滇南開唇蘭化學(xué)成分研究

錢麗萍 闕慧卿 彭華毅 李唯 陳阿虹 郭舜民 李援朝 林綏

【摘?要】?目的：應(yīng)用現(xiàn)代色譜方法和技術(shù)對滇南開唇蘭Anoectochilus burmannicus Rolfe植物全草進(jìn)行提取分離，對其化學(xué)成分進(jìn)行了研究。方法：應(yīng)用UV、IR、MS、1HNMR、13CNMR技術(shù)并結(jié)合文獻(xiàn)數(shù)據(jù)對分離到的13個成分進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析確證。結(jié)果：從滇南開唇蘭植物全草的正丁醇及乙酸乙酯部位分離到13個化合物，13個化合物經(jīng)鑒定分別是：蘆丁（1），山奈酚（2），棕櫚酸（3），槲皮素（4），anoectosterol（5），kinsenoside（6），anoectochine（7），石杉堿甲（8），ginsenine（9），硬脂酸（10），異鼠李素（11），8-對羥基芐基槲皮素（12），5，4′-二羥基-6，7，3′-三甲氧基黃酮（cirsilineol）（13）。結(jié)論：1-13化合物均為首次從滇南開唇蘭植物全草中提取分離到的。

【關(guān)鍵詞】?滇南開唇蘭;蘭科;開春蘭屬;黃酮類;生物堿類

【中圖分類號】R284.1?【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號】1007-8517（2020）24-0043-06

Abstract：Objective This research is focused on the study of compounds extracted andisolated from the whole plant of Anoectochilus Burmannicus Rolfe by using modern chromatographic method. Combined with literature data.Methods UV，IR，MS， 1HNMR and13CNMR are used to identify the structures of 13 compounds. Result The 13 compounds from the n-butanol and ethyl acetatepartsof the Anoectochilus Burmannicus Rolfe：rutin （1）， kaempferol（2）， palmitic acid（3）， quercetin（4）， anoectosterol（5），β-D-glucopyranosyl- （3R）-Hydroxybutanolide （kinsenoside）（6）， anoectochine（7）， huperzine A（8），ginsenine（9），stearic acid（10）， isorhamnetin（11），8-p-hydroxybenzyl quercetin（12）， 5，4-dihydroxy-6，7，3-trimethoxyflavone （cirsilineol）（13）. Conclusion It is the first time that all the 13 compounds are extracted from the whole plant of Anoectochilus Burmannicus Rolfe which is planted under woods for nine months.

Keywords：Anoectochilus burmannicus Rolfe;Orchidaceae;Anoectochilus;Flavonoids;Alkaloids

滇南開唇蘭Anoectochilus burmannicus Rolfe為蘭科（Orchidaceae）開唇蘭屬（Anoectochilus）植物，主要生長在云南南部至西南部，有研究報道[1]滇南開唇蘭水提物具有抗炎和胰島素抵抗作用。前期已報道[2]滇南開唇蘭揮發(fā)油成分，比較了不同采收期的揮發(fā)油成分，成分和含量均有差別。本研究對滇南開唇蘭植物全草進(jìn)行了化學(xué)成分的研究，從滇南開唇蘭的正丁醇及乙酸乙酯提取部位中分離到13個化合物，根據(jù)理化性質(zhì)、光譜數(shù)據(jù)及文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，經(jīng)鑒定13個化合物依次為：蘆?。?），山奈酚（2），棕櫚酸（3），槲皮素（4），anoectosterol（5），β-D-glucopyranosyl-（3R）-hydroxybutanolide（kinsenoside[BF]）（[BFQ]6），anoectochine（7），石杉堿甲（8），ginsenine（9），硬脂酸（10），異鼠李素（11），8-對羥基芐基槲皮素（12），5，4′-二羥基-6，7，3′-三甲氧基黃酮（cirsilineol）（13）。1～13化合物均為首次滇南開唇蘭植物全草中提取分離到的。

