典型畜禽糞污中雌激素排放特征

胡雙慶， 袁哲軍,2， 沈根祥*

1.上海市環(huán)境科學(xué)研究院， 上海 200233

2.上海紡織節(jié)能環(huán)保中心， 上海 200082

規(guī)?；笄蒺B(yǎng)殖業(yè)在快速發(fā)展的同時(shí)也給環(huán)境帶來(lái)了雌激素污染風(fēng)險(xiǎn). 據(jù)估計(jì)，環(huán)境中90%的天然雌激素來(lái)源于畜禽動(dòng)物排泄物[1-2]，且排泄物中雌激素的種類(lèi)和含量因畜禽動(dòng)物類(lèi)型、性別及其生長(zhǎng)發(fā)育階段的不同而存在差異[3]，豬和家禽主要通過(guò)尿液排放雌激素，而奶牛和羊主要通過(guò)糞便排放雌激素[4]，豬主要排放E1(estrone，雌酮)、E2(17β-estradiol，雌二醇)和E3(estriol，雌三醇)，而奶牛主要排放E1和E2[3,5]. 人工合成雌激素炔雌醇(17β-ethinylestradiol，EE2)和己烯雌酚(diethylstilbestrol，DES)因具有促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)和體質(zhì)量增加的作用，而被用作激素類(lèi)藥物或飼料添加劑應(yīng)用到畜禽養(yǎng)殖過(guò)程中. 進(jìn)入環(huán)境中的天然和人工合成雌激素具有很強(qiáng)的內(nèi)分泌干擾活性[6-7]，如它們能夠在ngL痕量水平誘導(dǎo)雄魚(yú)雌性化[8-9]，致使魚(yú)類(lèi)胚胎發(fā)育遲滯和畸形[10-11]，脅迫微生物群落結(jié)構(gòu)發(fā)生改變[12-13]. 因此，畜禽養(yǎng)殖業(yè)雌激素污染風(fēng)險(xiǎn)應(yīng)當(dāng)引起足夠重視.

近年來(lái)，畜禽養(yǎng)殖業(yè)雌激素污染及其控制逐漸成為研究熱點(diǎn)[14-16]. 目前對(duì)河流水體中雌激素污染特征進(jìn)行研究的報(bào)道[17-19]較多，但對(duì)畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)雌激素的排放特征研究報(bào)道相對(duì)較少. 再者，畜禽糞污基質(zhì)較為復(fù)雜，樣品前處理難度大，這給畜禽糞污雌激素研究帶來(lái)了挑戰(zhàn). 上海市畜禽養(yǎng)殖規(guī)模大、養(yǎng)殖類(lèi)型多樣化，養(yǎng)殖過(guò)程雌激素污染風(fēng)險(xiǎn)不容忽視. 因此，該研究通過(guò)建立固相萃取-高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(SPE-HPLC-MSMS)分析方法，對(duì)上海市典型畜禽養(yǎng)殖類(lèi)型排放的5種天然和人工合成雌激素(E1、E2、E3、EE2和DES)進(jìn)行定量檢測(cè)，分析其總體分布特征和檢出水平，并通過(guò)比較畜禽排泄物經(jīng)處理設(shè)施處理前后雌激素含量水平的差異，分析不同處理方式下雌激素的去除效率，以期為畜禽養(yǎng)殖雌激素污染風(fēng)險(xiǎn)管控提供參考.

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

儀器：5500Q-trap高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀(美國(guó)AB公司)，配MultiQuant 3.0.2軟件；12通道固相萃取裝置(美國(guó)Waters公司)；超聲波清洗器(KQ3200E，昆山市超聲儀器有限公司)；pH計(jì)(S220，梅特勒-托多儀器(上海)有限公司)；Milli-Q超純水器(美國(guó)Millipore公司)；氮吹儀(Anpel 12通道，上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(艾卡儀器設(shè)備有限公司上海分公司)；微波萃取儀(MARS CLSSIC，美國(guó)CEM公司)；低溫真空冷凍干燥機(jī)(上海昊博低溫真空有限公司).

