d 飼喂5 次（每隔3 h 一次）逐漸過渡到1 d 3 次（每隔5 h 一次），每天早上7：00 飼喂第一次，由同一組人員飼養(yǎng)，減少鵪鶉的應(yīng)激。

育雛期鵪鶉的免疫程序是保證鵪鶉健康生長的必要程序，免疫程序如下：7 d，新城疫傳染性支氣管炎二聯(lián)苗，二倍量滴鼻點(diǎn)眼；12 d，法氏囊多價(jià)苗，二倍量飲水；19 d 新城疫Ⅳ系，二倍量飲水?；A(chǔ)日糧及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧及營養(yǎng)水平（以風(fēng)干基記）

1.6 測定指標(biāo)及測定方法

1.6.1 生長性能測定

試驗(yàn)期間每天觀察、記錄各組試驗(yàn)鵪鶉的精神、活動、采食及飲水等基本情況。試驗(yàn)全程監(jiān)測記錄各組鵪鶉的死亡情況，并在試驗(yàn)第35 d 稱量鵪鶉體重，計(jì)算平均日增重。按如下公式計(jì)算：平均日增重=(終末體重-初始體重)/飼養(yǎng)日齡。

1.6.2 臟器指數(shù)測定

分別于試驗(yàn)第35 d，每組每個重復(fù)隨機(jī)選取8 只，解剖并分離心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、法氏囊、胸腺，剝離周圍脂肪后用濾紙吸干水分后稱重。按如下公式計(jì)算：器官指數(shù)（g/kg）=器官重（g）/體重（kg）

1.6.3 血清生化指標(biāo)監(jiān)測

分別在試驗(yàn)第35 d，每組每個重復(fù)隨機(jī)選取8只，翅靜脈采血1 ml，置于無抗凝劑的采血管中，靜置2 h，3 000 r/min 離心10 min，分離血清，置于-20 ℃保存?zhèn)溆?。用試劑盒測定血清GPT、GOT、BUN、TP含量。

1.7 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)利用SPSS19.0 單因素方差分析(oneway ANO-VA)，用Duncan's 法多重檢驗(yàn)分析組間差異顯著性，數(shù)據(jù)以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”組成，P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 一般觀察

整個試驗(yàn)過程鵪鶉未出現(xiàn)死亡或食欲不振、精神萎靡等異常情況，所有鵪鶉采食和飲水情況正常。

2.2 生長性能測定結(jié)果

表2 丹參水提液對生長性能的影響(g/只)

由表2可知，與空白組相比，在飲用水中添加低、中、高水平的丹參水提液后，鵪鶉體重分別提高了5.4%、4.4%、5.2%，差異顯著（P＜0.05）；平均日增重分別提高了7%、5.7%、6.7%，差異顯著（P＜0.05）。

2.3 臟器指數(shù)測定結(jié)果

由表3可得，與空白組相比，中劑量和高劑量組鵪鶉心臟、肝臟、肺臟、腎臟指數(shù)均顯著性的降低（P＜0.05），低劑量組心臟、肝臟指數(shù)有所降低但并不顯著（P＞0.05），腎臟指數(shù)顯著降低（P＜0.05）。在飲用水中添加低、中、高水平的丹參水提液，鵪鶉的胸腺指數(shù)分別提高了4.3%、8.7%、25%（P＜0.05）；各試驗(yàn)組的法氏囊指數(shù)差異不顯著（P＞0.05）；中劑量組和高劑量組脾臟指數(shù)較空白組分別提高了70.9%、90.9%，差異顯著（P＜0.05）。

2.4 血清生化指標(biāo)測定結(jié)果

表3 丹參水提液對臟器指數(shù)的影響(g/kg)

表4 丹參水提液對血清生化指標(biāo)的影響

由表4可知，中劑量組TP含量相比于空白組升高13.60%，差異顯著（P＜0.05）；低劑量組和高劑量組有增加趨勢但差異不顯著（P＞0.05）。對于血清GOT、GPT、BUN 的含量，各試驗(yàn)組之間差異不顯著（P＞0.05）。中劑量組GOT、GPT 含量和高劑量組GPT、BUN含量均呈下降趨勢（P＞0.05）。