1?儀器與藥材

1.1?儀器?APAⅡ自動探針熔點分析儀（德國Schorpp Geratelechik 公司），Avatar-330型紅外光譜儀（美國Thermo Electron Wrporation 公司），UV-300型紫外分光光度計（日本島津公司），Unity-500型核磁共振儀（美國 Varaina 公司），F(xiàn)innigan MAT-312 型質(zhì)譜儀（美國 Finnigan 公司），WFH-201B 暗箱式紫外透射儀（上海精科實業(yè)有限公司），LC-20A 型島津半制備高效液相色譜儀（日本島津公司），RE-2000B型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠），HH-2型數(shù)顯恒溫水浴鍋（金壇市江南儀器廠）。

1.2?材料?實驗用藥材為種植 6個月的滇南開唇蘭Anoectochilus burmannicus Rolfe，由福建省華芝韻生物科技有限公司提供，經(jīng)福建中醫(yī)藥大學(xué)（藥用植物學(xué)/中藥鑒定）楊成梓副教授及褚克丹教授鑒定為滇南開唇蘭Anoectochilus burmannicus Rolfe。實驗用高效薄層板、薄層用色譜硅膠G、柱層析硅膠（100-200目，200-300目）均為青島海洋化工廠產(chǎn)品，其余化學(xué)試劑均為市售色譜純和分析純。

2?提取與分離

種植6個月的滇南開唇蘭全草20kg用75%乙醇浸泡24h，提取2次，過濾提取液，減壓濃縮得粗浸膏1961g，用適量水混懸，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取液，分別減壓濃縮得各部位浸膏。乙酸乙酯部位浸膏730g，正丁醇部位浸膏690g，取正丁醇及乙酸乙酯部位浸膏分別經(jīng)硅膠柱層析反復(fù)色譜分離，用不同比例的石油醚：乙酸乙酯和三氯甲烷：甲醇洗脫，得到化合物1（1995mg），化合物2（189mg），化合物3（156mg），化合物4（159mg），化合物5（95mg），化合物6（89mg），化合物7（81mg），化合物8（105mg），化合物9（83mg），化合物10（235mg），化合物11（155mg），化合物12（129mg），化合物13（103mg）。

3?結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1，淡黃色粉末，mp 184～187℃，紫外燈下呈亮淺藍(lán)色熒光，HCl-Mg 粉反應(yīng)陽性，Molish 反應(yīng)陽性，F(xiàn)eCl3 反應(yīng)陽性，EI-MS m/z：610 [M]+，分子式C27H30O16。UVλmax nm（MeOH）：363，251，210。IRυmax cm-1（KBr）：3430（OH），1655（C=O），1607，1509，1456（苯環(huán)），1365，1300，1205。1HNMR（DMSO）δ：6.18（1H，d，J=1.8Hz，H-6），6.39（1H，d，J=1.8Hz，H-8），7.56（2H，m，H-2′，6′），6.86（1H，d，J=8.8Hz，H-5′），5.36（1H，d，J=7.38Hz，H-1″），5.08（1H，d，J=6.0Hz，H-1），1.01（ 3H，d，J=6.4Hz，CH3-6），12.61（1H，s，OH-5），10.87（1H，s，OH-7），9.69（1H，s，OH-4′），9.19（1H，s，OH-3′），糖部分其它質(zhì)子δ：3.05-5.28。13C-NMR（DMSO-d6）δ：157.1（C-2），133.3（C-3），177.3（C-4），161.7（C-5），99.1（C-6），163.8（C-7），93.9（C-8），157.2（C-9），105.3（C-10），121.5（C-1′），115.5（C-2′），145.3（C-3′），149.1（C-4′），116.7（C-5′），122.1（C-6′），101.7（C-1″），75.2（C-2″），77.1（C-3″），70.5（C-4″），75.9（C-5″），67.5（C-6″），101.1（C-1），70.9（C-2），71.1（C-3），72.3（C-4），68.6（C-5），18.1（C-6）。與蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品共薄層，多個展開系統(tǒng)的Rf值一致，根據(jù)理化性質(zhì)及以上檢測所得數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[3-5]報道的蘆丁一致，確認(rèn)化合物1為蘆丁。

