蒲公英飲片質(zhì)量評價及質(zhì)量控制分析

王青青 王夢雅

【摘?要】?目的：研究蒲公英飲片質(zhì)量評價及質(zhì)量控制，提高蒲公英飲片的質(zhì)量。方法：將蒲公英飲片作為研究材料，采用高效液項色譜儀對蒲公英進(jìn)行飲片質(zhì)量評價，并提出合理的蒲公英飲片質(zhì)量控制辦法，探究其中存在的問題。結(jié)果：蒲公英飲片含量在0.017%～0.065%之間，咖啡酸的含量不少于0.015%，蒲公英飲片質(zhì)量控制主要從合理選擇提取溶劑、明確評價工藝指標(biāo)、科學(xué)規(guī)定咖啡酸含量方面控制。結(jié)論：多批次不同產(chǎn)地的蒲公英飲片含量及咖啡酸含量存在一定差異。

【關(guān)鍵詞】?蒲公英;質(zhì)量;飲片;溶劑

【中圖分類號】R284.1?【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號】1007-8517（2020）24-0018-03

蒲公英屬于菊科植物，具有利尿通淋、清熱解毒和消腫散結(jié)的功效。蒲公英飲片在臨床上得到廣泛應(yīng)用，為提高蒲公英飲片的質(zhì)量，本研究對其質(zhì)量評價及質(zhì)量控制進(jìn)行研究分析，現(xiàn)報告如下。

1?材料與方法

1.1?主要儀器?選擇安捷倫科技有限公司生產(chǎn)的高效液項色譜儀，型號為Agilent100、迪馬公司生產(chǎn)的色譜柱，型號為ODS，規(guī)格為5μm。梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司生產(chǎn)的電子天平，型號為MS105DU。

1.2?材料?實驗用材料選擇：甲醇、色譜純、三乙胺、甲酸、磷酸、磷酸二氫鈉、水純化水、分析純。實驗用對照品為：中國藥品生物制品鑒定所提供的咖啡酸。

1.3?方法?根據(jù)蒲公英中主要成分咖啡酸水溶性和預(yù)實驗結(jié)果，確定咖啡酸的含量和得膏率作為指標(biāo)，將加水量、提取次數(shù)、提取時間進(jìn)行正交實驗。并對水提工藝的的各項參數(shù)進(jìn)行考察。

按照正交設(shè)計方案，稱取9份蒲公英原料25g，加入相應(yīng)倍量的水，微沸之后回流提取，過濾并搖勻。從中提取5mL，并通過0.22μm微孔濾膜過濾，廢去初濾液。對照品制備中，同樣使用精密測量儀器進(jìn)行咖啡酸稱取，稱取量為7.2mg，放置到50mL量瓶中，加入甲醇到相應(yīng)刻度搖勻。精密量取2mL，放置到10mL量瓶中，再加入甲醇到刻度，搖勻。經(jīng)過0.22μm微孔濾膜過濾，廢去初濾液，得到對照品。

2?結(jié)果

將咖啡酸的含量作為蒲公英飲片質(zhì)量檢驗的指標(biāo)，對超聲狀態(tài)下和回流狀態(tài)下兩種不同提取方法的蒲公英飲片中咖啡酸含量結(jié)果進(jìn)行分析，得到的結(jié)果沒有差異性，表明提取方法產(chǎn)生的影響不顯著。按照上述方法進(jìn)行操作之后得到，0.025mg/mL的溶液，室溫放置一段時間，并在2h、4h、8h、16h和24h等階段，分別進(jìn)行測定和計算，結(jié)果證明咖啡酸峰面積RSD為0.2%。證明樣品中咖啡酸的含量在24h之內(nèi)具有穩(wěn)定性。按照建立方法，對不同產(chǎn)地的蒲公英藥材進(jìn)行炮制加工，制備成蒲公英飲片之后對含量測定，結(jié)果可以看出不同產(chǎn)地蒲公英制備的蒲公英飲片含量具有產(chǎn)一定，基本上在0.017%～0.065%之間，根據(jù)測定得到的結(jié)果，按照干燥品進(jìn)行計算，得到咖啡酸的含量不少于0.015%。特征圖譜如圖1所示。