試劑：甲醇、乙腈、正己烷、二氯甲烷均為HPLC級(jí)，均購(gòu)自美國(guó)Tedia公司. E1(雌酮，純度為99.3%，)、E2(17β-雌二醇，純度為97.5%)、E3(雌三醇，純度為99.5%)、EE2(炔雌醇，純度為99.0%)、DES(己烯雌酚，純度為99.5%)、17β-E2-d3(17β-雌二醇-d3，純度為98.0%)、EE2-d4(炔雌醇-d4，純度為98.0%)和DES-d8(己烯雌酚-d8，純度為98.0%)均購(gòu)自德國(guó)Dr. Ehrenstorfer公司. 上述標(biāo)準(zhǔn)品均用甲醇配成標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液. 混和標(biāo)準(zhǔn)溶液中5種物質(zhì)的含量均為100 mgL. 根據(jù)需要用甲醇配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，于4 ℃冰箱中保存.

1.2 樣品的采集與保存

選擇上海市畜禽養(yǎng)殖業(yè)相對(duì)集中的區(qū)域，針對(duì)3種不同養(yǎng)殖類(lèi)型(豬、奶牛、雞)分別采集糞便、尿液、有機(jī)肥和污水樣品，向樣品中加入4 molL的鹽酸防止微生物對(duì)目標(biāo)物質(zhì)的降解作用. 樣品快速運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室后，放入-20 ℃冰箱冷凍保存. 試驗(yàn)前取出解凍，糞便樣品經(jīng)低溫真空冷凍干燥機(jī)干燥24 h后待用. 不同畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)的養(yǎng)殖規(guī)模、糞便污水處理方式等基本信息見(jiàn)表1.

表1 不同畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖規(guī)模及糞污處理方式

注： 1)豬和奶牛養(yǎng)殖量的單位為頭a，雞養(yǎng)殖量的單位為羽a.

1.3 液體樣品前處理方法

分別量取10 mL尿液樣品和100 mL污水樣品，用超純水稀釋至500 mL，水樣經(jīng)玻璃纖維濾紙(孔徑0.7 μm)過(guò)濾后，在每個(gè)樣品中均加入100 ng的3種內(nèi)標(biāo)物質(zhì)(17β-E2-d3、EE2-d4和DES-d8)，其中，17β-E2-d3 作為E1、E2和E3內(nèi)標(biāo)，EE2-d4作為EE2內(nèi)標(biāo)，DES-d8作為DES內(nèi)標(biāo). 調(diào)水樣pH為3，進(jìn)行Oasis HLB柱(200 mg，6 mL，美國(guó)Waters公司)固相萃取凈化. 依次用6 mL甲醇、6 mL水活化HLB固相萃取小柱. 上樣速率為3～6 mLmin，上樣結(jié)束后，依次用5 mL超純水、5 mL 5%的甲醇水溶液淋洗小柱，減壓抽干10 min，最后用10 mL甲醇分兩次洗脫[20]. 洗脫液在40 ℃下氮吹至近干，用8 mLV(正己烷)∶V(二氯甲烷)為3∶1的溶液重新溶解，進(jìn)行Florisil固相萃取柱(500 mg，6 mL，美國(guó)Waters公司)凈化，用5 mL二氯甲烷和5 mLV(正己烷)∶V(二氯甲烷)為 3∶1 的溶液先后進(jìn)行活化，樣品過(guò)柱流速為1 mLmin，過(guò)柱完后，用6 mLV(甲醇)∶V(二氯甲烷)為1∶4的溶液進(jìn)行洗脫，洗脫液氮吹至近干. 用1 mLV(甲醇)∶V(水)為7∶3的溶液重新溶解，過(guò)0.22 μm微孔濾膜到進(jìn)樣瓶中，進(jìn)行SPE-HPLC-MSMS測(cè)定.

1.4 固體樣品前處理方法

稱(chēng)取糞便、有機(jī)肥和土壤樣品各5.0 g(干質(zhì)量)，分別加入100 ng內(nèi)標(biāo)物. 利用微波輔助萃取(MAE)方法提取固體樣品中的雌激素. 微波萃取劑選取50 mLV(甲醇)∶V(丙酮)為1∶3的溶液，萃取溫度為100 ℃，萃取功率為800 W，萃取時(shí)間梯度設(shè)置為溫度爬升10 min，保持30 min，降溫20 min. 萃取結(jié)束后，轉(zhuǎn)移所有上清液于100 mL玻璃瓶中，轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(40 ℃，80 rmin，-75 kPa)中濃縮至10 mL，經(jīng)氮吹儀吹至近干. 用5 mL乙腈重新溶解，然后加入5 mL正己烷進(jìn)行液-液萃取(LLE)后，移除正己烷層，該操作重復(fù)兩遍，以除去油類(lèi)物質(zhì). 所得乙腈層溶液用超純水稀釋至500 mL，調(diào)節(jié)pH至3. 然后經(jīng)Oasis HLB柱固相萃取凈化，操作同1.3節(jié)液體樣品處理方法.