化合物2，黃色針狀結(jié)晶，mp263～265 ℃，HCl-Mg粉和AlCl3反應(yīng)呈陽性，EI-MS m/z：286 [M]+，分子式：C15H10O6 。UVλmax nm（MeOH）：255，369。IRυmax cm-1（KBr）：3180，1675，1605，1580。1HNMR（acetone-d6）δ：6.23（1H，d，H-6），6.53（1H，d，J=2.0Hz，H-8），6.97（2H，d，J=9.2Hz，H-3′，5′），8.11（2H，d，J=9.2Hz，H-2′，6′），8.03，9.11，9.75，12.18（-OH）。13C-NMR（DMSO-d6）δ：146.9（C-2），136.5（C-3），176.3（C-4），157.6（C-5），99.1（C-6），164.9（C-7），94.5（C-8），162.1（C-9），103.9（C-10），123.3（C-1′），116.3（C-3′ 和C-5′），130.3（C-2′和C-6′），159.9（C-4′）。與山奈酚標(biāo)準(zhǔn)品共薄層，多個展開系統(tǒng)的Rf值一致，根據(jù)理化性質(zhì)及以上檢測所得數(shù)據(jù)，與文獻(xiàn)[6-8]報道的山奈酚（kaempferol）一致，確認(rèn)化合物2為山奈酚。

化合物3，為白色顆粒狀結(jié)晶（石油醚-乙酸乙酯），mp 61～63℃，EI-MS m/z：256 [M]+。分子式：C16H32O2。IRυmax cm-1（KBr）：3500（寬峰，COOH中的OH），1705（C=O）。1HNMR（CDCl3）δ：2.36（2H，t，J=7.6Hz，O=C-CH2），1.64（2H，m，CH2），1.26（24H，brs，-CH2-×12），0.89（3H，t，J=6.8Hz，CH3）。13C-NMR（CDCl3）δ：180.72（C-1），34.03（C-2），31.91（C-3），29.78（C-4），29.71（C-5），29.65（C-6），29.59（C-7），29.51（C-8），29.48（C-9），29.42（C-10），29.35（C-11），29.19（C-12），29.03（C-13），24，65（C-14），22.68（C-15），14.11（C-16）。根據(jù)理化性質(zhì)及在MS中一系列失去CH2的碎片峰如：143，129，115，101，87，73，69，57，與棕櫚酸標(biāo)準(zhǔn)品共薄層，多個展開系統(tǒng)的Rf值一致，跟據(jù)以上檢測所得數(shù)據(jù)，與文獻(xiàn)[9-12]報道的棕櫚酸（palmitic acid）一致，確認(rèn)化合物3為棕櫚酸。

化合物4，黃色針狀結(jié)晶（甲醇），mp 313～315℃，HCl-Mg粉反應(yīng)呈陽性，Molish 反應(yīng)陰性性，示為黃酮類化合物，EI-MSm/z：302 [M]+，273，153，137，分子式：C15H10O7 。UVλmax nm（MeOH）：208，256，369。IRυmax cm-1（KBr）：：3435（OH），1645（C=O），1610，1515，1430（Ar）。1HNMR（DMSO）δ：6.19（1H，d，J=2.0Hz，H-6）， 6.38（1H，d，J=2.2Hz，H-8），6.89（1H，d，J=8.6Hz，H-5′），7.57（1H，dd，J=8.6Hz，J=2.2Hz，H-6′），7.71（1H，d，J=2.2Hz，H-2′），示有A環(huán)5，7取代，B 環(huán)為ABX 系統(tǒng)。13C-NMR（DMSO-d6）δ：147.3（C-2），135.9（C-3），175.9（C-4），160.1（C-5），98.5（C-6），163.7（C-7），93.8（C-8），158.3（C-9），103.3（C-10），122.5（C-1′），115.7（C-2′），145.1（C-3′），147.6（C-4′），115.5（C-5′），120.7（C-6′）。與槲皮素標(biāo)準(zhǔn)品共薄層，多個展開系統(tǒng)的Rf值一致，根據(jù)理化性質(zhì)及以上檢測所得數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13-15]報道的槲皮素（quercetin）一致，確認(rèn)化合物4為槲皮素。