3 討論

3.1 丹參水提液對鵪鶉生長性能的影響

有研究表明以中草藥作為飼料添加劑, 可以明顯的改善動物生產(chǎn)性能[11]。雖然目前研究報(bào)道丹參對鵪鶉生產(chǎn)性能的影響文章并不多，但有一些關(guān)于將丹參作為飼料添加劑在飼料中添加19.5%可以使雞鴨產(chǎn)蛋率提高10%～15%，增加肉雞的體重的報(bào)道[11-12]。靖吉強(qiáng)等[13]在丹參復(fù)方中藥制劑對肉雞生產(chǎn)性能及新城疫抗體效價(jià)的影響研究中，給肉雞飼喂丹參復(fù)方中藥制劑的結(jié)果表明肉雞的生長性能、抗病能力以及成活率均得到了不同程度的提高。林仁穗等[14]的中草藥制劑與丁香羅勒對鵪鶉產(chǎn)蛋性能影響的研究中，在復(fù)方中藥制劑中添加當(dāng)歸、川芎、山楂、淫羊藿等補(bǔ)氣益血等中藥能改善鵪鶉精神、羽毛狀態(tài)，增強(qiáng)機(jī)體功能，改善生長性能。本研究結(jié)果與上述報(bào)道中的結(jié)果一致，在鵪鶉飲用水中添加不同水平的丹參水提液，可顯著提高鵪鶉日增重，促進(jìn)鵪鶉的生長，改善鵪鶉的生長性能。丹參活血化瘀、通經(jīng)止痛，可以促進(jìn)血液循環(huán), 氣為血帥, 血為氣母，使氣血調(diào)暢以令機(jī)體功能得以增強(qiáng)，這或許是丹參改善生長性能的原因之一。

3.2 丹參水提液對鵪鶉臟器指數(shù)的影響

臟器指數(shù)是反映動物機(jī)體系統(tǒng)發(fā)育情況的重要指標(biāo)，臟器指數(shù)的高低與臟器發(fā)育的正常與否密切相關(guān)，臟器發(fā)育正常直接決定了臟器的正常功能。此外，臟器指數(shù)直接體現(xiàn)了機(jī)體的代謝水平，其越高說明臟器的代謝作用越強(qiáng)，有利于機(jī)體的發(fā)育?，F(xiàn)有許多學(xué)者研究丹參對臟器作用效果和影響機(jī)理，羅紅等[15]研究證實(shí)丹參的使用可以顯著減少細(xì)胞中Ⅲ型膠原的生成，從而發(fā)揮抗心肌纖維化的作用。肝纖維化發(fā)生的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是肝星狀細(xì)胞的活化，而丹參可以促使肝細(xì)胞程序性的死亡，同時(shí)抑制肝組織基因的表達(dá)，由此達(dá)到防治肝纖維化的作用[16-18]。張旭等[19]的研究表明丹參可明顯減輕糖尿病大鼠腎纖維化，改善腎功能。這些研究都表明丹參對動物體的作用都是有利的，可以不同程度的改善動物體臟器的狀態(tài)，從而影響臟器指數(shù)。在本研究結(jié)果中，與空白對照組相比，丹參低劑量對鵪鶉心臟、肝臟、肺臟和腎臟指數(shù)均無顯著影響，中劑量和高劑量對臟器指數(shù)有降低作用。

免疫器官發(fā)育是否良好以及機(jī)能強(qiáng)弱直接決定了禽類的免疫水平，Rivas 等[20]和Montzouris 等[21]研究表明，器官指數(shù)的高低決定了其中淋巴細(xì)胞增殖的程度，可用于評價(jià)免疫功能的強(qiáng)弱，其指數(shù)越大，表明機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫力越強(qiáng)。胸腺和法氏囊是重要的中樞免疫器官，胸腺的主要功能是產(chǎn)生T淋巴細(xì)胞和分泌胸腺素，參與細(xì)胞免疫[22-23]；法氏囊是B淋巴細(xì)胞發(fā)育和分化的主要場所，對維持機(jī)體的體液免疫功能很重要[24-25]。脾臟是外周免疫器官，主要是參與免疫應(yīng)答，形成針對血液中抗原的抗體[26]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在飲用水中添加低、中、高水平丹參水提液均能促進(jìn)鵪鶉法氏囊、胸腺和脾臟的發(fā)育，從而提高免疫力，增強(qiáng)對疾病的抵抗能力，其中高劑量組效果最顯著。