1.5 HPLC-MSMS分析

采用AB 5500 Q-trap高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀(美國(guó)AB公司)，配島津30A液相色譜，對(duì)5種目標(biāo)雌激素進(jìn)行檢測(cè). 其中，色譜柱選用Shim-Pack XR-ODSII C18(100 mm×2 mm，1.0 μm)型號(hào)，流動(dòng)相為0.1%氨水和乙腈. 5種雌激素高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析條件見(jiàn)表2.

表2 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析參數(shù)

1.6 質(zhì)量保證和質(zhì)量控制

用甲醇溶液配制5種雌激素的系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，ρ(雌激素)為1.0～500 μgL，采用內(nèi)標(biāo)法定量，向進(jìn)樣瓶中分別加入100 ng的17β-E2-d3、EE2-d4和DES-d8內(nèi)標(biāo)液，在選定的色譜和質(zhì)譜條件下進(jìn)行測(cè)定，得到5種雌激素的線性相關(guān)系數(shù)(r2)均大于0.995，表明所建立的線性關(guān)系良好. 在該方法條件下獲得各目標(biāo)物的LOD(檢測(cè)限)范圍為0.17～1.57 μgL，LOQ(定量限)范圍為0.57～5.25 μgL.

選擇4種環(huán)境樣品(糞便、有機(jī)肥、尿液、污水)，設(shè)置100和500 ng兩個(gè)加標(biāo)水平進(jìn)行加標(biāo)回收率試驗(yàn). 按1.3節(jié)和1.4節(jié)優(yōu)化的前處理方法進(jìn)行萃取、凈化和濃縮，用1.5節(jié)建立的分析方法測(cè)定各目標(biāo)物的含量，并計(jì)算回收率與相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(見(jiàn)表3)，得到糞便樣品中目標(biāo)物回收率范圍為61.3%～91.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于7.1%；有機(jī)肥樣品回收率為66.2%～106.3%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于6.9%；尿液樣品回收率范圍為65.4%～102.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于7.5%；污水樣品回收率范圍為64.8%～89.9%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于6.5%；表明所建立的方法對(duì)畜禽糞污環(huán)境樣品中雌激素的檢測(cè)分析具有良好的準(zhǔn)確度和精密度.

表3 不同環(huán)境樣品中雌激素的回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=3)

2 結(jié)果與討論

2.1 畜禽排泄物中雌激素總體分布特征

2.1.1畜禽糞便和有機(jī)肥中各雌激素檢測(cè)水平

分別對(duì)采集的18個(gè)糞便樣品(含平行樣，包括9個(gè)奶牛糞、6個(gè)豬糞和3個(gè)雞糞樣品)和18個(gè)有機(jī)肥樣品(含平行樣，包括3個(gè)奶牛場(chǎng)堆肥、6個(gè)奶牛場(chǎng)沼渣肥、6個(gè)豬場(chǎng)沼渣肥和3個(gè)雞場(chǎng)堆肥樣品)中5種雌激素含量進(jìn)行了測(cè)定(見(jiàn)圖1).

注： 箱式圖中上下水平線分別代表最小值和最大值；×代表第1和99百分位數(shù)；箱子上下底和中間水平線分別代表第25、75和50百分位數(shù)；含量平均值用小方塊()表示.