化合物5，針狀結(jié)晶，mp 139～141℃（CHCL3-MeOH），EI-MS m/z：424 [M]+，分子式：C30H48O。UVλmax nm（MeOH）： 253，371。IRυmax cm-1（KBr）： 3430（OH），2920（CH），1460（C=C）。1HNMR（CDCl3）δ：1.09（1H，m，H-1），1.87（1H，m，H-1），1.51（1H，m，H-2），1.85（1H，m，H-2），3.53（1H，m，H-3），2.23（1H，m，H-4），2.29（1H，m，H-4），5.36（1H，brd，J=5.4Hz，H-6），1.53（1H，m，H-7），1.99（1H，m，H-7），1.47（1H，m，H-8），0.95（1H，m，H-9），1.49（2H，m，H-11），1.18（1H，m，H-12），2.01（1H，m，H-12），1.01（1H，m，H-14），1.53（2H，m，H-15），1.26（1H，m，H-16），2.21（1H，m，H-16），1.16（1H，brd，J=4.0Hz，H-17），0.69（3H，s，H-18），1.03（3H，s，H-19），2.05（1H，m，H-20），1.00（3H，d，J=6.2Hz，H-21），5.23（1H，dd，J=15.4Hz，J=8.0Hz，H-22），5.15（1H，dd，J=15.4Hz，J=7.6Hz，H-23），2.42（1H，ddd，J=7.0Hz，J=7.0Hz，J=7.0Hz，H-24），1.41（1H，m，H-241），1.51（1H，m，H-241），0.85（3H，t，J=7.4Hz，H-242），1.98（2H，m，H-26），1.03（3H，t，J=7.6Hz，H-261），4.73（2H，dd，J=1.4Hz，J=1.2Hz，H-27）。13C-NMR（CDCl3）δ：37.3（C-1），31.8（C-2），71.9（C-3），42.3（C-4），140.9（C-5），121.9（C-6），31.9（C-7），32.1（C-8），50.3（C-9），36.7（C-10），21.3（C-11），39.9（C-12），42.3（C-13），57.1（C-14），24.3（C-15），28.9（C-16），56.1（C-17），12.3（C-18），19.5（C-19），40.3（C-20），20.9（C-21），137.3（C-22），130.7（C-23），51.3（C-24），26.3（C-241），12.3（C-242），154.9（C-25），27.1（C-26），12.5（C-261），107.1（C-27）。根據(jù)理化性質(zhì)及以上檢測所得數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]報道的[anoectosterol（26-Methylstigmasta-5，22，25，（27）-trien-3β-ol）]一致，確認(rèn)化合物5為anoectosterol。

化合物6，油狀物，EI-MS m/z：264 [M]+，分子式：C10H16O8。UVλmax nm（MeOH）：218，258，370。IRυmax cm-1（KBr）：3400（OH），2970（CH），1775（C=O）。1HNMR（pyridine-d5）δ：2.88（1H，dd，J=17.6Hz，J=2.8Hz，H-2），2.93（1H，dd，J=17.6Hz，J=5.2Hz，H-2），4.89（1H，dddd，J=5.2Hz，J=4.6Hz，J=2.8Hz，J=1.6Hz，H-3），4.43（1H，dd，J=10.4Hz，J=4.6Hz，H-4），4.71（1H，dd，J=10.4Hz，J=1.6Hz，H-4），4.91（1H，d，J=8.0Hz，G-H-1），3.99（1H，t，J=8.0Hz，G-H-2），4.25（1H，m，G-H-3），4.23（1H，m，G-H-4），3.97（1H，m，G-H-5），4.37（1H，dd，J=11.8Hz，J=5.8Hz，G-H-6），4.56（1H，dd，J=11.8Hz，J=2.4Hz，G-H-6）。13CNMR（pyridine-d5）δ：176.3（C-1），35.8（C-2），75.6（C-3），74.9（C-4），104.5（G-C-1），75.1（G-C-2），78.7（G-C-3），71.5（G-C-4），78.3（G-C-5），62.9（G-C-6）。根據(jù)理化性質(zhì)及以上檢測所得數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17-18]報道的kinsenoside（β-D-glucopyranosyl-（3R）-hydroxybutanolide）一致，確認(rèn)化合物6為kinsenoside。