3.3 丹參水提液對鵪鶉血清生化指標(biāo)的影響

動物機(jī)體血清生化指標(biāo)的變化直接反映了動物健康及代謝情況，血清中總蛋白（TP）主要用于機(jī)體能量供給和組織修補(bǔ)，是衡量蛋白質(zhì)在體內(nèi)代謝狀況的主要指標(biāo)，在維持血漿滲透壓、緩沖血液pH 值等調(diào)節(jié)機(jī)體穩(wěn)態(tài)方面具有重要功能[27]。該試驗(yàn)結(jié)果顯示丹參水提液可提高鵪鶉血液中的TP 含量，說明在飲用水中添加丹參可以促進(jìn)鵪鶉機(jī)體蛋白質(zhì)合成代謝增強(qiáng)，組織蛋白沉積能力上升, 氨基酸降解作用減弱。

血清GOT 和GPT 活性是動物機(jī)體肝臟功能正常的一種體現(xiàn)，肝細(xì)胞受損會導(dǎo)致血中GOT和GPT含量升高，引起肝臟代謝和解毒能力降低，導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)的毒素不能及時(shí)排出體外。本研究結(jié)果表明，飲用水中添加丹參水提液對GOT和GPT的活性無顯著影響，說明丹參對鵪鶉肝功能無不良影響。

血清尿素氮（BUN）通過鳥氨酸循環(huán)途徑生成, 可作為蛋白質(zhì)、氨基酸代謝的終產(chǎn)物衡量標(biāo)準(zhǔn)。劉彥慈等[28]研究發(fā)現(xiàn)BUN 是檢測動物體內(nèi)氨基酸降解狀況的重要指標(biāo)，反映了動物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝情況和日糧氨基酸之間的代謝平衡情況。Takahashi S 等[29]的研究發(fā)現(xiàn)血液尿素氮含量與蛋白質(zhì)的利用率之間呈顯著的負(fù)相關(guān),蛋白質(zhì)代謝異常時(shí),血液尿素氮濃度升高,蛋白質(zhì)代謝良好時(shí),血液尿素氮在血清中含量維持在一定范圍內(nèi)。堵光瑩等[30]的研究表明當(dāng)動物機(jī)體BUN含量較低時(shí)，說明氨基酸代謝穩(wěn)定，機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)合成代謝功能較強(qiáng)，動物日糧中氮利用率高。此外，BUN 含量的高低還是衡量腎功能正常與否的重要指標(biāo)。正常情況下,BUN的生成和排泄處于動態(tài)平衡狀態(tài)并保持在正常的生理水平；而且腎臟的代償與儲備能力強(qiáng)，只有當(dāng)腎功能明顯受損時(shí),血清中尿素氮才會明顯升高。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,低劑量和高劑量組在一定程度上降低了血清BUN含量,說明丹參水提液可以使鵪鶉體內(nèi)蛋白質(zhì)的代謝保持在較強(qiáng)狀態(tài)，提高鵪鶉對日糧中氨基酸的利用率,并保持腎功能正常。

4 結(jié)論

在鵪鶉飲用水中添加一定濃度的丹參水提液可促進(jìn)鵪鶉機(jī)體蛋白質(zhì)的合成代謝，提高鵪鶉對飼料中氨基酸的利用率，從而促進(jìn)鵪鶉的生長，提高育雛期鵪鶉的生長性能，可以促進(jìn)鵪鶉免疫系統(tǒng)器官的發(fā)育，增強(qiáng)機(jī)體的免疫機(jī)能。綜合考慮，在鵪鶉的飲用水中添加4%丹參水提液較適宜。