由圖1可見(jiàn)，糞便樣品中天然雌激素w(E1)、w(E2)和w(E3)范圍分別為26.5～55.5、19.1～45.2和nd～16.3 ngg，檢出率分別為100%、100%和50%；人工合成雌激素w(EE2)和w(DES)范圍分別為nd～8.3和nd～11.2 ngg，檢出率分別為83.3%和66.7%. ZHANG等[14]對(duì)上海市和浙江省13個(gè)畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行了布點(diǎn)采樣，測(cè)得糞便樣品中w(E1)、w(E2)、w(E3)和w(EE2)的范圍分別為nd～12.8、nd～101.0、nd～13.1和nd～10.4 ngg，表明兩個(gè)地區(qū)雌激素檢出情況相似，對(duì)比分析表明，上海市畜禽養(yǎng)殖業(yè)雌激素排放水平較穩(wěn)定. 另外，該研究發(fā)現(xiàn)，E3僅在豬糞和雞糞中被檢出，奶牛糞便中未檢出E3，這與奶牛主要分泌雌激素E1和E2、并不產(chǎn)生E3的研究報(bào)道[21]相一致，這進(jìn)一步證明了環(huán)境中雌激素種類(lèi)和畜禽養(yǎng)殖類(lèi)型的相關(guān)性. 在畜禽排泄物中檢出人工合成雌激素EE2和DES，分析原因可能是EE2和DES被作為動(dòng)物飼料添加劑用于畜禽養(yǎng)殖業(yè)，最終會(huì)隨畜禽排泄物進(jìn)入環(huán)境中.

由圖1可見(jiàn)，有機(jī)肥樣品中w(E1)、w(E2)、w(E3)、w(EE2)和w(DES)范圍分別為3.8～16.3、1.5～10.5、nd～4.2、nd～4.8和nd～5.4 ngg，檢出率分別為100%、100%、50%、66.7%和33.3%. 與糞便樣品相比，有機(jī)肥樣品中雌激素總體含量明顯降低，各雌激素檢出范圍縮小，且人工合成雌激素EE2和DES的檢出率也有所降低. 綜合分析表明，糞便經(jīng)過(guò)有機(jī)肥處理過(guò)程后，其中的雌激素會(huì)發(fā)生降解，從而其含量下降，檢出率降低.

2.1.2尿液和污水中各雌激素檢測(cè)水平

分別對(duì)采集的15個(gè)尿液樣品(含平行樣，9個(gè)奶牛尿液樣品和6個(gè)豬尿樣品)和18個(gè)污水樣品(含平行樣，3個(gè)奶牛場(chǎng)污水進(jìn)水、3個(gè)奶牛場(chǎng)污水出水、6個(gè)奶牛場(chǎng)厭氧發(fā)酵污水和6個(gè)豬場(chǎng)厭氧發(fā)酵污水樣品)中5種雌激素含量進(jìn)行測(cè)定，各雌激素檢出情況如圖2所示.

圖2 尿液和污水樣品中5種雌激素的含量范圍Fig.2 The concentration ranges of five estrogens in animal urine and sewage samples

尿液樣品天然雌激素ρ(E1)、ρ(E2)和ρ(E3)范圍分別為 1 087.0～4 380.3、1 144.5～3 640.0 和nd～ 1 322.1 ngL；污水樣品中分別為391.5～3 735.0、169.8～1 201.4 和nd～170.3 ngL，各雌激素的檢出含量較高，檢出范圍較寬. Raman等[22]發(fā)現(xiàn)某豬場(chǎng)氧化塘中ρ(E1)和ρ(E2)分別為 5 900.4～14 000.6 和 1 800.5～3 300.2 ngL，然而ZHENG等[23]發(fā)現(xiàn)某畜禽場(chǎng)污水處理設(shè)施中雌激素物質(zhì)總量低于5.0 ngL. 分析原因，可能與畜禽養(yǎng)殖類(lèi)型和畜禽動(dòng)物生長(zhǎng)期、污水處理方式和處理程度的差異有關(guān)，導(dǎo)致天然雌激素的含量水平差異較大，檢出范圍較寬. E1、E2、E3和DES在尿液和污水樣品中的檢出率相近. EE2在尿液樣品中未被檢出，但在污水樣品中檢出率達(dá)到100%，ρ(EE2)范圍為4.8～81.7 ngL. LIU等[24]發(fā)現(xiàn)，某養(yǎng)殖場(chǎng)經(jīng)處理的污水中ρ(EE2)為124～285 ngL，而未經(jīng)處理的污水中ρ(EE2)高達(dá)410 ngL；ZHANG等[14]測(cè)得某豬場(chǎng)氧化塘污水中ρ(EE2)為155 ngL. 然而，也有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[25-26]EE2含量低于檢測(cè)限. 因此，污水中EE2會(huì)因處理設(shè)施和處理程度的不同，而引起降解率出現(xiàn)較大差異.