化合物7，黃色固體，碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性，推測為生物堿類化合物，EI-MS m/z：216 [M]+ 。分子式：C12H12N2O2。UVλmax nm（MeOH）：220，270，277，280。IRυmax cm-1（KBr）：3350（NH），3085，3020（-CH），2925，2850，2795（C-H），1790（C=O），1635（C=C），1615，1550，1480，1450。1HNMR（DMSO-d6）δ：7.44（1H，d，J=8.0Hz，H-4），6.99（1H，dd，J=7.0Hz，J=8.0Hz，H-5），7.07（1H，dd，J=7.0Hz，J=8.0Hz，H-6），7.33（1H，d，J=8.0Hz，H-7），4.19（1H，d，J=16.0Hz，H-8），4.23（1H，d，J=16.0Hz，H-8），3.61（1H，dd，J=5.0Hz，J=10.6，H-11），2.81（1H，dd，J=10.6Hz，J=16.0Hz，H-12），3.13（1H，dd，J=5.0Hz，J=16.0Hz，H-12），10.9（1H，s，N1-H），8.78（1H，brs，OH），6.05（1H，s，N9-H）。13C-NMR（DMSO-d6）δ：126.3（C-2），106.7（C-3），127.8（C-3a），117.9（C-4），118.7（C-5），121.3（C-6），111.1（C-7），136.3（C-7a），40.3（C-8），169.3（C-10），56.8（C-11），23.0（C-12）。根據(jù)理化性質(zhì)及以上檢測所得數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[19]報道的anocetochine一致，確認(rèn)化合物7為anocetochine。

化合物8，結(jié)晶顆粒，mp229～231℃（丙酮），碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性，推測為生物堿類化合物，EI-MS（m/z）：242 [M]+，分子式：C15H18N2O。UVλmax nm（MeOH）：230，313。IRυmax cm-1（KBr）：3485，3185，1650，1550。1HNMR（CDCl3）δ：6.39（1H，d，J=9.0Hz，H-2），7.83（ 1H，d，J=9.0Hz，H-3），2.77（2H，dd，J=16.0Hz，J=3.0Hz，H-6），3.57（1H，m，H-7），5.39（1H，d，J=5.0Hz，H-8），1.62（3H，d，J=7.0Hz，H-10），5.47（1H，q，J=7.0Hz，H-11），2.11（2H，s，H-14），1.47（3H，s，H-16），13.20（1H，br.s，N-H）。13C-NMR（CDCl3）δ：165.5（C-1），117.1（C-2），140.3（C-3），133.0（C-4），142.6（C-5），35.3（C-6），33.2（C-7），124.5（C-8）12.7（C-10），111.3（C-11），143.5（C-12），54.8（C-13），49.7（C-14），134.6（C-15）23.1（C-16）。根據(jù)理化性質(zhì)及以上檢測所得數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[20-22]報道的石杉堿甲一致，確認(rèn)化合物8為石杉堿甲。

化合物9，白色粉末，碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性，推測為生物堿類化合物，EI-MS m/z：230 [M]+，分子式：C13H14N2O2。UVλmax nm（MeOH）：221，278，289。IRυmax cm-1（KBr）：3370（NH），3300（OH），2985，1650（C=O）。1HNMR（DMSO-d6）δ：4.53（1H，d，J=6.6Hz，H-3），3.62（1H，dd，J=4.8Hz，J=11.8Hz，H-6），3.17（1H，ddd，J=2.6Hz，J=4.8Hz，J=15.2Hz，H-7），2.78（1H，ddd，J=2.6Hz，J=11.8Hz，J=15.2Hz，H-7），7.46（1H，d，J=8.0Hz，H-10），7.01（1H，ddd，J=2.0Hz，J=7.6Hz，J=8.0Hz，H-11），7.09（1H，ddd，J=2.0Hz，J=7.6Hz，J=8.0Hz，H-12），7.35（1H，d，J=8.0Hz，H-13），1.63（3H，d，J=6.6Hz，H-15），11.11（1H，s，N-H），8.77（1H，s，O-H）。13C-NMR（DMSO-d6）δ：133.1（C-2），49.2（C-3），169.7（C-5），58.1（C-6），23.3（C-7），107.3（C-8），126.5（C-9），118.2（C-10），118.9（C-11），121.5（C-12），111.5（C-13），136.7（C-14），17.3（C-15）。根據(jù)理化性質(zhì)及以上檢測所得數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[23]報道的ginsenine一致，確認(rèn)化合物9為ginsenine，是首次從開唇蘭科植物中分離得到的。