基于特征成分關(guān)聯(lián)，對特征色譜中各特征成分進(jìn)行了相關(guān)性分析，選擇咖啡酸為基準(zhǔn)峰，并將其保留時間設(shè)定為1，計算特征峰為1～14，相對保留時間分別為0.543、0.823、0.912、0.930、0.965、1.000、1.236、1.392、1.472、1.533、1.947、2.125、2.169、2.717。

2.1?蒲公英飲片質(zhì)量評價?取材：中藥藥材產(chǎn)地廣泛，不同的生長環(huán)境與獨特的栽培技術(shù)，使不同產(chǎn)地的藥材質(zhì)量會產(chǎn)生一定的差異性。在實際制備和生產(chǎn)蒲公英飲片的過程中，要選擇具有代表性的材料進(jìn)行投料。全覆蓋藥材產(chǎn)地，要對當(dāng)?shù)氐牡乩憝h(huán)境可能產(chǎn)生的影響進(jìn)行分析。中藥來源廣泛，因為名稱而產(chǎn)生混淆的情況時有發(fā)生，對此，本研究從純正蒲公英的產(chǎn)地進(jìn)行取材，確保品質(zhì)的穩(wěn)定性。本研究過程中選擇的蒲公英材料來自于我國湖北、四川、河南和甘肅等地，使用DNA條形碼技術(shù)對蒲公英的品質(zhì)進(jìn)行鑒定，從源頭進(jìn)行材料質(zhì)量把關(guān)，測得蒲公英飲片的指標(biāo)與成分含量均符合我國頒布的《中國藥典》的要求，保證投料藥材的代表性與廣泛性，也保證了標(biāo)準(zhǔn)湯劑合理性和安全性[1]。

操作：本研究中的蒲公英飲片標(biāo)準(zhǔn)湯劑，嚴(yán)格按照國家中藥管理總局發(fā)布的《規(guī)范》中規(guī)定的工藝參數(shù)和研究數(shù)據(jù)進(jìn)行制備?；ㄈ~全草類藥物頭煎使用12倍量水，二煎使用10倍量水。蒲公英飲片的頭煎時間為30min，二煎的時間為20min。這種操作方法不僅保留蒲公英飲片原汁原味，同時又合理地使用現(xiàn)代化設(shè)備，制備出的蒲公英飲片以傳統(tǒng)的煎藥工藝作為基礎(chǔ)，同時提高藥物的整體質(zhì)量水平[2]。

品質(zhì)：此次研究采用標(biāo)準(zhǔn)化工藝，對蒲公英飲片標(biāo)準(zhǔn)湯劑進(jìn)行制備，并且測定其中咖啡酸的含量，得到蒲公英飲片標(biāo)準(zhǔn)湯劑物質(zhì)傳遞的規(guī)律，從整體上把控了蒲公英飲片的質(zhì)量。指標(biāo)成分轉(zhuǎn)移率考察結(jié)果和指紋圖譜具有較高的相似度，考查結(jié)果證明對此次研究過程中制備的蒲公英飲片總體質(zhì)量有均一性和穩(wěn)定性，研究得到的數(shù)據(jù)有參考價值。

標(biāo)準(zhǔn)化蒲公英飲片制備和出膏率考察結(jié)果更是為后續(xù)蒲公英飲片藥物大量生產(chǎn)工藝優(yōu)化提供參考指標(biāo)，能夠有效縮短研發(fā)時間，并提高藥物整體品質(zhì)。

2.2?蒲公英飲片質(zhì)量控制?合理選擇提取溶劑：咖啡酸是蒲公英中最為重要的一種成分，根據(jù)《中國藥典》中對蒲公英的要用價值進(jìn)行分析中可以看出，咖啡酸成分的含量會影響到蒲公英的價值。而且，在單味藥物配方中，蒲公英經(jīng)過水蒸氣提取、濃縮、干燥和制備成飲片，在實驗探究的過程中，如果提取溶劑為水，則咖啡酸的含量可能會受到水分的影響而出現(xiàn)含量變化。《中國藥典》規(guī)定蒲公英飲片中咖啡酸的含量在0.02%以上，本研究得出的蒲公英飲片中咖啡酸含量在0.04%以上，得膏率為20%以上。由此可以看出，合理選擇提取溶劑，不僅可以保證蒲公英飲片配方中咖啡酸含量高，又可以確保水溶性成分增多，是一種合理的提取方法[3]。