2.2 典型畜禽場(chǎng)雌激素的排放狀況

2.2.1典型豬場(chǎng)雌激素排放情況

對(duì)某規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)進(jìn)行加密布點(diǎn)采樣，共采集5種樣品——糞便、沼渣肥、還田土壤、尿液以及沼液樣品，這些樣品中雌激素含量如表4所示，5種雌激素總量分布見(jiàn)圖3.

表4 典型豬場(chǎng)樣品中5種雌激素含量(n=3)

注：—表示未檢出. 加粗?jǐn)?shù)值單位為ngg，非加粗?jǐn)?shù)值單位為ngL.

注： 糞便、沼渣肥、還田土壤樣品中雌激素含量單位為ngg；尿液和沼液中雌激素含量單位為ngL.

天然雌激素E1在糞便和尿液樣品中檢出含量均為最高，分別占樣品中雌激素總量的45%和48%，這與Johnson等[27-28]發(fā)現(xiàn)E1是豬排泄物中最主要的雌激素結(jié)果相符. 該養(yǎng)豬場(chǎng)糞污處理利用方式為沼氣工程模式，主要通過(guò)厭氧發(fā)酵生產(chǎn)沼氣，并產(chǎn)生沼液和沼渣肥. 由圖3可見(jiàn)，豬場(chǎng)糞便和尿液中雌激素總量分別為94.5 ngg和 8 882.2 ngL，糞污經(jīng)處理后產(chǎn)生的沼渣肥和沼液中雌激素總量分別為35.1 ngg和 4 388.6 ngL，還田土壤中雌激素總量為0.1 ngg，表明該養(yǎng)豬場(chǎng)厭氧發(fā)酵處理工藝對(duì)豬場(chǎng)污水中雌激素的去除效果一般，未被去除的雌激素會(huì)隨糞肥還田進(jìn)入農(nóng)田土壤，給農(nóng)田土壤環(huán)境帶來(lái)雌激素污染風(fēng)險(xiǎn)，相關(guān)研究[14]發(fā)現(xiàn)，組合式氣浮污水處理設(shè)施對(duì)畜禽排泄物中雌激素的去除率高達(dá)97%，其中對(duì)E1和E2的去除率達(dá)100%，而厭氧發(fā)酵處理對(duì)雌激素的去除率低于50%. 對(duì)比分析表明，污水處理設(shè)施的去除效率可能與糞污處理過(guò)程中的好氧-缺氧環(huán)境有關(guān)，好氧環(huán)境能夠促進(jìn)雌激素的吸附和降解[29]，而缺氧(厭氧)狀態(tài)下雌激素的降解受到抑制，EE2甚至不能得到降解[30-31]. 因此，為了加強(qiáng)對(duì)豬養(yǎng)殖過(guò)程雌激素排放的污染管控，可通過(guò)優(yōu)化養(yǎng)殖場(chǎng)糞污處理利用方式，提高糞污中雌激素的去除效果，從而降低雌激素進(jìn)入周邊環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn).

2.2.2典型奶牛場(chǎng)雌激素排放情況

對(duì)某規(guī)模化奶牛場(chǎng)進(jìn)行加密布點(diǎn)采樣，共采集6種樣品——糞便、尿液、堆肥、污水進(jìn)水、污水出水(污水采用厭氧-好氧凈化處理)和還田土壤樣品，這些樣品中5種雌激素含量如表5所示.

表5 典型奶牛場(chǎng)樣品中5種雌激素含量(n=3)

注： —表示未檢出. 加粗?jǐn)?shù)值單位為ngg，非加粗?jǐn)?shù)值單位為ngL.

注： 糞便、堆肥、還田土壤樣品中雌激素含量單位為ngg，尿液、污水進(jìn)水和污水出水中雌激素含量單位為ngL.