化合物10，白色固體顆粒，mp 71～73℃，EI-MS m/z：284 [M]+ ，分子式：C18H36O2。IRυmax cm-1（KBr）：3500（寬峰，COOH中的OH），1705（C=O）。1HNMR（CDCl3）δ：2.33（2H，t，J=7.6Hz，H-2），1.63（2H，m，H-3），1.28（多個H，m，H-4-17），0.88（3H，t，J=6.6Hz，H-18）。13C-NMR（CDCl3）δ：179.6（C-1），33.9（C-2），31.9（C-3），29.9-29（C-4-14），28.8（C-15），24.7（C-16），22.7（C-17），14.3（C-18）。與硬脂酸標(biāo)準(zhǔn)品共薄層，多個展開系統(tǒng)的Rf值一致，跟據(jù)以上檢測所得數(shù)據(jù)，與文獻(xiàn)[17，24]報道的硬脂酸（stearic acid）一致，確認(rèn)化合物10為硬脂酸。

化合物11，黃色結(jié)晶性粉末，mp 283～285℃（MeOH），HCl-Mg 反應(yīng)呈陽性，Molish 反應(yīng)呈陰性，EI-MS m/z：316[M]+ ，分子式：C16H12O7 。UVλmax nm（MeOH）：255，265，368。IRυmax cm-1（KBr）：：3450（OH），1650（C=O），1610，1515，1430（Ar）。1HNMR（DMSO-d6）δ：7.75（1H，s，H-2′），7.69（1H，d，J=8.6Hz，H-6′），6.95（1H，d，J=8.6Hz，H-5′），6.19（1H，d，J=2.0Hz，H-6），6.49（1H，d，J=2.0Hz，H-8），9.41（1H，s，3-OH），9.71（1H，s，4′-OH），10.75（1H，s，7-OH），12.43（1H，s，5-OH），3.81（3H，s，-OCH3）。13C-NMR（DMSO-d6）δ：147.3（C-2），135.9（C-3），175.9（C-4），160.7（C-5），98.3（C-6），163.9（C-7），93.8（C-8），156.3（C-9），103.1（C-10），121.9（C-1′），115.6（C-2′），146.7（C-3′），148.9（C-4′），111.8（C-5′），121.6（C-6′），55.9（C-OCH3）。與異鼠李素標(biāo)準(zhǔn)品共薄層，多個展開系統(tǒng)的Rf值一致，跟據(jù)以上檢測所得數(shù)據(jù)，與文獻(xiàn)[25-26 ]報道的異鼠李素一致，確認(rèn)化合物11為異鼠李素。

化合物12，黃色固體顆粒，mp 251～253℃（MeOH），HCl-Mg 反應(yīng)呈陽性，Molish 反應(yīng)呈陰性，示為黃酮類化合物，EI-MS m/z：408[M]+，分子式：C22H16O8，UVλmax nm（MeOH）：255，265，373。IRυmax cm-1（KBr）：3455（OH），1655（C=O），1615，1520，1435（Ar）。1HNMR（DMSO-d6）δ：6.33（1H，s，H-6），7.73（1H，d，H-2′），6.86（1H，d，H-5′），7.47（1H，dd，H-6′），7.04（2H，d，H-2″，H-6″），6.58（2H，d，H-3″，H-5″），3.96（2H，s，H-7″）。13C-NMR（DMSO-d6）δ：146.9（C-2），135.7（C-3），176.1（C-4），161.6（C-5），97.9（C-6），158.9（C-7），106.3（C-8），153.6（C-9），103.1（C-10），122.3（C-1′），115.3（C-2′），145.3（C-3′），147.9（C-4′），115.7（C-5′），120.6（C-6′），130.9（C-1″），129.3（C-2″，6″），115.5（C-3″，5″），155.6（C-4″），27.4（C-7″）。與8-對羥基芐基槲皮素標(biāo)準(zhǔn)品共薄層，多個展開系統(tǒng)的Rf值一致，跟據(jù)以上檢測所得數(shù)據(jù)，與文獻(xiàn)[27 ]報道的8-對羥基芐基槲皮素一致，確認(rèn)化合物12為8-對羥基芐基槲皮素。