明確評價工藝指標(biāo)：根據(jù)蒲公英飲片制備領(lǐng)域?qū)嶒炑芯靠梢钥闯?，如果有兩項評價指標(biāo)同時存在，那么在蒲公英飲片質(zhì)量評定中，主要采用的方法為兩項指標(biāo)加權(quán)評價方法。這種評價方法能在兩項指標(biāo)變化趨勢不一致的情況下，突顯出優(yōu)越性。但是，在選擇工藝指標(biāo)時，主要是根據(jù)以往的工作經(jīng)驗確定的。因為不同的藥材在《藥典》中有不同的規(guī)定，無論是藥理活性成分還是總體提取物對于最終產(chǎn)品的藥效會產(chǎn)生不同的影響[4]。根據(jù)本研究能看出，在實驗中沒有引入權(quán)重概念，主要是因為蒲公英飲片中咖啡酸的含量以總提取物的含量指標(biāo)變化趨勢具有一致性。由此可以看出，本研究所采用的方法是一種有利于提高得膏率的方法，對于蒲公英飲片的質(zhì)量能起到較好的控制效果。

科學(xué)規(guī)定咖啡酸含量：根據(jù)相關(guān)領(lǐng)域的資料研究可以看出，不同產(chǎn)地蒲公英其中含有的咖啡酸的含量會有較大的差異性。一般情況下，蒲公英中的咖啡酸含量會從0.10%～0.36%不等，所以，不同產(chǎn)地的蒲公英飲片作為有原料生產(chǎn)值得的配方中，咖啡酸含量也會參差不齊。制定完善的含量控制標(biāo)準(zhǔn)，是確保蒲公英飲片質(zhì)量的重要手段。

3?討論與結(jié)論

在本研究中，經(jīng)過測量得到原材料中咖啡酸含量為0.02%，多批樣品測定結(jié)果表明咖啡酸的含量均在0.04%以上。制備工藝最終得到蒲公英飲片的咖啡酸含量為0.04%，提取工藝的得到率為36%。所以，從理論上分析，蒲公英飲片和蒲公英原材料中的咖啡酸含量基本持平。實驗數(shù)據(jù)與理論折算有較大的差異性。而且，因為蒲公英中咖啡酸具有溶于水的特性，在高溫條件下的正交試驗中，具有不穩(wěn)定性。當(dāng)溫度回流到100攝氏度左右時，也會有其他成分轉(zhuǎn)化成為咖啡酸。根據(jù)相關(guān)規(guī)定可以得出，蒲公英咖啡酸不能低于0.02%，本研究所得到的蒲公英飲片中咖啡酸的含量不低于0.4mg/g[5-7]。

在研究的過程中，實驗雖然嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)定進(jìn)行操作，并將水溶劑作為蒲公英飲片的溶劑，在微沸騰狀態(tài)下提取1h之后制備得到成品。但是，其中包括咖啡酸在內(nèi)的酚酸類有效成分仍有不穩(wěn)定性，并且遇光會分解。本實驗制備蒲公英飲片標(biāo)準(zhǔn)湯劑按照《藥典》與相關(guān)技術(shù)要求中規(guī)定的工藝參數(shù)與數(shù)據(jù)進(jìn)行制備，花葉全草類藥物頭煎加水量為12倍，二煎加水量為10倍，飲片頭煎時間為30min，二煎時間為20min。這種藥物煎煮方法不僅能保留重要湯劑原本的特性，而且也運用了現(xiàn)代煎藥設(shè)備，制備的蒲公英飲片湯劑基于傳統(tǒng)工藝，也實現(xiàn)了工藝優(yōu)化升級的目的。雖然其中咖啡酸的含量已經(jīng)超過《中國藥典》中關(guān)于蒲公英飲片中咖啡酸含量的規(guī)定，但是不能完全排除其他成分轉(zhuǎn)化影響。所以，其中是否有其他成分損失，蒲公英飲片配方的實際應(yīng)用質(zhì)量仍有待進(jìn)一步研究[8]。

綜上所述，本研究通過實驗探究的方法，制備蒲公英飲片，并對其質(zhì)量進(jìn)行分析，探討出合理的蒲公英飲片質(zhì)量控制辦法，為今后相關(guān)領(lǐng)域的研究提供參考。

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（收稿日期：2020-07-07?編輯：程鵬飛）