在奶牛場(chǎng)糞便和尿液樣品中E1和E2的含量均較高，分別占糞便樣品中雌激素總量的61%和25%以及尿液樣品中雌激素總量的41%和57%，表明E1和E2是奶牛排泄物中最主要的雌激素，這與Hanselman等[3-4]研究奶牛排泄物中雌激素的分布結(jié)果相一致. 研究報(bào)道[7，32]顯示，E2具有很強(qiáng)的內(nèi)分泌干擾活性，故應(yīng)加強(qiáng)對(duì)奶牛養(yǎng)殖業(yè)糞污雌激素污染風(fēng)險(xiǎn)的管控. 由圖4可見(jiàn)，奶牛糞便和尿液中雌激素總量分別為84.6 ngg和2 636.7 ngL，比豬糞和豬尿中低12%和70%，表明豬排泄物中雌激素含量高于奶牛排泄物. 糞便經(jīng)高溫好氧堆肥后，雌激素總量為16.2 ngg，下降了81%，其中E1和E2含量顯著降低. ZHANG等[33]研究顯示，堆肥處理對(duì)奶牛糞便中雌激素的去除率達(dá)55.8%；ZHENG等[23]研究發(fā)現(xiàn)，糞便經(jīng)堆肥3個(gè)月后，雌激素的去除率高達(dá)80%. 對(duì)比分析表明，該奶牛場(chǎng)的好氧堆肥處理方式可有效去除固體糞便中的雌激素. 在還田土壤樣品中，雌激素總量為0.1 ngg，只有DES以較低含量被檢出，其他雌激素均未被檢出. 由于土壤環(huán)境中存在各種吸附和降解作用[34]，使得進(jìn)入土壤中的雌激素含量降低. 污水經(jīng)處理設(shè)施處理后，雌激素總量由 2 605.6 ngL降至615.7 ngL，E1、E2和EE2含量顯著降低，去除率分別達(dá)72%、82%和84%，且在污水出水中DES含量低于檢測(cè)限. 該奶牛場(chǎng)污水經(jīng)場(chǎng)區(qū)內(nèi)預(yù)處理達(dá)到納管標(biāo)準(zhǔn)后接入污水處理廠污水收集管網(wǎng)，采用的污水處理方式為厭氧-好氧凈化處理. 這表明該污水處理方式對(duì)天然和人工合成雌激素均具有較高的去除效果，可能是微生物厭氧與好氧降解以及污泥吸附等共同作用的結(jié)果[24].

2.2.3典型雞場(chǎng)雌激素排放情況

圖5 典型雞場(chǎng)樣品中5種雌激素含量Fig.5 The concentration distribution of five estrogens in the samples from the chicken farm

對(duì)某規(guī)?；B(yǎng)雞場(chǎng)進(jìn)行平均布點(diǎn)采樣，共采集3種樣品，包括糞便、堆肥和還田土壤樣品，這些樣品中雌激素含量如圖5所示. 雞場(chǎng)雌激素的排放特征與豬場(chǎng)和奶牛場(chǎng)有較大差異. 雞主要排泄固體糞便，產(chǎn)生的尿液量很少，因此該研究未采集液體樣品. 雞糞樣品中5種雌激素均被檢出，總量達(dá)60.9 ngg，比豬糞和奶牛糞雌激素總量低36%和28%，表明雞對(duì)環(huán)境中雌激素的貢獻(xiàn)率遠(yuǎn)低于豬和奶牛. 堆肥樣品中未檢出EE2，其他4種雌激素總量為17.5 ngg，相較于糞便樣品雌激素總量下降71%，表明雌激素在高溫堆肥過(guò)程中得到了較好的降解. 5種雌激素在雞糞還田土壤中均未被檢出.

3 結(jié)論

a) 上海市典型豬場(chǎng)、奶牛場(chǎng)和雞場(chǎng)排泄物中均含有一定數(shù)量的天然和人工合成雌激素，其中，豬場(chǎng)糞便和尿液中5種雌激素總量分別為94.5 ngg和 8 882.2 ngL，奶牛場(chǎng)糞便和尿液中總量分別為84.6 ngg和 2 636.7 ngL，雞場(chǎng)糞便中總量為60.9 ngg.

b) E1為豬排泄物中最主要的雌激素，分別占糞便和尿液樣品中雌激素總量的45%和48%，E1和E2為奶牛排泄物中最主要的雌激素，分別占糞便樣品中總量的61%和25%，占尿液樣品中總量的41%和57%，且通過(guò)糞便和尿液向環(huán)境中排放的5種雌激素總量表現(xiàn)為豬場(chǎng)>奶牛場(chǎng)>雞場(chǎng).

c) 厭氧發(fā)酵處理對(duì)豬場(chǎng)污水中雌激素具有一定的去除效果，經(jīng)處理后沼液中雌激素總量降至 4 388.6 ngL，固體糞高溫堆肥和污水厭氧-好氧凈化處理對(duì)奶牛排泄物中雌激素具有較好的去除效果，糞便經(jīng)堆肥處理后雌激素總量降至16.2 ngg，污水經(jīng)處理后雌激素總量降至615.7 ngL.