化合物13，黃色針狀結(jié)晶，mp 205～207℃，HCl-Mg 反應(yīng)呈陽性，Molish 反應(yīng)呈陰性，示為黃酮類化合物，EI-MS m/z：344[M]+，分子式：C18H16O7，UVλmax nm（MeOH）：275，345。IRυmax cm-1（KBr）：：3455（OH），1645（C=O），1615，1510，1435（Ar）。1HNMR（DMSO-d6）δ：8.05（1H，d，J=1.60Hz，H-2′），7.31（1H，dd，J=1.6Hz，J=8.0Hz，H-6′），7.16（1H，d，J=8.0Hz，H-5′），6.81（1H，s，H-8），6.37（1H，s，H-3）。13C-NMR（DMSO-d6）δ：148.5（C-2），137.5（C-3），176.3（C-4），162.6（C-5），167.5（C-6），164.9（C-7），95.1（C-8），156.9（C-9），103.7（C-10），122.3（C-1′），116.9（C-2′），146.9（C-3′），149.4（C-4′），111.9（C-5′），121.9（C-6′），56.4（C-3′-OCH3），61.1（C-6-OCH3），57.1（C-7-OCH3）。與5，4′-二羥基-6，7，3′-三甲氧基黃酮標(biāo)準(zhǔn)品共薄層，多個展開系統(tǒng)的Rf值一致，跟據(jù)以上檢測所得數(shù)據(jù)，與文獻(xiàn)[14，26]報道的5，4′-二羥基-6，7，3′-三甲氧基黃酮一致，確認(rèn)化合物13為5，4′-二羥基-6，7，3′-三甲氧基黃酮（cirsilineol）。

4?討論

林下種植6個月的金線蓮和滇南開唇蘭全草提取的有效部位進(jìn)行初步體外抗癌活性的篩選，用MTT法在體外對人肺癌細(xì)胞NCI-H446，spc-A1 進(jìn)行抑瘤實驗，金線蓮、滇南開唇蘭在濃度為100/μg·mL-1時，對人肺癌細(xì)胞NCI-H446抑制率分別為89%和93%，對spc-A1 肺腺癌細(xì)胞抑制率分別為90%和95%。 Studens t檢驗，與對照組相比，P<0.001。發(fā)現(xiàn)滇南開唇蘭的抗癌活性比金線蓮略強(qiáng)，因此對滇南開唇蘭進(jìn)行了化學(xué)成分研究，探索該植物中抗癌有效的先導(dǎo)化合物。

從滇南開唇蘭植物全草中提取分離得到13個化合物，1～13化合物是首次從滇南開唇蘭植物全草中分離得到，其中，4個生物堿：anoectosterol（5），anoectochine（7），石杉堿甲（8），ginsenine（9）;6個黃酮：蘆?。?），山奈酚（2），槲皮素（4），異鼠李素（11），8-對羥基芐基槲皮素（12），5，4′-二羥基-6，7，3′-三甲氧基黃酮（cirsilineol）（13）;2個有機(jī)酸：棕櫚酸（3），硬脂酸（10），1個內(nèi)酯苷類化合物：kinsenoside（6）?；衔铮?）、（9）在金線蓮植物中未見報道。本研究可為完善滇南開唇蘭的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及進(jìn)一步的研究開發(fā)奠定基礎(chǔ)。

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（收稿日期：2020-07-02?編輯：劉?斌）